CC BY
42
УДК 618.396-07:616.155.1-074
АДРЕНОРЕАКТИВНОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ В ДИНАМИКЕ РАЗВИТИЯ НЕОСЛОЖНЕННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ И ЛЕЧЕНИИ УГРОЗЫ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ
Б.И. Медведев, И.Н. Помаскин, И. С.Николаева, О.К. Маркина ГОУ ВПО ЧелГМА Росздраеа, г Челябинск
Цель исследования - изучение адренозависимой скорости оседания эритроцитов (А-СОЭ) и адренозависимой осморезистентности эритроцитов (А-ОРЭ) у небеременных женщин, в динамике неосложненного течения беременности, при угрозе преждевременных родов (УПР), а также при лечении УПР гинипралом или сернокислой магнезией. Установлено изменение силы адренергического механизма, в частности повышение его силы при беременности в сравнении с небеременными, а так же в динамике развития неосложненной беременности. В динамике лечения по данным А-СОЭ и А-ОРЭ происходит увеличение силы этого механизма, что можно расценивать, как эффективность проводимой терапии УПР.
Ключевые слова: угрожающие преждевременные роды, осморезистентность, адренореактивностъ, адренорецептор.
Актуальность. Невынашивание беременности в современном акушерстве занимает одно из первых мест среди важнейших проблем. Именно преждевременные роды определяют уровень перинатальной смертности, заболеваемости и инвалидности новорожденных. Частота этой патологии не имеет устойчивой тенденции к снижению, несмотря на многочисленные и высокоэффективные методы диагностики и лечения, разработанные в последние годы. По данным К. Батш (2000) за последние 10 лет частота преждевременных родов увеличилась в среднем на 1,5-2%. Это может быть обусловлено увеличением числа многоплодных беременностей вследствие широкого внедрения вспомогательных репродуктивных технологий. Показатель составляет в развитых странах 5-9 %, в Российской Федерации до 12,0 % . Перинатальная смертность среди недоношенных новорожденных в 30-35 раз выше, чем среди доношенных. Ранняя неонатальная смертность составляет около 60-70 % в этой группе. Мертворождаемость при преждевременных родах превышает этот показатель при родах в срок в 8-13 раз. Проблема недонашивания имеет и социальное значение. Чрезвычайно велики затраты на выхаживание глубоко недоношенных детей с массой при рождении менее 1000 г. Внедрение современных технологий выхаживания детей позволяет снизить перинатальную смертность, но при этом возрастает инвалидность с детства, что так же требует больших финансовых расходов [6].
Установлено, что большую роль в развитии ряда акушерских осложнений, в том числе и при угрозе преждевременных родов (УПР ) играет нарушение адренергического механизма [1, 2, 5, 7, 8]. Для практического акушерства необходимо наличие объективных методов оценки состояния этого механизма. Однако большинство прямых методов определения являются инвазивными и сложными.
Наиболее доступными методами на сегодняшний день являются метод определения адренорецепции мембран эритроцитов по величине их осморезистентности (А-ОРЭ) [4, 8], а так же определение адренозависимой СОЭ (А-СОЭ) в присутствии адренергических средств [3]. Однако отсутствуют данные об изменении адренореактивности мембран эритроцитов в динамике развития неосложненной беременности, а также в динамике лечения УПР.
Целью нашей работы явилось изучение А-СОЭ и А-ОРЭ у небеременных женщин, в динамике неосложненного течения беременности, при УПР, а также при лечении УПР гинипралом или сернокислой магнезией.
Материалы и методы исследования. Обследовано 87 женщин, из них 20 - небеременных женщин -1 группа, 33 - с неосложненным течением беременности на сроке беременности 24-36 недель - II группа, 34 беременных женщин с угрожающими преждевременными родами, получавших магнезиальную терапию (14 человек) - III группа и 20 женщин, получавших терапию бета-миметиками (гинипрал) в течение 4-7 и более дней - IV группа. В формировании клинических групп не участвовали беременные с явлениями гес-тоза, с острым течением экстрагенитальной и генитальной инфекции. Все женщины дали информационное согласие на участие в исследовании.
