CC BY
20
На всех описываемых длинах волн нами было получено статистически значимое повышение карбонильных производных для группы больных тромбофлебитом по сравнению со здоровыми лицами и больными с варикозным расширением вен нижних конечностей. Уровень изучаемого маркера у лиц с варикозным расширением вен также имел тенденцию к повышению, однако отличия оказались статистически недостоверными. Полученные результаты в целом согласуются с данными [3, 5], свидетельствующими о значительном вкладе окислительной модификации белка именно в патогенез воспалительного поражения тканей.
Таким образом, повышенный уровень окислительно модифицированных белков при тромбофлебитах может быть использован в качестве маркера выраженности оксидативного стресса при данной патологии.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Дубинина Е.Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А., Поротов И.Г. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека. Методы ее определения // Вопр. мед. химии. - 1995. - Т. 41, № 1. -С. 24-26.
2. Dalle-Donne I., Ross R., Guistarini D [et al.]. Protein carbonil groups as biomarkers of oxidative stress //
Clinica Chimica Acta. - 2003. - Vol. 329. - P. 23-38.
3. Dean R.T., Fu S., Stoker R. [et al.]. Biochemistry and pathology of radical-mediated protein oxidation //
Biochem. J. - 1997. - Vol. 324. - P. 1-18.
4. Levine R.L., Garland D., Oliver C.N. [et al.]. Determination of carbonyl content in oxidatively modified
proteins // Methods in Enzymol. - 1990. - Vol. 186. - P. 464-478.
5. Piroddi M., Depunzio I., Calabrese V. [et al.]. Oxidatively-modified and glycated proteins as candidate pro-
inflammatory toxins in uremia and dialysis patients // Amino Acids. - Vol. 32. - P. 573-592.
6. Stadman E.R., Levine R. L. Protein Oxidation // Ann. New York Acad. Sci. - 2000. - Vol. 889. -
P. 191-208.
7. Wolff S.P., Dean R.T. Fragmentation of proteins by free radicals and its effect on their susceptibility to enzymic hydrolysis // Biochem J. - 1986. - Vol. 234. - P. 399-403.
Фомина Мария Алексеевна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоц-развития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
Шумская Елена Ивановна, ассистент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
Фомина Наталья Васильевна, ассистент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, д. 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
УДК 616.14-002-008.93:612.015.13 © Н.В. Фомина, М.А. Фомина, Р.Е. Калинин, 2011
Н.В. Фомина, М.А. Фомина, Р.Е. Калинин АКТИВНОСТЬ ЛИЗОСОМАЛЬНЫХ ЦИСТЕИНОВЫХ ПРОТЕИНАЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ТРОМБОФЛЕБИТОМ
ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова»
Минздравсоцразвития России
Обнаружено повышение активности лизосомальных цистеиновых катепсинов B, и Ь в сыворотке крови у больных тромбофлебитом глубоких вен нижних конечностей относительно здоровых лиц; наибольшая степень изменений отмечена для катепсина Ь.
Ключевые слова: лизосомальные цистеиновые протеазы, тромбофлебит.
LYSOSOMAL CYSTEINE CATEPSIN’S ACTIVITY IN THROMBOPHLEBITIS PATIENT BLOOD SERA
It was detected that thrombophlebitis is associated with increased activity of lysosomal cysteine cathepsins B and L in blood serum; the largest rate of increasing was detected for catepsin L activity.
Key words: lysosomal cysteine protease, thrombophlebitis.
Лизосомальные цистеиновые протеиназы (ЛЦП) относятся к семейству папаиноподобных протеолитиче-ских ферментов, локализованных в основном в лизосомах клетки. Именно данная группа лизосомальных ферментов в настоящее время является объектом пристального внимания исследователей. Показано, что ЛЦП принимают участие во множестве физиологических и патологических процессов [3, 5, 7]. Особенный интерес вызывает способность ферментов данной группы секретироваться во внеклеточную среду и их способность к частичному протеолизу компонентов внеклеточного матрикса [1, 4] и стимуляции неоангиогенеза [3, 6].
