CC BY
39
Таблица б. Показатели ишемии миокарда по данным суточного мониторирования у больных ГКМП с различными генотипами АгдІбЄІу гена 02-АР
1 1 I Ж «к л А п ■— Генотип Arg16Gly Генотип Gln27Glu
1 ЮКсяЗсяТбЛ Ь Arg/Arg Arg/Gly Gly/Gly Gln/GIn Gln/Glu GIh/GIh
Количество эпизодов ишемии 3,6±0,50 3,2±0,48 4,1 ±1,10 3,8±0,54 3,5±0,41 2,7±0,70
Продолжительность эпизодов ишемии, мин 95,5±13,0* 60,5 ±10,2 89,3±19,3 80,7±10,9 77,0±12,9 64,3 ±17,3
* - значимые различия по критерию t-Стьюдента, р<0,05
лиморфных вариантов в 16 и 27 кодонах с такими показателями, как ФК СН по классификации ЫУНА, ИММ, нарушения ритма и степень выраженности ишемии миокарда при суточном мониторирова-нии ЭКГ. Анализ комбинаций аллельных вариантов полиморфизмов генов А0РВ2 показал, что комбинация генотипов С1у16С1у/С1и27С1и ассоциирована с более благоприятной клинической картиной заболевания и степенью выраженности ГЛЖ, тогда как комбинация Агд16Агд/С1п27С1п связана с более тяжелой клинической картиной, более выраженным ремоделированием ЛЖ и наличием значимых нарушений ритма.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что генотип Агд16Агд/С1п27С1п является генотипом «риска» и ассоциируется с возникновением неблагоприятных клинических проявлений заболевания. Комбинация генотипов С1у16С1у/С1и27С1и является протективной и свидетельствует о благоприятном прогнозе заболевания.
Поскольку известно [9], что полиморфные варианты генов р-АР связаны не только с фенотипическими особенностями заболевания, но и с эффективностью лечения р-адреноблокаторами, то очень важно провести исследование ассоциации генетического полиморфизма р-АР с чувствительностью пациентов к лекарственным препаратам, что позволит оптимизировать лечение р-адреноблокаторами у пациентов с ГКМП.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Практический врач. Прил. к журн «Медикал маркет» 1996; 4:4 -> 10.
3. Brodde О.Е. Beta-1 and beta-2 adrenoreceptor polymorphisms: functional impotance, impact on cardiovascular disease and drug responses. Pharmacol Ther. 2008; 117:1-29.
4. Dishy V., Sofowora G.G., Xie H-G et al. The effect of common polymorphisms of the beta-2-adrenergic receptor on agonist-mediated vascular desensitization. N Eng J Med 2001; 345:1030~> 1035.
5. Reihsaus E., Innis М., MacIntyre N., Liggett S.B. Mutations in the gene encoding for the beta
2-adrenergic receptor in normal and asthmatic subjects. Am J Respir Cell Mol Biol. 1993; 8: 334~> -339.
6. MathewC.C. Theisolationofhighmolecularweight eucaryotic DNA. in Walker JMNJ (ed): Methods in Molecular Biology, Clifton: Human Press 1984; 2, № 4:31-34.
7. Aynacioglu A.S., Cascorbi I., Gungor K. and al. Population frequency, mutation linkage and analytical methodology for theArg 16Gly, Gln27Glu and Thr 164lle polymorphisms in the b2-adrenergic receptor among Turks. Br.J. Clin. Pharmacol., 1999; 48, №5:761-764.
8. Флетчер P., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология: Основы доказательной медицины. М.: Медиа Сфера; 2004.347.
9. Johnson J.A., Terra S.G. Beta-adrenergic receptor polymorphisms: cardiovascular disease associations and pharmacogenetics. Pharm Res. 2002; 19, №12: 1779-1787.
1. Sipola P, Vanninen E.,Aronen H.J. et al. Cardiac adrenergicactivityisassociatedwithleftventricular hypertrophy in genetically homogeneous subject with hypertrophic cardiomyopathy. J Nucl Med. 2003; 44:487^493.
2. Моисеев B.C. Достижения и спорные вопросы в изучении кардиомиопатии и миокардитов.
Курбанов Р. Д., Срожидинова Н. 3.
ЗНАЧЕНИЕ Р1Ю12А1.А ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА РРА11Г ПРИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ И МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ
Республиканский Специализированный Центр Кардиологии, г. Ташкент, Узбекистан
Kurbanov R. D., Srojidinova N. Z.
ROLE OF THE PPARr PROI2ALA POLYMORPHISM IN HYPERTENSION AND METABOLIC SYNDROME
Republic Specialized Centre of Cardiology, Tashkent, Uzbekistan
РЕЗЮМЕ
Цель исследования. Изучение Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу среди здоровых лиц и больных АГ узбекской популяции и оценка ассоциации Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу с уровнем АД и процессами сердечно-сосудистого ремоделирования.
