CC BY
493
Химия растительного сырья. 2012. №1. С. 153-160.
УДК 615.322:615.074
ИЗУЧЕНИЕ СОСТАВА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ СУХИХ ЭКСТРАКТОВ ЭХИНАЦЕИ УЗКОЛИСТНОЙ И ШАЛФЕЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО
© В.М. Косман1, О.Н. Пожарицкая1’2, А.Н. Шиков1’2, В.Г. Макаров1’2
1ЗАО «Межрегиональный центр ’’Адаптоген“», Пискаревский пр., 47/5, Санкт-Петербург, 195067 (Россия), e-mail: [email protected]; [email protected] 2Санкт-Петербургский институт фармации, Пискаревский пр., 47/33, Санкт-Петербург (Россия), e-mail: [email protected]
Изучен состав серийно выпускаемых биологически активных веществ сухого экстракта травы эхинацеи узколистной (водного) и сухого экстракта листьев шалфея лекарственного (водно-спиртового), входящих в ряд изготовляемых и разрабатываемых отечественных и зарубежных фитопрепаратов, В экстрактах травы эхинацеи узколистной и листьев шалфея лекарственного установлено присутствие фенольных соединений, производных гидроксикоричных кислот, а также углеводов и аминокислот, В составе сухого экстракта листьев шалфея лекарственного обнаружены еще флавоноиды и терпе-новые соединения, Стандартизацию экстрактов и их идентификацию в составе комплексных фитопрепаратов рациональ -но основывать на выявлении и количественном определении фенольных соединений (производных гидроксикоричных кислот и флавоноидов) с применением метода высокоэффективной жидкостной хроматографии,
Ключевые слова: эхинацея узколистная, шалфей лекарственный, экстракт, химический состав, стандартизация,
Работа выполнена при финансовой поддержке ЗАО «Натур Продукт Интернешнл» (Россия).
Введение
В настоящее время в отечественной и мировой практике лечение препаратами растительного происхождения набирает все большую популярность. Поэтому изучение и характеристика биологически активных веществ (БАВ) растительного сырья и получаемых на их основе экстрактов и фитопрепаратов является актуальным.
Эхинацея узколистная (Echinacea angustifolia (DC) Hell, сем. Астровые или Сложноцветные - As-teraceae, Compositae) и шалфей лекарственный (Salvia officinalis L., сем. Губоцветные - Lamiaceae) относятся к числу широко применяемых лекарственных растений.
Растения рода Эхинацея (эхинацея пурпурная - E. purpurea Moench., эхинацея узколистная - E. angustifolia DC Hell и эхинацея бледная - E. pallida Nutt.) являются известными иммуностимуляторами, входящими в состав многих отечественных и зарубежных препаратов (настойка, жидкий экстракт, таблетки Эстифан, Гербион, капли Иммунал, сироп Иммунекс и др.) [1]. Препараты эхинацеи применяют для лечения и профилактики респираторных заболеваний, при септических процессах, кожных, гинекологических, урологических заболеваниях, лейкопении, вызванной облучением или цитостатиками. Они оказывают иммуностимулирующее, противоаллергическое, противоопухолевое действия, стимулируют синтез интерферона и интерлейкина, способствуют восстановлению микроциркуляции и заживлению ран, ожогов и язв [1-3]. Основными действующими биологически активными веществами растений рода Эхинацея, в том числе надземной части эхинацеи узколистной, считают гидроксикоричные кислоты и полисахариды [2, 3]. Среди производных гидроксикоричных кислот обнаружены цикориевая, кафтаровая, кофейная, феруловая и кумаровая кислоты и их эфиры с винной кислотой (эхинакозид, цинарин и др.). Соотношение указанных компонентов зависит от ботанического вида и морфологической группы сырья. В траве эхинацеи узколи-
* Автор, с которым следует вести переписку,
стной обнаружены также флавоноиды - производные апигенина, лютеолина, кверцетина, кемпферола, свободные сахара, до 0,1% эфирного масла, содержащего в качестве основного компонента изобутират гераниола [2-4]. Для подземных органов растений этого рода характерно наличие алкиламидов - изобутилами-дов С11-С1б полиненасыщенных кислот. Содержание в корнях эхинацеи пурпурной составляет до 0,04, эхинацеи узколистной - до 0,15%, в надземной части количество амидов значительно ниже [5].