Цель: изучение изменений активности лизосомальных цистеиновых катепсинов B, H и L в сыворотке крови на фоне тромбофлебита.
Материалы и методы. В работе представлены результаты обследования 32 человек, разделенных в ходе исследования на 3 группы: здоровые доноры (группа 1, «контроль»; n=12), больные с диагнозом тромбофлебит глубоких вен нижних конечностей (группа 2; n=10) и больные с диагнозом варикозное расширение вен нижних конечностей (группа3, «группа сравнения»; n=10). Активность катепсинов B, H и L изучали спектрофлуоримет-рическим методом по Barrett & Kirschke [2]. Статистическая значимость отличий полученных результатов от контрольной группы и группы сравнения оценивалась с использованием t-критерия Стьюдента.
Результаты. При сопоставлении показателей активности изучаемых ферментов в сыворотке крови у больных тромбофлебитом с аналогичными для здоровых доноров и группы сравнения нами обнаружены следующие тенденции (табл.). Оказалось, что у больных тромбофлебитом в сыворотке крови активность катепсинов В и L повышалась относительно контрольной группы в 1,6 и 2,7 раза соответственно. Активность катепси-на Н практически не менялась. В группе сравнения у больных с варикозным расширением вен нижних конечностей в сыворотке крови повышалась активность катепсинов В, L и Н соответственно в 3,6; 1,5 и 1,9 раза. Причем, повышение активности катепсинов В и L при тромбофлебите, а также повышение активности катепси-нов В, L и Н при варикозном расширении вен оказались статистически значимыми. Таким образом, при варикозном расширении вен нижних конечностей с начальными проявлениями ХВН в большей степени повышалась активность катепсинов В и Н, при более серьезном поражении - тромбофлебите глубоких вен нижних конечностей в большей степени повышалась активность катепсина L.
Обнаруженные тенденции могут свидетельствовать о наличии участия катепсинов В, L и Н в патогенезе тромбофлебита и варикозного расширения вен; кроме того, степень изменения их активности в сыворотке крови может оказаться прогностическим признаком при данной патологии.
Таблица
Сравнительный анализ активности катепсинов В, Ь, Н в сыворотке крови больных тромбофлебитом
и больных ХВН (в мкмоль/чхл), М±т
Группа 1; n=12 Группа 2; n=10 Группа 3; n=10
Катепсин B 0,67±0,08 1,07±0,13* 2,04±0,22*
Катепсин L 4,35±0,33 11,57±0,70* 6,57±0,53*
Катепсин H 8,24±0,39 8,43±1,12 16,03±1,11*
Примечание: * - статистически значимые отличия от группы 1 (р<0,05).
Таким образом, тромбофлебит сопровождается нарастанием активности лизосомальных цистеиновых ка-тепсинов в сыворотке крови, по-видимому, по причине их избыточной секреции в пораженном участке.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Жлоба А.А., Дунаевский В.А. Активность секретируемых форм цистеиновых катепсинов в крови в качестве маркеров тканевого роста // Вопросы онкологии. - 1996. - Т. 42. - № 1. - С. 70-76
2. Barrett A.J., Kirschke H. Cathepsin B, cathepsin H, cathepsin L // Methods in Enzymol. - 1981. - Vol. 80. -P. 535-561.
3. Im E., Venkatakrishnan A., Kazlauskas A. Cathepsin B regulater the intrinsic angiogenic threshold of endothelial cells // Mol. Biol. Cell. - 2005. - Vol. 16. - P. 2991-2890.
4. Ishidoh K., Kominami E. Procathepsin L deggades extracellular matrix proteins in the presens of glycosaminoglycans in vitro // Biochem. Biophis. Res. Commun. - 1995. -Vol. 217. - P. 624-631.
5. Turk B., Turk D., Turk V. Lysosomal cysteine proteases: more than scavengers // Biochim. Biophis. Acta. -2000. - Vol. 1477. - P. 98-111.
