CC BY
129
© О. I. Матлай
УДК 616. 831-005. 1/. 6:548. 33 О. I. Матлай
Анатз ЗВ'ЯЗКУ С677Т ПОЛiMОPФiЗMУ ГЕНА N5,N10-METiЛEНTETPAГiДPОФОЛATPEДУКTAЗИ (MTHFR) З ШЕМННИМ АТЕРОТРОМБОТИЧНИМ iНCУЛЬTОM В ОаБ PÍ3H0I CTATi
Сумський державний ушверситет (м. Суми)
Представлену роботу виконано в рамках теми наукових дослщжены з держбюджетним фшансуван-ням «Визначення ролi полiморфiзму поодиноких ну-клеотидiв у розвитку склеротичних уражень крово-носних судин», № держ. реестрацп 91. 01. 01. 11-12.
Вступ. З кожним роком статистика констатуе зростання показниюв захворюваностi та смерт-ностi вiд серцево-судинних захворювань, i в першу чергу, таких як Ысулыт та iнфаркт мiокарда. Частота шсульту залежить вiд вiку, стат^ регiону проживання, i варiюе в межах 150 - 200 випадюв на 100 тис. на-селення [3].
Найбтыш частою причиною тромбооклюзивного ураження судинно! системи мозку е атеротромбоз - генералiзований i прогресуючий процес, що залежить вщ еволюцiI атеросклеротичних змiн у судинах [7]. Принципово важливою ланкою патогенезу атеросклерозу та його ускладнены е ендотелiалына дис-функцiя (ЕД) [2]. Одыею з причин, що викликаюты хронiчне пошкодження ендотелiю, може бути не-сприятливий вплив надлишку гомоцисте!ну. Ключо-вим серед фермен^в, якi впливаюты на рiвены гомо-цисте!ну е №,№0-меттентетрапдрофолатредуктаза (MTHFR), яку кодуе ген MTHFR. Одним з кгмычно значущих полiморфiзмiв гена MTHFR е варiант, при якому вщбуваетыся замiна амiнокислотного залиш-ку аланшу на залишок валiну в сайт зв'язування фо-лату (полiморфiзм C677T (Ala222Val) гена MTHFR) [1, 5, 18].
Мета дослщження - провести аналiз асоща-цп алелыного полiморфiзму гена MTHFR, C677T (rs 1801133) з розвитком iшемiчного атеротромботич-ного шсульту (1АТ1) в осiб рiзноI статi.
Об'ект i методи дослщження. Для аналiзу ви-користано венозну кров 170 хворих з 1АТ1 (42,4 % жшок i 57,6 % чоловшв) вiком вiд 40 до 85 роюв (середнiй вк - 64,7 ± 0,73 роки), що перебували на диспансерному обл^ в пол^ычному вщдшен-нi Сумсыко! клiнiчноI лiкарнi № 5. Контрольна група складалася зi 124 пащетчв (36,3 % жiнок i 63,7 % чо-ловiкiв), середнiй вк склав 76,7 ± 0,93 роки. Ц групи не вiдрiзнялися за стввщношенням осiб рiзноI статi (P = 0,294 за x2-критерiем), проте середнм вiк пер-шо! (76,7 ± 0,93 роки) був ютотно вищим, нiж друго! (P < 0,001).
Патогенетичний варiант iнсулыту визнача-ли вiдповiдно до критерпв TOAST [4], на пiдставi
анамнестичних даних i особливостей клiнiчного пе-pe6iry хвороби, даних ультразвуково! доплерографiI мапстральних артерiй голови, ЕКГ. Iшемiчний характер шсульту встановлювався за даними анамнезу i клiнiчноI картини хвороби, даних КТ-доотдження головного мозку. У груп контроля вiдсутнiсть серце-во-судинно! патологiI пiдтверджували шляхом зби-рання анамнестичних даних, зняття електрокардю-грами i вимiрювання артерiального тиску.