Материалы и методы. Обследованы 163 больных АГ и 50 здоровых лиц мужского пола узбекской национальности. Метаболический синдром (МС) устанавливали согласно классификации ЮВ 2005г. Проводились исследования: пероральный тест толерантности к глюкозе, ЭхоКГ с допплерографией, тест с реактивной гиперемией, определение толщины КИМ общей сонной артерии, липидный спектр крови и микроальбуминурии. Рго12А1а полиморфизм гена РРАРу определялся с помощью ПЦР с применением специфических праймеров и рестриктазы.
Результаты. Изучение распространенности Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу показало достоверно большее накопление Рго-аллеля как среди больных с АГ (89,9%), так и среди здоровых лиц (83%). У больных с АГ и МС не выявлено связи между Рго12А1а полиморфизм гена РРАРу и уровнем АД, ММЛЖ, липидов и гликемии. При этом у больных с АГ и МС-носителей Рго-аллеля
SUMMERY
Aim. To study prevalence of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene in Uzbek hypertensive patients and healthy men and its association with blood pressure and cardiovascular remodeling process.
Methods. We observed 169 hypertensive patients and 50 healthy men Uzbek nationality. Metabolic syndrome (MS) was defined according to IDF, 2005. It has been performed oral glucose tolerance test, echocardiography, reactive hyperemia test,definition of common carotid intima-media thickness, lipids, microalbuminuria (MAU). Genotyping of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene was determined by PCR amplification with allele-specific primers.
Results. Analysis of frequency distribution of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene has shown significantly greater accumulation of Proallele both among hypertensive patients (89.9%) and healthy subjects (83%).There was no association between Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene and blood pressure, left ventricular mass lipid and glucose levels in hypertensive patients with MS. It has been revealed higher heart rate and MAU in hypertensive patients with MS-carriers of Proallele as compared with Ala-allele carriers. Genetic risk assessment of MS by multiplicative model of
гена PPARy обнаружены более высокая ЧСС и МАУ по сравнению с носителеями А1а-аллеля гена PPARy. Расчет генетического риска развития МС с использованием мультипликативной модели наследования показал, что наличие Pro-аллеля гена PPARy было связано с повышенным риском (ОШ
1,73 при 95% ДИ 0,89-3,37), а наличие А1а-аллеля -со сниженным риском развития МС (ОШ 0,58 при 95% ДИ 0,30-1,13).
Заключение. Выявлена высокая частота Рго12 аллеля и Pro/Pro генотипа Рго12А1а полиморфного маркера PPARy как у больных АГ с наличием и отсутствием МС, так и у здоровых лиц узбекской национальности. У больных АГ с МС - носителей Pro-аллеля Рго12А1а полиморфного маркера PPARy - вероятность развития МС выше по сравнению с носителями А1а-аллеля.
Ключевые слова: Рго12А1а полиморфизм гена PPARy, артериальная гипертония, метаболический синдром.
В настоящее время широко обсуждается вопрос о роли генетических факторов в развитии метаболического синдрома (МС) и его компонентов, таких как ожирение, дислипидемия и нарушение углеводного обмена, способствующих увеличению риска развития сердечно-сосудистых осложнений. Одну из центральных ролей в регуляции метаболизма липидов и углеводов играют транскрипционные регуляторы липидной природы - ядерные рецепторы, активируемые про-лифератором пероксисом (Peroxisome Proliferator Activated Receptor - PPAR, NRICs) - представляющие собой один из классов лиганд-активируемых факторов транскрипции [1]. После связывания лигандов малой молекулярной массы они активируют транскрипцию генов, контролирующих жировой и углеводный метаболизм.
У животных и человека определены три вида
inheritance has shown that availability of Pro-allele has associated with high risk of MS (OR 1.73, 95%CI 0.84-3.37) but presence of Ala-allele has associated with low risk of MS (OR 0.58 95%CI 0.30-1.13).
Conclusion. It has been found high frequency of Pro-allele and Pro/Pro genotype of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene both among hypertensive patients with or without MS and healthy subjects of Uzbek nationality. Probability of MS development is higher in hypertensive patients with MS-carriers of Pro-allele of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene as compared with Ala-allele carriers.
Key words: Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene, hypertension, metabolic syndrome.
