CC BY
11
уровне показателей иммунизации в городах, районах, населенных пунктах, лечебно-профилактических, детских учреждениях, на врачебных, фельдшерских участках; дополнительная иммунизация против полиомиелита детей групп риска; своевременное, полное выявление и
обследование больных ОВП; дополнительное обследование детей из групп риска, а также на территориях по эпидемическим показаниям; обеспечение требований биологической безопасности работы микробиологических лабораторий). ш
Анализ качества отечественной живой коревой вакцины на современном этапе вакцинопрофилактики кори
В.Ф. Попов1, Т.Н. Юнасова1, Л.А. Гайдерова1, В.М. Колышкин2, О.Ю. Шитикова1, Е.С. Сидоренко2
1 ФГУН «Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича» Роспотребнадзора, Москва
2 ФГУП «НПО «Микроген», Московское подразделение по производству бактерийных препаратов
Введение
В России с 2002 года проводятся планомерные мероприятия по реализации Национальной программы элиминации кори.
Современный этап вакцинопрофилактики кори в нашей стране имеет определенные отличительные особенности:
• достигнуты стабилизация спорадического уровня заболеваемости и отсутствие заболеваемости корью на большинстве территорий Российской Федерации,
• снизилась циркуляция дикого вируса, вследствие чего не происходит естественной иммунизации населения,
• невосприимчивость к коревой инфекции обеспечивается только за счет вакцинопрофилактики.
В этих условиях проблема качества отечественной коревой вакцины, применяющейся в стране около 40 лет, не потеряла своей актуальности. В новой ситуации по-новому встают вопросы о том, достаточно ли содержание вируса в прививочной дозе, не происходит ли гиператтенуации вакцинного штамма Ленинград-16 в течение длительного времени производства вакцины, может ли предприятие обеспечить гарантированное стабильное качество вакцины для продолжения вакцинопрофилактики кори.
Цель работы - анализ ряда количественных показателей качества всех серий отечественной коревой вакцины, выпущенных за последние 11 лет.
Материалы и методы
Ретроспективный анализ качества живой коревой вакцины (ЖКВ) проводился по данным, пред-
ставленным в сводных протоколах производства и контроля Московского подразделения по производству бактерийных препаратов ФГУП «НПО «Микроген», и по результатам контроля препарата в ГИСК им. Л.А. Тарасевича. Проведена оценка 2080 серий ЖКВ, выпущенных в 1995 - 2005 годах.
Результаты и обсуждение
Живая коревая вакцина на основе отечественного штамма Ленинград-16 изготавливается из производственного штамма, прошедшего 25 пассажей на первично трипсинизированной культуре клеток: 21 пассаж - на почках морских свинок и 4 пассажа - на фибробластах японских перепелов. Стандартная пассажная характеристика вакцины сохраняется в течение всего времени ее выпуска и соответствует уровню 28-го пассажа. Контролируемая стандартная технология производства вакцины с помощью отлаженной системы приготовления посевных вирусов исключает гиперат-тенуацию штамма, что обеспечивает сохранение высокой антигенной активности ЖКВ. Это подтверждают результаты многолетнего ежегодного контроля вакцины на антигенную активность, проводимого предприятием [2].
Мониторинг основных показателей качества вакцины и соблюдения требований к узловым этапам технологического процесса производства ЖКВ, систематическое инспектирование предприятия, проводящееся ГИСК им. Л.А. Тарасевича, а также регулярная самоинспекция, осуществляемая службой контроля качества предприятия, обеспечивают постоянный контроль состояния производства и качества препарата.
Анализ определенного блока показателей, сделанный на массивном материале, был интересен с точки зрения того, насколько стабильно технология производства вакцины обеспечивает регламентированное качество. За много лет был проанализирован блок показателей качества вакцины, по которому можно судить о стандартности вакцины по содержанию вируса в прививочной дозе в каждой ампуле, а также дана оценка точности розлива, потери массы при высушивании, качества защитного газа, используемого в процессе герметизации вакцины.
