CC BY
39
УДК 615.32:543.429.23:543.544.5.068.7
А. В. Кручонок1, Е. Г. Попов1, Е. Д. Скаковский2, Л. Ю. Тычинская2, С. А. Ламоткин3, В. В. Титок1
Центральный ботанический сад Национальной академии наук Беларуси
2Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси 3Белорусский государственный технологический университет
АНАЛИЗ КОМПОНЕНТНОГО СОСТАВА ЭКСТРАКТОВ РАСТЕНИЙ
РОДА ЭХИНАЦЕИ (ECHINACEA MOENCH) МЕТОДАМИ ЯМР И ВЭЖХ
Проведен сравнительный 1Н и 13С ЯМР анализ водных (D20) экстрактов листьев четырех образцов растений рода Echinacea Moench: диких (E. angustifolia, E. purpurea) и культурных (E.^hybrida сорт 'Leilani' [E. paradoxa^E. purpurea], E. purpurea сорт 'Elegy'). Для исследования использовали листья, собранные в августе в фазе цветения. Растения выращены в Центральном ботаническом саду (ЦБС) Национальной академии наук Беларуси. В них обнаружены биологически активные вещества (БАВ), в частности 4 углевода (глюкоза, фруктоза, галактоза, сахароза) и 11 аминокислот (фенилаланин, тирозин, у-аминомасляная кислота, аспарагин, пролин, аланин, треонин, валин, изолейцин, лейцин, глутамин). Дополнительно методом ВЭЖХ исследовано соотношение других БАВ, в том числе фенольной природы, в вышеуказанных, а также еще в 6 образцах: у дикой E. paradoxa и культурных (E.^hybrida сорт 'Hot Papaya', E. purpurea сорт 'Green Jewel', E.^hybrida сорт 'Strawberry Shortcake', E. purpurea сорт 'Green Envy', E. purpurea сорт 'Secret Romance'). В результате идентифицированы 13 соединений: аскорбиновая кислота, кафтаровая кислота, хлоро-геновая кислота, синапиновая кислота, цинарин, эхинакозид, кофейная кислота, феруловая кислота, бензойная кислота, цикориевая кислота, салициловая кислота, резвератрол, коричная кислота и оле-аноловая кислота. Опираясь на результаты анализов БАВ, обсуждены характерные видовые и сортовые особенности изучаемых объектов. Настоящее исследование подтверждает возможность использования ЯМР- и ВЭЖХ-методов для целей хемосистематики Echinacea ssp. и определения наилучших сроков заготовки их лекарственного растительно сырья.
Ключевые слова: Echinacea ssp., 1Н и 13С ЯМР, ВЭЖХ, фитохимический состав.
A. V. Kruchonok1, E. H. Popoff1, E. D. Skakovski2, L. Yu. Tychinskaya2, S. A. Lamotkin3, V. V. Titok1
1Central Botanical Garden of the National Academy of Sciences of Belarus 2Institute of Physical Organic Chemistry of the National Academy of Sciences of Belarus 3Belarusian State Technological University
ANALYSIS OF CONEFLOWER PLANTS (ECHINACEA MOENCH) EXTRACTS' CHEMICAL COMPOSITION BY NMR AND HPLC METHODS
Objects of our study - Echinacea wild species (E. angustifolia, E. paradoxa, E. purpurea) and their cultural varieties ('Hot Papaya', 'Green Jewel', 'Strawberry Shortcake', 'Secret Romance', 'Green Envy', 'Leilani', 'Elegy'). The aim of this work was to compare the chemical composition these plants. Therefore, we performed a comparative 1H and 13C NMR analysis of aqueous (D2O) leaf extracts of these objects, that were grown in the Central Botanical Garden (Minsk, Nat. Ac. Sci. of Belarus) and collected in August at the flowering stage. This allowed us to identify the characteristic differences between the samples for 4 carbohydrates (glucose, fructose, galactose, sucrose) and 11 amino acids (phenylalanine, tyrosine, y-aminobutyric acid, asparagine, proline, alanine, threonine, valine, isoleucine, leucine, glutamine). Additionally, interspecific ratio of Echinacea constituents (such as [hydroxy]cinnamic) and other organic acids, cynarine, echinacoside etc.) was studied by HPLC. Some valuable biologically active compounds (resveratrol, oleanolic acid...) first have been detected (that are new to the genus Echinacea). This approach confirms once again that the methods used are helpful to assess the quality of plant raw materials with elucidation of the optimal harvesting terms, as well as for the purpose of chemosystematics between Echinacea ssp.