рецепторов, РРАРз: РРАРа, РРАРр/б и РРАРу. РРАРа экспрессируется, главным образом, в тканях с высоким уровнем катаболизма ЖК (печень, мозг, бурый жир, почки, сердце, скелетные мышцы). РРАРу - в белой и бурой жировой ткани, и, в незначительной степени, в сердце и скелетных мышцах. Оба типа рецепторов экспрессируются в сосудистом эндотелии, гладкомышечных клетках сосудов и в макрофагальных пенистых клетках. РРАРб экспрессируются в большинстве тканей [2]. РРАРу является основным фактором регуляции дифференцировки адипоцитов, а также способствует экспрессии белка, транспортирующего жирные кислоты, повышает экспрессию и активность ацетил-КоА-синтазы, фосфатидилинозитол-
3-киназы, увеличивает экспрессию гена адипо-нектина, транспортера глюкозы (СШТ-4), 51Р-1 и
2, подавляет экспрессию гена лептина, участвует
Контактная информация:
Курбанов Равшанбек Давлатович Республиканский Специализированный Центр Кардиологии М3 РУз, директор. Тел.: +998-71 -237-38-1 б(приемная)
Срожидинова Нигора Зайнутдиновна Республиканский Специализирова нный Центр Кардиологии М3 РУз, старший научный сотрудник. Лаборатория Артериальной гипертонии и молекулярно-генетических исследований. 100052, Ташкент, Республика Узбекистан, Ул. Осиё, 4 Тел.: +998-97-804-01-12 Факс: +998-71-234-16-67 E-mail: [email protected]
Таблица 1. Биологические эффекты изоформ рецепторов PPAR [3]
PPAR Экспрессия в тканях Лиганды Функции
PPARa Печень, сердце, почки, скелетные мышцы ЖК (фибраты) Окисление СЖК, противовоспалительный
PPARp/6 Различные ткани ЖК Органогенез (пренатальный период), окисление СЖК
PPARy Адипоциты, макрофаги, сердце, мышцы ПНЖК (глитазоны) Адипогенез, липогенез, регуляция инсулиночувствительности, антипролиферативный
в регуляции белков, разобщающих окислительное фосфорилирование, ингибирует экспрессию в жировой ткани ФНО-альфа, что сопровождается снижением инсулиновой сопротивляемости и улучшением секреции инсулина бета-клетками.
Известны три изоформы продукта гена РРАРу (табл. 1), наиболее изученного рецептора, играющего ключевую роль в дифференцировке ади-поцитов, распределении жировой ткани, балансе энергии, метаболизме липидов и гомеостазе глюкозы [4]. Так, РРАРу1 экспрессируется в организме практически повсеместно, РРАРу2 - в жировой ткани, РРАРуЗ - в адипоцитах, макрофагах, эпителии толстого кишечника.
Человеческий ген РРАРу расположен на хромосоме 3 и охватывает геномный сегмент более 150 кЬ. Он состоит из 9 экзонов (А1, А2, В и 1-6), среди которых две различные изоформы мРНК РРАРу и протеин, РРАРу1 и РРАРу2, образуются с использованием отдельных промоторов и 5 экзонов. мРНК РРАРу1 состоят из экзонов А1, А2 и 1-6 и транслируются из промотора Р2, тогда как мРНК РРАРу2 являются комбинацией экзонов В и 1-6 и транслируются из промотора Р2. Два протеина отличаются присутствием добавочных 28 1МН2-терминальных аминокислот РРАРу2 [5].
Ген РРАРу кодирует гамма-рецептор, который в основном продуцируется в жировой ткани, и индуцирует пролиферацию пероксисом, отвечающих за окисление жирных кислот. Также данный рецептор регулирует дифференцировку адипоцитов и гомеостаз глюкозы (определяет потребность мышечной ткани в глюкозе и ее чувствительность к инсулину), стимулирует синтез и выброс печенью параоксоназы, связывает гипо-липидемические препараты и жирные кислоты, участвует в регуляции костного метаболизма.
Наиболее изученным полиморфизмом гена РРАРу, является Рго12А1а-полиморфизм (гз1801282), представляющий собой замену нуклеотида цитозина - С на гуанин - С в 34 положении экзона В, что приводит к замещению про-
лина на аланин в аминокислотном положении 12 изоформы PPARy2. Тип наследования мутации аутосомно-доминантный, частота гетерозигот в популяциях европейского типа достигает 20%, гомозигот, носителей генотипа GG (что соответствует Ala/Ala) - до 2%. Молекулярные эффекты мутации: при варианте 12А1а активность рецептора понижена, что приводит к угнетению вышеуказанных процессов, повышению уровня общего холестерина и ЛПВП, снижению уровня триглицеридов и повышению чувствительности тканей к инсулину.
