Научная статья на тему 'Антагонистические свойства штаммов Trichoderma asperellum в отношении токсинобразующих грибов рода Fusarium'

Антагонистические свойства штаммов Trichoderma asperellum в отношении токсинобразующих грибов рода Fusarium Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
322
79
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ГИПЕРПАРАЗИТИЧЕСКАЯ / АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ / АНТИИКРОБНАЯ / ТОКСИНОБРАЗУЮЩИЕ / ГРИБЫ / ANTAGONISTIC / FUNGI / BIPARASITIC / ANTIMICROBIAL / TOXIGENIC

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Попова А. Д., Садыкова В. С.

Исследование антагонистической активности штаммов Trichoderma asperellum к токсинобразующим фитопатогенным грибам рода Fusarium. Для оценки антимикробной активности проводили исследования методами перпендикулярных штрихов, бумажных дисков и агаровых блоков (метод диффузии в агар). Перспективным для штаммов Trichoderma asperellum является разработка антимикробных препаратов.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Попова А. Д., Садыкова В. С.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

ANTAGONISTIC PROPERTIES OF TRICHODERMA ASPERELLUM WITH RESPECT TO THE TOXIGENIC FUNGI FUSARIUM

Research antagonistic activity of Thichoderma asperellum with respect to toxigenic fungi Fusarium. Research were performed out by methods: perpendicular line, paper discs and blocks agar (agar diffusion method). Trichoderma asperellum is the strain to be promising for further development of antimicrobial preparations.

Текст научной работы на тему «Антагонистические свойства штаммов Trichoderma asperellum в отношении токсинобразующих грибов рода Fusarium»

23. Бореально-субтропическая группа ареалов (7 видов): Lygus pratensis, Eurydema oleraceafeptopterna dolabrata, Cymus claviculus, Megalonotus chiragra, Aelia acuminata, Stenotus binotatus;

24. Суббореальная группа ареалов (3 вида): Plagiognathus arbustorum arbustorum, Legnotuspicipes, Carpocoris fuscispinus;

25. Суббореально-субтропическая группа ареалов (3 вида): Lygus gemellatus, Dicranocephalus agilis, Graphosoma lineatum.

IX. Эвриконтинентальный тип ареалов (5 видов):

26. Суббореальная группа ареалов (3 вида): Plagiognathus fulvipennis, Aelia sibirica, Neottiglossa leporina;

27. Суббореально-субтропическая группа ареалов (2 вида): Piezodorus lituratus, Enoplops scapha.

Большиая часть видов известняковых битопов имеют широкое распространение с транспалеарктическим (36,68%) и западным (16,58%) типами ареалов. Минимально представлены виды западнопанконтинентального (1,18%) и эвриконтинентального (2,96%) типов ареалов. Еще меньше роль видов, ареал которых выходят за пределы Палеарктики -палеарктическо-эфиопский тип ареала (1 вид - 0,59%). Примерно в равных долях представлены голарктические (9,47%), суператлантические (10,06%), панатлантические и суператлантическо-эвриконтинентальные виды (по 11, 24%).

При анализе распределения видов по широтному простиранию, выявлено, что преобладают широкие бореально-субтропический (33,93%) и бореально-субббреальный (31,52%) группы. При этом, в долготном направлении среди них преобладают виды с широкими секторными ареалами - транспалеаркты (37,5% и 46,2% соответственно). Наименьшее число видов в исследуемой фауне обладает ареалами, вытянутыми от суббореального до субтропического пояса (28 видов), причем основную часть этой группы составляют виды широкой транспалеарктической (7 видов) и узкой западной (6 видов) групп.

Фауна полужесткокрылых известнякового севера в пределах Рязанской и Липецкой областей включает виды широко распространенные в Палеарктике и заселяющие преимущественно открытые, хорошо инсолированные биотопы. Большинство видов не имеют специфики в отношении приуроченности к строго определенному типу ландшафтов, некоторые приурочены непосредственно к каменистым биотипам (Eysarcorisfabricii, Geocoris dispar, и др.).