Визначення C677T (rs 1801133) полiморфiзму гена MTHFR проводили за допомогою методу пол^ меразно! ланцюгово! реакцiI з наступним аналiзом довжини рестрикцiйних фрагментв при видiленнi !х шляхом електрофорезу в агарозному гелi.
Для генотипування венозну кров набирали в стерильних умовах в моновети об'емом 2,7 мл з калieвою стлю етилендiамiнтетраоцтово! кислоти ("Sarstedt", Нiмеччина), що слугувала антикоагулянтом. Кров заморожували i зберiгали при темпе-ратурi - 20 °С. ДНК з не! видтяли, використовуючи набори "Изоген" (РоЫя). Амплiфiкацiю дiлянки гена, що мютить сайт C677T полiморфiзму, проводили за допомогою пари специфiчних праймерiв: прямого (sence) - 5' GTCATCCCTATTGGCAGGTTAC3' i зворот-ного (antisense) - 5' CTGAGAGGAGATCTGGGAAGAA 3'. Праймери було синтезовано фiрмою "Metabion" (Нiмеччина). Для амплiфiкацi! брали 50-100 нг ДНК i додавали до сумiшi, що мютила 5 мкл 5-кратного PCR-буферу, 1,5 мМ сульфату магнiю, 200 мкМ сумiшi чотирьох нуклеотидтрифосфатiв, по 15 pM кожного з праймерiв i 0,75 ОД Taq-полiмерази («Ферментас», Литва ), об'ем доводили до 25 мкл де-iонiзованою водою. PCR проводили в термоциклерi GeneAmp PCR System 2700 («Applied Biosystems», США). Амплiфiкацiя фрагмента, що мютив старто-ву дiлянку, складалася з 33 ци^в: денатурацiя - 94 °С (50 с), гiбридизацiя праймерiв - 64,5 °С (45 с) i елонгацiя - 72 °С (1 хв). Для рестрикцмного анал^ зу 6 мкл продукту амплiфiкацi! шкубували при 37°С протягом 20 годин з 3 ОД рестриктази Hinfl («Thermo Scientific», США) у буферi R такого складу: 10 мМ трю-HCl (рН 8,5), 10 мМ MgCl2, 100 мМ KCl, 0,1 мг/ мл альбумину. Наявнiсть у 677 позицп гена MTHFR цитозину перешкоджае рестрикци, а при його замн на тимiн рестриктаза розщеплюе амплiфiковану д^ лянку (довжина - 334 пари азотистих основ) на два фрагменти - 241 i 93 пари основ (рис. 1).
Рис. 1. Результати рестрикцмного аналiзу С677Т полiморфiзму гена MTHFR. M - маркер молекулярной' маси (по - пари нукле'Гнових основ); дорiжки 4, 7 вщповщають C/C - генотипу; дорiжки 1, 2, 3- C/T -генотипу; 5, 6, 8, 9, 10 - T/T - генотипу.
Амплiфiкати вивченого фрагмента гена MTHFR пюля рестрикци роздшяли в 2,5 % агарозному гел^ що мiстив 10 мкг/мл бромистого етидю Горизон-тальний електрофорез (0,13А; 200V) проводили протягом 25 хв. Вiзуалiзацiю ДНК пюля електрофо-резу здмснювали за допомогою трансiлюмiнатора («Бiоком», РоЫя).
Статистичний аналiз проводили з використан-ням програми SPSS-17. При цьому достовiрнiсть вiдмiнностей визначали за с2-критер!ем. Значення P < 0,05 вважали достовiрним.
Результати досл1джень та 'Гх обговорення. Ге-нотипування хворих з 1АТ1 та пацieнтiв контрольно! групи за C677T полiморфiзмом гена MTHFR дало змогу встановити частоту, з якою зустрiчаються окремi варiанти цього гена, а також порiвняти Тх мiж групами загалом i за статтю.
