CC BY
40
7. Чобанян А. Г., Куценко И. И., Колесникова Н. В. Состояние рецепторной функции нейтрофилов периферической крови и перитонеальной жидкости у больных с наружным генитальным эндометриозом 1-11 степени распространения // Материалы 2-го регионального научного форума «Мать и дитя». - Сочи, 2008. - С. 231.
8. Berkkanoglu M., Arici A. Immunology and endometriosis // Am. J. Reprod. Immunol. - 2003. - Vol. 50. - P. 48-59.
9. Carolain E., Cargett, Peter A. W. Rogers. Human endometrium angiogenesis // Reproduction. - 2001. - Vol. 121. - P. 181-186.
Поступила 22.12.2008
Н. П. ЛИСИЦЫНА1, П. А. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ2, Х. П. ТАХЧИДИ3
АКТИВНОСТЬ КОМПОЗИЦИЙ ПРОИЗВОДНОГО (3-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ ТЗ-50-2 С ВИЗИТОНОМ-ПЭГ ПРИ АНЕСТЕЗИИ ПОВЕРХНОСТНЫМ МЕТОДОМ
краснодарский филиал ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава»,
г. Краснодар, ул. Красных Партизан, 6;
2Кафедра фармакологии Кубанского государственного медицинского университета,
г. Краснодар, ул. Седина, 4;
3ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава», г. Москва, Бескудниковский бульвар, 59а. E-mail: kybfarma@rambler.ru
При поверхностном методе обезболивания роговицы глаза кролика сочетание производного p-аминомасляной кислоты ТЗ-50-2 с визитоном-ПЭГ по анестезирующей активности, глубине и длительности обезболивающего эффекта значительно превосходит ТЗ-50-2, приготовленное на физиологическом растворе. Оба сочетания в 0,312, 0,625, 1,25 и 2,5%-ной концентрациях ТЗ-50-2 не оказывают раздражающего действия на роговицу и конъюнктиву.
Сочетания ТЗ-50-2 с визитоном-ПЭГ при содержании в них ТЗ-50-2 в концентрациях 0,3125-2,5% вызывают дозозависимый обезболивающий эффект и сохраняют стабильность (прозрачность растворов).
Ключевые слова: поверхностная анестезия, композиция ТЗ-50-2 + визитон-ПЭГ.
N. P. LISITSINA1, P. A. GALENKO-YAROSHEVSKY2, CH. P. TAHCHIDI3
ACTIVITY OF COMPOSITIONS OF p-AMINOBUTYRIC ACID DERIVATIVE TZ-50-2 WITH VIZITON-PEG IN THE METHOD OF TOPICAL ANESTHESIA
Krasnodar branch of FGU «ISTC» Eye Microsurgery «named after Acad. S. Fedorov of Roszdrav»,
Krasnodar, st. Krasnykh Partizan, 6;
2Department of Pharmacology of Kuban State Medical University, Krasnodar, st. Sedina, 4;
3FGU «ISTC» Eye Microsurgery «named after Acad. S. Fedorov of Roszdrav»,
Moscow, Beskudnikovsky Boulevard, 59 A, e-mail: kybfarma@rambler.ru
When using a method of topical anesthesia of rabbits eye cornea, a combination of derivative of p-aminobutyric acid TZ-50-2 with Viziton-PEG on the anesthetic activity, the depth and duration of pain control significantly exceeds the effect of TZ-50-2 prepared in the physiologic salt solution. Both combinations in 0,312, 0,625, 1,25 and 2,5% concentrations of TZ-50-2 do not cause an irritating effect on the cornea and conjunctiva.
Combinations of TZ-50-2 and Viziton-PEG with the content of TZ-50-2 in concentrations 0.3125 - 2.5% cause dose dependent anesthetic effect and maintain stability (transparency of solutions).
Key words: topical anesthesia, composition of TZ-50-2 + Viziton-PEG.