Препараты шалфея лекарственного (Salvia officinalis L.) - настой, настойку, препарат Сальвин и другие - используют при воспалительных заболеваниях полости рта (стоматитах, гингивитах, пародонтозе, катарах верхних дыхательных путей, ангине), гастритах, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки с пониженной кислотностью желудочного сока, спастических колитах, цистите. Наружно настой шалфея полезен при воспалении кожи, гнойных язвах и ранах, ожогах и обморожении [6]. Листья шалфея содержат до 2,5% эфирного масла, в состав которого входят цинеол, пинен, туйон, борнеол и другие тер-пеновые соединения; а также фенольные соединения - флавоноиды (производные лютеолина и апигенина), дубильные вещества, производные гидроксикоричных кислот (розмариновая, кофейная, хлорогеновая, феруловая), сахара и полисахариды, витамины группы В и РР, тритерпеновые сапонины - производные урсо-ловой и олеаноловой кислот [7].
Состав БАВ и фитопрепаратов, получаемых из листьев шалфея и травы эхинацеи, зависит не только от особенностей компонентного состава исходного растительного сырья, но и от технологии его обработки. Поэтому экстракты и фитопрепараты, получаемые из одного вида растительного сырья различными производителями, не одинаковы по своему компонентному составу, что обусловливает необходимость фитохимического анализа каждого такого продукта.
В задачу данного исследования входило изучение состава биологически активных веществ сухого экстракта травы эхинацеи узколистной (Euromed S.A., Spain) и сухого экстракта листьев шалфея лекарственного (Cognis Iberia, Spain), входящих в состав ряда фитопрепаратов, выпускаемых и разрабатываемых компаниями ЗАО «Натур Продукт Интернешнл» (Россия) и «Натур Продукт Европа» (Нидерланды).
Материалы и методы
Объектами исследования служили промышленные образцы трех серий сухого экстракта травы эхинацеи узколистной (Euromed S.A., Spain), представлявшие собой гигроскопичные аморфные порошки темно-коричневого цвета (экстракты получены методом перколяции, экстрагент - вода, соотношение сырье -экстракт 5 : 1) и трех серий сухого экстракта листьев шалфея лекарственного (Cognis Iberia, Spain), представлявшие собой гигроскопичные аморфные порошки светло-коричневого цвета (экстракты получены методом перколяции, экстрагент - этанол-вода, соотношение сырье - экстракт 5 : 1, конечный продукт содержал 65-75% экстракта, 23-24% мальтодекстрина и 1-2% диоксида кремния). Образцы предоставлены компанией ЗАО «Натур Продукт Интернешнл» (Россия). Все образцы оказались хорошо растворимы в воде, поэтому для определения большинства фитохимических показателей (кроме анализа содержания тер-пеновых соединений) использовали их водные растворы.
Влажность, золу общую, содержание дубильных веществ (методом перманганатометрического титрования) и аскорбиновой кислоты (титрованием раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия) определяли в соответствии с рекомендациями ГФ XI [8].
Определение тируемой кислотности (в пересчете на кофейную кислоту) выполнено методом потенциометрического титрования по ГОСТу 25555.0-82 «Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения титруемой кислотности» [9].
Содержание полифенольных соединений в пересчете на галловую кислоту определяли спектрофотометрическим методом по реакции с реактивом Фолина-Чокальтеу (Fluka, Германия) в соответствии с рекомендациями [10].
Содержание углеводов до и после гидролиза определяли спектрофотометрическим методом с о-толуидиновым реактивом (ОТР) [11] в пересчете на глюкозу («Вектон», Россия). Гидролиз водных растворов экстрактов проводили серной кислотой при кипячении реакционной смеси с обратным холодильником на электрической плитке в течение 2 ч. Осадок фенольных соединений отфильтровывали через бумажный фильтр (синяя лента), аликвоту фильтрата нейтрализовали 20% раствором карбоната натрия до pH ~ 7 (по универсальному индикатору) и использовали для проведения реакции с ОТР.
