Значение экспрессии дифференцировочных антигенов, молекул адгезии и Fas/APO в оценке клинического течения множественной миеломы и хронического лимфолейкоза Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Значение экспрессии дифференцировочных антигенов, молекул адгезии и РАБ/АРО в оценке клинического течения множественной миеломы и хронического лимфолейкоза.

(Обзор)___________________________________

Т.А. Митина МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского

о том, что трансэндотелиальная миграция лимфоцитов и их выход в ткани сопровождается потерей клеточных рецепторов, которые остаются в циркуляции в виде растворимых форм селектина и SCD23. Следовательно, высокие уровни селектина и SCD23 могут указывать на активность процесса инфильтрации опухолевыми клетками различных органов. На гомотопическое и гетеротипическое взаимодействие миеломных клеток со сгромальными элементами тканей указано в исследованиях [6,160], показавших, что это взаимодействие происходит между CD38 и CD31, являющимся лигандом CD38 . При этом возникающий сигнал передается на опухолевую клетку, вызывая сдерживание клеточного роста. В то же время отсутствие CD31 экспрессии сопровождается активацией опухолевого роста и CD31(-) фенотип отмечен при более агрессивном течении ММ с наличием в цитологическом субстрате плаз-мобластов. Известно, что ИЛ-6 является аутокринным и паракринным фактором роста ММ. Действие ИЛ-6 на миеломную клетку опосредуется через мембранный ли-гавд CD 126 и молекулу сигнала трансдукции CD 130 [9]. Было показано, что их коэкспрессия встречается в 22% случаев в момент диагноза ММ и возрастает при рецидиве (42%). При рецидиве экспрессия CD126 менялась мало, a CD 130 увеличивалась с 43% до 88%. Следовательно, экспрессия CD130 может расцениваться как фактор неблагоприятного клинического прогноза. Большая роль в стимуляции продукции ИЛ-6 миеломными клетками отводится CD40 .который является лигандом соответствующих маркеров, инициирующих этот процесс [141].

Хорошо известный дисбаланс иммунорегуляторных клеток при ММ (CD4 / CD8) исследован в соответствии с количеством CD57 [64]. Было установлено, что при отношении CD4 / CD8 < 1 увеличивается количество CD57, которые подавляют PWM и ФГА стимулированную пролиферацию, продукцию Ig, и повышают чувствительность к апоптозу лимфоцитов периферической крови. Эти данные более точно объясняют патогенез иммунодефицит-

TJ зучение иммунологического фенотипа опухолевой jl _1клетки при лимфопролиферативных заболеваниях (ЛПЗ), которые включают в себя рад нозологических форм (множественная миелома - ММ, хронический лимфолей-коз - ХЛЛ - неходжскинские лимфомы (НХЛ)), представляется важной проблемой для клинической гематологии. Биологический аспект этой проблемы позволяет более глубоко понять вопросы патогенеза ЛПЗ, оценить связь иммунологического фенотипа опухолевой клетки с изменениями клеточного генома и уточнить характер межклеточного взаимодействия. Клиническое значение этого направления исследований заключается в важности имму-нофенотипической характеристики опухолевых клеток для совершенствования классификаций ЛПЗ и клинической диагностики.

Анализ данных литературы, опубликованных в основном за период 1998-2000 гг. показал, что интерес к этой проблеме остается высоким. Это касается характеристики рада новых дифференцировочных антигенов, антигена ароптоза, отражающего специфическую функцию генома запрограммированную гибель опухолевой клетки и клинико-биологических аспектов экспрессии молекул адгезии на опухолевых клетках.

1. Роль дифференцировочных антигенов в процессах внеклеточного взаимодействия при лимфопролиферативных заболеваниях.

Характеристика дифференцировочных антигенов (CD), проводимая согласно данным «5-th International Workshop on Human Leukocyte Differentiation Antigens, Boston USA» [143] в последние годы пополнилась новыми сведениями. Появилась достаточно важная информация о дифференцировочных антигенах, свидетельствующая об их участии в процессах межклеточного взаимодействия. Так, при ХЛЛ установлено взаимодействие циркулирующих опухолевых клеток с эндотелием сосудов [35]. При этом высказано достаточно важное предположение