Обследование пациентов проводили по единой схеме, включающей анализ анамнеза, жалоб, общеклинические и лабоаторные, а также дополнительные методы исследования: оопределение А-СОЭ в присутствии адреналина в концентрациях 10-5—10“ 1 г/мл по методике Е.В. Колобовой и соавт. (1996 г.); определение А-ОРЭ в присутствии адреналина в разведениях 10~5-10-8 г/мл по методу Идельсона ЛИ. в модификации Бабина А.П. 2005 г.; колостроцитограмма (Медведев Б.И., Востренко-ва С.А., 1987); оценка степени зрелости шейки
Медведев Б.И., Помаскин И.Н., Николаева И.С., Маркина О.К.
Адренореактивность эритроцитов в динамике развития неосложненной беременности...
матки (Чернуха, 2003); оценка спонтанной сократительной деятельности (СДМ) матки по наружной гистерографии проводилась по бальной системе от 0 до 3 баллов.
Определение адренозависимой осморезистентности эритроцитов
Кровь в объеме 8 мл получали из локтевой вены с 8-10 часов утра; к ней добавляли 2 мл антикоагулянта (5 % раствор цитрата натрия). ОРЭ оценивали по методу Идельсона Л.И., используя в качестве гипотонического раствора 0,40 % раствор КаС1. Кровь в объеме 0,1 мл добавляли в 2 пробирки с холостыми пробами (одна с 5 мл дистиллированной водой, вторая с 5 мл 1 % раствором КаС1), а также в контрольную пробирку и 6 опытных пробирок. В пробирки с холостыми пробами и в контрольную пробирку добавляли 0,02 мл 0,9 % раствора №01. В опытные пробирки добавляли по
0,02 мл адреналина в возрастающей концентрации соответственно Ю'10, 10" , 10“8, 10~7, Ю-6, 10-5. Затем все пробирки инкубировали в термостате в течение 10 минут при температуре 37 °С в термостате типа ТС-80М-2, после чего во все пробирки, кроме холостых проб, добавляли по 5 мл 0,40 % раствора ИаС1 и повторно инкубировали в течение 30 минут при температуре 37 °С, подвергая в дальнейшем 5-минутному центрифугированию на центрифуге типа ОПН-8УХЛ4 при 2000 об/мин. Для каждой пробирки измеряли оптическую плотность надосадочной жидкости (против надосадоч-ной жидкости, содержавшейся в холостой пробе с
1 % раствором КаС1) на фотоэлектроколориметре типа КФК-2 с зеленым светофильтром при длине волны 540 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Величина оптической плотности надосадочной жидкости опытной пробы выражали в процентах к оптической плотности надосадочной жидкости контрольной пробы.
Определение адренозависимой СОЭ (А-СОЭ)
Цитратную кровь разливали по 0,5 мл в 9 пробирок. Для определения контрольной СОЭ (т.е. в отсутствии адреналина) впервые 2 пробирки добавляли 0,005 мл 0,9 % раствора ИаС1 (2 контрольные пробы). В остальные пробирки с кровью добавляли по 0,05 мл маточного раствора адреналина соответствующей концентрации 10-5, Ю"6, 10'7, 10”8, 10"9, 10“10, Ю-11 г/мл. Полученную смесь из каждой пробирки набирали самотеком в капилляры Панченкова до отметки «0» (0,1 мл). Результат оценивали через 1 час. С этой целью фиксировали величину контрольной СОЭ, а также значения СОЭ для каждой исследуемой концентрации адреналина (в мм/ч) и выражали их в процентах к контрольной СОЭ.
Колостроцитограмма (молозивный тест)
Метод цитологического исследования секрета молочной железы. Секрет получали путем сдавливания молочной железы в области ареолы соска. Первая капля удалялась ватным тампоном, а последующая наносилась на обезжиренное предметное стекло. Готовился нативный мазок. Окраска осуществлялась спиртовым раствором Судана черного В.
Зерна фосфолипидов окрашиваются в темно-синий, почти черный цвет. Общий осмотр мазка производился под малым (об.8х ок. 10), детальное изучение мазка под большим увеличением (об.40х ок. 10). Проводилась дифференцировка зерен по размерам. Крупными считались зерна величиной 7—10 (и, средними 4-6 ц, мелкими до 3 \х. Процентное соотношение рассчитывалось на 100 зерен в поле зрения, в том числе крупных, средних, мелких.