Определение содержания флавоноидов выполнено методом дифференциальной спектрофотометрии по образованию окрашенных продуктов реакции с раствором хлорида алюминия на основании рекомендаций [12] в пересчете на лютеолин-7-глюкозид (Sigma) и лютеолин (Sigma).
Определение суммарного содержания аминокислот выполнено спектрофотометрическим методом по образованию окрашенных продуктов нингидриновой реакции на основании рекомендаций [13] в пересчете на L-аргинин (Sigma, Germany).
Суммарное содержание терпеновых соединений определяли также спектрофотометрически по обра-зованию окрашенных продуктов реакции с раствором ванилина и серной кислоты в пересчете на урсоловую кислоту (Sigma) и олеаноловую кислоту (Sigma). Для анализа спиртовые растворы экстрактов пропускали через колонку с оксидом алюминия (для хроматографии) для удаления фенольных соединений, аликвоту полученного элюата смешивали с 8% спиртовым раствором ванилина и 72% водным раствором серной кислоты (в посуде, помещенной в ледяную баню), нагревали на водяной бане при 60 °С 10 мин, останавливали реакцию охлаждением в ледяной бане в течение 2 мин и измеряли оптическую плотность полученного раствора при 535 нм.
Регистрацию УФ-спектров водных растворов и измерение оптических плотностей проводили на регистрирующем спектрофотометре UV-PharmaSpec 1700 (Shimadzu, Japan) в диапазоне длин волн 200-500 нм.
Анализ основных фенольных соединений, входящих в состав экстрактов, выполнен методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на жидкостном хроматографе высокого давления фирмы Shimadzu (Japan) с диодно-матричным детектором и колонкой Luna CJ8 (2) 4,6x150 мм (размер частиц сорбента 5 мкм) (Phenomenex, USA) с предколонкой длиной 3,0 мм, заполненной тем же сорбентом (Phenomenex, USA). Использован режим градиентного элюирования смесью ацетонитрил - 0,03% раствор трифторуксусной кислоты с линейным изменением концентрации ацетонитрила от 10 до 100% в течение 90 мин. Скорость потока элюента 1,0 мл/мин. Дозируемый объем 20 мкл, время записи одной хроматограммы около 30 мин. Детектирование - диодно-матричное сканирование в диапазоне 200-700 нм, обработка хроматограмм при 330 нм. Регистрация и обработка хроматограмм выполнена с помощью программного обеспечения LCSolution (Shimadzu, Япония). В работе использовали ацетонитрил (для ВЭЖХ, сорт 4, НПК «Криохром», СПб.), трифторуксусную кислоту (для спектроскопии, Sigma, Germany) и воду очищенную, полученную методом бидистилляции.
В прибор дозировали водные растворы экстрактов, идентификация и количественный анализ методом внешнего стандарта выполнены с использованием растворов стандартных образцов хлорогеновой ки -слоты, кофейной кислоты, лютеолина, лютеолин-7-глюкозида, карнозола, карнозовой кислоты, цикориевой кислоты (Sigma), феруловой кислоты (Fluka), розмариновой кислоты (Aldrich), цинарина (PhytoLab), эхи-накозида (Extrasynthese), кафтаровой кислоты (Sigma).
Все измерения проведены не менее чем в трехкратной повторности, данные представлены в виде: среднее значение ± стандартное отклонение. Статистическая обработка результатов измерений выполнена с использованием программы Origin 4.1.
Результаты и обсуждение
Для фитохимической характеристики сухих экстрактов травы эхинацеи узколистной и листьев шалфея лекарственного были выбраны те группы соединений, присутствие которых наиболее вероятно в гидрофильных экстрактах. В водном (эхинацея) и водно-спиртовом (шалфей) экстрактах можно ожидать наличие фенольных соединений, углеводов, аскорбиновой кислоты, аминокислот и др. Основные результаты представлены в таблице, типичные УФ-спектры водных растворов экстрактов приведены на рисунке 1.