Розлив вакцины на предприятии автоматизирован и производится с помощью высокоточного валидированного оборудования. Объем вакцины -0,1 мл, и от точности розлива зависит количество вируса в каждой ампуле готового препарата. Точность розлива контролируется весовым методом и оценивается по коэффициенту вариации массы сухого остатка в ампуле. В нормативной документации (НД) регламентированный коэффициент вариации массы сухого остатка составляет 10%. С 1995 по 2005 год среднегодовые показатели коэффициента вариации массы сухого остатка в произведенных сериях вакцины варьировали от 1,05 до 4,5%. С 2000 по 2005 год этот показатель находился в пределах от 1,05 до 1,48% (табл. 1).
Регламентированный уровень потери массы при высушивании способствует, наряду с другими известными технологическими приемами, сохранению вируса в ампулах в пределах срока годности.
Допустимый уровень потери массы при высушивании по нормативной документации - не более 2%. Ретроспективный анализ качества ЖКВ по этому показателю за последние 11 лет выявил, что около 15% выпущенных серий имели от 1 до 2% остаточной влаги. Потеря массы при высушивании
Таблица 1.
Показатели качества ЖКВ в 2000 - 2005 гг.
более чем 85% серий ЖКВ за этот период времени составляла 1% и менее. В течение последних шести лет данный показатель колебался в пределах от 0,78 ± 0,02% до 0,95 ± 0,03%.
Вакцину герметизируют в среде защитного газа высокого качества. Допустимое количество остаточного кислорода в защитном газе в соответствии с требованиями НД - не более 1%. Среднее многолетнее содержание остаточного кислорода в защитном газе составило 0,285%.
Данные статистической обработки указанных показателей качества по результатам анализа подавляющего большинства выпущенных серий вакцины за последние шесть лет представлены в таблице 1. Полученные результаты не выявили каких-либо закономерностей в динамике этих показателей, так как их значения за все время исследования были оптимальными и свидетельствовали о высоком качестве ЖКВ, которое явилось следствием стандартности и стабильности технологического процесса ее производства.
Анализ специфической активности живой коревой вакцины, выпущенной в 1995 - 2005 годах, показал, что содержание вируса в прививочной дозе в течение исследуемого периода времени было всегда гарантированно выше минимально регламентированного уровня, то есть выше 1000 ТЦД50 (3 £ ТЦД 50) (табл. 2).
Обращает на себя внимание тот факт, что в течение 1995 - 1996 годов 40 - 60% серий вакцины характеризовалось высоким содержанием вируса в прививочной дозе. Специфическая активность этих серий была 5,0 ^ ТЦД 50 / 0,5 мл и выше. В 1997 году выпуск высокотитражных серий вакцины значительно уменьшился и их количество составило лишь 6,3%, с 1998 года выпуск высокотитражных серий полностью прекращен. Из таблицы видно, что
Годы Белок, мкг/ доза (X ± т) Норма по НД -не более 2 мкг на дозу Потеря в массе при высушивании, % (X ± т) Норма по НД -не более 2% Точность розлива -коэффициент вариации массы, % (X ± т) Норма по НД -не более 10% Содержание антибиотика, мкг/доза (X ± т) Норма по НД -не более 20 мкг на дозу Активность, 1д ТЦД50 /доза (X ±т) Норма по НД -не менее 3,0 lg ТЦД^ на дозу Объем выпуска (кол-во серий)
2000 0,66 ± 0,01 (197) 0,78 ± 0,02 (197) 1,14 ± 0,03 (148) 3,62 ± 0,04 (148) 4,14 ± 0,02 (197) 197
2001 0,68 ± 0,02 (126) 0,89 ± 0,03 (126) 1,48 ± 0,04 (126) 3,68 ± 0,04 (126) 3,84 ± 0,02 (126) 126
2002 0,62 ± 0,03 (81) 0,80 ± 0,3 (81) 1,38 ± 0,08 (63) 3,75 ± 0,04 (63) 3,72 ± 0,03 (81) 81
2003 0,59 ± 0,04 (58) 0,95 ± 0,03 (58) 1,13 ± 0,06 (58) 3,70 ± 0,04 (58) 3,90 ± 0,04 (58) 58
2004 0,41 ± 0,02 (182) 0,92 ± 0,03 (182) 1,05 ± 0,03 (182) 3,50 ± 0,05 (182) 4,01 ± 0,02 (182) 182
2005 0,7 ± 0,04 (164) 0,9 ± 0,02 (164) 1,31 ± 0,03 (164) 4,6 ± 0,06 (164) 4,2 ± 0,02 (164) 164
Примечание: в скобках указан объем выборки, серий.
