CC BY
8УДК: 638.154.3
АМЕРИКАНСКИЙ ГНИЛЕЦ, ЕГО АКТУАЛЬНОСТЬ, СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ И ПРОФИЛАКТИКИ НА ПАСЕКАХ
А.С. Авраменко - аспирант по научной специальности 4.2.3 Инфекционные
болезни и иммунология животных, e-mail: alexskznivi@mail.ru А.А. Миронова - доктор ветеринарных наук, главный научный сотрудник М.В. Авраменко - младший научный сотрудник
Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт — филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр» (СКЗНИВИ — филиал ФГБНУ ФРАНЦ), г. Новочеркасск, ул. Ростовское
шоссе 0
Аннотация. В своем исследовании мы рассмотрели данные от отечественных и зарубежных авторов по заболеванию американский гнилец пчел. По данным статистических анализов из предложенных источников сформировали выводы о текущем заболевании, методов его диагностики и профилактики на пасеках.
Ключевые слова: американский гнилец, инфекционные заболевания пчел, бактериозы, диагностика, профилактика.
AMERICAN FOULBROOD, ITS RELEVANCE, METHODS OF DIAGNOSIS AND PREVENTION IN APIERS
A.S. Avramenko - postgraduate student in scientific specialty 4.2.3 Infectious diseases and immunology of animals A.A. Mironova - Doctor of Veterinary Sciences, Chief Researcher M.V. Avramenko - junior researcher
«North-Caucasus Zonal Scientific Research Veterinary Institute» - Branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution «Federal Rostov Agricultural Research Centre» (NCZSRVI - Branch of the FSBSIFRARC), Novocherkassk, Rostov highway 0
Abstract. In our study, we reviewed data from domestic and foreign authors on the disease American foulbrood of bees. Based on statistical analyzes from the
proposed sources, conclusions were drawn about the current disease, methods for its diagnosis and prevention in apiaries.
Key words: american foulbrood, infectious diseases of bees, bacteriosis, diagnosis, prevention.
Введение. Американский гнилец (гнилец печатного расплода, злокачественный гнилец, бранденбургский гнилец) - заболевание инфекционного характера 5-6-дневных личинок печатного расплода, относящееся к бактериальным инфекциям (бактериозы), сопровождающееся гнилостным разложением личинок, ослаблением и высокой вероятностью полной гибели пчелосемьи [4].
Обнаружение данного заболевания вызывает трудности даже для опытных пчеловодов, что влечет за собой как экономические потери, так и риск к распространению заболевания за пределы зараженной семьи.
Болезнь распространена во всех странах, где развито пчеловодство и имеет большое влияние на здоровье пчелосемей [6].
Благодаря своим свойствам, таким как трудному выявлению на ранних этапах, высокой контагиозностью и вероятностью полной гибели семьи американский гнилец является одним из лидирующих по опасности инфекционным заболеванием у пчел и причисляется к группе Б (МЭБ), являющийся опасным карантинным заболеванием с обязательной регистрацией [4].
Цель. Выявление актуальности методов диагностики и профилактики американского гнильца пчел.
Исходя из поставленной цели сформированы следующие задачи:
- изучение статистических данных и научных источников в соответствии с данной тематикой;
- изучение способов диагностики и профилактики при поражении пчелосемей американским гнильцом;
- систематизация полученных данных и определение основных аспектов диагностики и профилактики американского гнильца.
Материалы и методы исследований. Объектом наших исследований была научная литература, а также статистические данные, полученные от отечественных и зарубежных авторов по тематике, касаемой диагностики и профилактики американского гнильца пчел.