По результатам наших исследований, в известняковых биотопах среднерусского севера видов отчетливо южного или северного происхождения очень мало. Судя по тому, что большинство Heteroptera в своем распространении ограничены западной частью Палеарктики и их ареалы находятся под влиянием Атлантики, в формировании в целом фауны полужесткокрылых насекомых кальцефитных биотопов преобладали автохтонные формообразовательные процессы. К группе с западным типом ареалов относятся виды с максимальной численностью в исследованных биотопах, что отражает наиболее оптимальные условия для их развития. Таким образом, становление фауны кальцефитных ландшафтов происходило в открытых биотопах степного типа.

Литература

1. Шустов Б.С. Карстовые явления в Рязанской и Липецкой областях. Региональное карстоведение / Б.С. Шустов. - М.: АН СССР, 1961. http://styx-speleo.ru/biblioteka/151-karstovye-yavleniya-v-ryazanskoj-i-lipetskoj-oblastyakh (дата обращения 30.04.2014).

2. Мильков Ф.Н. Общий обзор природы известнякового севера Среднерусской возвышенности / Ф.Н. Мильков // Известняковый север Среднерусской возвышенности. - Воронеж, 1978. - С. 4-12.

3. Скуфьин К.В. Реликтовая фауна известнякового севера Среднерусской возвышенности / К.В. Скуфьин, В.Т. Кузнецова // Изучение и охрана природы малых заповедных территорий. - Воронеж, 1986. - С. 140-147.

4. Голуб В.Б. Видовой состав полужесткокрылых (Heteroptera) заповедника «Галичья гора» / В.Б. Голуб // Состояние и проблемы экосистем Среднего Подонья. - Воронеж, 1996. - Вып. 8. - С. 89-91.

5. Парфенова Н.И. Дополнения к видовому составу клопов-слепняков

заповедника «Галичья гора» / Н.И. Парфенова // Состояние и проблемы экосистем среднерусской лесостепи. - Воронеж, 2000. - Вып. 14. - С. 60-63.

6. Лычковская И.Ю. Полужесткокрылые надсемейства щитников (Heteroptera, Pentatomoidea) заповедника «Галичья гора» / И.Ю. Лычковская // Вопросы естествознания: материалы межвуз. науч. конф. преподавателей, аспирантов и студентов. - Липецк, 2003. - Вып. 11. - С. 32-35.

7. Лычковская И.Ю. Полужесткокрылые насекомые (Heteroptera) Каменного лога г. Липецка / И.Ю. Лычковская // Состояние и проблемы экосистем среднерусской лесостепи. - Воронеж, 2004. - Вып. 18. - С. 62-64.

8. Лычковская И.Ю. Изучение фауны полужесткокрылых (Heteroptera) карьерно-отвальных ландшафтов Липецкой области / И.Ю. Лычковская // Экология Центрально-Черноземной области Российской Федерации. - 2005. - №2 (15). - С. 77-80.

9. Лычковская И.Ю. Полужесткокрылые насекомые (Heteroptera) кальцефитных биотопов Среднего Дона / И.Ю. Лычковская // Проблемы устойчивого функционирования водных и наземных экосистем. - Ростов-н/Д., 2006 а. - С. 245-248.

10. Лычковская И.Ю. Особенности фауны полужесткокрылых (Heteroptera) карьерно-отвальных комплексов по разработке известняка в Липецкой области / И.Ю. Лычковская // Труновские чтения: традиции и современность. - Липецк, 2013. - С. 133-139.

11. Емельянов А.Ф. Предложения по классификации и номенклатуре ареалов / А.Ф. Емельянов // Энтомологическое обозрение. - 1974. - Т. 53, вып. 3. - С. 497-522.

Попова А.Д. ', Садыкова В. С. 2

'Студент, ФГБОУ ВПО Московский Государственный Университет Пищевых Производств; ^Профессор, доктор биологических наук, научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. ГАУЗЕ РАМН, г. Москва,

Россия.

АНТАГОНИСТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ШТАММОВ TRICHODERMA ASPERELLUM В ОТНОШЕНИИ ТОКСИНОБРАЗУЮЩИХ ГРИБОВ РОДА FUSARIUM

Аннотация

Исследование антагонистической активности штаммов Trichoderma asperellum к токсинобразующим фитопатогенным грибам рода Fusarium. Для оценки антимикробной активности проводили исследования методами перпендикулярных штрихов, бумажных дисков и агаровых блоков (метод диффузии в агар). Перспективным для штаммов Trichoderma asperellum является разработка антимикробных препаратов.