Key words: Echinacea ssp, 1Н & 13С NMR, HPLC, phytochemical composition.
Введение. В настоящее время значительно возросла потребность медицины в использовании лекарственных препаратов на основе растительного сырья. Одно из направлений поиска
новых растительных источников биологически активных веществ (БАВ) - изучение возможности выращивания в Беларуси видов растений, которые в других странах занимают большие
площади и широко применяются для лекарственных целей. Перспективным источником БАВ являются виды эхинацей (Echinacea Moench).
Род эхинацеи включает виды трав, природный ареал которых позиционирован в при-антлантических районах Северной Америки и Мексики. Это многолетние корневищные растения с прямым стеблем до 1 м высотой с красивыми соцветиями. Как лекарственные они культивируются в Германии, Франции и США. С лечебной целью используют корни и цветки. Экстракты листьев до настоящего времени не находили широкого применения [1].
Различные виды эхинацеи отличаются друг от друга не только цветом, но и разным содержанием БАВ. Их используют для лечения многих заболеваний, в том числе при змеиных укусах, простудах, зубной боли, язвах, ранах и герпесе. Препараты из эхинацей проявили себя при лечении рака, артрита, СПИДа, синдрома хронической усталости, а также как средства, стиму-
Анализируемые виды и сор
лирующие иммунитет. Установлено, что их «активным началом» являются углеводы, аминокислоты и фенольные соединения, однако имеющиеся данные по сравнительной оценке компонентного состава различных видов и сортов Echinacea недостаточны.
Поэтому цель настоящей работы - сравнительный анализ перспективных образцов эхина-цеи методами ядерного магнитного резонанса (гН и 13С ЯМР) и высоко-эффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для определения содержания отдельных БАВ (углеводы, аминокислоты, фенольные вещества).
Основная часть. Исследование проведено на растениях рода Echinacea Moench семейства Compositae: 3 видов (E. purpurea, E. paradoxa, E. angustifolia Moench), и 6 сортов ('Green Jewel', 'Green Envy', 'Secret Romance', 'Leilani', 'Hot Papaya', 'Strawberry Shortcake', см. табл. 1, рис. 1). В работе использовали листья, отобранные в августе - в фазе цветения, в период максимального накопления растениями БАВ.
Таблица 1
(гибриды) Echinacea Moench
Название образца Шифр Информация об образце, plant patent (PP), оригинатор
1. E.^hybrida 'Leilani' Е1 USA PP23526, Terra Nova
2. E. angustifolia Е2 Природный (дикий) вид
3. E. purpurea Ез Природный (дикий) вид
4. E. purpurea 'Elegy' Е4 Селекция ЦБС НАН Беларуси
5. E.^hybrida 'Hot Papaya' Е5 USA PP21022, Arie Blom
6. E. purpurea 'Green Jewel' Еб USA PP18678, Piet Oudolf
7. E.^hybrida 'Strawberry Shortcake' Е7 USA PP23020, Terra Nova
8. E. paradoxa Е8 Природный (дикий) вид
9. E. purpurea 'Green Envy' Е9 USA PP17172, Mark Veeder
10. E. purpurea 'Secret Romance' Е10 USA PP23036, Terra Nova
Рис. 1. Анализируемые виды и сорта рода Echinacea Moench Трулы БГТУ Серия 2 № 1 2020
Для осуществления ЯМР-анализа воздушно-сухие листья измельчались и заливались Б2О в соотношении растительное сырье : экстрагент = = 1 : 15. Экстракция проводилась в течение 24 ч при комнатной температуре. Отфильтрованный экстракт в объеме 0,5 мл помещали в 5-миллиметровую ампулу ЯМР. В раствор переходило ~15% исходной навески. Были проанализированы 4 образца: Е1, Е2, Е3, Е4.