В ряде работ продемонстрирована роль Рго12А1а полиморфного маркера гена PPARy в развитии инсулинорезистентности (ИР), сахарного диабета и атеросклероза. Однако роль Pro 12А1а полиморфизма гена PPARy в развитии нарушений углеводного и липидного обмена у пациентов АГ и МС узбекской национальности до настоящего момента не изучено.
Цель исследования: изучить распределение частот генотипов и аллелей Pro 12А1а полиморфизма гена PPARy среди здоровых лиц и больных АГ узбекской популяции и оценить ассоциацию Рго12А1а полиморфизма гена PPARy с уровнем АД и процессами сердечно-сосудистого ремоделирования.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В исследование были включены 163 больных АГ и 50 здоровых лиц мужского пола узбекской национальности. Средний возраст больных составил 45,4±11,0 лет, длительность АГ - 4,9±4,3 лет. МС устанавливали согласно классификации IDF, 2005г. Всем больным проводились: перораль-ный тест толерантности к глюкозе, определение липидного спектра крови и микроальбуминурии. Для оценки параметров внутрисердечной гемодинамики проводилось ЭхоКГ с допплерографией. Эндотелийзависимая вазодилятация (ЭЗВД) оценивалась с помощью теста реактивной ги-
Таблица 2. Частота генотипов и аллелей Рго12А1а полиморфизма гена РРА11у
у здоровых и больных АГ
Все больные АГ (п=163) Больные АГсМС (п=118) Больные АГ без МС (п=45) Здоровые лица (п=50)
Генотипы
Pro/Pro 80,4% 79,7% 82,2% 66%
Pro/Ala 19,0% 19,5% 17,8% 34%
Ala/Ala 0,6% 0,8% 0% 0%
Х2=255,82, df=2, р=0,000 Х2=180,187, df=2, р=0,000 Х2= 118,42; df=1; р=0,000 Х2= 84,50; df=1; р=0,000
Аллели
Pro 12 89,9% 89,4% 91,1% 83%
Ala 12 10,1% 10,6% 8,9% 17%
Х2=411,54, df=1, р=0,000 X2=290,04,df=1, р=0,000 Х2=75,8; df=2; р=0,000 Х2=49,02; df=2; р=0,000
перемни. Толщину КИМ общей сонной артерии (ОСА) определяли с помощью ультразвука высокого разрешения.
Геномную ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови по стандартному протоколу с использованием набора реагентов Diatom ТМ DNA Prep 200 (производство ООО «Лаборатория ИзоГен»), Путем ПЦР-амплификации изучали распределение Рго12А1а полиморфного маркера гена PPARy. ПЦР анализ проводили с использованием набора реагентов для ПЦР амплификации ДНК GenePak ТМ PCR Core (производство ООО «Лаборатория ИзоГен»), Для проведения ПЦР амплификации использовали GeneAmp® ПЦР система 9700 с золотым 96-ячеечным блоком (Applied Biosystems). Для генотипирования Рго12А1а полиморфного маркера гена PPARy использовалась следующая последовательность праймеров:
• Forward primer 5'-ТСТGGG AGATTCTCCTATTGGC-3'
• Reverse primer 5'- CTG GAA GAC AACTAC AAG AG-3'
Амплификацию полиморфных участков гена
PPARy проводили по следующей программе: первый цикл - 94°С/5мин, 35 циклов - 94°С/30сек, 52°С/30сек, 72°С/30сек, последний цикл -
72°С/5мин. ПЦР продукт для Рго12А1а полиморфного маркера гена PPARy имел 154 п.н.
Для идентификации аллелей применялись рестриктаза BstSFI. Пробы выдерживались в течение 2-х часов при температуре 60°С. Конечные продукты расщепления фракционировали с помощью электрофореза в 4% агарозном геле с последующей окраской в растворе бромистого этидия (0,01%) и визуализацией под ультрафиолетовым светом [6].
В результате амплификации фрагмент, состоявший из 154 п.н., соответствовал широко распространенному Рго12 аллелю, а наличие двух фрагментов из 132 п.н. и 22 п.н. - Ala 12 аллелю, наличие трех фрагментов: 154 п.н., 132 п.н. и 22 п.н. оценивалось как гетерозиготное состояние Prol 2/ Alai 2 (рис. 1).
Статистическая обработка полученных резуль-
г э л ь в 1 а 9 1011 12 и и ie te гт us 19 гп 21 гг л и 25
Рис. 1. Результаты RLFP-анализа Рго12А1а полиморфизма гена PPARy.