В УФ-спектре водного раствора сухого экстракта травы эхинацеи узколистной (рис. 1А) зарегистрирован максимум поглощения около 280 нм и плечо в области 330 нм, свидетельствующие о присутствии фенольных соединений и гидроксикоричных кислот соответственно. Влажность некоторых образцов экстракта травы эхинацеи узколистной превышает предел в 5%, допустимый для сухих экстрактов (ГФ). Этот факт указывает на высокую гигроскопичность данного продукта, требующего строгого соблюдения условий хранения. Зольность образцов достаточно высока - около 25%, что является, вероятно, отличительной особенностью данного экстракта.
Содержание фенольных соединений, определенное разными методами (перманганатометрически или с реактивом Фолина-Чокальтеу), составляет около 5%. По-видимому, большинство фенольных соединений представлено кислотами, так как значения показателей титруемая кислотность (в пересчете на ко-
фейную кислоту) и полифенольных соединений близки между собой. Флавоноиды в образцах экстрактов травы эхинацеи узколистной обнаружены не были. Для более детального анализа состава фенольных соединений, присутствующих в сухом экстракте травы эхинацеи узколистной, был использован метод обра-щенно-фазовой ВЭЖХ с диодно-матричным детектированием (рис. 2А). Идентификация выполнена по совпадению абсолютных времен удерживания и диодно-матричных спектров по сравнению с аутентичными образцами веществ-свидетелей, а также методом добавок. В составе образцов экстрактов травы эхинацеи узколистной идентифицированы кафтаровая (доминирующий компонент), хлорогеновая, кофейная и цикориевая кислоты. Цинарин и эхинакозид плохо разделимы в выбранных условиях анализа и присутствуют в минорных количествах. Минорными являются также несколько неидентифицированных компонентов, которые по характеристичному виду диодно-матричных спектров (плечо около 280 нм и максимум около 325-330 нм) относятся к группе гидроксикоричных кислот.
А Б
Рис. 1. УФ-спектры водных растворов сухих экстрактов травы эхинацеи узколистной (А) и листьев шалфея лекарственного (Б)
А)
Б)
33ипт,4пт (1.00)
"
2
гч Й '
|с Я
гч о кі§ 1 1 О |
.664 11" ^ І 1Ґ щ ^о ї\ г *7
330пт,4пт (1.00) 5)
4
' " “со
3
г8 '.о
8 „ 5 2 1 от со <4 ¡І и
/с А" ІмАЛч,
Рис. 2. Типичные ВЭЖХ-хроматограммы водных растворов сухого экстракта травы эхинацеи узколистной (А, 1 - неидентифицированный компонент; 2 - кафтаровая кислота; 3 -хлорогеновая кислота; 4 - изомер хлорогеновой кислоты; 5 - кофейная кислота; 6 - цикориевая кислота;
7 - неидентифицированный компонент) и листьев шалфея лекарственного (Б, 1 - кофейная кислота; 2 - лютєолин-7-глюкозид, 3 - гликозид лютеолина, 4 - розмариновая кислота)
Данные фитохимического анализа сухого экстракта травы эхинацеи узколистной и сухого экстракта листьев шалфея лекарственного, % масс. (стандартные отклонения всех значений не превышали 5%)
Параметр Сухой экстракт травы эхинацеи узколистной Сухой экстракт листьев шалфея лекарственного
Серия 1 Серия 2 Серия 3 Среднее Серия 1 Серия 2 Серия 3 Среднее
