CC BY
8
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»
Санкт-Петербург 23-24 июня 2016 г.
метилирование генов БГЯР1 и р151Ш4Ь — у 39 (68,4 %) и 36 (63,2 %) больных соответственно. Следующими по частоте убывания были гены БОХ7, БГЯР4 и БГЯР5 — у 27 (47,4 %), 24 (42,1 %) и 20 (35,1 %) больных соответственно. Одновременное метилирование 3-5 генов было более частой находкой у больных ОМЛ с мие-лодисплазией (7 из 10 больных, 70 %). При анализе числа метилированных генов в группах с разными вариантами кариотипа выявлено, что у больных с нормальным кариотипом и больных с одной или двумя независимыми хромосомными аберрациями чаще обнаруживалось метилирование 2 (32,3 % и 29,4 % соответственно) и 3 (22,6 % и 23,5 % соответственно) генов одновременно. Напротив, метилирование 5 генов чаще выявлялось у больных с множественными хромосомными аберрациями. Следствием этого является значимое различие между больными с на-
личием комплексного и нормального кариотипа, у которых выявлено одновременное метилирование 5 генов: 50,0 % против 9,7 % соответственно (р = 0,022).
Выводы. Аберрантное метилирование генов р15ШК4Ъ, БОХ7 и антагонистов сигнального пути Wnt обнаруживается у большинства больных ОМЛ, что позволяет рекомендовать гипомети-лирующие препараты для лечения больных, которым по разным причинам не может быть назначена интенсивная цито статическая терапия. Обнаружение у большей части больных ОМЛ с миелодисплазией или комплексным кариоти-пом значительного числа генов с аберрантным статусом метилирования может послужить основанием для инициации пилотного исследования по изучению комбинированного лечения 5-аза-цитидина с малыми дозами цитарабина.
Грицаев С. В., Сидорова Ж. Ю., Кострома И. И., Мартынкевич И. С., Тиранова С. А., Свитина С. П., Дрижун Ю. С., Капустин С. И., Бессмельцев С. С.
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
АБЕРРАНТНОЕ МЕТИЛИРОВАНИЕ ПРОМОТЕРНЫХ ОБЛАСТЕЙ ГЕНОВ И ВЫЖИВАЕМОСТЬ БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ С НОРМАЛЬНЫМ КАРИОТИПОМ И ОТСУТСТВИЕМ МУТАЦИЙ
В ГЕНАХ ЕЬТЗ И ЫРМ1.
Выбор интенсивности постремиссионной терапии больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) зависит, прежде всего, от молекулярно-генетических аберраций, отражающих биологический фенотип лейкозных клеток, в частности, чувствительность бластов к лекарственной терапии и риск развития рецидива. Наибольшие трудности возникают в случае нормального ка-риотипа и отсутствия мутаций с установленным прогностическим потенциалом.
Цель. Изучить ассоциацию аберрантного метилирования островков CpG генов БОХ7, р15ШК4Ъ и антагонистов сигнального пути Wnt с общей и безрецидивной выживаемостью больных ОМЛ с нормальным кариотипом и без мутаций в генах FLT3 и ЫРМ1.
Материалы и методы. Изучены клинико-ла-бораторные показатели 57 больных ОМЛ, которые в индукционном периоде получали курсы 7+3. Критерии исключения: острый промиело-цитарный лейкоз и лечение гипометилирующи-ми препаратами до заготовки образцов перифе-
рической крови. Геномную ДНК из лейкоцитов периферической крови выделяли стандартным способом. До проведения исследования образцы ДНК хранили при температуре -20оС. Статус метилирования генов изучали посредством метил-специфической полимеразной цепной реакции.
Результаты. Нормальный кариотип имел место у 31 из 56 больных (54,4 %) с известными результатами цитогенетического исследования. Для решения поставленной цели из данной группы были исключены 8 больных: двое по причине обнаружения мутаций в генах FLT3 и ЫРМ и трое из-за невозможности проведения стандартных индукционных курсов 7+3. Дополнительно больные были стратифицированы на 2 группы по числу генов (БОХ7, р15ШК4Ъ, SFRP1, SFRP4 и SFRP5) с аберрантным статусом метилирования: 0-2 против 3-5. В первую группу вошли 13 больных и во вторую 10 больных. В группе с 0-2 метилированными генами полная ремиссия была достигнута у 9 (69,2 %) больны, у 4 констатирован первично-резистентный ва-
риант. Рецидив ОМЛ развился у 5 больных. Медиана времени наблюдения составила 24 (7-64) месяца. В группе с 3-5 метилированными генами полная ремиссия была диагностирована у 8 (80,0 %) больных, из которых у 4 в последующем развился рецидив. Период наблюдения варьировал от 2 до 96 месяцев, медиана 17 месяцев. Медиана общей выживаемости между больными не различалась: не достигнута в группе с 0-2 метилированными генами и 31 месяц в группе
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XII, № 2, 2016
с 3-5 метилированными генами. Также не различалась и медиана безрецидивной выживаемости: 26,7 и 33,5 месяца соответственно.