Таблица 3. Сравнительная характеристика больных АГ и МС с учетом носительства Рго12А1а полиморфного маркера гена РРА11у
Параметры Рго-аллель (п=188) Р А1а-аллель (п=48)
САД, мм рт. ст. 159,9±16,1 0,71 157,3± 14,5
ДАД, мм рт. ст. 102,4±9,6 0,31 100,8±9,6
ЧСС, уд/мин. 79,9±9,3 0,034* 76,5±7,8
иММЛЖ, г/м2 167,3±40,3 0,37 161,8±28,9
ДО, % 4,3±6,0 0,05 6,3±7,5
КИМ, мм 0,99±0,24 0,32 0,95±0,20
МАУ, мг/л 25,1 ±31,5 0,020* 13,9± 15,5
ОХС, мг/дл 222,0±34,8 0,48 217,7±48,1
ТГ, мг/дл 206,0±111,9 0,78 212,0±207,0
ХСЛВП, мг/дл 39,7±6,4 0,18 38,4±6,0
ХСЛНП, мг/дл 142,0±30,7 0,34 137,0±39,1
Глюкоза натощак, ммоль/л 4,9±0,9 0,32 4,7±0,5
татов проводилась по стандартным программам из пакета Statistica 6.0. Оценивалось соответствие числовых данных нормальному закону распределения. Определяли: выборочное среднее арифметическое X; выборочное среднее квадратичное (стандартное) отклонение - SD; результаты представлены X±SD. Для оценки различий между сравниваемыми средними значениями независимых использовали t- критерий Стьюдента. Для анализа достоверности различий между качественными признаками использовали критерий Х2. Рассчитывали относительный риск (OIJJ) с использованием мультипликативной генетической модели. Статистически значимыми считали различия при р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Среди обследованных больных частота встречаемости Рго12 аллеля гена PPARy составила 89,9%, a Ala 12 аллеля - 10,1%, х2=411,54, df=1, р=0,000.У больных АГ Pro/Pro генотип встречался в 80,4% случаев, Pro/Ala генотип - в 19,0%, Ala/Ala генотип - в 0,6% случаях, х2=255,82, df=2, р=0,000.
Распределение Pro 12А1а полиморфного маркера гена PPARy у здоровых лиц было несколько иным, в частности, отмечено отсутствие Ala/Ala гомозигот, преобладание Pro/Pro генотипа (66%) против Pro/Ala генотипа (33%), х2=49,02; df=2; р=0,000, а частоты Рго12 и Ala 12 - аллелей составили 83% и 17%, соответственно (х2= 84,50; df=1; р=0,000).
Среди обследованных больных с АГ МС диагностирован у 118 больных (72,4%). Частота
распределения аллелей и генотипов Pro 12А1а полиморфизма гена PPARy у больных АГ с МС следующей: носительство Рго12 аллеля встречалось в 89,4% случаев, а носительство Ala 12 аллеля - в 10,6% случаев, х2=290,04, df=1, р=0,000. Pro/Pro генотип встречался в 79,7% случаев, Pro/Ala генотип - в 19,5%, Ala/Ala генотип - в 0,8% случаях, Х2=180,187, df=2, р=0,000.
У больных с АГ без МС соотношение Pro/ Рго:Рго/А1а:А1а/А1а-генотипов было 82,2%:17,8%:0 (Х2=75,8; df=2; р=0,000), а частоты Pro 12 и Ala 12 - аллелей 91,1 %:8,9% (х2= 118,42; df=1; р=0,000), таблица 2.
Следует отметить, что распределение частот генотипов среди больных и здоровых лиц соответствовало равновесию Харди-Вайнберга.
Таким образом, выявлено накопление Рго12 аллеля и Pro/Pro генотипа как у больных АГ с и без МС, так и у здоровых лиц узбекской национальности.
В дальнейшем анализ ассоциации Pro 12А1а полиморфизма гена PPARy с показателями системной и центральной гемодинамики, маркерами сосудистого ремоделирования проводился в зависимости от носительства аллелей в группе больных с АГ и МС (табл. 3).
При анализе показателей уровня АД, иММЛЖ, липидов носители Pro- и А1а-аллелей между собой не различались. Уровень гликемии натощак и после нагрузки также не зависела от Рго12А1а полиморфизма гена PPARy. Следует отметить, что у носителей Pro-аллеля гена PPARy выявлена более высокая ЧСС: 79,9±9,3 уд/мин против 76,5±7,8 уд/мин, р=0,034. Носители Рго-аллеля
имели несколько выраженную нарушенную ЭЗВД по сравнению с носителями А1а-аллеля: 4,3±6,0% против 6,3±7,5%, р=0,05. Уровень МАУ также был достоверно высокий в группе больных-носите-лей Pro-аллеля гена PPARy: 25,1±31,5мг/л против 13,9± 15,5 мг/л, р=0,020.