Результаты проведенных исследований. В ходе проведенного нами исследования было выявлено, что возбудитель Bacillus larvae (Paenibacillus larvae) - подвижная грамположительная палочка размером 2-5*5-0.8 мкм с закругленными концами, является факультативным анаэробом, спорообразую-щая. Имеет 5 слоев оболочек разной толщины. Температура роста бациллы 20-45°C, оптимальная температура 34-37°C. Растет в анаэробных и аэробных условиях pH 6.8-7.2. При неблагоприятных условиях образует эндоспоры. Споры устойчивы к физическому и химическому воздействию. Жизнеспособность спор сохраняется в почве до двух лет, в ульях и на сотах до 15 лет, в трупах личинок до 30 лет. В лабораторных условиях споры способны сохранять свою вирулентность после 70 лет [4, 6, 7].
Заболевание распространено во всех странах с развитым пчеловодством и проявляется в период жары, когда пчелы наиболее активны и имеют расплод в семье. Затихание болезни происходит в период главного медосбора, когда расплод сокращается количественно.
Установлено, что штаммы P. Larvae, взятые на исследования с разных континентов, имеют одинаковые антигенные свойства [1, 4].
В период СССР, на его территории, более чем в 50% всех исследуемых проб пораженного расплода обнаруживали американский гнилец.
Восприимчивы к заражению только молодые личинки 24-часового возраста. У взрослых личинок так же прорастают споры, но вегетативные клетки не достигают эпителия кишечника, а выводятся вместе с фекалиями. По этой причине пчелы устойчивы к заражению заболеванием, однако остаются спо-роносителями и могут заразить молодых личинок, поскольку споры будут находится в пищеварительном тракте взрослой пчелы более 2 месяцев [1, 8].
Главным источником возбудителя являются погибшие личинки, находящиеся в запечатанном расплоде. Количество спор в трупе данных личинок может составлять до 2.5 млрд. экземпляров. К вторичным источникам возбудителя инфекции относятся корма и соты от больных семей. Внутри семьи споры разносят рабочие пчелы, которые очищают пораженные бактериями лунки.
Естественным путем распространения американского гнильца между семьями происходит вследствие пчелиного воровства, а также благодаря вредителям ульев (моль, клещи и тд.). Причинами возникновения заболевания на пасеке также могут быть нарушение и несоблюдение ветеринарно-санитарных правил содержания пчел [6, 8].
На выживаемость пчел могут влиять и другие факторы. Резистентность семьи снижается при смешанных инфекциях, которые, в совокупности с американским гнильцом, уменьшают вероятность выживаемости и приводят к летальным исходам.
Заражение личинок пчел происходит до их запечатывания, при попадании в кишечник спор с кормом, во время подкармливания пчелами-кормилицами. Первоначально заболевают ослабленные личинки. Возбудитель, при заражении личинок, проникает через стенку кишечника в гемолимфу, где начинает размножатся и распространяется по всему организму в течении 12-24 часов, предопределяя общую интоксикацию организма.
В данный период у личинок происходят дегенеративные процессы: в цитоплазме клеток - вакуолизация, плазморексис, плазмопикноз, в ядрах - ка-риорексис и гиперхроматоз. В ответ на внедрение возбудителя организм личинки отвечает защитной реакцией - фагоцитозом, однако размножение микробов быстрее, чем их фагоцитирование, поэтому организм личинок полноценно не защищен [4].
Молочко, которое получают личинки, обладает бактерицидными свойствами, благодаря чему они не заболевают гнильцом в течении трех дней. Ин-
кубационный период длится 2-7 дней, поэтому заразившиеся личинки погибают после запечатывания ячеек. В среднем, для заражения одной личинки, необходимо 10000 спор возбудителя в 0.01 мл раствора сахаров. Личинки погибают перед их окукливанием, а их ткани подвергаются гнилостному разложению и выделению специфического данной болезни запаха.
