CC BY
14
4. Вахрушев Я.М., Иванов Л.А., Никишина Е.В.и др. К вопросу о распространенности пилорического гелиобактера при заболеваниях гастродуоденальной зоны //Материалы 7-й сессии Российской группы по изучению Helicobacter pylori. - Нижний Новгород, 1998.- С. 38
5. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М., 1978.
6. Смоленко Е.Д. Диагностика и лечение желудочного геликобактериоза у больных хроническим гастритом: Автореферат дисс. канд. мед. Витебский гос. мед. ин-т. - Минск, 1993. - 24 с.
7. Циммерман Я.С. Очерки гастроэнтерологии. - Пермь, 1992. - 333 с.
УДК 616.36 - 036.12:612.015.32
АКТИВНЫЕ ФОРМЫ КИСЛОРОДА В ОЦЕНКЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И ПРОГНОЗИРОВАНИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У БОЛЬНЫХ ЦИРРОЗОМ ПЕЧЕНИ Т. Н. Янковая
Смоленская государственная медицинская академия
Показано, что по мере утяжеления патологии печени уменьшается способность лейкоцитов цельной крови генерировать АФК, наиболее выраженное у больных с декомпенсированным циррозом и сформированными портокавальными шунтами. Оценка фагоцитарной способности лейкоцитов цельной крови генерировать АФК с помощью люминолзависимой хемилюминесценции при ЦП может быть использована в качестве критерия диагностики бактериальных осложнений у данных больных.
Развитие бактериальных осложнений при циррозах печени (ЦП) обусловливает около 25% летальности (6,8). В литературе описаны многочисленные случаи спонтанного бактериального перитонита (7), пневмонии (8, 3), эмпиемы плевры (3, 6), бактериального эндокардита (3) и т.д. Появление бактериальных осложнений при ЦП обусловлено в первую очередь снижением неспецифической резистентности организма, ведущая роль в осуществлении которой принадлежит фагоцитарной активности лейкоцитов. Как эффективные клетки воспаления лейкоциты генерируют активные формы кислорода (АФК) и формируют бактерицидную защиты организма от инфекции (3). Наряду с оценкой гуморальных факторов неспецифического иммунитета (иммуноглобулины, комплемент и т.д.), изучался хемотаксис, адгезия, поглотительная и переваривающая способность (5), активность внутриклеточных ферментов, метаболизм полиморфноядерных лейкоцитов (4). Недостатками данных исследований неспецифической резистентности организма являются значительная трудоемкость и возможность неоднозначного истолкования результатов, за счет использования различных методических подходов. В связи с изложенным, представляет интерес изучение способности лейкоцитов цельной крови генерировать АФК, для поиска новых критериев диагностики бактериальных осложнений при ЦП.
Цель исследования - изучить способность лейкоцитов цельной крови генерировать АФК у больных с ЦП в сопоставлении с клиническими проявлениями и возможность их использования, для оценки неспецифической резистентности организма.
Материалы и методы. В исследование было включено 33 больных ЦП мужчин в возрасте от 23 до 56 лет. Для определения контрольных показателей фагоцитарной активности лейкоцитов исследовалась цельная кровь у 30 доноров (мужчин) того же возраста. Диагноз заболевания устанавливался на основании характерных жалоб больных - анамнестических данных, физических, лабораторных и инструментальных методов исследования. В ряде случаев диагноз был подтвержден морфологическим исследованием биоптатов печени. В зависимости от выраженности асцита пациенты с ЦП были разделены на 3 группы: 1- ая группа включала больных ЦП без асцита (п=10), 2-я группа - с транзиторным асцитом (п=10) , 3-я группа - с резистентным асцитом (п=13). В зависимости от наличия варикозно расширенных вен пищевода (ВРВП) больные с ЦП были разделены на две группы: в 1-ую группу (п=23) вошли больные с ВРВП; во 2-ую группу (п=10) -без ВРВП. Неспецифическую резистентность организма оценивали по способности лейкоцитов цельной крови генерировать активные формы кислорода (АФК) и исследовали с помощью люминолзависимой хеми-люминесценции (ХЛ-Л) лейкоцитов цельной крови, стимулированной кристаллами сульфата бария (1,2). Измерение выполняли на хемилюминометре ИРА-03 с использованием ФЭУ-127. Для определения абсолютной интенсивности ХЛ-Л использовали стандартный радиолюминесцентный источник П-01, интенсивность излучения которого составляла 10,2 х10 5 квант/с4р (1,2). Амплитуда вспышки ХЛ-Л характеризует количество образовавшихся АФК в ответ на действие стимула, которое пропорционально фагоцитарной активности стимулированных лейкоцитов (1,2).
Результаты исследования и обсуждение. Способности лейкоцитов цельной крови генерировать АФК у больных ЦП и в контрольной группе представлены в таблице 1.
Показатель Контроль (п=30) ЦП (п=33) Р
АФК лейкоцитов в х 10 5 квант/с4 р 27,25± 1,41 10,80±0,53 < 0,05
Примечание: Р- различие между ХЗП и контролем.
Исследование способности стимулированных лейкоцитов цельной крови генерировать АФК с помощью ХЛ-Л выявило у больных ЦП снижение генерации АФК лейкоцитами по отношению к контрольной группе (Р<0,05). Для поиска новых параметров, которые характеризуют состояние неспецифической резистентности организма изучена взаимосвязь образования АФК лейкоцитами цельной крови с клиническими проявлениями ЦП, что может позволить выработать критерии прогнозирования риска развития бактериальных осложнений у данного контингента больных. С этой целью была проанализирована зависимость генерации АФК лейкоцитами от выраженности печеночной недостаточности и портальной гипертензии (асцита, ВРВП). Исследована способность лейкоцитов цельной крови генерировать АФК в зависимости от выраженности асцита у больных ЦП (табл. 2).