Расчет генетического риска развития МС с использованием мультипликативной модели наследования показал, что наличие Pro-аллеля гена PPARy было связано с повышенным риском (OIJJ
1,73 при 95% ДИ 0,89-3,37), а наличие А1а-аллеля -со сниженным риском развития МС (OIJJ 0,58 при 95% ДИ 0,30-1,13), но без статистической достоверности, р=0,1.
ОБСУЖДЕНИЕ
Частота встречаемости генотипов Рго12А1а полиморфизма гена PPARy изучена в различных популяциях. Во всех популяциях отмечено широкое распространение Рго12-аллеля и Рго/Рго-генотипа. В исследовании G. Sanchez et al., проведенное у испанцев (п=464) распространенность Рго/Рго-генотипа составила 82,9% у мужчин, 83,1% у женщин, гетерозигот - 15,7%, 16,5%, гомозигот по Ala 12-аллелю - 1,4%, 0,4%, соответственно [7]. Исследование, проведенное на датской популяции (п=2245), показало также большее накопление Рго/Рго-генотипа среди лиц с ИР, так и без ИР: 75,5% и 74,2%, соответственно. Распределение гетерозигот среди обеих групп было равномерным: 23,8% и 23%, соответственно. Отмечалось несколько большее накопление Ala/Ala генотипа у лиц без ИР (2,8%) по сравнению лиц без ИР (0,7%) [8]. В азиатских популяциях наблюдается аналогичная картина, но частота А1а12аллеля была значительно ниже. Так, в исследовании J. Yamamoto, проведенное среди японцев - больных с АГ, частота Рго/Рго-генотипа составила 95,1%, Pro/Ala-генотипа - 4,9%, Ala/Ala генотип отсутствовал [6]. Среди китайцев - больных АГ и МС распределение генотипов Pro 12А1а полиморфизма гена PPARy было аналогичным: гомозиготы по Рго12-аллелю - 90,9%, гетерозиготы - 9,09%, гомозиготы по 12А1а-аллелю отсутствовали [9].
По данным Мкртумян А. М.и соавт. частота встречаемости Pro аллеля была выше частоты Ala аллеля в русской популяции. Так, определение частот аллелей Pro и Ala показало, что в группе больных с МС они составили, соответственно, 0,81 и 0,19, в группе лиц без МС - 0,69 и 0,31. При оценке распределения частот генотипов Pro12А1а полиморфного маркёра гена PPARy отмечено, что частоты генотипов Pro/Pro, Pro/Ala и Ala/Ala в группе больных МС составили 0,65, 0,33 и 0,02,
соответственно. В контрольной группе обнаружены следующие частоты указанных генотипов Рго12А1а полиморфного маркёра гена PPARy: 0,52,
0,33 и 0,15, соответственно [10].
По результатам нашего исследования у лиц узбекской популяции также отмечается большее накопление Pro 12 аллеля и Pro/Pro генотипа как у больных АГ с и без МС, так и у здоровых лиц.
Вопрос о влиянии Рго12А1а полиморфизма гена PPARy на риск развития нарушений углеводного и липидного обмена остается открытым, т.к. полученные результаты разноречивые. По данным ряда авторов Рго12А1а полиморфный маркер гена PPARy ассоциируется с уровнем глюкозы, инсулина, липидов, а также с риском развития сахарного диабета [11]. Так, в исследовании L. Dongxia выявлено, что 12А1а-аллель носит про-тективный характер, а носители Pro/Pro генотипа имели более высокий уровень инсулина натощак, индекса HOMA-IR [9]. У больных СД-2 выявлена связь полиморфного маркёра Рго12А1а с увеличением ИМТ [12]. Результаты исследования М. Ghoussaini также свидетельствуют об ассоциации Рго12-аллеля с повышенным уровнем инсулина, индекса HOMA-IR у лиц с ожирением, и носитель-ство данного аллеля увеличивает риск развития сахарного диабета у лиц с ожирением [13]. Схожие данные получены в исследованиях Gonzalez Sanchez [7] и L. Frederiksen [8], где носители 12А1а-аллеля имели большую инсулиночувствитель-ность и лучший липидный профиль по сравнению с носителями Pro/Pro генотипа. В исследовании на мексиканской популяции S.A. Cole и соавт., напротив, доказали явную связь генотипа Ala/Ala с развитием ожирения, что, в свою очередь, является риском развития ИР [14].