Клинические признаки проявляются через 7-10 дней после заражения, однако заметить их бывает проблематично. У личинок меняется их блеск вплоть до темно-коричневого. Разлагающаяся масса становится тягучей и может образовывать длинные нити, имеет запах столярного клея. После 20-30 дней масса высыхает, крышечки западают, темнеют и имеют отверстия. Пчелам затруднительно очистить такие ячейки, и они выводят новый расплод в соседних ячейках, что способствует перезаражению новых особей. Сами пчелы становятся вялыми, уменьшается количество новых молодых особей и без должного внимания семья имеет риск к гибели [3, 4].
Семьи пчел отличаются различной степенью устойчивости к заболеванию. Пчелы обнаруживают изменения у личинок, вскрывают крышечки и удаляют пораженные личинки. В основе такой реакции лежат поведенческие факторы. Установлена возможность передачи по наследству устойчивости пчел к данному заболеванию. В пораженной переболевшей семье у пчел и здоровых личинок выявлены относительно специфические агглютинины.
Существует 4 стадии патологоанатомических изменений у зараженных личинок:
1. изменение формы и стадии сегментации, грязно-желтые пятна на теле;
2. потеря формы и сегментации, личинки искривлены, слизистой консистенции, появляется запах столярного клея, становятся коричневого цвета;
3. изменение личинок, превращение их в коричневую гнилостную массу;
4. масса становится темно-коричневого цвета, засыхает и плотно прикрепляется в ячейке [6].
Предварительно диагноз ставится по клиническим признакам и патологическим изменениям. Для этого необходимо обращать внимание на:
- вид расплода («сплошной», «пёстрый»);
- особенности печатки сотов с расплодом и внешний вид восковых крышечек (цвет крышечек, наличие продырявленных и вогнутых крышечек);
- внешний вид личинок (возраст, цвет, блеск, тургор, сегментация тела, положение личинок в ячейках сота).
Окончательно диагноз подтверждается лабораторными исследованиями, куда направляется соты 10*15 см с пораженным расплодом с максимальным количеством пораженных ячеек [3, 6].
Для выявления наличия американского гнильца лаборатории необходимо провести микроскопию мазков и выделить культуру возбудителя с ее последующей идентификацией.
В первый день исследования готовят мазки из разложившейся массы или засохших корочек из ячеек: извлекаются не менее 10 погибших личинок и помещаются в пробирку с 5 мл стерильного физраствора, которую подогревают над пламенем до кипения, охлаждают и растирают на предметном стекле. Окрашивают по Граму, а также 2%-ным спиртовым раствором карболового фуксина в течении 1.5-2 мин для обнаружения спор в мазке. При наличии возбудителя будут видны овальные споры и одиночные палочки.
Затем содержимое пробирки высевают в МПБ и на среде Эндо. Посевы помещают в термостат на 24-72 часа при температуре 37-38°С В положительном случае в МПБ возбудитель дает помутнение, через 48 часов среда просветляется, а на дне пробирки - осадок.
На плотных средах за 48-72 часа появляются шероховатые колонии сначала прозрачные, затем серо-белые.
Срок лабораторного исследования длится 10 дней [2, 3, 5].
Для выявления скрытой формы заболевания и санитарной оценки пасек исследуют мед на наличия спор американского гнильца.
Так же для диагностики используют: РА, РСК, РИД, РИФ, ИФА, однако чаще всего используется ПЦР.
При дифференциальной диагностике необходимо исключать: европейский гнилец, парагнилец, порошковидный расплод, мешотчатый расплод, застуженный расплод, аспергиллез, варроатоз, аскосфероз. При таких болезнях как европейский гнилец и порошковидный расплод чаще всего будут поражены незапечатанные личинки, в то время как американский гнилец - болезнь печатного расплода. При парагнильце крышечки чаще всего будут нетронуты, а при поражении американским гнильцом у крышечек будут присутствовать характерные изменения. При мешотчатом расплоде погибшие личинки будут кардинально отличаться изменениями в отличии от американского гнильца. Застуженный расплод - это гибель личинок сплошными участками снизу или на боковых частях рамок. Так же следует иметь в виду, что семьи могут болеть несколькими заразными заболеваниями одновременно [2, 3].