ного синдрома, который является ведущим в клинической картине болезни. Показано также [31,132], что (CD45+, VLA5-), циркулирующие предшественники опухоли при ММ имеют более ранний фенотип чем плазматические клетки костного мозга(СШ5-, VLA5+). Важно отметить, что миеломные клетки связываются с эндотелием костного мозга через CD31, который, как известно, является лигандом CD38. Кроме того, указанное взаимодействие может происходить за счет экспрессии молекул адгезии VLA-4 и VCAM-1, N-CAM, CD44. В свою очередь стромальные элементы костного мозга влияют на активность миелом-ной клетки через ИЛ-6, CD 126 и CD 130 взаимодействие. Авторы также отмечают, что при диссеминации плазмо-цитоза плазматические клетки теряют адгезивные молекулы LFA-3, N-CAM, LFA-1, VLA-5. Незрелые циркулирующие предшественники при ММ [CD45+CD49e- (VLA-5)] могут пролиферировать в ответ на действие IL-6 [65]. Очень важно подтверждение роли антигенов клеточной дифференцировки в межклеточном взаимодействии и влиянии на рост опухоли при ХЛЛ. Установлено [99], что на нормальной лимфоидной ткани экспрессия CD27 (семейство рецепторов фактора некроза опухоли) и его ли-гавда CD70 представлена достаточно редко. Коэкспрессия CD27 и CD70 на В-клетках при лимфопролиферативных болезнях расценивается как дисрегуляция, что приводит к подобной аберрантной экспрессии. Так, CD70 найден в 50% В-ХЛЛ, 33% фолликулярной лимфомы, в 71% крупноклеточной В-лимфомы и в 25% случаев лимфомы мантийной зоны. Взаимодействие CD27 и CD70 антигенов между собой и с CD40 влияло на прогрессию этих В-кле-точных новообразований [170].

Новые данные о функции HL А антигенов I и II классов [ 9,166]показывают, что в 2% случаев В-клеточных лим-фом с агрессивным клиническим течением не было экспрессии HLA-антигенов I и II классов.

Связь между этими явлениями закономерна, так как через HLA-антигены реализуется противоопухолевое действие аутологичных натуральных киллеров (NK) иТ-лим-фоцитов, инициирующих апоптотические сигналы. Следовательно, при потере экспрессии этих антигенов опухолевой клеткой, последняя уходит из-под контролирующего влияния противоопухолевого иммунитета. Важно отметить, что описанное биологическое явление имеет клиническое значение. Эти результаты подтверждаются и другими исследованиями [154], где подчеркивается связь экспрессии HLA-антигенов II класса и гибели селезеночных В-лимфоцитов через механизм FAS/FAS-лиганд взаимодействия. Этот феномен подтверждается так же морфологическими исследованиями, в которых обнаруживается инфильтрация опухолевой ткани при фолликулярной лимфоме аутологичными цитотоксическими Т-лимфоцитами, опосредованная HLA-антигенами [145].

Пан-В клеточный антиген CD40, который представлен на опухолевых лимфоцитах при ХЛЛ, в настоящее время рассматривается не только как часть иммунофенотипи-ческого стандарта при подтверждении диагноза заболевания [25,89,96,108]. Установлена его роль в процессах межклеточного взаимодействия через CD40- лиганд (CD 154 на Т-лимфоцитах), в результате чего возникает сигнал на клеточное выживание, что защищает клетку от активации апогтгоза FAS-L и флюдаробином.

Показано так же, что связывание CD40 индуцирует BCL-2 экспрессию и блокирует апоптоз в BCL-2 (-) лимфоцитах зародышевых центров. Опухолевый фенотип при ЛПЗ, который часто характеризуется аберрантной экспрессией дифференцировочных антигенов, по-видимому, является отражением генетических нарушений опухолевой клетки [113]. В этой связи иммунодефицит и аутоиммунные реакции при ХЛЛ могут быть связаны экспрессией дефектного CD79b и коэкспрессией CD5, что снижает функцию антигенпрезентирующих клеток, в то же время взаимодействие CD40 -CD40-L - их активизирует [27]. Исследования с использованием двух и трехцветной иммунофлюоресценции показали, что при ХЛЛ выявлялась двойная аберрантная экспрессия на опухолевых В-лим-фоцитах (CD 19, CD20) Т-клеточных антигенов CD8 и CD5 [111]. Исследования, уточняющие взаимосвязь между экспрессией дифференцировочных антигенов и трисоми-ей-12 при ХЛЛ показали, что данное хромосомное нарушение встречается в атипичных случаях ХЛЛ и связаны с высокой экспрессией CD 11а, CD20, FMC7 и CD38 и хорошей экспрессией lg. При такой иммунофенотипической картине возможен диагноз лимфомы из клеток мантийной зоны [152,62,42]. При ММ отсутствие РАХ-5 гена сопровождалось отсутствием экспрессии CD 19 и усилением опухолевого роста [84].