Спектры ЯМР водных растворов зарегистрированы на спектрометре ЛУЛКСЕ-500 (Бгцкег) с рабочими частотами 500 и 125 МГц для ядер 1Н и 13С соответственно при температуре 293 К. В качестве внутреннего стандарта и для последующих количественных расчетов использовали добавленный в раствор трет-бутиловый спирт определенной концентрации. Химические сдвиги сигналов стандарта в протонном спектре -бонз = 1,24 м. д., в углеродном - бонз = 30,29 м. д. 1Н ЯМР-спектры накапливали в течение 15 мин, 13С - 14 ч. Для идентификации соединений в идентичных условиях предварительно записаны :Н и 13С ЯМР-спектры ряда углеводов и аминокислот. Отнесение химических сдвигов этих соединений дано в работах [2, 3]. Все экспериментальные данные получены и обработаны с помощью пакета программ XWIN-NMR 3.5.
Используя ВЭЖХ при пробоподготовке сырья и получения экстрактов для анализа наличия целевых компонентов, мы руководствовались ГОСТ Р 4.1.167203 [4]. Листья высушивали при 303 К и экстрагировали 70%-ным этанолом при соотношении сырье : экстрагент = 1 : 50; экстракцию осуществляли при 277 К в течение
10 сут. Затем экстракт переносили в стекляную герметичную посуду и хранили в темноте при той же температуре. Анализ компонентов экстрактов с использованием для идентификации стандартов БАВ (фирма «Кампилаб» (Минск)) вели хроматографом Аджилент-1260 на колонке Zorbax Eclipse Plus C18 (Agilent, США). Экстракты предварительно центрифугировали (15 000 g, 3 мин, 293 К) и пропускали через фильтры PTFE (Agilent, ФРГ) с диаметром пор 0,2 мкм, затем вносили в виалы, откуда отбор в прибор проводился автосэмплером. ВЭЖХ осуществляли в градиентном режиме стандартным методическим подходом [510] с регистрацией субстанций детектором DAD G4212B (Agilent, США) в milli Absorbance Units [mAU]. Обработка данных хроматографом проводилась по программе AgilentOpenLAB CDS ChemStation.
На рис. 2 приведены спектры ЯМР :Н (а) и 13C (б) D2O экстракта листьев эхинацеи E.^hybrida 'Leilani' (Е1). Спектры остальных трех образцов подобны. Отличия наблюдаются, главным образом, в интенсивности линий, что связано с различным количественным содержанием компонентов. Нам удалось идентифицировать четыре углевода (глюкоза (2 изомера), фруктоза (5 изомеров), галактоза (2 изомера) и сахароза), а также одиннадцать аминокислот (фенилаланин, тирозин, у-аминомасляная кислота, аспарагин, пролин, аланин, треонин, ва-лин, изолейцин, лейцин, глутамин). Процентное содержание углеводов (сумма изомеров) и аминокислот представлено в табл. 2.
Таблица 2
Содержание углеводов и аминокислот у различных образцов Echinacea Moench (%)
Компонент Е1 Е2 Е3 Е4
1. Глюкоза 7,2 4,6 11,9 10,7
2. Фруктоза 9,9 9,5 20,2 13,5
3. Галактоза -* 4,3 - 2,0
4. Сахароза - - 9,6 4,0
5. Фенилаланин 1,1 2,5 0,3 0,6
6. Тирозин - 1,4 - -
7. у-Аминомасляная кислота 4,2 1,3 1,1 2,5
8. Аспарагин 3,6 2,7 - -
9. Пролин - 1,8 0,5 2,9
10. Аланин - 5,2 4,2 3,7
11. Треонин 7,9 0,5 - -
12. Валин 1,5 2,9 0,8 1,7
13. Изолейцин 3,1 1,8 0,5 0,9
14. Лейцин 1,6 1,3 0,5 0,5
15. Глутамин - - 0,5 2,1
Всего 40,1 39,8 50,1 45,1
* Не определено.
диапазоны содержания БАВ в разных партиях 10 образцов Echinacea sp. в табл. 3 представлены как процент от суммы детектируемых веществ, при этом значения tR приведены в интервале времени записи пика. Необходимо отметить, что по содержанию кафтаровой, хлороге-новой и цикориевой кислот, цинарина и эхина-козида определяется качество лекарственного сырья эхинацеи, так как они считаются главными иммуномодуляторами [4-9]. В исследованных образцах наибольшее их количество содержат E. angustifolia (Е2), E. purpurea (Е3) и E. purpurea 'Elegy' (Е4).
Некоторые выявленные компоненты (бензойная, кофейная кислоты) являются универсальными метаболитами растений.