На рис. 2 наведено частоту виявлення рiзних алельних варiантiв даного полiморфiзму у пащен-^в, що були об'ектом дослiдження. Так, встановле-но, що у хворихз IATI сгВввщношення гомозигот за оснлвнималелем(С/С),гетеро зигот(СД) i гомозигот за мшорним алелем (T/T) складае 52,4 %, 35,9 % i 11,8%,авкоое°етьшй грут - вiдповiдно 46,0 %, 4У,е%,5,6%.Сри °слму всцмшност в iлi авс-
тот зазначених генотипiв мiж групою хворих з 1АТ1 та
КИНТ°ОЛЬНОЮ фуПОЮ беЛИ СВаТИСТИЧ/°ДОСТКВ1рНИ-
ми (P = 0,044).
%
60 50 40 30 20 10 0
L
P=0,044
■ XBopi з I ATI □ Контрольна група
C/C
C/T
T/T
Рис. 2. Частота алельних варiантiв гена MTHFR за по-лiморфiзмом C677T у хворих з iшемiчним атеротром-ботичним iнсультом (чорнi стовпчики) i в контрольнш rpyni (Prni елевулвки).Р р стаиссоочсаоначпулсть вiдмiнностi показникiв за x2-критерieм ^рсона.
Розподiл частот алельних варiантiв полiморфiз-му C677T за статтю у дослщжуваних пацiентiв наведено в табл.1.
З поданих даних виткае, стввщношення варiан-тiв даного полiморфiзму в осiб чоловiчоТ стат е рiз-ним у хворих з 1АТ1 та в контролi (P = 0,011).
Таблиця 1
Вплив C677T полiморфiзму гена MTHFR на розвиток iшемiчного атеротромботичного шсульту (iATi) в ceiG жiночоГi чоловiчоV статi
Генотип ЖЫки Чоловiки
Контроль 1нсульт Контроль 1нсульт
C/C 27(60,0 %) 37(51,4 %) 30(38,0 %) 52(53,0 %)
C/T 16(35,6 %) 28(38,9 %) 44(55,7 %) 33 (33,7 %)
T/T 2(4,4 %) 7(9,7 %) 5(6,3 %) 13(13,3 %)
Разом 45(100 %) 72(100 %) 79(100 %) 98(100 %)
P 0,482 0,011
Примiтка: подано частоту генотипу в абсолютних одиницях i вщсотках. P - статистична значимють вiдмiнностей мiж порiвнюваними групами за x2-критерiем.
У чоловiкiв з 1АТ1 частота гомозигот за мiнорним («патолопчним») алелем (Т/Т) була майже втричi вищою, нiж у контрольнiй грут. Всупереч цьому у жiнок розподт алельних варiантiв С677Т полiмор-фiзму не вiдрiзнявся, якщо порiвнювати хворих з 1АТ1 та пацieнтiв контрольно! групи (Р = 0,482).
У табл. 2 представлено дан генотипування за С677Т полiморфiзмом у жшок i чоловiкiв - окремо у хворих з 1АТ1 i у пащен^в без гостро! церебрально! патологи.
Одержат результати свщчать про вщсутнють статистично значимих вiдмiнностей мiж особами жшочо! i чоловiчо! статi у контрольна групi пащен-тiв (Р = 0,061), так й у хворих з цереброваскулярною патолопею (Р = 0,677). Аналiз же частоти iшемiчних iнсультiв у жiнок i чоловiкiв з рiзними варiантами генотипу за С677Т полiморфiзмом показав наявнють статистично значимих вiдмiнностей мiж особами-гетерозиготами жшочо! i чоловiчо! статi (табл. 3). У жшок, носив С/Т генотипу, шсульт розвиваеться час-тiше майже вдвiчi, шж у чоловiкiв (Р = 0,028).
Аналiзуючи дослiдження, направленi на вивчення зв'язку полiморфiзму 677С ^ Т гена МТИРЯ з рiзни-ми мультифакторiальними захворюваннями виявле-но, що даний SNP пов'язаний принаймнi з чотирма групами: серцево-судинними захворюваннями, патолопею ваптност та дефектами ембрюнального розвитку, онколопчними захворюваннями, нейро-когштивними захворюваннями.