Таблица 2.
Характеристика ЖКВ по содержанию вируса в прививочной дозе за 1995 - 2005 гг.
Год Кол-во серий Количество серий (%), содержащих в прививочной дозе
3,0 - 3,5 lg ТЦД5о/0,5 мл 3,51 - 4,0 lg ТЦД5о/ 0,5 мл 4,01 - 4,5 lg ТЦД5о/0,5 мл 4,6 - 5,0 lg ТЦД5о/0,5 мл ^ 5 lg ТЦД50/ 0,5 мл
1995 266 0 9,8 25,8 22 43
1996 255 0 0 4,7 35,2 60,0
1997 159 0 6,3 42,8 44,6 6,3
1998 311 0 41,5 40,8 17,7 0
1999 281 0,7 37,4 48,4 13,5 0
2000 197 0 22,8 69,1 8,1 0
2001 126 9,5 54,8 34,1 1,6 0
2002 81 16,1 74,1 8,6 1,2 0
2003 58 3,5 63,8 31 1,7 0
2004 182 3,3 46,7 49,5 0,5 0
2005 164 1,2 31 62,8 5 0
с 1998 по 2005 год большинство серий ЖКВ (от 82 до 96%) выпускалось с заданными параметрами активности - от 3,5 до 4,5 ^ ТЦД 50/0,5 мл.
Основанием для прекращения выпуска ЖКВ с высокой активностью послужили материалы об иммуносупрессивном действии высокотитражных коревых вакцин. По сообщениям ряда исследователей, в результате иммунизации детей 4 - 6-месячного возраста высокоактивной вакциной из штамма Эдмонстон-Загреб у этих детей наблюдали выраженное и продолжительное иммуносупрессивное состояние [1, 3, 4].
Следующий блок показателей - содержание общего белка и антибиотика в прививочной дозе. С этими показателями может быть связано сенсибилизирующее действие вакцины. Следует отметить, что средняя величина, характеризующая содержание антибиотика в дозе вакцины за прошедшие 11 лет, находилась в пределах 3,06 - 7,04 мкг.
)
3. Aaby P., Knudsen K., Whittle H. et al. Long-term survival after Edmonston- o Zagreb measles vaccination in Guenue-Bissau: increased female mortality o rate // J. Pediatr. 1993. V. 122. "
4. Whittle H., Campbell H., Rahman S. et al. Antibody persistence in Gambian children after high-dose Edmonston-Zagreb measles vaccine // Lancet. 1990. V. 336.
Средний показатель за последние пять лет составил 3,62 мкг на дозу, что свидетельствует на протяжении многих лет вакцина содержит следовые количества антибиотика и этот показатель стабилен. Согласно рекомендациям ВОЗ и требованиям отечественной нормативной документации допускается до 25 мкг антибиотика на дозу.
Ретроспективный анализ содержания белка за 2000 - 2005 годы показал, что количество белка в прививочной дозе ЖКВ колебалось в пределах от 0,41 до 0,7 мкг на дозу, что ниже допускаемого НД.
Выводы
Представленные материалы свидетельствуют о стабильно высоком качестве отечественной живой коревой вакцины в течение последних 11 лет, которое явилось следствием стандартности и стабильности технологии ее изготовления. ш
Литература
1. Мельников С.Я. Коревые вакцины: новые направления, новые стратегии // Вопросы вирусологии. 1996. № 2. С. 18-22.
2. Юминова Н.В., Колышкин В.М., Россошанская Н.В. и др. Пятилетний мониторинг качества отечественных коревой и паротитно-коревой вакцин. Теоретические и практические аспекты элиминации кори. Сборник научных трудов. - М., 2005. С. 160-162.