1 ........ ...... » .. .... 1. . .1. ....... . л------J wJLJA All 1 jlJIK „XuLi а
8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0
ppm (t1)
Анализ данных табл. 2 показывает, что больше всего углеводов содержится в образце E. Purpurea (Ез - 41,7%), а меньше всего - в E.xhybrida 'Leilani' (Е1 - 17,1%). В исследованных экстрактах присутствуют пять незаменимых аминокислот: фенилаланин, треонин, ва-лин, изолейцин и лейцин, причем их содержание наибольшее в гибриде Е1.
При проведении нами ВЭЖХ-анализов образцов экстрактов листьев Echinacea ssp. идентифицированы не менее 13 соединений (см. табл. 3). Типичная хроматограмма экстрактов листьев Echinacea Moench на примере пробы E. xhybrida 'Strawberry Shortcake' (Е7) представлена на рис. 3. Хроматограммы остальных образцов качественно схожи. Выявляемые ВЭЖХ
50
Рис. 2. Спектры ЯМР 1Н (а) и 13С (б) Б20-экстракта листьев эхинацеи E.^hybrida 'Leilani' (Е1) Трулы БГТУ Серия 2 № 1 2020
ppm (t1)
Т-Г
6 8
10
12 14 16
min
Т ' 1 ' I
10 12
б
14
Рис. 3. Типичная хроматограмма стандартов (а) и экстракта листьев (б) (на примере пробы Echinacea х hybrida 'Strawberry Shortcake' [E7]): 1 - аскорбиновая кислота; 2 - протокатеховая кислота; 3 - кафтаровая кислота; 4 - хлорогеновая кислота; 5 - синап(ин)овая кислота; 6 - цинарин; 7 - эхинакозид; 8 - кофейная кислота; 9 - феруловая кислота; 10 - бензойная кислота; 11 - цикориевая кислота; 12 - tr-резвератрол; 13 - tr-коричная кислота; 14 - олеаноловая кислота; ВС - внутренний стандарт (2)
Таблица 3
Содержание БАВ Echinacea Moench (%)
а
Определяемый компонент tR1, мин Образцы Echinacea ss p. (Ei)2
E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10
1. Аскорбиновая кислота 1,0-1,2 1,4-10,9 0,6-5,0 0,7-4,2 0,8-4,7 0,3-2,5 0,1-1,3 2,4-6,7 5,8-7,3 0,9-6,5 0,4-4,3
2. Кафтаровая кислота 3,0-3,2 13,6-17,5 26,3-30,6 24,6-24,8 22,4-24,1 16,5-19,1 12,4-12,9 3,4-4,8 0,7-1,0 21,2-26,8 13,5-15,8
3. Хлорогеновая кислота 3,8-3,9 1,6-1,7 1,8-2,9 2,6-2,8 3,4-3,6 0,5-0,8 0,1-0,3 1,4-1,5 5,7-14,6 2,0-2,2 1,4-1,5
4. Синап(ин)овая кислота 5,3-5,4 6,9-9,2 2,8-3,9 1,4-2,0 1,7-2,0 1,5-1,7 4,7-4,9 1,5-1,6 -3 1,3-1,4 2,9-3,8
5. Цинарин 6,3-6,5 1,9-2,5 -3 1,2-1,3 -3 -3 0,6-0,7 -3 0,8-0,9 -3 -3
6. Эхинакозид 6,8-6,9 _3 _3 -3 -3 _3 0,1-0,2 2,8-7,5 0,9-1,7 1,4-1,5 -3
7. Кофейная кислота 7,1-7,3 0,7-3,1 0,8-2,9 0,6-2,4 0,7-2,9 0,4-0,5 0,5-0,6 2,4-4,5 1,9-2,2 0,6-2,8 0,4-2,1
8. Феруловая кислота 8,6-8,9 28,4-43,4 28,6-32,8 45,6-51,1 48,4-53,2 58,9-68,4 54,4-57,7 14,8-30,9 4,8-8,2 44,7-50,8 56,7-70,3
9. Бензойная кислота 10,2-10,6 1,3-1,4 0,8-2,7 2,2-3,2 2,5-3,1 1,2-3,5 1,9-2,3 2,2-2,9 4,0-4,6 0,8-2,2 0,9-3,5
10. Цикориевая кислота 10,7-10,9 1,4-1,5 1,3-1,8 3,1-3,6 3,1-3,7 1,9-2,4 -3 4,4-6,6 -3 1,1-1,2 1,6-2,4
11. /г-Резвератрол 13,8-14,4 0,9-1,0 -3 0,6-0,7 0,6-0,7 -3 0,5-0,6 2,0-2,4 7,3-16,1 0,8-0,9 -3
12. /г-Коричная кислота 14,5-14,9 6,4-7,9 3,7-5,2 3,5-4,7 4,7-16,9 4,9-5,8 3,3-5,4 8,3-12,6 1,9-4,6 2,4-5,1 4,2-5,5
13. Олеаноловая кислота 15,0-15,4 0,7-3,3 1,7-1,8 0,3-2,1 3,3-3,4 0,3-2,6 0,4-1,4 1,4-2,7 1,0-3,5 0,4-3,5 0,7-3,7
1 Время удерживания компонента (Retention time) при хроматографировании приведено в интервале времени записи пика.