При сравнительном анализе функции нормальных CD5+ и CD 19+ лимфоцитов и лимфоцитов при ХЛЛ с коэкспрессией CD19+, CD5+, показано, что в опухолевых лимфоцитах при контакте со стромой костного мозга угнетается апоптоз, что играет главную роль в накоплении клеток в костном мозге при этом заболевании [95].

Интересен вопрос об уровнях поражения кроветворных предшественников при ХЛЛ. Одновременный им-мунофенотипический и генотипический анализы [66] показали, что на CD34 лимфоцитах не выявлено маркеров ХЛЛ. Однако при ХЛЛ с трисомией-12, часть CD34+ клеток имели этот генетический маркер опухоли [142]. Изучение и систематизация дифференцировочных антигенов на опухолевых клетках при ЛПЗ имеет большое практическое значение, так как они могут служить мишенью для применения антител против них с лечебной целью. В этой связи важно отметить, что при взаимодействии антител на клеточные линии фолликулярной лимфомы лизис клеток усиливается при добавлении ингибиторов комплемента CD55 или CD59, что может учитываться в клинической практике [97].

Таким образом, проведенный анализ показал, что диф-ференцировочные антигены при ЛПЗ являются не только маркерами клеточных линий, но более широко отражают функцию опухолевых клеток. Установлено их участие в процессах межклеточного взаимодействия и связи со стромой костного мозга. При ХЛЛ у опухолевых лимфоцитов с фенотипом CD 19+, CD5+ при контакте со стромой угнетается апоптоз, a SCD23 принимает участие в трансэндотелиальной миграции лимфоцитов. Показано, что CD40 отражает достаточно широкий спектр клеточных функций. Определена роль CD40 и его лиганда CD 154 в формировании сигнала на выживание опухолевых клеток при ХЛЛ, а так же в индукции BCL-2 экспрессии в лимфоцитах зародышевых центров.

"Г

Взаимодействие CD40, CD27 и его лиганда CD70 является биологической основой для прогрессии ЛПЗ. Стимулирование продукции ИЛ-6 миеломной клеткой происходит при опосредуещем влиянии CD40 и через мембранные лиганды ИЛ-6 CD 126 и CD 130. Интересно, что циркулирующие предшественники при ММ, имеющие более ранний фенотип (CD45+, VLA5-) более чувствительны к стимулирующему влиянию ИЛ-6.

Взаимодействие CD38 и его лиганда CD31 обеспечивают связь опухолевой клетки с эндотелием и сгромой костного мозга, что влияет на особенности клинических проявлений опухолевого роста при ММ.

Изучение иммунологического фенотипа опухолевых клеток при ЛПЗ позволило установить двойную коэкспрес-сию Т-клеточных антигенов CD8 и CD5 на опухолевых В-лимфоцитах при ХЛЛ. Отношение CD4/CD8 < 1 совпадаете повышением количества CD57, что активирует апоптоз в иммунокомпегенгных клетках, вызывая иммунодефицит.

Прослежена связь экспрессии дифференцировочных антигенов с геномом опухолевой клетки. Так трисомия-12 при ХЛЛ совпадает с высокой экспрессией CD 11а, CD20, FMC7 и CD38, а отсутствие РАХ-5 гена при ММ сочетается с отсутствием экспрессии CD 19.

2. Иммунофенотипический диагноз лимфопролиферативных заболеваний.