Влажность 8,3 5,5 4,3 6,3±2,1 4,8 4,3 4,0 4,4±0,4
Общая зола 24,5 26,2 27,4 26,0±1,5 10,5 10,5 10,2 10,4±0,2
Дубильные вещества (пермангонатометрия) 3,6 5,3 4,5 4,5±0,8 8,4 9,0 8,4 8,6±0,3
Полифенольные соединения 5,1 5,6 5,3 5,3±0,3 9,4 8,4 6,7 8,2±1,4
(в пересчете на галловую кислоту)
Титруемая кислотность 6,5 7,8 7,1 7,1±0,7 4,3 4,2 4,5 4,3±0,2
(в пересчете на кофейную кислоту) Содержание индивидуальных соединений (ВЭЖХ)
- кафтаровая кислота 0,59 1,17 1,45 1,07±0,44 н/о н/о н/о н/о
- хлорогеновая кислота 0,09 0,09 0,06 0,08±0,02 н/о н/о н/о н/о
- кофейная кислота 0,11 0,20 0,22 0,18±0,06 0,11 0,09 0,07 0,09±0,02
- цинарин/эхинакозид 0,12 0,13 0,19 0,15±0,04 н/о н/о н/о н/о
- цикориевая кислота 0,94 2,19 2,56 1,90±0,85 н/о н/о н/о н/о
- лютеолин-7-глюкозид н/о н/о н/о н/о 0,19 0,20 0,31 0,23±0,07
- гликозид лютеолина н/о н/о н/о н/о 1,71 1,54 1,82 1,69±0,14
- розмариновая кислота н/о н/о н/о н/о 2,75 2,80 3,03 2,86±0,15
суммарно 1,85 3,78 4,48 3,37±1,36 4,76 4,63 5,23 4,87±0,32
Содержание фенольных соединений (ВЭЖХ)
в пересчете на кофейную кислоту 1,09 2,14 2,76 2,00±0,84 3,30 3,19 3,75 3,40±0,30
в пересчете на розмариновую* кислоту Не опред. Не опред. Не опред. Не опред. 5,60 5,40 6,36 5,79±0,51
Сумма флавоноидов (СФ)
в пересчете на лютеолин-7-глюкозид в пересчете на лютеолин н/о н/о н/о н/о 2,9 4,2 3,0 4,3 2,9 4,2 2,9±0,1 4,2±0,1
Углеводы (в пересчете на глюкозу)
- свободные (до гидролиза) 4,0 2,8 3,1 3,3±0,6 6,0 6,7 6,2 6,3±0,4
- свободные и связанные (после сернокислого 7,0 7,1 6,0 6,7±0,6 25,3 27,5 26,7 26,5±1,1
гидролиза)
Аминокислоты (в пересчете на аргинин) 8,9 6,1 8,6 7,9±1,5 2,0 1,8 1,6 1,8±0,2
Терпеновые соединения
в пересчете на урсоловую кислоту в пересчете на олеаноловую кислоту н/о н/о н/о н/о 1,7 2,6 2,1 3,5 2,0 3,2 1,9±0,2 3,1±0,5
Примечания:* содержание соединений в пересчете на розмариновую кислоту рассчитывали только для образцов сухого экстракта листьев шалфея лекарственного, в которых это соединение было обнаружено; **- н/о - не обнаружены.
Изучение состава биологически активных веществ ... 157
Содержание моносахаров составило 3-4%, полисахаридов также 3-4%. Такие значения представляются весьма невысокими для экстракта, полученного из сырья, известного как источник биологически активных полисахаридов. Однозначных количественных данных о содержании полисахаридов в надземной части эхинацеи узколистной в доступной литературе обнаружено не было. Кисличенко и соавт. [14] сообщают, что содержание водорастворимых полисахаридов в надземных частях родственного вида - эхинацеи бледной, может достигать 11-18%. Вместе с тем полисахариды присутствуют преимущественно в подземных органах растений рода Эхинацея, и именно из корней эхинацеи узколистной предложено получать экстракты с содержанием полисахаридов до 15% [15, 16]. Таким образом, полученные результаты не противоречат литературным данным. В составе экстракта обнаружено также 6-8% аминокислот и не обнаружены терпеновые соединения.