Известно, что соединение ТЗ-50-2 (лабораторный шифр) обладает выраженной местноанестезирующей (терминальной, инфильтрационной, проводниковой и спинномозговой) активностью, превосходящей таковую лидокаина и тримекаина; представляет интерес для внедрения в практическую анестезиологию [1, 7].
Композиции дикаина, лидокаина и маркаина с вис-коэластиком визитоном-ПЭГ (протектор эпителия гелевый), содержащим 1% гидроксипропилметилцеллюло-зы, индуцируют более выраженную обезболивающую
активность, чем эти местные анестетики, взятые отдельно [3-5, 11].
Цель работы - выявить возможное пролонгирование местно-анестезирующего действия соединения ТЗ-50-2 визитоном-ПЭГ при обезболивании поверхностным методом.
Материалы и методы
Опыты выполнены на 55 белых нелинейных мы-шах-самцах и 34 кроликах (68 глаз) обоего пола массой 0,021-0,032 и 2,6-3,4 кг соответственно.
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (106) 2009 УДК 615.216-2
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (106) 2009
Исследования проводили с учетом Методических указаний по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ [6, 12].
В работе руководствовались статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).
Поверхностную анестезию, вызываемую сочетаниями ТЗ-50-2 + визитон-ПЭГ (В-ПЭГ) и ТЗ-50-2 + физиологический раствор (ФР), изучали в опытах на роговице глаза кролика по методу Ренье-Валета [6, 9], при этом определяли пороговые и эквивалентные анестетические концентрации, индексы Ренье и Валета; параллельно исследовали возможное раздражающее действие по Бе^юаг [13]. Кроме того, при изучении активности ТЗ-50-2 в принятых условиях эксперимента учитывали также следующие временные (в мин) интервалы обезболивания: наступление анестезии, начало и окончание полного обезболивания, общую продолжительность обезболивания.
Острую токсичность сочетаний исследовали (определяли среднюю летальную дозу (ЛД50) по ТЗ-50-2) в опытах на мышах при подкожном введении [8].
Соединение ТЗ-50-2 растворяли в В-ПЭГ (производитель ООО Научно-экспериментальное производство МНТК «Микрохирургия глаза», г. Москва, ТУ-9393-00829039336-2005, регистрационное удостоверение Рос-здравнадзора - ФС 01031475/1140-05) и ФР.
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М. Л. Беленькому [2] и с помощью таблиц Н. Н. Самойлова [10]. Учет
результатов исследований, выраженных в альтернативной форме (определение ЛД50, средних эффективных концентраций (ЭК50) и терапевтических индексов (ЛД50/ЭК50), или широты терапевтического действия), осуществляли по методам В. Б. Прозоровского [8] и М. Л. Беленького [2].
Результаты исследования
При определении пороговой анестетической концентрации оказалось, что для соединения ТЗ-50-2, входящего в состав композиций ТЗ-50-2 + В-ПЭГ, она составляет 0,3125% (индекс Ренье равен 168,5), тогда как для ТЗ-50-2 + ФР - 0,625% (индекс Ренье составляет 183,8). Полный (100%-ный) анестезирующий эффект (индекс Ренье 1300,0) вызывает ТЗ-50-2, приготовленное на В-ПЭГ, в концентрации 2,5%. Сочетание ТЗ-50-2 + ФР ни в одной из исследованных концентраций ТЗ-50-2 (1,25, 2,5 и 5%) не индуцирует полного обезболивания; максимальный индекс Ренье равен 765,1 при концентрации, составляющей 5%.