Першими, хто припустив, що гомозиготний генотип (ТТ) МТИРЯ 677С ^ Т-варiанту може бути фактором ризику для серцево-судинних захворю-вань був Капд S. S. et а1. [6, 9, 14 - 17]. ва^етапп А. et а1. вивчаючи МТИРЯ 677С ^ Т пiдтвердили за-лежнiсть наявност генотипу (ТТ) з високим ризиком
Таблиця 2
Частота генотишв за C677T полiморфiзмом гена MTHFR у жiнок i чоловiкiв у контрольнiй rpyni i в хворих з iшемiчним iнсультом
Генотип Контроль 1нсулыт
Жшки Чоловки Жшки Чоловки
C/C 27(60,0 %) 30(38,0 %) 37(51,3 %) 52(53,0 %)
C/T 16(35,6 %) 44(55,7 %) 28(39,0 %) 33(33,7 %)
T/T 2(4,4 %) 5(6,3 %) 7(9,7 %) 13(13,3 %)
Разом 45(100 %) 79(100 %) 72(100 %) 98(100 %)
P 0,061 0,677
Примiтка: подано частоту генотипу в абсолютних одинииях i вiдсотках. P - ста-тистична значимiсть вщмЫностей мiж порiвнюваними групами за x2-критерieм.
Таблиця 3
Частота iшемiчних шсульпв у жiнок i чоловiкiв з pi3-ними ваpiантами генотипу за C677T полiмоpфiзмом гена MTHFR
C/C C/T T/T
1нсулыт (-) 1нсулыт ( ± ) 1нсулыт (-) 1нсулыт ( ± ) 1нсулыт (-) 1нсулыт ( ± )
Жшки 27 (47,4 %) 37 (41,6 %) 16 (26,7 %) 28 (45,9 %) 2 (28,6 %) 7 (35,0 %)
Чоловки 30 (52,6 %) 52 (58,4 %) 44 (73,3 %) 33 (54,1 %) 5 (71,4 %) 13 (65,0 %)
Разом 57 89 60 61 7 20
P 0,491 0,028 0,756
Примггка: подано частоту генотипу в абсолютних одиницях i вiдсотках. P - статис-тична значимiсть вiдмiнностей мiж порiвнюваними групами за x2-критерieм.
розвитку коронарного атеросклерозу, 1шем1чно1 хвороби серця та шфаркту м1окарду [13]. Вивчення молодих чоловшв 1зра1лю продемонстрували бтыш високу поширен1сты гомозиготного MTHFR 677T у хворих з гострим шфарктом мюкарду [11]. Досл1-джуючи популяц1ю ж1нок в постменопауз1 Roest М. et
al. виявили, що MTHFR 677 C/T полiмор-фiзм пов'язаний з незначним знижен-ням ризику шсульту, в той час не було ыякого зв'язку мiж MTHFR 677 С/Т пол^ морфiзмом та тромбозом глибоких вен. [16]. Isordia-Salas у сво!х роботах доводить, що T алель полiморфiзму C677T гена MTHFR являе собою незалежний фактор ризику для iшемiчного шсульту осiб молодого вiку мексикансько-ме-тиського населення [12]. В украшсьюй популяци аналiз, проведений Tatarskyy P. F. et al. виявив асо^а^ю C677T полiмор-фiзму з iшемiчним шсультом у жiнок [8].
Таким чином, у виконанм нами робот проаналiзовано асоцiацiю C677T полiморфiзму гена MTHFR з гострими порушеннями мозкового кровооб^ i виявлено зв'язок дослщжуваного гене-тичного чинника з розвитком 1АТ1 в осiб чоловiчоI та жшочо! статi в украIнськiй популяци.