Стабильно воспроизводимый признак опухолевой клетки, каким является иммунологический фенотип, имеет большое значение не только для понимания патогенеза опухолевого роста, но так же для клинической практики. Результаты изучения проблемы иммунофенотипическо-го диагноза [12,26,40,16,105,102] свидетельствуют о том, что в настоящее время сформулированы диагностические принципы, позволяющие в клинической практике точно проводить дифференциальную диагностику. Согласно этим данным иммунологический фенотип соответствует различным ЛПЗ:

ХЛЛ -ХПЛЛ -Иммуноцитомы -лимфома из клеток мантийной зоны -

ВКЛ-

Фолликулярная лимфома -лимфома из клеток маргинальной зоны(чаще MALT, реже нодальная или селезеночная) -

SlgM\ lgD\ panB*, CDs*, CD23\ CD43\ FMC7‘;

CD5/ , CD23 , FMC7

Slg , panB , CD5 * CD10, CD23, CD43 1;

SlgNT, D , panB , CD5 , CD10 » CD2} > CD43 , CDuc\BCL-2\ циклип D* (причем может быть атипичный вариант с фенотипом CDs', CD23*); CD19 , CD25 » CDilc, CD юз ■> Slg ;

Slg , panB , CD10 , CD5, CD43, CDzS ;

Slg , panB , CDj, CD10, CD13, CD^"^ , BCL-2\C4D,‘.

Приводится так же иммунофенотипический стандарт, позволяющий провести дифференциальный диагноз между типичным ХЛЛ (Slg+/-, CD5+, CD23+, FMC7-, CD79b-) и другими ЛПЗ (Slg+, CD5-, CD23-, FMC7+, CD79b+) [34]. Отмечена важность экспрессии CD22, который имеет низкие значения при ХЛЛ, но высокие при В-клеточных НХЛ [38]. Иммунофенотипический стандарт для дифференциальной диагностики ХЛЛ и других ЛПЗ, предложенный другими авторами [104,45], по существу идентичен изложенным данным [33], причем автор указывает на диагностическую ценность CD79b (SN8), представляющего собой антитело к мембранному протеину В-29. Замена в этом стандарте CD22 на CD79b повышает его диагностические возможности с 91 % до 96%.

В дополнение к уже описанным антигенам, применяемым в дифференциальной диагностике ЛПЗ, изучается экспрессия циклин D1 (cyclin D1) и ее клиническое значение при этих заболеваниях. При типичном ХЛЛ с иммунологическим фенотипом CD5+, CD23+, CD79b- в 30% наблюдений выявлена экспрессия cyD 1, хотя этот антиген является маркером НХЛ из клеток мантийной зоны. Исследования показали, что в случаях cyDl+, ХЛЛ безреци-дивная выживаемость была ниже, чем в случаях ХЛЛ с отрицательными значениями cyDl [107]. Изучение имму-нофенотипических различий между селезеночной лим-фомой из клеток маргинальной зоны (MZCL), селезеночной лимфомой из ворсинчатых клеток (SLVL) и лимфо-мой из клеток мантийной зоны [41,109] по двойной флуоресцентной метке показало, что иммунологический фенотип селезеночных лимфом был практически идентичен: CD5-, CD23-, CD43-/+. В 30% случаев была выявлена CD5 позитивность, a CD 11 с+ фенотип встречался при SLVL.

В то же время иммунологический фенотип при НХЛ из клеток мантийной зоны отличался от такового при SLVL и MZCL: CD5+, CD10-, CD19+, CD23-. Важное диагностическое значение имеют данные тканевого иммунофено-типирования, позволяющие выделить особый вариант В-клеточных лимфом с Т-клеточным обогащением (CD45RO, CD3)+ и (CD20, CD79a)+и (CD 15, CD30) [161], а также исследования установившие иммунологический фенотип (CD20+, clgM/k, CD38+/-) плазмобласгного варианта диффузной крупноклеточной лимфомы имеющей тяжелый клинический прогноз [76].

В качестве важного диагностического антигена следует рассматривать CD10 [106], который разделяет НХЛ на 2 группы: фолликулярного центра и другие. Иммунофено-типическая диагностика распространенности опухолевого процесса является важной для клиники, так как позволяет предпринять более эффективное лечение. Иммуно-фенотипическое исследование СМЖ у больного с симптомами нейролейкоза позволило выявить клоновый лим-фоцитоз[60]. В да* том наблюдении лимфоцитоз был представлен CD19hCD20 лимфоцитами, с отношениемк/1=0.3, что соответствовало фенотипу опухолевых В-лимфоци-тов в периферической крови. Данное исследование позволило исключить вирусный лимфоцитоз и диагностировать опухолевое поражение нервной системы.

Аналогичные результаты получены другими авторами [103] при диагностике лейкемического менингита у больного с В-ХЛЛ. Опухолевый цитоз в СМЖ подтвержден данными иммунофенотипического анализа: CD23+, CD22+, CD5+, к+, который в дальнейшем служил основанием для назначения интратекальной химиотерапии ме-татрексатом.