При применении композиций ТЗ-50-2 + В-ПЭГ, в которых ТЗ-50-2 содержится в 0,625 и 1,25%-ной концентрациях, индексы Ренье равны 444,9 и 916,9, тогда как в условиях использования ТЗ-50-2, приготовленного на ФР, в
1,25 и 2,5%-ной концентрациях - 449,4 и 611,1 соответственно. Индексы Валета для композиций ТЗ-50-2 + В-ПЭГ относительно сочетаний ТЗ-50-2 + ФР, в которых ТЗ-50-2 использовано в 0,625, 1,25, 2,5 и 5%-ной концентрациях, составляют 1,9, 1,9, 2,1 и 1,1; эквивалентные анестетические концентрации равны 0,3298, 0,6644, 1,1682 и 4,3731% соответственно (табл. 1). Следует отметить, что при увеличении концентрации ТЗ-50-2 в сочетании с В-ПЭГ до 5% обезболивающее действие его снижается - индекс Ренье составляет 857,2.
Таблица 1
Сравнительная активность (по индексам Ренье и Валета) сочетаний ТЗ-50-2 + В-ПЭГ и ТЗ-50-2 + ФР при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаза кролика
Концентрация ТЗ-50-21, % Индексы Ренье2 Индексы Валета относительно ТЗ-50-2 + ФР
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ ТЗ-50-2 + ФР
0,3125 168,5 ± 7,1 (151,5 ^ 185,5) - -
0,625 444,9 ± 15,0 (408,8 ^ 481,0) 183,8 ± 7,1 (166,7 ^ 200,8) 1,9 [0,3]
1,25 916,9 ± 35,5 (831,8 ^ 1002,0) 449,4 ± 13,2 (417,7 ^ 481,0) 1,9 [0,7]
2,5 1300,0 611,1 ± 21,8 (558,7 ^ 663,6) 2,1 [1,2]
5,0 857,2 ± 38,4 (766,3 ^ 948,1) 765,1 ± 15,3 (728,4 ^ 801,9) 1,1 [4,4]
++ ++
1 Приготовлено на В-ПЭГ и ФР.
2 Представлены средние арифметические, вычисленные из 8 опытов, со стандартной ошибкой средней.
Примечание: 1. В скобках: круглых - доверительные границы при р = 0,05; квадратных - эквивалентные анестетические концентрации для ТЗ-50-2 при сочетании его с В-ПЭГ. 2. (++) - гиперемия конъюнктивы век, мигательной перепонки, края век и склеры в течение 30-300 мин.
Таблица 2
Сравнительная активность [по ЭК50 и терапевтическому индексу (широте терапевтического действия)] сочетаний ТЗ-50-2 + В-ПЭГ и ТЗ-50-2 + ФР при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаза кролика
Сочетание Местноанестезирующая активность Токсичность 0,5%-ного раствора при подкожном введении мышам Терапевтический индекс
ЭК501, % Относительная ЛД50, мг/кг Относительная Абсолютный Относительный
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 0,8 (0,78 - 0,9) 3,8 856,2 (805,8 - 906,6) 0,9 1074,3 4,1
ТЗ-50-2+ ФР 3,0 (2,6 - 3,5) 1,0 798,6 (744,0 - 843,8) 1,0 264,1 1,0
1При расчете ЭК50 сочетания ТЗ-50-2 + В-ПЭГ взяты индексы Ренье при концентрациях ТЗ-50-2, соответствующих 0,3125, 0,625, 1,25 и 2,5, а при расчете ЭК50 ТЗ-50-2 + ФР - 0,625, 1,25, 2,5 и 5,0%.
Примечание: в скобках - доверительные границы при р = 0,05.