Ключевые слова: гиперпаразитическая, антагонистическая, антиикробная, токсинобразующие, грибы.

Popova A.D. \ Sadykova V.S. 2

'Student, Moscow State University of Food Production; 2Doctor of Biological Sciences, Professor Research Institute of New Antibiotics

them. G.F. Gause RAMS, city of Moscow, Russia.

ANTAGONISTIC PROPERTIES OF TRICHODERMA ASPERELLUM WITH RESPECT TO THE TOXIGENIC FUNGI

FUSARIUM

Abstract

Research antagonistic activity of Thichoderma asperellum with respect to toxigenic fungi Fusarium. Research were performed out by methods: perpendicular line, paper discs and blocks agar (agar diffusion method). Trichoderma asperellum is the strain to be promising for further development of antimicrobial preparations.

Keywords: biparasitic, antagonistic, antimicrobial, toxigenic, fungi.

33

Одними из естественных антагонистов фитопатогенных микроорганизмов являются грибы рода Trichoderma, обнаруживающие космополитизм и встречающиеся во всех типах почв. На основе этих грибов создана группа биопрепаратов-триходерминов. Большинство исследователей во всем мире отмечают их высокую эффективность в подавлении многих возбудителей болезней растений. В связи с широким применением грибов рода Trichoderma в самых разных странах накоплен огромный фактический материал, касающийся физиолого-морфологических, биохимических и генетических исследований грибов, а также технологии получения биопрепаратов и их успешное применение. Однако, потенциальные возможности использования представителей вида микромицетов Trichoderma asperellum в биологическом контроле возбудителей инфекций растений изучены недостаточно. По словам ведущего специалиста, занимающегося исследованием этих грибов Г. Самуельса (Samuels, 2006): «Род Trichoderma сейчас в стадии открытия для человечества. Численность, биоразнообразие, роль и взаимодействие видов Trichoderma в окружающей среде только теперь можно оценить в полной мере. С открытием новых экологических ниш и описания новых видов в неизученных географических регионах еще много новых видов будет найдено, изучены процессы жизнедеятельности этого «захватывающего» рода и использован их потенциал в биотехнологии будущего» [1,4,5,6].

В связи с этим, цель работы такова: исследование антагонистической активности штаммов Trichoderma asperellum к токсинобразующим фитопатогенным грибам рода Fusarium.

Исследования проводили со штаммами Trichoderma asperellum: МГ/6 (ВКПМ F-878) , T-30 (ВКПМ F-767) и TH-7 (ВКПМ F-888), выделенными из различных природных объектов Средней Сибири (Садыкова, 2012).

1. T-30 (Номер штамма в Генбанке KF900134) - выделен из исходного штамма, изолированного из почвы тепличного комплекса Березовского района Красноярского края.

2. Mg-6 (Номер штамма в Генбанке KF922326) - моноспоровый штамм, выделен из исходного Mg-97, изолированного из почв лесного биоценоза Маганского лесхоза Красноярского края.

3. TH-7 (Номер штамма в Генбанке KF922329) - выделен из исходного штамма, изолированного из почв Таловского лесничества Красноярского края.

В качестве тест-объектов изучали штаммы токсинобразующих видов Fusarium sambucinum Fuckel (ВКПМ F-900) и Fusarium sporotrichioides Sherb. (ВКПМ F-890).

Для получения культуральных фильтратов и мицелия штаммы глубинно культивировали на питательной среде Сабуро в течении 10 и 14 суток. Антимикробные соединения исследовали в водных, спиртовых и этилацетатных экстрактах мицелия. Для оценки антимикробной активности исследования проводили методами перпендикулярных штрихов, бумажных дисков и агаровых блоков (метод диффузии в агар) (Егоров, 2004, Егоров 1965).