6. Urbich C., Heeschen C., Aicher A. [et al.]. Cathepsin L is required for endithelial progenitor cell-induced neovascularization // Nat. Med. - 2005. - Vol. 11. - P. 206-213.
7. Vasiljeva O., Reinheckel T., Peters C. [et al.]. Emerging roles of cysteine cathepsins in disease and their potential as drug targets // Curr. Pharm. Des. - 2007. - Vol. 13. - P. 387-403.
Фомина Шталья Васильевна, ассистент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
Фомина Мария Алексеевна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
Калинин Ролман Евгеньевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 390013, г. Рязань, ул. Чкалова, 10, тел. (4912) 76-20-56, е-mail: ksyusha@mail.ryazan.ru
УДК 577.161.3:615.272
© Л.К. Хужахметова, Л.Г. Сентюрова, 2011
Л.К. Хужахметова, Л.Г. Сентюрова ВЛИЯНИЕ а-ТОКОФЕРОЛА-АЦЕТАТА И ЦИКЛОФЕРОНА НА ОКИСЛИТЕЛЬНУЮ МОДИФИКАЦИЮ БЕЛКОВ У СТРЕССИРОВАННЫХ КРЫС
ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России
В работе представлено изучение динамики свободнорадикальных процессов окислительной модификации белков в плазме крови при стрессогенном воздействии и при фармакологической коррекции (введении а-токоферола, циклоферона) у половозрелых крыс. Выраженный антиоксидантный эффект оказывая комплекс а-токоферол + циклоферон на стрессиро-ванных крыс.
Ключевые слова: а-токоферол, циклоферон, окислительная модификация белков, антиоксидант, стресс.
L.K. Khuzhachmetova, L.G. Sentjurova
INFLUENCE OF а-TOCOPHEROL-ACETATE AND CYCLOFERON ON THE PROTEIN OXIDATIVE
MODIFICATION IN STRESSED RATS
The present research in devoted to the study of the dynamic of free-radical processing oxidative modification plasma proteins of rats brain by the influence stress and pharmacology correction (а-tocopherol, cyclopheron). The complecs а-tocopherol + cyclopheron exerted antioxidantic effects on the stressed rats.
Key words: а-tocopherol, cyclopheron, oxidative, modification proteins, antioxidant, stress.
При стрессе создаются условия для интенсивной выработки свободнорадикальных продуктов, повышения окислительной деструкции белков, липидов. Происходит активация гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы; модуляция иммунной системы, обусловленная апоптозом иммунокомпетентных клеток, снижением активности естественных киллеров, уменьшением сывороточного интерферона.
Цель: изучение динамики свободнорадикальных процессов окислительной модификации белков (ОМБ) в плазме крови при стрессогенном воздействии и при фармакологической коррекции (введение а-токоферол-ацетата, циклоферона) у половозрелых крыс.
Материалы и методы. В эксперименте было использовано 80 белых беспородных половозрелых крыс-самцов (10 мес.), средней массой 360,5 гр. В опыте использованы следующие группы:
1) интактные крысы (контроль); 2) крысы, получавшие масляный 10% раствор а-токоферол-ацетат per os, в течении 2-х недель, в дозе 0,5 мг на 100 гр. массы тела; 3) крысы, получавшие циклоферон (Полисан Спб) в/м, в течение 2-х недель, в дозе 0,77 мг на 100 гр. массы тела; 4) крысы, получавшие совместно 10% массляный раствор а-токоферол-ацетата (0,5 мг на 100 гр.) и циклоферон в/м (0,77 мг. на 100 гр.) в течение 2-х недель; 5) крысы, подвергшиеся иммобилизационному стрессу в пластиковых цилиндрах по 1 часу в день в течение 2-х недель; 6) стрессированные крысы, получавшие предварительно 10% масляный раствор а-токоферол-ацетата в тех же дозах в течение 2-х недель; 7) стрессированные крысы, получавшие предварительно а-