Выводы. Число генов с аберрантным статусом метилирования не может рассматриваться в качестве предиктора эффективности лечения больных ОМЛ с нормальным кариотипом и без мутаций в генах FLT3 и NPM1 при назначении в индукционном периоде стандартной схемы терапии 7+3.
Загоскина Т. П.1, Зотина Е. Н.2, Шардаков В. И.2, Криницына Е. Е.2
1 ГБОУ ВПО «Кировская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Киров
2 ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ НАТУРАЛЬНЫХ КИЛЛЕРНЫХ КЛЕТОК У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ
Клиническое течение хронического лимфо-лейкоза (ХЛЛ) крайне гетерогенно. Как показывает практика, стратификация больных ХЛЛ непроста и нуждается в совершенствовании. Известно, что злокачественный рост во многом обусловлен взаимодействием опухоли с иммуно-компетентными клетками. Особенностью ХЛЛ является непосредственное вовлечение в опухолевый процесс клеток иммунной системы. Данные литературы и наши собственные наблюдения указывают на разнообразные нарушения иммунного ответа у больных ХЛЛ, в том числе и системы естественной резистентности организма — натуральных киллерных клеток (КК-клеток). До сих пор не изучалось прогностическое значение взаимодействия клона злокачественных В-лимфоцитов и КК-клеток, которое может отражать клиническое течение болезни.
Целью настоящего исследования явилась оценка прогностического значения соотношения абсолютного числа КК-клеток к абсолютному числу клеток опухолевого клона у больных ХЛЛ.
Материалы и методы. В исследование включено 140 больных ХЛЛ в возрасте от 35 до 82 лет (медиана — 61 год), мужчин было 87 (62 %), женщин — 53 (38 %). У 83 (59 %) пациентов заболевание было диагностировано впервые, из них у 54 (65 %) больных констатирована стадия А, у 20 (24 %) — стадия В и у 9 (11 %) — стадия С по классификации J. Вте1;. Среди обследованных 29 (21 %) пациентов находились в периоде ремиссии заболевания, 28 (20 %) больных имели
рецидив ХЛЛ. Определение иммунофенотипа лимфоидных элементов проводили на проточном цитофлуориметре с использованием специфических моноклональных антител. Определяли величину соотношения абсолютного числа КК-клеток (CD3CD16/56+) к абсолютному числу клона клеток ХЛЛ («КК-клетки/клетки ХЛЛ»). Клетки опухолевого клона выделяли по коэк-спрессии антигенов CD19+, CD5+, CD23+, слабой экспрессии CD20 и CD79b, отсутствию CD10 и FMC7, а также рестрикции легких цепей иммуноглобулинов каппа или лямбда. Результаты представлены в виде средней арифметической и 95 % доверительного интервала (ДИ).
Результаты. У больных ХЛЛ обнаружены достоверные изменения соотношения «КК-клетки/ клетки ХЛЛ». У пациентов с впервые выявленным ХЛЛ соотношение «КК-клетки/клет-ки ХЛЛ» равнялось 0,06 (95 % ДИ: 0,04-0,08). У больных с продвинутыми стадиями заболевания (В и С по классификации J. Вте1;) наблюдалось более выраженное снижение соотношения «КК-клетки/клетки ХЛЛ» по сравнению с пациентами со стадией А. У больных с продвинутыми стадиями соотношение «КК-клетки/клетки ХЛЛ» составило 0,03 (95 % ДИ: 0,02-0,05), тогда как у пациентов с ранней стадией ХЛЛ оно равнялось 0,08 (95 % ДИ: 0,05-0,10) (р = 0,036). При изучении соотношения «КК-клетки/клетки ХЛЛ» в зависимости от этапа заболевания выявлено, что наиболее выраженное снижение данного показателя отмечалось у больных с реци-