Для лечения используются антибиотики широкого спектра действия, однако данный способ приводит к появлению устойчивых форм микроорганизмов и снижению общей резистентности семей, что следует учитывать, поскольку заболевание является карантинным и все манипуляции необходимо обговаривать с ветеринарными специалистами.
Важным моментом в профилактике всех заболеваний является повышение общего иммунитета пчелосемей [4].
В профилактических целях необходимо: содержать здоровые семьи, выполнять ветеринарно-санитарные правила, обеспечивать пчел полноценным кормом, предотвращать занос возбудителя извне, своевременно выявлять первые случаи заражения и предотвращать их.
Приобретаемые пчелиные семьи обследуют на месте и в течение 30 дней содержат на карантине и только после этого, с соблюдением надлежащего контроля, их переводят на основную пасеку.
Весной семьи необходимо пересаживать в продезинфицированные улья и необходимо иметь не менее 15% запасных ульев на каждой пасеке. Срок эксплуатации сотов, включая соты магазинных надставок, не должен превышать 2 лет. Очень важно ежегодно обновлять не менее 1/3 сотов гнезда.
Лучший способ предупреждения болезни - недопущение перевозок неблагополучных пасек для медосбора на специально отведенные места, исключающие контакт пчел с благополучными пасеками [2].
Ульи, соты, инвентарь подвергают профилактической дезинфекции, проводят очистку и побелку складских помещений, еженедельно очищают предлетковые площадки.
К общим санитарным мероприятиям на пасеке относят:
- оборудование предульевых площадок;
- систематический сбор и уничтожение погибших пчел и личинок;
- недопущение пчелиного воровства;
- ликвидация безматочных семей [6].
Выводы и заключение. Анализируя полученные данные, установлено, что вопросы о способах диагностики, лечения и профилактики американского гнильца до сих пор остаются открытыми. Антибиотикотерапия является нецелесообразной для лечения, поскольку продукты пчеловодства, в частности мед, становятся непригодными к дальнейшей реализации из-за наличия в них остаточных веществ после применения антибиотиков. По этой же причине эффективного лечения на данный момент не выявлено, что дает возможность над проработкой данной проблемы будущему поколению. Однако, уже в начале 2023 года, была одобрена первая в мире вакцина для пчел «PrimeBEE» (Dalial Freitak, Heli Salmela, Annette Kleiser, Хельсинский университет, патент на изобретение № CA3151793A1, 2022 г.).
Литература
1. Авраменко, А. С. Анализ возникновения инфекционных заболеваний пчел на территории Ростовской области / А. С. Авраменко, А. А. Миронова, М. В. Гунько // Актуальные вопросы развития отраслей сельского хозяйства: теория и практика : Материалы V Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых АПК, п. Рассвет, 18-19 мая 2023 года. - п. Рассвет: Общество с ограниченной ответственностью "АзовПринт", 2023. - С. 194-204. - DOI 10.34924/FRARC.2023.36.93.041. - EDN ROWJRC.
2. Ибрагимов, Р. П. Американский гнилец пчел, меры борьбы и профилактика его в условиях Азербайджанской ССР : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Р. П. Ибрагимов. -Казань, 1964. - 34 с. - EDN ZMPHAP.
3. Клиническая и лабораторная диагностика заразных болезней расплода пчел / М. И. Гулюкин, А. Н. Сотников, М. А. Лучко [и др.] // Ветеринария. -2016. - № 4. - С. 25-27. - EDN VSTYEX.
4. Кочетов, А.С. Пчеловодство: учебник для СПО / А.С. Кочетов, А.Г. Ман-напов. — 3е изд., стер. — Санкт Петербург: Лань, 2022. — 188 c.