Как показали наши исследования, оценка гиперпаразитической активности показала гетерогенность штаммов в пределах вида и различия по степени активности изолятов в отношении фитопатогенных микромицетов. Штаммы вида Trichoderma asperellum проявили внутривидовую вариабельность по гиперпаразитической активности в зависимости от вида фитопатогена (в таб. 1).

Для описания типов взаимоотношений между грибами рода Trichoderma и фитопатогенами родов Fusarium использовали шкалу Джонсона и Карла, в модификации и дополнении Ф.К. Алимовой.

Таблица 1 - Индекс антагонизма в баллах

Исследуемый штамм Индекс антагонизма

F. sporotrichioides F.sambucinum

T. asperellum TH-7 2 4

T. asperellum T-30 4 4

T. asperellum МГ/6 5 5

Исследуемый штамм Trichoderma asperellum МГ/6 характеризуется максимальной активностью и действует на Fusarium sporotrichioides Sherb. (ВКПМ F-890) и Fusarium sambucinum Fuckel (ВКПМ F-900) одинаково по шкале Джонсона и Карла - 5 баллов. Механизм подавления - при контакте антагонист продолжает расти с неизменной скоростью поверх колонии подавляемого организма. Штамм Trichoderma asperellum T-30 действует одинаково на Fusarium sporotrichioides Sherb. (ВКПМ F-890) и Fusarium sambucinum Fuckel (ВКПМ F-900). Индекс антагонизма по шкале Джонсона и Карла составляет 4 балла, т.е. подавление одного организма при контакте, антагонист обрастает колонию подавляемого организма. Для Trichoderma asperellum TH7 в отношении обоих видов Fusarium характерна низкая гиперпаразитическая активность, индекс антагонизма составил 4 и 2 балла соответственно.

Исследуя культуральные экстракты штамма Trichoderma asperellum методом бумажных дисков и методами диффузии в агар, наиболее эффективные действия проявил этилацетатный экстракт из культуральной жидкости штамма Trichoderma asperellum МГ/6 и Т-30. Этилацтатный экстракт получали выращиванием глубинно в колбах на 1000 мл на жидкой среде Сабуро на качалке в течении 10 и 14 суток, затем культуральную жидкость фильтровали через мембранные фильтры на воронке Зейца под вакуумом. Для извлечения антибиотических веществ культуральную жидкость экстрагировали этилацетатом (1:1). Полученные экстракты упаривали в вакууме на роторном испарителе «Rotavapor-RBUchi» (Швейцария) при 42°С досуха, сухой остаток растворяли в водном 60% этаноле и получали спиртовые концентраты. Во всех фракциях - маточниках (исходной культуральной жидкости).

Однако, проверяя спиртовые и водные экстракты из штаммов Trichoderma, методом диффузии в агар, выяснили, что спиртовой экстракт активнее, чем водный экстракт по отношению токсинобразующим грибам рода Fusarium. Для получения спиртовых и водных экстрактов грибы глубинно культивировали на жидкой среде Сабуро на качалке (120-140 об/мин) в течении 10 и 14 суток, затем культуральную жидкость фильтровали через мембранные фильтры на воронке Зейца под вакуумом. Отобранный мицелий помещали в морозильную камеру, после оставляли в сушильном шкафу при температуре 40оС до полного испарения влаги.

Водные и спиртовые экстракты из биомассы мицелия получали путем измельченния биомассы и экстрагирования при температуре: 22 ± 1 °С. Соотношение исследуемого образца к экстрагенту составляло 1:3. Из мицелия определяли антимикробную активность методом диффузии в агар. Действие спиртового экстракта наглядно изображено на рисунке 1.

34

Рис. 1 Метод диффузии в агар со спиртовым экстрактом Trichoderma asperellum на Fusarium sambucinum и Fusarium sporotrichioides. а) T. asperellum МГ/6 и F. sambucinum F-900; б) T. asperellum Т-30 и F. sambucinum F-900; в) T. asperellum TH-7 и F. sambucinum F-900; г) T. asperellum МГ/6 и F. sporotrichioides F-890; д) T. asperellum Т-30 и F. sporotrichioides F-890; е) T. asperellum

TH-7 и F. sporotrichioides F-890.

