CC BY
5
соединении как условия для модификации эффекта мутагенов.
Литература
1. Бурмантова Н. П.. /Курков В. С.. Выскубенко И. Ф„ Сычева Л. П. // Современные биохимические методы в гигиене окружающей среды, — М„ 1982. — С. 45—52.
2. Журков В. С., Меркурьева Р. В., Бурмантова Н. П. и др.//Вести. АМН СССР. — 1985. — № 1, —С. 54—58.
3. Литвинов Н. И., Воронин В. М., Казачков В. И.// Вопр. онкол. — 1984, —Т. 30, № 4, —С. 56—60.
4. Литвинов И. Н.. Соколовский В. В., Журков В. С. // Генетические последствия загрязнения окружающей среды. — Орджоникидзе, 1986. — С. 81.
5. Подомная М. А., Бобринев Е. В., Радчепко Л. У. и др.//Актуальные проблемы оценки фармакологической активности химических соединений. — М., 1981.— Ч. 2, —С. 124—125.
6. Саратиков А. С.. Новожеева Т. П.. Горшкова В. /(. //
Фармакол. и токсикол. — 1982, —№6. — С. 55—59.
7. Скворцова Н. Н., Иродова Е. В. // Гиг. и сан, — 1981. —L №7, — С. 9—12. *
8. Сычева Л. П., Казачков В. И. //Там же.— 1985. — № 7, —С. 29—31.
9. Capel J. D., Dorrel H. M.. Jenner М. et al.//Biochem. Pharmacol.— 1979, — Vol. 28, N 8. — P. 1139—1141.
10. Hales В. F.. Jain R. // Ibid. — 1980. —Vol. 29, N 2. — P. 256—259.
11. Von Halle E. S. // Progress in Mutation Research. — Geneva, 1985, —Vol. 5. — P. 699—725.
12. Lowry О. H., Rosebrough N. J., Farr A. Z„ Randall R. J. U J. biol. Chem.—1951. —Vol. 193, N I. — P. 265—275.
13. Omura Т.. Scto R.// Ibid. — 1964. — Vol. 239, N 7. — P. 2370—2378.
14. Stevens J. Т.. Oberholser К■ M., Wagner S. R., Green F. E. //Toxicol, appl. Pharmacol. — 1977. — Vol. 39, N 3, — P. 411—421.
Поступила I9.08.S7
УДК 616.155.1-02:613.632:547.532]-092.9
Е. Г. Фельдт, Е. Л. Скворцова
АНАЛИЗ НОРМОХРОМНЫХ ЭРИТРОЦИТОВ С МИКРОЯДРАМИ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ КРЫС ПОСЛЕ ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ БЕНЗОЛА
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
'vi
Учет частоты нормохромных эритроцитов с мнкроядра-ми в периферической крови мышей при длительном воздействии химического вещества служит эффективным непрямым тестом выявления мутагенной активности [6, 8].
В настоящее время этот метод широко применяется зарубежными исследователями для оценки действия модельных мутагенов — ацетилальдегида, диметнлбензантрацена, циклофосфамида, азотистого иприта, алкалоидов пнрролн-зина, триэтиленмеламина, митомнцина С, колхицина [6— 9]. Мы также использовали модифицированный микро-ядернын тест для оценки мутагенного действия циклофосфамида при длительном поступлении и показала совпадение данных, полученных с применением мнкроядерного теста на эритроцитах периферической крови и костного мозга с результатами метафазного анализа аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей [3].
Одним из достоинств рассматриваемого метода является возможность получения информации в динамике, что может представлять определенный интерес для гигиенистов. Поскольку большинство исследований в гигиене проводится на крысах, мы сочли целесообразным проанализировать частоту эритроцитов с микроядрами в периферической крови крыс при длительной затравке мутагеном. В качестве модельного вещества избран бензол, мутагенные свойства которого хорошо изучены.
Эксперимент проведен на самцах нелинейных крыс. Бензол в дозах 50, 500 и 1000 мг/кг (0,008, 0,08 и 0,16 ЬОг,о соответственно) в растворе подсолнечного масла вводили крысам зондом в желудок в течение 6 нед по 5 дней в неделю. В опытных и контрольной группах было по 6 животных. Препараты периферической крови готовили 6 раз (1 раз в неделю), начиная с 7-х суток после начала эксперимента. Каплю крови из хвостовой вены помещали на сухое обезжиренное предметное стекло, шлифованным стеклом делали мазок. Препараты высушивали на воздухе, затем (через 1 ч) фиксировали в абсолютном метаноле (3 мин), окрашивали по методу Мая — Грюнвальда — Гнмзы. При анализе подсчитывали количество нормохромных эритроцитов с мнкроядрамн и полихроматофиль-ных эритроцитов на 2000 нормохромных эритроцитов.