5. Курченко, Г. А. 1095. [Выделение пробиотических штаммов Lactobacilli для профилактики американского гнильца пчел. (Словакия)]. Mudronova D., Rumanovska K., Toporcak J., Nemcova R., Gancarcikova S., Hajduckova V. Selection of probiotic lactobacilli designed for the prevention of american foulbrood // Folia veterinaria / Univ. of veterinary medicine.-Kosice, 2011.-vol.55 N 4.-P. 127-132.-Англ.-ШЫ^г.: p.132. Шифр 79178-H / Г. А. Курченко // Ветеринария. Реферативный журнал. - 2012. - № 4. - С. 1095. - EDN PUSONJ.
6. Латыпов, Д.Г. Болезни и вредители медоносных пчел: учебное пособие для СПО / Д.Г. Латыпов, Р.Р. Тимербаева, Е.Г. Кириллов. — Санкт Петербург: Лань, 2022. — 288 с.
7. Лучко, М. А. Американский и европейский гнильцы пчелиного расплода / М. А. Лучко, Г. В. Злобин // Ветеринарная патология. - 2009. - № 3(30). - С. 88-92. - EDN OCZGKR.
8. Лучко, М. А. Болезни расплода пчел / М. А. Лучко, А. Н. Сотников // Ветеринария. - 2012. - № 6. - С. 9-14. - EDN PBBBUV.
Referenve
1. Avramenko, A. S. Analysis of the occurrence of infectious diseases of bees in the Rostov region / A. S. Avramenko, A. A. Mironova, M. V. Gunko // Topical issues of the development of agricultural industries: theory and practice : Materials of the V All-Russian Scientific and Practical Conference of Young Agricultural Scientists, Rassvet village, May 18-19, 2023. - Rassvet village: AzovPrint Limited Liability Company, 2023. - pp. 194-204. - DOI 10.34924/FRARC.2023.36.93.041. -EDN ROWJRC.
2. Clinical and laboratory diagnostics of infectious diseases of the bee fetus / M. I. Gulyukin, A. N. Sotnikov, M. A. Luchko [et al.] // Veterinary medicine. - 2016. - No. 4. - PP. 25-27. - EDN VSTYEX.
3. Ibragimov, R. P. American bee rot, control measures and its prevention in the conditions of the Azerbaijan SSR : abstract of the dissertation for the degree of Candidate of Veterinary Sciences / R. P. Ibragimov. - Kazan, 1964. - 34 p. - EDN ZMPHAP.
4. Kochetov, A.S. Beekeeping: textbook for SPO / A.S. Kochetov, A.G. Man-napov. — 3rd ed., ster. — Saint Petersburg: Lan, 2022. — 188 p.
5. Kurchenko, G. A. 1095. [Isolation of probiotic Lactobacilli strains for the prevention of American bee rot. (Slovakia)]. Mudronova D., Rumanovska K., Toporcak J., Nemcova R., Gancarcikova S., Hajduckova V. Selection of probiotic lactobacilli designed for the prevention of american foulbrood // Folia veterinaria / Univ. of veterinary medicine.-Kosice, 2011.-vol.55 N 4.-P. 127-132.-English-Bibliogr.: p.132.
Cipher 79178-H / G. A. Kurchenko // Veterinary medicine. Abstract journal. - 2012. - No. 4. - p. 1095. - EDN PUSONJ.
6. Latypov, D.G. Diseases and pests of honey bees: a training manual for SPO / D.G. Latypov, R.R. Timerbaeva, E.G. Kirillov. — Saint Petersburg: Lan, 2022. — 288 p.
7. Luchko, M. A. American and European rotten bees / M. A. Luchko, G. V. Zlobin // Veterinary pathology. - 2009. - № 3(30). - Pp. 88-92. - EDN OCZGKR.
8. Luchko, M. A. Diseases of bee brood / M. A. Luchko, A. N. Sotnikov // Veterinary medicine. - 2012. - No. 6. - pp. 9-14. - EDN PBBBUV.