В УФ-спектре водного раствора экстракта листьев шалфея лекарственного (рис. 1Б) зарегистрированы максимумы поглощения около 280 и 330 нм, также свидетельствующие о присутствии фенольных соединений и гидроксикоричных кислот соответственно. По содержанию влаги испытуемые образцы удовлетворяют требованиям, предъявляемым к сухим экстрактам, т.е. не более 5%. Содержание золы значительно ниже, чем для экстрактов травы эхинацеи узколистной - менее 15%. Этот факт может быть связан прежде всего с использованием более гидрофобного растворителя (водно-этанольная смесь). Содержание фенольных соединений, определенное разными методами (перманганатометрически или с реактивом Фолина-Чокальтеу), составляет около 10%. Флавоноиды в образцах экстрактов шалфея обнаружены в количестве около 3%; пересчет на лютеолин-7-глюкозид представляется более достоверным, так как по данным ВЭЖХ-анализа (см. ниже) соединения этой группы присутствуют в экстракте преимущественно в виде гликозидов. Вместе с тем необходимо принять во внимание, что производные гидроксикоричных кислот также могут вступать в реакцию с хлоридом алюминия и вносить свой вклад в оптическую плотность испытуемого раствора. Для получения более достоверных результатов при использовании суммарных спектрофотометрических методик следует вводить дополнительные стадии обработки проб, позволяющие отделить флавоноиды от производных гидроксикоричных кислот, или привлекать более селективные методы анализа.
Для более детального анализа состава фенольных соединений, присутствующих в экстракте листьев шалфея лекарственного, также был использован метод обращено-фазовой ВЭЖХ (рис. 2Б). Идентификация выполнена по совпадению абсолютных времен удерживания и УФ-спектров по сравнению с аутентичными образцами веществ-свидетелей, а также методом добавок. В составе образцов экстрактов листьев шалфея лекарственного идентифицированы кофейная и розмариновая кислоты (доминирующий компонент) и лютео-лин-7-глюкозид. Второй по величине пик (со временем удерживания около 17 мин) принадлежит гликозиду лютеолина (природа углеводного остатка не установлена), расчет содержания этого компонента проводили на лютеолин-7-глюкозид. На основании данных диодно-матричных спектров (наличие характерного максимума при 345 нм) пики нескольких минорных компонентов также отнесены к производным лютеолина. В результате кислотного гидролиза проб (в 10% растворе соляной кислоты) наблюдали исчезновение пиков гликозидов и появление значимого пика лютеолина. Карнозол и карнозовая кислота, характерные для шалфея [7], в исследуемых образцах обнаружены не были. Таким образом, в исследуемом экстракте листьев шалфея лекарственного установлено присутствие производных гидроксикоричных кислот и флавоноидов.
Содержание моносахаров составило около 6%, полисахаридов - около 20%, аминокислот - около 2%. В составе экстракта обнаружены также терпеновые соединения - производные урсоловой кислоты, их суммарное содержание составило около 2-3%.
Анализируя полученные данные, можно отметить, что состав групп БАВ в двух характеризуемых экстрактах довольно схож - присутствуют фенольные соединения, дубильные вещества, углеводы, производные гидроксикоричных кислот, аминокислоты. Вместе с тем экстракт листьев шалфея лекарственного отличает несколько большее разнообразие групп БАВ - обнаружены терпеновые соединения и флавоноиды. Присутствие этих групп веществ может быть связано с водно-спиртовой, а не водной экстракцией, используемой для получения исследуемых экстрактов. Наиболее достоверно различия между двумя экстрактами могут быть выявлены с помощью метода ВЭЖХ. Хроматографические профили двух экстрактов (рис. 2А и Б) наглядно иллюстрируют различный компонентный состав фенольных соединений - гидроксикоричных кислот и флавоноидов двух изучаемых объектов. Данный тест может быть использован как при
определении подлинности самих экстрактов, так и для их идентификации в составе лекарственных форм, в том числе при совместном присутствии. Для количественной стандартизации экстрактов могут быть использованы параметры, основанные на определении суммарного содержания фенольных соединений (гидроксикоричных кислот) или на определении содержания индивидуального соединения. Первый случай предпочтительнее для экстракта травы эхинацеи узколистной, который характеризуется набором близких по химической природе компонентов - соединений группы гидроксикоричных кислот. Доминирующий компонент - кафтаровая кислота, относится к сравнительно редким и дорогостоящим стандартам. Значительно более доступна кофейная кислота, являющаяся структурным фрагментом всех компонентов, идентифицированных в составе экстракта травы эхинацеи узколистной. Таким образом, ее применение для стандартизации представляется вполне обоснованным. В случае сухого экстракта листьев шалфея лекарственного расчет суммарного содержания фенольных соединений (независимо от выбираемого стандарта -кофейная, розмариновая кислоты или иное) представляется недостаточно достоверным, так как в его составе обнаружены не только гидроксикоричные кислоты, но и флавоноиды. Вместе с тем число компонентов, обнаруживаемых в составе экстракта листьев шалфея, невелико, среди них присутствует один явно доминирующий - розмариновая кислота. Поэтому стандартизация рассматриваемого экстракта по содержанию розмариновой кислоты представляется оптимальной.