2 Приведены выявляемые диапазоны варьирования содержания БАВ в разных партиях листьев.
3 Не определено.
Представляют особый интерес другие выявленные БАВ. Например, резвератрол (в малых дозах он действует как антиканцероген); фе-руловая, хлорогеновая и другие кислоты (они проявляют гепатопротекторное и гипогликеми-ческое действие, уменьшают риск сердечно-сосудистых заболеваний); олеаноловая кислота (считается геронтопротектором, так как оказывает ранозаживляющее и противовоспалительное действие, снижает артериальное давление, тонизирует нервную систему, восстанавливает сердечный ритм, нормализует уровень холестерина) [10].
Результаты ВЭЖХ-анализов (рис. 3, табл. 3) позволили ранжировать образцы Е; по содержанию ряда ценных компонентов (БАВ). Выявленные закономерности приводим ниже:
I — Е1 > Ее > Е7 > Е9 > Е2 — Е4 > Ез > Е10 > Ег> Ее;
3 — Е2 > Ез > Е9 > Е4 > Е5 > Е1 > Е10 > Еб > Е7>> Ее;
4 — Ее > Е4 > Ез > Е2 > Е9 > Е1 > Е7 > Е5 > Еб > Е10;
5 — Е1 > Еб > Ею — Е2 > Е4 > Ез > Е5 = Е7 > Е9 > Ее;
6 - Е1 > Ез > Е8 > Еб;
7 — Е7 > Е9 > > Еб;
9 — Е5 > Е10 > Еб > Е4 > Ез — Е9 > Е1 > Е2 > Е7 > Е8;
II — Е7 > Е4 — Ез > Е5 > Е10 > Е2 > Е1 > Е9;
12 — Е8 > Е7 > Е1 > Е9 > Ез > Е4 > Еб;
13 — Е4 > Е7 > Ез > Е1 > Е5 > Е10 > Е2 — Еб > Е9 > Е8;
14 — Е4 > Е8 — Е10 > Е7 > Е1 > Е9 > Е2 > Е5 — Ез > Еб.
Таким образом, при сопоставлении ВЭЖХ-данных с таковыми природного вида E. purpurea (E3 (исходный эталон)) становится видно, как селекция повышает качество новых форм и сортов растений рода Echinacea по содержанию ценных компонентов (БАВ).
Проведенная работа подтверждает правомочность апробированных методов для использования в оценке качества ЛРС по детекции целевых соединений и в определении оптимальных сроков его заготовки, а также для целей хемоси-стематики растений.
Заключение. Методом :Н и 13С ЯМР определено содержание четырех углеводов и одиннадцати аминокислот, среди которых пять незаменимых, в экстрактах (D2O) листьев четырех образцов Echinacea ssp. Применение ВЭЖХ позволило идентифицировать и количественно оценить содержание 13 БАВ в экстрактах листьев 10 образцов Echinacea ssp. Показано, что в качестве лекарственного сырья целесообразно использовать всю надземную часть растений, включая листья. Выявлены перспективные образцы с наибольшим содержанием БАВ. Подтверждена возможность использования ЯМР- и ВЭЖХ-методов для целей хемосистематики Echinacea ssp. и определения наилучших сроков заготовки сырья (согласно общепринятой шкале ВВСН [9]), когда содержание целевых БАВ достигает максимума.