Таблица 3
Сравнительная характеристика временных параметров действия сочетаний ТЗ-50-2 + В-ПЭГ и ТЗ-50-2 + ФР при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаза кролика
Сочетание Концентрация ТЗ-50-2, % Начало анестезии, мин Начало полной анестезии, мин Окончание полной анестезии, мин Общая продолжительность обезболивания, мин
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 0,3125 2,0 3,0 - 15,2 ± 0,4 (14,3 - 16,1)
ТЗ-50-2 + ФР 0,3125 - - - -
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 0,625 1,0 2,0 12,5 ± 0,7 (10,9 - 14,1) 23,1 ± 0,8* (21,2 - 25,0)
ТЗ-50-2 + ФР 0,625 2,0 3,0 - 16,4 ± 0,7 (14,8 - 18,0)
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 1,25 1,0 2,0 42,8 ± 1,3* (39,7 - 45,9) 62,5 ± 2,0* (57,8 - 67,2)
ТЗ-50-2+ ФР 1,25 1,0 2,0 11,7 ± 0,7 (10,1 - 13,3) 22,6 ± 0,9 (20,4 - 24,8)
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 2,5 1,0 2,0 65,4 ± 1,6* (61,6 - 69,2) 76,5 ± 1,3* (73,4 - 79,6)
ТЗ-50-2 + ФР 2,5 1,0 2,0 32,2 ± 1,5 (28,7 - 35,6) 45,3 ± 1,7 (41,2 - 49,4)
ТЗ-50-2 + В-ПЭГ 5,0 1,0 2,0 39,7 ± 1,9 (35,3 - 44,1) 57,3 ± 1,6 (53,5 - 61,1)
ТЗ-50-2 + ФР 5,0 1,0 2,0 36,8 ± 1,4 (33,4 - 40,2) 52,4 ± 1,3 (49,3 - 55,5)
Примечание: в скобках - доверительные границы при р = 0,05.
Сопоставление ЭК50 и широты терапевтического 3,024% и 264,1, т. е. первое сочетание в 3,8 и 4,1 раза
действия выявило, что для композиции ТЗ-50-2 + В- соответственно превосходит второе (табл. 2). Важно от-
ПЭГ они равны 0,797% и 1074,3, а для ТЗ-50-2 + ФР - метить, что композиции ТЗ-50-2 (5%) + В-ПЭГ и ТЗ-50-2
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (106) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (106) 2009
(5%) + ФР оказывают раздражающее действие, характеризующееся гиперемией конъюнктивы век, мигательной перепонки, края век и склеры в течение 30 - 300 мин.
Что же касается этапов местноанестезирующего действия исследованных сочетаний, то установлено, что в пороговой анестетической концентрации (0,3125%) ТЗ-50-2 при сочетании с В-ПЭГ вызывает наступление анестезии через 2,0 мин. Полная анестезия отсутствует. Общая продолжительность обезболивания составляет 15,2 мин.
С увеличением концентрации ТЗ-50-2, приготовленного на В-ПЭГ и ФР, до 0,625% время наступления анестезии при инстилляции образовавшихся сочетаний в конъюнктивальный мешок равно 1,0 и 2,0 мин соответственно. Композиция ТЗ-50-2 (0,625%) + В-ПЭГ индуцирует наступление полной анестезии через 2,0 мин, а окончание полного обезболивания - спустя 12,5 мин, тогда как ТЗ-50-2 (0,625%) + ФР не вызывает полного обезболивания; общая продолжительность анестезии под влиянием первой композиции равна 23,1 мин, второй - 16,4 мин.
Дальнейшее повышение концентрации ТЗ-50-2 до
1,25 и 5% в сочетаниях с В-ПЭГ и ФР приводит к наступлению анестезии и началу полного обезболивания через 1,0 и 2,0 мин; окончание полной анестезии и общая продолжительность обезболивания равны 42,8 и 62,5, 11,7 и 22,6, 65,4 и 76,5, 32,2 и 45,3 мин соответственно, т. е. по последним двум показателям первая композиция в 3,6 и 2,8, 2,0 и 1,7 раза превосходит вторую. В концентрации 5% ТЗ-50-2, как в сочетании с В-ПЭГ, так и с ФР, по времени наступления анестезии и началу полного обезболивания равны (1,0 и 2,0 мин соответственно), а по окончании полной анестезии и общей продолжительности обезболивания - практически сопоставимы (39,7 и 36,8, 57,3 и 52,4 мин). Обращает на себя внимание тот факт, что при переходе концентрации ТЗ-50-2 от 2,5 к 5% в сочетании с В-ПЭГ время окончания полной анестезии и общей продолжительности обезболивания в 1,6 и 1,3 раза соответственно снижается (табл. 3), при этом композиция ТЗ-50-2 (5%) + В-ПЭГ теряет стабильность, становясь мутной.