Висновки. 1снуе зв'язок мiж пол^ морфiзмом C677T гена MTHFR з розвитком iшемiчного атеротромботичного шсульту в оЫб жiночоI i чоловiчоI статi в украIнськiй популяцiI. Чоловки, носií T/T- варiанту цього гена та жшки-гете-розиготи (С/Т) мають бтьший ризик розвитку гострих порушень мозкового кровообiгу.
Перспективи подальших дослщжень. Наве-денi вище данi ще раз маркують необхiднiсть подальших доотджень у даному напрямку з метою виявлення нових полiморфних варiантiв геыв-кан-дидатiв серцево-судинних захворювань, а саме ше-мiчного атероторомботичного шсульту
Л^ература
1. Гипергомоцистеинемия - значимый фактор риска развития артериальных и венозных тромбозов / В. М. Шмелева, С И. Капустин, М. Н. Блинов [и др.] // Медицинский академический журнал. - 2003. - № 3. - C. 28-34.
2. Гомазков О. А. Эндотелий - «эндокринное дерево» / О. А. Гомазков // Природа. - 2000. - № 5. - С. 38-46.
3. Мщенко Т. С. Аналiз етдемюлогп цереброваскулярних хвороб в УкраУш / Т. С. Мщенко // Судинн захворювання головного мозку. - 2010. - № 3. - С. 2-9.
4. Classification of subtype of acute ischemic stroke. Definitions for use in a multicenter clinical trial. TOAST. Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment / H. P. Adams, B. H. Bendixen, L. J. Kappelle [et al.] // Stroke. - 1993. - Vol. 24. - P. 35-41.
5. Genetic polymorphisms in folate and homocysteine metabolism as risk factors for DNA damage / N. Botto, M. G. Andreassi, S. Manfredi [et al.] // Eur. J. Hum. Genet. - 2003. - Vol. 11, № 9. - P. 671-678.
6. Genetic polymorphism of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) as a risk factor for coronary artery disease / H. Morita, J. Taguchi, H. Kurihara [et al.] // Circulation. -1997. - Vol. 95. - P. 2032-2036.
7. International prevalence, recognition, and treatment of cardiovascular risk factors in outpatients with atherothrombosis / D. L. Bhatt, P. G. Steg, E. M. Ohman [et al.] // JAMA. - 2006. -Vol. 295 (2). - Р 180-9.
8. Ischemic stroke in Ukrainian population: possible involvement of the F2 G20210A, F5 G1691A and MTHFR C677T gene variants / P. F. Tatarskyy, A. M. Kucherenko, S. A. Kravchenko [et al.] // Biopolymers and Cell. -2010. - Vol. 26, № 4. - P. 299-305.
9. Kang S. S. Genetic and nongenetic factors for moderate hyperhomocysteinemia / S. S. Kang, P. W. Wong // Atherosclerosis. - 1996. - Vol. 119. - P. 135-138.
10. Methylenetetrahydrofolate reductase 677 C/T genotype and cardiovascular disease mortality in postmenopausal women / M. Roest, T. van der SchouwYvonne, E. Grobbee Diederick [et al.] // Am. J. Epidemiol. - 2001. - Vol. 153. - P. 673-9.
11. Synergistic effects of prothrombotic polymorphisms and atherogenic factors on the risk of myocardial infarction in young males / A. Inbal, D. Freimark, B. Modan [et al.] // Blood. - 1999. - Vol. 93, № 7. - P. 2186-2190.
12. The C677T polymorphism of the methylenetetrahydrofolate reductase gene is associated with idiopathic ischemic stroke in the young mexican-mestizo population / I. Isordia-Salas, F. Barinagarrementema-Aldatz, A. Leacos-Miranda [et al.] // Cere-brovasc. Dis. - 2010. - Vol. 29. - P. 454-459.
13. The TT genotype of the methylenetetrahydrofolate reductase C677T gene polymorphism is associated with the extent of coronary atherosclerosis in patients at high risk for coronary artery disease / A. Gardemann, H. Weidemann, M. Philipp [et al.] // European Heart Journal. - 1999. - Vol. 20. - P. 584-592.