Литература
1. Попов Е. Г., Кручонок А. В., Титок В. В. Видоспецифичность содержания биологически активных веществ в листьях Echinacea Moench // Нарочанские чтения 11: материалы 11-й Междунар. науч.-практ. конф. (Беларусь, Нарочь, 20-23 сент. 2017 г.). Минск: Ставрополь: Северо-Кавказ. федеральный ун-т, 2017. С. 81-86.
2. ЯМР-спектроскопия в исследовании водных экстрактов травы пажитника греческого (Trigonella focnum graccum L.) / Е. Д. Скаковский [и др.] // Журнал прикладной спектроскопии. 2014. Т. 81, № 4. С. 542-546.
3. Анализ экстрактов лимона методом ЯМР / Е. Д. Скаковский [и др.] // Труды БГТУ. Сер. 2. Химические технологии, биотехнологии, геоэкология. 2018. № 1. С. 17-25.
4. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. 400 с.
5. Моисеев Д. В. Определение фенольных кислот в растениях методом ВЭЖХ // Химия растительного сырья. 2014. Т. 16, № 3. С. 171-174.
6. Determination of major phenolic compounds in Echinacea spp. raw materials and finished products by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection: single-laboratory validation matrix extension / P. N. Brown [et al.] // J. AOAC Int. 2011. Vol. 95, No. 5. P. 1400-1410.
7. Соколов С. Я. Фитотерапия и фитофармакология: руководство для врачей. М.: Медицинское информационное агентство, 2000. 967 с.
8. Brown P. N., Mudge E. M., Paley L. Determination of phenolic constituents in Echinacea raw materials and dietary supplements by HPLC-UV // J. AOAC Int. 2016. Vol. 99, No. 5. P. 1197-1203.
9. Meier U. Entwicklungsstadien mono- und dikotyler Pflanzen: BBCH Monografie. Berlin: Biologische Bundesanstalt fur Land und Forstwirtschaft, 2001. 165 p.
10. Геронтопротекторные вещества иссопа лекарственного (Hyssopus officinalis L.) и многоколосника морщинистого (Agastache rugosa Fisch. et Mey) / Л. В. Кухарева [и др.] // Вестник БРФФИ. 2016. № 4. С. 21-31.
References
1. Popoff Е. H., Kruchonok А. V., Titok V. V. Species specific percentage of bioactive compounds in Echinacea Moench leaves. Narochanskie chteniya 11: materialy 11-y Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. [Naroch Reading 11: Proceeding of 11 Int. Sci.-Pract. Conf.]. Minsk, Stavropol, BSU-NKFU Publ., 2017, pp. 81-86 (In Russian).
2. Skakovski Ye. D., Tychinskaya L. Yu., Matveychuk S. V. [et al.] NMR spectroscopy in the study of water extracts of fenugreek (Trigonella focnum graccum L.). Zhurnal prikladnoy spectroscopii [J. Appl. Spectroscopy], 2014, vol. 81, no. 4, pp. 542-546 (In Russian).
3. Skakovski Ye. D., Latyshevich D. N., Tychinskaya L. Yu., Lamotkin S. A. Analysis of lemon extract by NMR method. Trudy BGTU [Proceedings of BGTU], Series 2: Chemical engineering, biotechnologies, geoecology, 2018, no. 2, pp. 17-25 (In Russian).
4. Rukovodstvopo metodam kontrolya kachestva i bezopasnosti biologicheski aktivnykh dobavokk pishche [Guidance on methods for monitoring the quality and safety of dietary supplements]. Moscow, Dep. of the State Sanitary and Epidemiological Surveillance ofthe Ministry ofHealth ofthe Rus. Federation, 2004. 400 p.
5. Moiseev D. V. Determination of phenolic acids in plants by HPLC. Khimia rastitelnogo syrya. [Chemistry of plant materials], 2014, vol. 16, no. 3, pp. 171-174 (In Russian).
6. Brown P. N., Chan M., Paley L., Betz J. M. Determination of major phenolic compounds in Echinacea spp. raw materials and finished products by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection: single-laboratory validation matrix extension. J. AOAC Int., 2011, vol. 95, no. 5, pp.1400-1410.
7. Sokolov S. Ya. Fitoterapiya i fitofarmakologiya [Herbal medicine and phytopharmacology]. Moscow, Med. Inform. Agency Publ., 2000. 967 p.
8. Brown P. N., Mudge E. M., Paley L. Determination of phenolic constituents in Echinacea raw materials and dietary supplements by HPLC-UV J. AOAC Int., 2016, vol. 99, no. 5, pp. 1197-1203.