Оценка степени зрелости шейки матки проводилась по специальной шкале, в которой учитывались: консистенция, длина влагалищной части, проходимость цервикального канала и положение шейки матки в полости малого таза. Каждый признак оценивался от 0-2 баллов (максимум 8 баллов). О наличии УПР свидетельствовало число баллов более 3.
Наружная одноканальная гистерография с одновременной записью кардиотохограммы. Оценка проводилась по бальной системе: 0 баллов выставляли при отсутствии СДМ, 1 балл - при наличии редких малых волн, 2 балла - при наличии частых малых волн, и 3 балла - при наличии больших волн. На наличие УПР указывало наличие 2 или 3 балла.
Результаты исследования подвергались количественной обработке методом параметрической статистики с представлением их в виде М ±ш. Различия между количественными показателями оценивали по ^критерию Стьюдента, а между качественными - по критерию хи-квадрат, считая их достоверными при р < 0,05.
Результаты. Характеристика групп. По социальному статусу: высшее образование превалирует в группах III и IV, тогда как во II гр. - среднее. Достоверно чаще беременные с УПР имели отягощенный акушерско-гинекологический анамнез: эрозия шейки матки в 42,1 %, в 36 % - воспалительные заболевания, наличие мед. абортов с осложнением (14,5 %) и самопроизвольные выкидыши (28,3 %).
Достоверно выше во III и IV группах, чем во
II гр. была частота экстрагенитальной патологии (60,25% и 15,8% соответственно). Наличие анемии легкой и средней степени достоверно растет в группах II, III и IV - соответственно 24, 50, 78 %. В IV гр. наличие осложнений в предыдущих беременностях значительно выше, чем во II гр. Так кровотечения на ранних сроках беременности -
20.0 % и 6,1 % соответственно; УПР в I половине беременности - 80,2% и 15,0% соответственно; УПР в II половине беременности -72,2 % и 6,1 % соответственно; токсикоз I половины беременности - 60% и 6,1 %; фето-плацентарная недостаточность - 60,0 % и 15,2 %. Достоверно чаще в III и IV гр. встречались токсикоз 1 половины беременности (58,8 % и 31,3 % во II гр.), УПР в 1 половине беременности (42,0 % и 18,0 % соответственно), фето-плацентарная недостаточность (33,5 % и
12.1 % во II гр.). Значительно чаще наличие ЗППП у женщин в IV гр. - в 70 %, тогда как Ш гр. - 50,0 %, во II гр. - 24,2 %.
Достоверно отличаются III и IV гр. по степени
Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура», выпуск 21
125
Проблемы здравоохранения
выраженности УПР по показателям СДМ (средний балл 2,5 и 3,1 в IV гр., во II гр. 0,8), данных коло-строцитограммы (в IV гр. в 59 % угроза и в 30 % в
III гр., во II гр. в 7 % угроза), состоянию шейки матки (средний балл 4,5 в IV гр., 3,5 в III гр., во II гр. - 1,5). По субъективным ощущениям - в III гр. в 80 % жалобы на тяжесть внизу живота, тогда как в IV гр. помимо выше указанных (в 47 %) беременные предъявляли жалобы на нерегулярное тонизирование матки и боли внизу живота (29,5 % и
35.3 % соответственно). Таким образом, дополнительные методы исследования подтверждают наличие УПР у женщин групп III и IV.