14. Thermolabile 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase as a cause of mild hyperhomocysteinemia / A. M. Engbersen, D. G. Franken, G. H. Boers [et al.] // Am. J. Hum. Genet. - 1995. - Vol. 56. - P. 142-150.
15. Thermolabile defect of methylenetetrahydrofolate reductase in coronary artery disease / S. S. Kang, E. L. Passen, N. Ruggie [et al.] // Circulation. - 1993. -Vol. 88. - P. 1463-1469.
16. Thermolabile methylenetetrahydrofolate reductase: an inherited risk factor for coronary artery disease / S. S. Kang, P. W. K. Wong, A. Susmano [et al.] // Am. J. Hum. Genet. - 1991. - Vol. 48. - P. 536-545.
17. Thermolabile methylenetetrahydrofolate reductase in patients with coronary artery disease / S. S. Kang, P. W. Wong, J. M. Zhou [et al.] // Metabolism. - 1988. - Vol. 37. - P. 611-613.
18. Voetsch B. Genetic determinants of arterial thrombosis / B. Voetsch, J. Loscalzo // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. - 2003. - Vol. 24, № 2. - P. 216-229.
УДК 616. 831-005. 1/. 6:548. 33
АНАЛ1З ЗВ'ЯЗКУ C677T ПОЛ1МОРФ1ЗМУ ГЕНА МЕТ1ЛЕНТЕТРАГ1ДРОФОЛАТРЕДУКТАЗИ (MTHFR) З 1ШЕМ1ЧНИМ АТЕРОТРОМБОТИЧНИМ ШСУЛЬТОМ В ОС1Б Р1ЗНОТ СТАТ1
Матай О. I.
Резюме. Представлено результати визначення C677T (rs1801133) полiморфiзму гена метилентетрап-дрофолатредуктази (MTHFR) у 170 хворих з iшемiчним атеротромботичним шсультом (1АТ1) та 124 Ыдив^ дуумiв без uiei патологи (контрольна група). Встановлено, що у хворих з 1АТ1 сгмввщношення гомозигот за основним алелем (C/C), гетерозигот (C/T) i гомозигот за мшорним алелем (T/T) складае 52,4 %, 35,9 % i 11, 8 % (у контрольна груп - вщповщно 46,0 %, 48,4 %, 5,6 %, P = 0,044 за x2-критерiем). Чоловки, носи T/T- ва-рiанту цього гена та жЫки-гетерозиготи (С/Т) мають бтьший ризик розвитку iшемiчного атеротромботич-ного шсульту.
Ключов1 слова: метилентетрагщрофолатредуктаза (MTHFR), алельний полiморфiзм, iшемiчний Ысульт.
УДК 616. 831-005. 1/. 6:548. 33
АНАЛИЗ СВЯЗИ С677Т ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА МЕТИЛЕНТЕТРАГИДРОФОЛАТРЕДУКТАЗЫ (MTHFR) С ИШЕМИЧЕСКИМ АТЕРОТРОМБОТИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ У ЛИЦ РАЗНОГО ПОЛА
Матлай О. И.
Резюме. Представлены результаты определения C677T (rs 1801133) полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) у 170 больных с ишемическим атеротромботическим инсультом (ИАТИ) и 124 индивидуумов без этой патологии (контрольная группа). Установлено, что у больных с ИАТИ соотношение гомозигот по основному аллелю (C/C), гетерозигот (C/T) и гомозигот по минорному ал-лелю (T/T) составляет 52,4 %, 35,9 % и 11,8 % (в контрольной группе - соответственно 46,0 %, 48,4 %, 5,6 %, P = 0,044 по х2-критерию). У мужчин, носителей T/T- варианта этого полиморфизма и женщин-гетерозигот (С/Т) риск развития ишемического атеротромботического инсульта выше.