Таблица 2. Способность лейкоцитов генерировать АФК у больных ЦП в зависимости от выраженности асцита
Показатель Контроль (доноры) (п=30) По степени выраженности асцита
1 группа (п=10) 2 группа (п=10) 3 группа (п=13)
АФК лейкоцитов в х105 квант/с4 р 27,25 ± 1,41 14,3 7± 0,60 10,02±0,56 7,72± 0,54
Р<0,05 Р<0,05 Р1 <0,05 Р <0,05 Р2 <0,05 Р3 < 0,05
Примечание: Р- различия с контролем, Р1-различия между группами 1-2, Р2-различия между 1-3, РЗ- различия между 2-3.
Зарегистрировано снижение способности лейкоцитов генерировать АФК у больных ЦП всех трех групп по отношению к контрольной группе (Р<0,05). Установлено, что с увеличением степени тяжести ЦП по выраженности асцита данный показатель снижается. Так, в 1 группе больных ЦП, генерация АФК составила 14,37± 0,60 х10 5 квант/с4 р, что выше чем у больных 2 группы (Р1< 0,05) и 3 (Р2 <0,05), причем получено значимое изменение показателя между группами 2 и 3 (Р3 <0,05).
Полученные данные свидетельствуют о снижении способности лейкоцитов цельной крови генерировать АФК у больных ЦП по мере увеличения выраженности асцита, что указывает на тесную связь функциональной активности лейкоцитов с выраженностью печеночной недостаточности и подтверждает значимость эндотоксинемии в подавлении процессов фагоцитоза. Следует заметить, что асцит свидетельствует не только о паренхиматозной недостаточности, но и портальной гипертензии. Поэтому увеличение его выраженности должно происходить параллельно с повышением сброса портальной крови, содержащей ингибиторы фагоцитиарной активности лейкоцитов (в первую очередь эндотоксин грамотрицательных кишечных бактерий), в системную циркуляцию, минуя печень. Поэтому изучена зависимость способности лейкоцитов цельной крови генерировать АФК от ВРВП у больных ЦП (табл. 3). У больных ЦП как с ВРВП, так и без ВРВП регистрировалось достоверное снижение генерации АФК лейкоцитами цельной крови (Р<0,05) по
отношению к контрольной группе. Наибольшее изменение генерации АФК лейкоцитами установлено у больных ЦП с наличием ВРВП (Р 1 < 0,05).
Так как ВРВП является наиболее характерным проявлением портальной гипертензии полученные результаты еще раз свидетельствуют о роли коллатерального портокавального сброса крови в снижении фагоцитарной активности лейкоцитов.
Представленные данные позволяют сделать вывод, что по мере утяжеления патологии печени уменьшается способность лейкоцитов цельной крови генерировать АФК, наиболее выраженное у больных с декомпенси-рованным циррозом и сформированными портокавальными шунтами, что следует иметь в виду при оценке риска развития бактериальных осложнений у данных больных.
Таблица 3. Способность лейкоцитов генерировать АФК у больных ЦП с ВРВП и без ВРВП
Показатель Контроль (доноры) (п =30) ЦП с ВРВП (п=23) ЦП без ВРВП (п=10)
АФК лейкоцитов в х10 5 квант/с4 р 27,25± 1,41 9,59± 0,40 13,32± 1,13
Р<0,05 Р <0,05 Р1 <0,05
Примечание: Р- различие с контролем, Р1-различие между больных ЦП с ВРВП и без ВРВП
Внедрение при ЦП метода оценки фагоцитарной функции лейкоцитов цельной крови по их способности генерировать АФК позволит с высокой степенью достоверности выявлять угнетение неспецифической резистентности организма и на этой основе корректировать реабилитационные мероприятия у данных больных с целью предупреждения инфекционных осложнений, в амбулаторных условиях.
Литература
1. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Пирязев А.П. Стимулированная кристаллами сульфата бария хелмилюминес-ценция лейкоцитов цельной крови // Биофизика. -1989. - Т.34, № 6. - С. 1051 -1054.
2. Шерстнев М.П. Методика регистрации люминолзависимой хемилюминесценции лейкоцитов цельной крови стимулированной кристаллами сульфата бария // Вопр. хемилюминесценции. - 1991. - № 2. - С. 20 - 22.
3. Майер К. П. Гепатит и последствия гепатита. Пер. с нем. - М.: Гэотар Медицина, 1999.-424 с.
4. Ягода А.В. Молекулярно-клеточные аспекты патогенеза, клиника и лечение хронического гепатита и цирроза печени: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. - М.,1994. -50с.
5. Akalin H.E., Lalely Y., Telatar H. Serum bactericidal and opsonic activities in patients with non-alcoholic cirrhosis // Quart. J. Med. - 1985. - Vol. 56. - P. 431-436.
6. Caly W. R., Strauss E. A prospective study of bacterial infections in patients with cirrhosis // J. Hepatol. - 2002. - Vol.18. -P. 353 - 358.
7. Savli H., Pristant H., Zach G. et. al. Spontaneous bacterial peritonitis: a serious problem in patients with ascites // Europ. J. Gastroenterol. Hepatol. - 2001. - Vol.28. - P. 448 - 458.
8. Wyke R.J. Problems of bacterial infections in patients with liver disease // Gut. -1987.-Vol.28.-P.623-641.