Следует отметить, в некоторых исследованиях вышеуказанные взаимосвязи не найдены. В исследовании J. Yamamoto не выявлена ассоциация между Рго12А1а полиморфизмом гена PPARy и инсулиночувствительностью [6]. При изучении различных полиморфизмов (-681 C>G, -689С.Т, Pro12Ala, 1431 С>Т) у лиц с МС французской популяции выявлено, что в отдельности ни один из полиморфизмов не ассоциировался с МС, но специфический гаплотип этих полиморфизмов гена PPARy ассоциировался с повышенным риском МС
[15]. В исследовании, проведённом на датской популяции, S.K. Hansen и соавт. тоже не обнаружили ассоциации данного полиморфизма с СД 2 типа
[16]. Мы в своем исследовании также не нашли ассоциацию с Рго12А1а полиморфизмом гена PPARy и показателями системной и центральной гемодинамики, липидов, гликемии. Но выявлена взаимосвязь между носительством Pro аллеля гена
PPARy и уровнем ЧСС, МАУ.
Согласно полученным данным Мкртумян А.М. и соавт., риск развития МС в русской популяции оказался связан с носительством Pro аллеля (OR = 2,06; Cl -1,30-3,26) и генотипа Pro/Pro (OR = 1,74; Cl = 1,01-3,06) Prol 2Ala полиморфного маркёра гена PPARy [10]. В другом исследовании, проведенной Кобалавой Ж.Д. и др., у больных АГ показано, что у носителей Pro аллеля гена PPARy ИР встречался чаще, чем у пациентов-носителей Ala аллеля. Установлена связь Prol 2А1а полиморфного маркёра гена PPARy со значениями ДАД [17]. По результатам нашего исследования носительство Pro аллеля также связано с риском развития МС (OIJJ
1,73 при 95% ДИ 0,89-3,37), но без статистической достоверности, р=0,1.
Итак, в настоящее время активно обсуждается возможность определения генетической предрасположенности к развитию ИР. Взаимосвязь между генетическими и средовыми при формировании МС является сложной и пока еще недостаточно понятной. Несмотря на то, что окончательно неизвестны все генетические маркёры, развитие высоких технологий позволит производить массовое обследование населения для выявления генетически обусловленной предрасположенности к МС.
ВЫВОДЫ
1. Впервые изучен Prol 2А1а полиморфизм гена PPARy у больных мужчин АГ с наличием и отсутствием МС и здоровых лиц узбекской популяции. Выявлено накопление Рго12 аллеля и Pro/Pro генотипа Pro 12А1а полиморфного маркера PPARy как у больных АГ с наличием и отсутствием МС, так и у здоровых лиц узбекской национальности.
2. Prol 2А1а полиморфизм гена PPARy не ассоциируется со степенью АГ, ГЛЖ, но носительство Pro-аллеля связано с выраженностью ЧСС, МАУ и дисфункцией эндотелия у больных АГ с МС узбекской национальности.
3. У больных АГ с МС - носителей Рго-аллеля Prol 2А1а полиморфного маркера PPARy вероятность развития МС выше (OIJJ 1,73 при 95% ДИ 0,89-3,37), в то время как у носителей А1а-аллеля она существенно ниже (OIJJ 0,58 при 95% ДИ
0,30-1,13), но без статистической достоверности, р=0,1, что требует дальнейших исследований с включением большой выборки больных.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Desvergne В., Michalik L., Wahli W. Transcriptional Regulation of Metabolism //Physiol. Rev. - 2006. -Vol. 86. -P. 465-514.
2. Desvergne B., Wahli W. Peroxisome proliferator-activated receptors: nuclear control of Metabolism //Endocr. Rev. - 1999. -V. 20.- P. 649-688.
3. Kie-Wilk B., Dembinska-Kie A., Olszanecka A., et al. The selected pahtophysiological aspects of PPARs activation. // J. of Physiology and pharmacology -2005; 56 (2): p. 149.162.
4. Semple R.K. Chatterjee V.K., O'Rahilly S. PPAR gamma and human metabolic disease // J. Clin. Invest. -2006. -V. 116(3).-P. 581-585.
5. Cresci S. PPAR genomics and pharmacogenomics: implications for cardiovascular disease// PPAR Research. - 2008. - Vol. 2008. - 11 Pages.
6. Yamamoto J., Kageyama S., Nemoto M. PPARg2 Pro 12Ala Polymorphism and Insulin Resistance in Japanese Hypertensive Patients. // Hypertens Res 2002;25:25-29
7. Gonzalez Sanchez J L, Serrano Rios М., Fernandez Perez C. et al. Effect of the Pro 12Ala polymorphism of the peroxisome proliferator-activated receptor g-2 gene on adiposity, insulin sensitivity and lipid profile in the Spanish population.// European Journal of Endocrinology (2002) 147 495-501.
8. Frederiksen L, Brodbek K., Fenger M. et al. Studies of the Pro12Ala Polymorphism of the PPAR-Gene in the Danish MONICA Cohort: Homozygosity of the Ala Allele Confers a Decreased Risk of the Insulin Resistance Syndrome. //J Clin Endocrinol Metab 87: 3989-3992,2002.