У контрольных животных на протяжении 6 нед затравки колебаний частоты нормохромных эритроцитов с
микроядрами не выявлено (0—0,01 %). При воздействии дозы 50 мг/кг в препаратах не было обнаружено ни одного мнкроядерного эритроцита. При дозах 500 и 100 мг/кг средние значения анализируемого показателя в группах колебались в пределах 0—0,01 и 0—0,025 % соответственно, что свидетельствует об отсутствии повышения частоты нормохромных эритроцитов с микроядрамн у подопытных животных по сразненню с контролем.
Показатель «% полнхроматофнльных эритроцитов» в контрольной группе и у животных, получавших бензол в дозах 50 и 500 мг/кг, колебался незначительно (см. таблицу). При воздействии дозы 1000 мг/кг наблюдалось снижение частоты полнхроматофилов в крови через 2 нед затравки, а затек резкое повышение ее к концу опыта как результат процессов' угнетения кроветворения и компенсации, развивающихся последовательно в костном мозге экспериментальных животных.
Таким образом, полученные данные не выявили накопления в периферической крови крыс нормохромных эрит-роцнтов с микроядрами при пероральном введении бензЪи^Г ла в подсолнечном масле в течение 6 нед. В то же время известно, что при других путях поступления (подкожном, ингаляционном) бензол дает выраженный цнтогенетический эффект в клетках костного мозга крыс [1, 2. 4]. По-види-мому, продолжительность существования микроядерных
Содержание полнхроматофнльных эритроцитов в периферической крови крыс при пероральном введении бензола (М±т)
о Количество полнхроматофнльных эритроцитов, %
доза бензола, мг/кг
ч = <и в, X г; 0 . 50 500 1000
1-я 2-я 3-я 4-я 5-я 6-я 1 .025 ±0,240 0,775±0,130 0,492 ±0,093 0,61 7 ±0,069 0,925 + 0,1 53 0,776±0,208 1 . 1 08 ±0, 1 75 0 ,755 + 0,075 1 ,033 + 0,151 1 ,042 ±0,1 54 1 ,508 ±0. 180 0,800 ± 0,278 1 ,075 ± 0,107 1,050 ± 0,248 0. 508 ±0, 126 1 , 125 ±0, 121 1 ,333 ±0.21 1 1.465 ± 0,172 0,61 7 ±0.305 0,058 ± 0,042 0.450 ± 0,303 1,483 ± 0,2G5 1,367 ± 0,255 2,258 ± 0,300
зии
J
-^эритроцитов в крови крыс значительно меньше, чем «нормальных». Есть данные [10]. что селезенка крыс участвует в селективной элиминации эритроцитов с микроядрами. Введение крысам в течение 20 дней триэтнленмеламнна в дозе 0,2 мг/кг не приводило к повышению частоты нормо-хромных эритроцитов с микроядрами в периферической крови, в то время как у спленэктомнрованных животных та же доза увеличивала частоту эритроцитов с микрояд-рамн в 9 раз. Следует отмстить, что у мышей подобный механизм селективной элиминации мнкроядерных эритроцитов селезенкой отсутствует [5]: бензол в дозе 0,250 мл/кг (220 мг/кг) при иероральном введении в течение 56 дней индуцировал сопоставимые уровни эритроцитов с микроядрами в периферической крови как спленэктомнрованных, так и интактных мышей.
Таким образом, возможности применения данного метода на крысах ограничены необходимостью использования спленэктомнрованных животных. По нашему мнению, наиболее подходящим объектом для выявления мутагенных свойств исследуемого фактора при его длительном воздействии путем учета частоты нормохромных эритроцитов с микроядрами в периферической крови являются мыши.
Литература
Доброхотов В. Б. И Гиг. и сан. — 1972. — № 10. — С. 36—39.
2. Доброхотов В. Б., Еникеев М. И. //Там же.— 1977.— № 1, —С. 32-34.
3. Журков В. С.. Рёсснер П.. Пасторкова А., Фельдт Е. Г.//Бюл. экспер. биол. — 1986. — № 8. — С. 222— 224.
4. Ляпкало А. А.// Гиг. труда — 1973, —№ З.г-С. 24— 29.