Таким образом, при поверхностном методе обезболивания роговицы глаза кролика композиция ТЗ-50-2 + В-ПЭГ по анестезирующей активности, глубине и длительности обезболивающего эффекта значительно превосходит ТЗ-50-2 + ФР. Оба сочетания в исследованных концентрациях ТЗ-50-2 (за исключением 5%) не оказывают раздражающего действия на роговицу и конъюнктиву.
Сочетания ТЗ-50-2 + В-ПЭГ при содержании в них ТЗ-50-2 в концентрациях 0,3125-2,5% индуцируют прогрессивно нарастающий обезболивающий эффект; местноанестезирующая активность ТЗ-50-2 (5%) + В-ПЭГ по сравнению с ТЗ-50-2 (2,5%) + В-ПЭГ существенно снижается, при этом композиция теряет прозрачность (мутнеет), т. е. стабильность ее нарушается.
ЛИТЕРАТУРА
1. Авакимян А. А., Ханкоева А. И., Галенко-Ярошевский А. П., Туровая А. Ю., Уваров А. В., Попков В. Л., Попов П. Б., Стодоля Г. А., Тихонов А. В. Сравнительная местноанестезирующая и противо-аритмическая активность некоторых солей замещенного 3-бензи-ламинобутанамида // Кубанский научный медицинский вестник. -1999. - № 1-3 (37-39). - С. 85-88.
2. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 152 с.
3. Галенко-Ярошевский А. П., Варлашкина И. А., Тахчиди Х. П., Малюгин Б. Э., Сахнов С. Н. Повышение обезболивающей активности маркаина путем его сочетания с визитоном-ПЭГ при поверхностной анестезии роговицы глаза // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - № 12 (93). - С. 40-45.
4. Галенко-Ярошевский А. П., Варлашкина И. А., Тахчиди Х. П., Малюгин Б. Э., Сахнов С. Н. Анестезирующее действие сочетания дикаина с визитоном-ПЭГ в условиях поверхностного метода обезболивания роговицы глаза // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - № 12 (93). - С. 45-51.
5. Галенко-Ярошевский А. П., Варлашкина И. А., Фисту-ненко П. С. Обезболивающая активность лидокаина при сочетании его с визитоном-ПЭГ в условиях поверхностной анестезии // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - № 12 (93). -С. 36-40.
6. Игнатов Ю. Д., Червякова И. В., Васильев Ю. Н., Гален-ко-Ярошевский А. П., Жуков В. Н. Методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У. Хаб-риева. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина». - 2005. - С. 364-392.
7. Попков В. Л., Хан В. В., Авакимян А. А., Галенко-Ярошевс-кий А. П., Тюхтенева З. И. Сравнительная активность некоторых N-замещенных аммонийных солей амидов ß-амино-у-оксимасля-ной кислоты в условиях проводниковой анестезии // Кубанский научный медицинский вестник. - 1999. - № 1-3 (37-39). - С. 109 -112.
8. Прозоровский В. Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фармакол. и токсикол. - 1962. - Т. 25. - № 11. - С. 115-119.
9. Прянишникова Н. Т., Шаров Н. А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. - Л.: Медицина. - 1967. - 239 с.
10. Самойлов Н. Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. - Томск, 1970. - 63 с.
11. Тахчиди Х. П., Сахнов С. Н., Мясникова В. В., Галенко-Яро-шевский П. А. (ред.) Анестезия в офтальмологии: Руководство. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство». - 2007. - 552 с.
12. Хабриев Р. У. (ред.). Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -2-е изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина». -2005. - 832 с.
13. Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. - Forsch. -1966. - Bd. 16. - № 5. - P. 623.
Поступила 26.12.2008