9. Dongxia L., Qi H., Lisong L., Jincheng G. Association of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gene Pro12Ala and C161T Polymorphisms With Metabolic Syndrome.//Circ J 2008; 72:551 -557.
10. Мкртумян А. М., Бирюкова E.B., Маркина H.B. Молекулярно-генетические особенности, характер метаболизма глюкозы и функция эндотелия у больных метаболическим синдромом русской популяции.// Сахарный диабет 2008;4:26-30.
11.SwarbrickM.M., Chapman C.M.L., McQuillan B.M.A. Pro12Ala polymorphism in the human peroxisome proliferator-activated receptor-g2 is associated with combined hyperlipidaemia in obesity.// European Journal of Endocrinology (2001) 144277-282.
12.Vaccaro O. et al. Prol2Ala polymorphism of the PPAR gamma 2 locus modulates the relationship between energy intake and body weight in type 2 diabetic patients // Diabetes Care. - 2007. - Vol. 30, №5. p. 1156-1161.
13.Ghoussaini М., Meyre D., Lobbens S. et al. Implication of the Prol2Ala polimorphism of the PPAR-gamma 2 gene in type 2 diabetes and obesity in the French population. // BMC MrdicalGenetics 2005;6:ll:1471-2350.
14. Cole S. A. et al. The Prol2Ala variant of peroxisome proliferator-activated receptor-G2 (PPARG2) is associated with measures of obesity in Mexican Americans//Int. J. Obes. - 2000. - № 24. - P. 522-524.
15.Meirhaeghe A., Cottel D., Amouyel P., Dallongeville J. Association Between Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Haplotypes and the Metabolic Syndrome in French Men and Women.// Diabetes 2005;54:3043-3048.
16. Hansen SK, Nielsen EM, Ek J, Andersen G. et al. Analysis of separate and combined effects of common variation in KCNJ11 and PPARG on risk of type 2 diabetes. J Clin Endocrinol Metab. 2005; 90(6):3629-3637.
17. Кобалава Ж.Д., Носиков B.B., Толкачева В.В. и др. Клинико-генетические детерминанты нарушений углеводного обмена у больных с артериальной гипертонией и избыточной массой тела. //Кардиология 2005;4:37-43.
Махкамова Н. У., Ходжаев А. И.
ЧАСТОТА ВСТРЕЧАЕМОСТИ И СТРУКТУРА ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ У ЛИЦ УЗБЕКСКОЙ НАЦИОНАЛЬНОСТИ С РАЗЛИЧНЫМИ ПОЛИМОРФИЗМАМИ ГЕНОВ АНГИОТЕНЗИНПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА И
АПОЛИПОПРОТЕИНА Е
Республиканский специализированный центр кардиологии, г. Ташкент, Узбекистан
Makhkamova N. U., Khodjayev A. I.
PREVALENCE AND STRUCTURE OF CEREBROVASCULAR COMPLICATIONS OF ARTERIAL HYPERTENSION IN UZBEK PATIENTS WITH VARIOUS ANGIOTENSIN-CONVERTING ENZYME AND APOLIPOPROTEINE E GENE POLYMORPHISMS
Republic Specialized Centre of Cardiology, Tashkent, Uzbekistan
РЕЗЮМЕ
Целью данной работы явилось изучение частоты и структуры цереброваскулярных осложнений у больных, страдающих гипертонической болезнью, и выявление их взаимосвязи с полиморфизмом генов АПФ и АпоЕ. Для этого обследованы больные обоих полов в возрасте 25-75 лет, страдающие ГБ II и III стадии. Для этого проведено клинико-неврологическое, биохимическое и молекулярно-генетическое исследования для определения полиморфизмов генов АПФ и АпоЕ. Выявлена ассоциированность некоторых полиморфизмов изученных генов с наиболее тяжелыми осложнениями ГБ.
Ключевые слова: артериальная гипертония, цереброваскулярные осложнения, полиморфизм генов ангиотензинпревращающего фермента (АПФ), аполипопротеина Е (АпоЕ).
SUMMARY
The purpose of the given work was frequency and structure studing cerebrovaskular complications at sick suffering hypertensive illness and revailing of their interrelation with polymorphism of genes ACE and APOE. Patients of both sexes at the age of 25-75 years suffering arterial hypertension (AH) 1 and 3 stages are for this purpose surveyed. Clinic-neurologic, biochemical and molekular-genetic research for definition of polymorphisms of genes ACE and APOE is for this purpose conducted. Are revealed to associate some polymorphisms of the studied genes with the heaviest complications AH.
Key words: Arterial hypertention, cerebrovaskular complications, polymorphism of genes angiotensin-converting enzyme (ACE), apolipoprotein E (APOE).