Заключение
В результате изучения биологически активных веществ промышленно выпускаемых экстрактов в составе сухого экстракта травы эхинацеи узколистной установлено присутствие фенольных соединений, производных гидроксикоричных кислот, углеводов, аминокислот, а в составе сухого экстракта листьев шалфея лекарственного обнаружены еще флавоноиды и терпеновые соединения. Стандартизацию экстрактов и их идентификацию в составе комплексных фитопрепаратов рационально основывать на обнаружении и количественном определении фенольных соединений (производных гидроксикоричных кислот и флавоноидов) с применением метода высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Список литературы
1. Государственный реестр лекарственных средств. М., 2000. 1204 с.
2. Куркин В.А., Авдеева О.И., Авдеева Е.В., Мизина П.Г. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinacea purpurea (L.) Moench. // Растительные ресурсы. 1998. T. 34, вып. 2. C. 81-85.
3. Самородов В.Н., Поспелов C.B., Моисеева Г.Ф., Середа A.B. Фитохимический состав представителей рода эхинацея (Echinacea Moench) и его фармакологические свойства (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. 1996. Т. 30, №4. С. 32-37.
4. Bames J., Anderson L.A., Gibbons S., Phillipson J.D. Echinacea species (Echinacea angustifolia (DC.) Hell., Echinacea pallida (Nutt.) Nutt., Echinacea purpurea (L.) Moench): a review of their chemistry, pharmacology and clinical properties // J. Pharm. Pharmacol. 2005. V. 57, N8. Pp. 929-954.
5. Mazza G., Cottrell T. Volatile components of roots, stems, leaves, and flowers of Echinacea species // Journal of Agriculture and Food Chemistry. 1999. V. 47, N8. Pp. 3081-3085.
6. Sloley B.D., Urichuk L.J., Tywin C., Coutts R.T., Pang P.K., Shan J.J. Comparison of chemical components and antioxidants capacity of different Echinacea species // J. Pharm. Pharmacol. 2001. V. 53, N6. Pp. 849-857.
7. Лекарственные растения Государственной фармакопеи / под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева. М., 1999. 488 с.
8. Sage leaf // ESCOP Monographs. 2nd ed. Stuttgart, New-York: Thieme. 2003. Pp. 339-344.
9. Государственная фармакопея СССР. 11-е изд., перераб. и доп. М., 1987. Вып. 1. 335 с.; М., 1989. Вып. 2. 398 с.
10. Государственные стандарты. Продукты переработки плодов и овощей. Методы анализа. М., 2002. 200 с.
11. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. М., 2004. 240 с.
12. Оболенская A.B., Ельницкая З.П., Леонович A.A. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы. М., 1991. 320 с.
13. Фитохимический анализ лекарственного растительного сырья / под. ред. К.Ф. Блиновой. СПб., 1998. 60 с.
14. Использование нингидриновой реакции для количественного определения а-аминокислот в различных объектах : методические указания. Волгоград, 2007. 106 с.
15. Кисличенко B.C., ДьякЯ.В., Кошевой О.М. Эхинацея бледная - Echinacea pallida (Nutt.) Nutt. Аналитический обзор // Провизор. 2008. №8.
16. Патент №6881426 (US). Echinacea angustufolia extracts / Appl. N10/302842 / 19.04.05.
17. Патент WH0/2004/014958. Polysaccharides of Echinacea angustifolia / Appl. N PCE/EP2003/006717 / 19.02.04.
Поступило в редакцию 17 июня 2011 г.
После переработки 10 октября 2011 г.