Ключевые слова: метилентетрагидрофолатредуктаза (MTHFR), аллельный полиморфизм, ишемичес-кий инсульт.
ийС 616. 831-005. 1/. 6:548. 33
Analysis of the Connection C677T Polymorphism Metilentetrahidrofolatreductase Gene (MTHFR) with Atherothrombotic Ischemic Stroke in Individuals of Both Sexes
Matlay O. I.
Abstract. Every year statistics notes the increasing morbidity and mortality as the result of cardiovascular disease such as stroke and myocardial infarction in the first place. Stroke depends on age, sex, region of residence, and varies from 150 - 200 cases per 100 000 of population. The most common cause of vascular brain tromboinclusive lesions is Atherothrombosis - generalized and progressing process that depends on the evolution of atherosclerotic changes in vessels. Principally the important role in the pathogenesis of atherosclerosis and its complications is endothelial dysfunction. One of the causes of chronic endothelial damage may be negative effects of excess homocysteine. The key enzymes that affect the homocysteine level is N5,N10- metilentetrahidrofolatreductase (MTHFR), that encodes a gene MTHFR. One of clinically relevant polymorphisms MTHFR gene is an option in which the amino acid residue substitution of alanine for valine residue in folate binding site (polymorphism C677T (Ala222Val) gene MTHFR, rs1801133). As the result of mutations a variant of the enzyme with a termolability threshold 55 ° C is produced, which has twice reduced activity.
The aim of our study was to analyse communication polymorphism C677T MTHFR gene with atherothrombotic ischemic stroke in two sexes of Ukrainian population. For analysis venous blood of 170 patients with atherothrombotic ischemic stroke (42,4 % women and 57,6 % men) aged 40 to 85 years (mean age - 64,7 ± 0,73 years) who were on the records in the outpatient department Sumy clinical Hospital № 5 was used. The control group consisted of 124 patients (36,3 % women and 63,7 % men), average age was 76,7 ± 0,93 years. The groups did not differ in the ratio of two sexes (P = 0,294 for the %1-test), but the average age of the first group (76,7 ± 0,93 years) was significantly higher than of the second one (P < 0,001). C677T polymorphism was determined by polymerase chain reaction, followed by restriction fragment length analysis. The results have been statistically worked on by using the new Excel 2000. Statistical significance of differences was determined by %l and t-test. Pathogenetic variant of stroke was determined according to the criteria TOAST, based on the anamnestic data and clinical features of the disease, ultrasound Doppler data of major arteries of the head, ECG. Ischemic stroke character was determined with the help of history and clinical information of the disease given by CT brain study.
Genotyping of patients with atherothrombotic ischemic stroke and the comparison of the data with the results of restriction analysis in the control group made it possible to reveal that patients with atherothrombotic ischemic stroke ratio of homozygotes for the major allele (C/C), heterozygotes (C/T) and homozygotes for the minor allele (T/T) is 52,4 %, 35,9 % and 11,8 %, while in the control group - respectively 46,0 %, 48,4 %, 5,6 %. The differences in the distribution of the frequency of these genotypes between the group of patients with atherothrombotic ischemic stroke and control groups were statistically true (P = 0,044). The Ratio of options of the same polymorphism in women and men with atherothrombotic ischemic stroke and without this disease showed the following - Women had the distribution-C / C - 51,4 %, C / T - 38,9 %, T / T - 9 7 % (in the control group, respectively 60,0 %, 35,6 %, 4,4 %), P = 0,028, respectively among men - 53,0 %, 33,7 %, 13,3 % (38,0 %, 55,7 %, 6,3 %), P = 0,011. So, in Ukrain, namely in the Sumy region, the male population who hold T/T- variant of this gene and female heterozygous (C/T) have a higher risk of atherothrombotic ischemic stroke.
Key words: metilentetrahidrofolatreductase (MTHFR), allelic polymorphism, ischemic stroke.
Рецензент - проф. ДубШШ С. I.
Стаття надшшла 3. 02. 2014 р.