9. Meier U. Entwicklungsstadien mono- unddikotyler Pflanzen: BBCHMonografie. Berlin, Biologische Bundesanstalt fur Land und Forstwirtschaft, 2001. 165 p.
10. Kuhareva L. V., Popoff E. H., Gil T. V., Luu A. D., Bui H. V., Ninh B. H., Tu N. B., Titok V. V. Gerontoprotective principles in herbs ofHyssopus officinalis L. and Agastache rugosa Fisch. et Mey. Vestnik BRFFI [Bull. of the Belarus Rep. Fond of Fund. Res.], 2016, no. 4, pp. 21-31 (In Russian).
Информация об авторах
Кручонок Алеся Владимировна - заведующий сектором сохранения и восстановления растительных ресурсов. Центральный ботанический сад Национальной академии наук Беларуси (220012, г. Минск, ул. Сурганова, 2в, Республика Беларусь). E-mail: kruchonak@gmail.com
Попов Евгений Германович - кандитат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории биоразнообразия растительных ресурсов. Центральный ботанический сад Национальной академии наук Беларуси (220012, г. Минск, ул. Сурганова, 2в, Республика Беларусь). E-mail: E.Popoff@cbg.org.by
Скаковский Евгений Доминикович - кандидат химических наук, доцент. Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси (220072, г. Минск, ул. Сурганова, 13, Республика Беларусь). E-mail: sed@ifoch.bas-net.by
Тычинская Людмила Юльевна - кандидат химических наук, заведующий лабораторией физико-химических методов исследования. Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси (220072, г. Минск, ул. Сурганова, 13, Республика Беларусь). E-mail: sed@ifoch.bas-net.by
Ламоткин Сергей Александрович - кандидат химических наук, доцент кафедры физико-химических методов сертификации продукции. Белорусский государственный технологический университет (220006, г. Минск, ул. Свердлова, 13а, Республика Беларусь). E-mail: jossby@rambler.ru
Титок Владимир Владимирович - доктор биологических наук, член-корреспондент Национальной академии наук Беларуси, заведующий лабораторией биоразнообразия растительных ресурсов. Центральный ботанический сад Национальной академии наук Беларуси (220012, г. Минск, ул. Сурганова, 2в, Республика Беларусь). E-mail: V.Titok@cbg.org.by
Information about the authors
Kruchonok Alesya Vladimirovna - Head of the Sector for the Conservation and Restoration of Plant Resources. Central Botanical Garden of National Academy of Sciences of Belarus (2v, Surganova str., 220012, Minsk, Republic of Belarus). E-mail: kruchonak@gmail.com
Popoff Eugene Hermanovich - PhD (Biology), Leading Researcher of the Laboratory of Plant Resources Biodiversity. Central Botanical Garden of National Academy of Sciences of Belarus (2v, Surganova str., 220012, Minsk, Republic of Belarus). E-mail: E.Popoff@cbg.org.by
Skakovski Eugene Dominikovich - PhD (Chemistry), Associate Professor, Head of the Laboratory of Physical-Chemical Methods of Research. Institute of Physical Organic Chemistry of National Academy of Sciences of Belarus (13, Surganova str., 220072, Minsk, Republic of Belarus). Е-mail: sed@ifoch.bas-net.by Tychinskaya Lyudmila Yul'evna - PhD (Chemistry), Head of the Laboratory of Physical-Chemical Methods of Research. Institute of Physical Organic Chemistry of National Academy of Sciences of Belarus (13, Surganova str., 220072, Minsk, Republic of Belarus). Е-mail: sed@ifoch.bas-net.by
Lamotkin Sergey Aleksandrovich - PhD (Chemistry), Assistant Professor, the Department of Physical-Chemical Methods of Products Certification. Belarusian State Technological University (13a, Sverdlova str., 220006, Minsk, Republic of Belarus). E-mail: jossby@rambler. ru
Titok Vladimir Vladimirovich - DSc (Biology), Corresponding Member of National Academy of Sciences of Belarus, Head of the Laboratory of Plant Resources Biodiversity. Central Botanical Garden of National Academy of Sciences of Belarus (2v, Surganova str., 220012, Minsk, Republic of Belarus). E-mail: V.Titok@cbg .org.by
Поступила 01.11.2019