5. Barale R.. Giorgelli F., Migliore L. et al.//Mutat. Res.—1985. —Voi. 144, N 3. — P. 193—196.
6. Mac Gregor J. Т., Wehr С. M., Goi/ld D. H. // Environ. Mutagen.— 1980. — Vol. 2, N 4. — P. 509—514.
7. Mac Gregor J. Т., Henika P. R„ Roitman J. N.// Ibid.— 1985.— Vol. 7, Suppl. 3. — P. 68.
8. Schlegel R., Mac Gregor J. T. //Mutat. Res. — 1982.— Vol. 104, N 6, —P. 337—369.
9. Schlegel R„ Mac Gregor J. T. // Environ. Mutagen. — 1983.— Vol. 5, N 3. — P. 379.
10. Schlegel R., Mac Gregor J. T. //Mutat. Res.— 1984. — Voi. 127, N 2, —P. 169—174.
Поступила 19.03.87
УДК 612.766.2.014.49.08: [612.822.3:577.175.82 +612.89
Н. Г. Журавлева
О ПЕРЕСТРОЙКАХ НЕЙРОМЕДИАТОРНОЙ ФУНКЦИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА И ВЕГЕТАТИВНОЙ РЕГУЛЯЦИИ ПОКОЯ ПРИ АДАПТАЦИИ К ХРОНИЧЕСКОЙ ГИПОКИНЕЗИИ
НИИ гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР, Москва
Ранее [2] было показано, что адаптация к хронической гипокинезии (ХГ) сопровождается перестройками медленной биоэлектрической активности головного мозга. Фактором, инициирующим перестройки, является стойкое снижение уровня тонической активации мозга, вызванное значительной проприоцептизной депривацией мозговых структур, и прежде всего ретикулярной формации (РФ). Перестройки развиваются по двум направлениям: снижения общего уровня активности мозга (соответственно снижению уровня его активации) и усиления реактивности мозга на сигналы внешней среды. Последнее, обусловливая экстренное восполнение дефицита активации, обеспечивает поддержание мозговой активности на уровне, соответствующем (или близком к таковому) анализу сигналов и организации ответной реакции.
Изменения биоэлектрической активности сопровождаются частичной десинаптизацией мозга [8], что позволяет предположить участие кедиаторных систем в процессах адаптации. В связи с этим в настоящей работе изучены изменения холинергической, норадренергнческои и серото-нинсргическон систем головного мозга крыс на фоне 8— 10-месячной гипокинезии умеренной степени. У этих же крыс исследовано состояние веге=гатнвной регуляции покоя.
ХГ создавали путем содержания крыс с 1,5-месячного возраста в клетках малого объема по 23 ч в сутки 5 раз в неделю. О перестройках медиаторных систем судили по содержанию в Мозге норадреналина (НА) и серотокнна (С), а также по активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ) головного мозга. Состояние вегетативной регуляции покоя оценивали по содержанию в периферической крови адреналина (А), НА и ацетилхолина (АХ). Использованы 32 крысы (самцы) линии Внстар.
Согласно полученным данным, в мозге у гипокннези-рованных крыс содержание НА было на 48,8 % больше, С — на 17,8 % меньше, а активность АХЭ — на 26.4 % выше, чем в контроле. Эти данные свидетельствуют о том, что адаптация к ХГ вызывает возрастание функциональной активности норадренергической системы, уменьшение активности серотонинергической системы и, по-видимому,
Ч
снижение уровня функционирования холинергической системы. Доказательством последнего служит описанное в литературе [41 уменьшение содержания АХ в мозге крыс уже на 2-м месяце круглосуточной гипокинезии.
В периферической крови у гипокинезированных крыс было обнаружено увеличение содержания АХ в 2,5 раза по сравнению с контролем. В то же время уровень кате-холаминов (КА) был снижен, причем в большей степени за счет НА (на 43,4%), чем А (на 9,8%). В результате соотношение А/НА изменилось в сторону существенного (почти в 2 раза) возрастания относительного уровня А. Эти сдвиги свидетельствуют о том, что на фоне 8—10-месячной гипокинезии имеет место усиление парасимпатического фона регуляции покоя при одновременном ослаблении симпатического фона, причем активность гормонального звена снмпатоадреналовой системы (САС) повышена относительно влияний кеднаторного звена.
Прн оценке функциональной значимости нейромедна-торных перестроек исходили из следующих представлений. АХ в головном мозге выполняет роль полифункционального медиатора, участвующего в сннаптической передаче [6, 13]. По отношению к холинергической системе НА и С являются модуляторами [9], обеспечивающими регуляцию активности нейронов, осуществляемую ими в связи с влиянием на эмоционалыю-мотнвационные компоненты поведения [11, 12]. В частности, модуляторные влияния НА. включающие активизацию синтеза и утилизации АХ [10] и повышение холнночувствнтелыюсти постсинаптпческих мембран [14], направлены на возрастание эффективности синаптическпх входов для раздражителей [11, 12]. Причем при снижении содержания в мозге С влияние НА усиливается [1].
В свете изложенного с учетом нейрофизиологических и морфологических данных [2, 8] снижение уровня АХ з мозге представляется закономерным следствием редукции не-функцнонирующей при ХГ части проприоцептнвных и ретикулярных терминален. Не менее важное значение для этого, по-видимому, имеет уменьшение мощности холинер-гических механизмов как результат снижения общей мета-