В результате проведенных исследований были получены следующие результаты: Микромицеты рода Trichoderma asperellum МГ/6, T-30 и TH-7 проявляют антибиотическую активность по отношению к токсинобразующим штаммам Fusarium sambucinum и Fusarium sporotrichioides. Из трех представленных штаммов грибов T. asperellum высокую антоганистическую активность в отношении фитопатогенов рода Fusarium проявляют штаммы Trichoderma asperellum МГ/6 и Т-30.

Вывод

Все штаммы рекомендуется использовать в виде спорово-мицелиального препарата, так как только такая форма обеспечивает подавление сразу двух видов фитопатогенов - Fusarium sambucinum и Fusarium sporotrichioides. Таким образом, на основе штаммов T. asperellum МГ/6 и Т-30 рекомендуется получение биопрепаратов.

Литература

1. Аспите, А.Ф. Использование триходермина для защиты растений от фитопатогенных микромицетов / Аспите А.Ф., Швинка Ю.Э., Стрикаускас С.В. // Вестник с.-х. науки. - 1981. - № 9. - С. 114-118.

2. Егоров Н.С. Микробы антагонисты и биологические методы определения антибиотической активности// Издательство «Высшая школа», Москва, 1965, с - 96-130

3. Егоров Н.С. Основные учения об антибиотиках// Изд.МГУ, Наука, Москва 2004г. - с 78

4. Садыкова В.С. Экология грибов рода Trichoderma (Pers.:Fr.) бассейна реки Енисей, их биологические свойства и практическое использование: Автореф. док. биол. наук / Садыкова В.С. - Москва, 2012. - С.8-31

5. Chet I. Trichoderma - application, mode of action, and potential as a biocontrol agent of soilborne plant pathogenic fungi / Chet I. // In Innovative Approaches to Plant Disease Control (ed. I. Chet). - 1987. - P. 137-160.

6. Reino, J.L. Secondary metabolites from species of the biocontrol agent Trichoderma / J.L. Reino, R.F. Guerriero, R. Herna'ndez-Gala', I.G. Collado // Phytochem Rev. 2008. - Vol. 7. - P. 89-123.

Никольская1 В.А., Постольник2 Н. А., Меметова3 З.Н.

'Кандидат биологических наук, доцент, Таврический национальный университет им. В.И. Вернадского; 2 Магистр, Таврический национальный университет им. В.И. Вернадского; 3Аспирант, Таврический национальный университет им. В.И.

Вернадского

ГИПЕРИНСУЛИНЕМИЯ, ВЛИЯНИЕ НА МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ОРГАНИЗМЕ

Аннотация

В данной статье определена результирующая в изучении воздействия гиперинсулинемического состояния на различные процессы в организме при его проявлении как в роли самостоятельного фактора влияния на организм, так и в виде осложнения при патологии, а также произведена краткая систематизация имеющихся в литературе данных, способствующих раскрытию механизмов возникновения и развития гиперинсулинемии.

Ключевые слова: гиперинсулинемия, гестационный сахарный диабет, ишемическая болезнь сердца, окислительная модификация белков.

Nikol'skaya V.A. 1, Postol'nik КА. 2, Memetova Z.N. 3

'PhD, lecturer, Taurida National V. I. Vernadsky University; 2Holder of a masters degree, Taurida National V. I. Vernadsky University;

^Postgraduate student, Taurida National V. I. Vernadsky University HYPERINSULINEMIA, INFLUENCE ON METABOLIC PROCESSES IN AN ORGANISM

Abstract

In this article a resultant is certain in the study of influence of the state excessively increased contents of insulin on different processes in an organism at his display both in a role of independent factor of influence on an organism and as complication at pathology, and also short systematization of present in literature of information, cooperant opening of mechanisms of origin and development of hyperinsulinemia is made.

Keywords: hyperinsulinemia, gestational diabetes, ischemic disease, oxidative мodifications of proteins.

Изменения метаболических процессов в организме определяют последующую вероятность развития патологии, а структурный след любого отклонения - её интенсивность и направленность; следует учитывать, что, в конечном счете, совокупность затронутых звеньев различных процессов обусловливают характер выраженности заболевания.

35

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.