Оценка А-СОЭ показала, что адреналин снижает СОЭ небеременных женщин и женщин с неосложненным течением беременности. При этом впервые отмечено, что степень снижения напрямую зависела от концентрации в среде адреналина, чем она выше, тем на большую величину происходило снижение А-СОЭ. Так, у женщин группы II СОЭ в отсутствии адреналина составила 34,31 мм/ч, при наличии в среде адреналина в концентрации 10"5 г/мл она достигала 32,34 ±1,58 или
95.03 ± 1,39 % от контрольной СОЭ. В среде адреналина концентрации 10"11 г/мл - 27,09 ± 1,58 ,что составило 73,54 ± 2,62 в % к контролю. При анализе полученных данных во всех разведениях адреналина прослеживается дозозависимое снижение СОЭ при снижении концентрации адреналина от 10~5—10-11 г/мл. При УПР - способность адреналина снижать СОЭ уменьшается (10-8-10~п). Более четкая зависимость от дозы адреналина наблюдается в II гр. При анализе абсолютных значений СОЭ достоверные отличия между гр. I, II и III. И здесь прослеживается дозозависимость от концентрации адреналина в гр. II и III. Подтверждены данные литературы о том, что у женщин с УПР снижена и обычная СОЭ и А-СОЭ, т.е уменьшение СОЭ под влиянием адреналина, чем у женщин группы II. Положительный эффект магнезии и ги-нипрала не сопровождается ростом адренореак-тивности эритроцитов, так как лечение направлено на усиление эффективности активации Р-адрено-рецепторов (Р-АР) миометрия, а не на повышение синтеза р-АР или устранение факторов, снижающих в условиях организма эффективность этой активации. При лечении гинипралом существенного изменения в адренореактивности не происходит, хотя во всех разведениях адреналина кроме 10~5 можно наблюдать незначительное снижение А-СОЭ. В динамике развития неосложненной беременности также имеется незначительное снижение А-СОЭ в разведениях адреналина Ю-6, 10~8, 10~9, 10-10, 10“и. В целом эти данные позволяют заключить, что, как и предполагалось ранее, при УПР снижается активация р-адренорецепторов, что приводит к активации сократительной деятельности матки.
Полученные результаты определения адрено-зависимой осморезистентности эритроцитов свидетельствуют о снижении этого показателя при беременности в сравнении с небеременными. В динамике неосложненной беременности проис-
ходит дальнейшее снижение А-ОРЭ, а при УПР она достоверно повышается. Причем степень повышения А-ОРЭ зависит от степени выраженности УПР. При проведении лечения происходит восстановление А-ОРЭ практически до уровня неосложненного течения беременности, однако достоверно во всех разведениях адреналина это происходит только при лечении MgS04.
Таким образом, мы наблюдаем изменение силы адренергического механизма, в частности повышение его силы при беременности в сравнении с небеременными, а так же в динамике развития неосложненной беременности. В динамике лечения по данным А-СОЭ и А-ОРЭ происходит увеличение силы этого механизма, что можно расценивать, как эффективность проводимой терапии УПР. Таким образом, наши исследования подтверждают участие адренергического механизма в динамике развития неосложненной беременности, а так же в механизмах развития УПР.
Литература
1. Гусева, Е.В. fS-адренореактивностъ эритроцитов женщин при нормальных и осложненных родах / Е.В. Гусева, С.А. Дворянский, В.И. Циркин // Акушерство и гинекология —1998. -N9 4.— С. 17—22.
2. Дворянский, С.А. Адренергический механизм на различных этапах репродуктивного процесса у женщин: клинико-физиологические и экологические аспект: автореф. дис. ... д-ра мед. наук / С.А. Дворянский. - М., 1998. - 33 с.
3. Колобова, Е.В. Способ оценки адренореактивности эритроцитов беременных женщин по изменению скорости оседания эритроцитов на фоне их блокады Р-адренорецепторов / Е.В. Колобова, С.А. Дворянский, В.И. Циркин // Патент на изобретение Ru № 2120632 Cl от 20.10.98. Описание изобретения к патенту Российской Федерации. Бюл. N.9 29, 1998.
4. Метод оценки адренореактивности организма ф-арм) у беременных для прогнозирования течения родов / JI.B. Адамян, Т.Ю. Смолънова, И.Г. Длусская и др. // Проблемы репродукции. — 2006. - N9 1.- С. 91-97.
5. Осокина, А.А. Клинико-лабораторная характеристика /3-адренергического механизма при угрозе преждевременных родов: автореф. дис. ... канд. мед. наук/А.А. Осокина. - Киров, 1998. —22 с.
6. Сидельникова, В.М. Преждевременные роды. Недоношенный ребенок / В.М. Сидельникова, А.Г. Антонов. — М.: Гэотар-Мед, 2006. - 454 с.
7. Циркин, В.И. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции) / В. И. Циркин, С.А. Дворянский. - Киров, 1997.-270 с.
8. А beta-2-adrenergic receptor activates adeni-late-cyclase in human erythrocyte membranes at physiological calcium plasma concentration / J.F. Horga, J. Gisbert, J.C. De Agustin et ah //Blood Cell Mol Dis 2000 Jun. - V. 3. -P. 223-228.
Поступила в редакцию 14 января 2009 г.