Клиническое значение экспрессии дифференцировочных антигенов при ХЛЛ можно оценивать не только по факту экспрессии или по факту ее отсутствия, но так же по степени ее выраженности [68,158]. Так уровень экспрессии CD 19 и CD20 был очень низким при ХЛЛ. При высоком проценте CD20+ снижается вероятность диагноза типичного ХЛЛ. Диагностическая ценность CD23 наиболее высокая, a CD20 выше, чем CD 19. При неблагоприятном прогнозе и атипичной картине ХЛЛ интенсивность экспрессии Slg и CD20 была более высокой. Так же было

отмечено [100], что количество С023 и его лиганда СО!\ при ХЛ Л было более высоким на пролимфоцитах, чем на малых лимфоцитах, хотя четких клинических корреляций не было.

Анализ количественной экспрессии С037 при ЛПЗ показал, что при ХЛЛ выявлены меньшие значения этого антигена, чем при других ЛПЗ.

Таким образом, проведенный анализ опубликованных исследований, касающихся иммунофенотипической диагностики ЛПЗ, показал, что данная проблема достаточно активно разрабатывается.

Следует отметить широко используемые в клинической практике иммунофенотипические стандарты для дифференциальной диагностики ХЛЛ и В-НХЛ. Так, хорошо разработана иммунофенотипическая дифференциация ХЛЛ, лимфомы из клеток мантийной зоны, волосатоклеточного лейкоза, селезеночных лимфом из ворсинчатых клеток и клеток маргинальной зоны, В-клеточной лимфомы, обогащеннойТ-лимфоцитами. Введено в клиническую практику понятие количественной экспрессии отдельных дифференцировочных антигенов. Это очень важно для широко используемого метода одноцветной иммунофлюоресценции. За экспрессию какого-либо антигена обычно принимаются его значения выше нормальных показателей или контроля. Однако превышение этих значений может быть минимальным или достаточно выраженным. В связи с этим установлено, что минимальные значения экспрессии СЭ22 характерны для ХЛЛ, а максимальные значения характерны для НХЛ. Аналогичная закономерность обнаружена для СП37. В настоящее время в практику иммунофенотипического диагноза ЛПЗ достаточно широко вошли такие антигены как С079Ь, С011с, Су01иС010.

5. Иммунологический фенотип и клинический прогноз при лимфопролиферативных заболеваниях

Клиническое значение иммунофенотипирования заключается не только в диагностической ценности данного метода, но так же в определении прогностического риска при экспрессии отдельных дифференцировочных антигенов. Экспрессия (Ю20 при ММ ассоциировалась с низкой выживаемостью [138], а С014+ ММ характеризовалась более тяжелым течением, что объясняется повышенной продукцией ИЛ-1 [73]. При В-ХЛЛ отмечена взаимосвязь между количеством СО 14+ и выживаемостью больных. Количество СО 14+ лимфоцитов больше чем 5* 109/л соответствовало выживаемости 63 месяца, при меньшем количестве выживаемость составила 136 месяцев [28].

Анализ клинических данных показал, что при типичном ХЛЛ с иммунологическим фенотипом С019+, С05+, СБ23+ в определенном числе наблюдений отмечается экспрессия СБ1 1Ь, С014, СБ25, РМС7. Однако клинически значимой является экспрессия СО 14, которая связана с более тяжелым течением болезни [29].

Анализ количества С04 лимфоцитов крови при ММ показал, что превышение уровня 395 кл/мкл связано с большей выживаемостью. При этом отмечен достаточно высокий уровень СО 19, что указывает на сохранность иммунитета и коррелировало с большой выживаемостью. Кроме того, СЮ4511А+, являясь подклассом хелперов, про-

дуцирует интерферон-гамма и ИЛ-2. Химиотерапевтическое лечение, направленное на подавление опухолевого клона, угнетает так же иммунитет, что может способствовать не только присоединению инфекций, но и прогрессированию болезни [82, 83,114,159]. Повышение уровня растворимого (SCD23) при ХЛЛ (A-стадия) связано с высоким риском прогрессии заболевания [54,148]. Так же как и при ММ CD20 имеет важное прогностическое значение при ХЛЛ. Причем для клинического прогноза важен не только сам факт экспрессии этого антигена на опухолевых клетках, но и его плотность (количество молекул на клеточной поверхности). Было установлено [47], что при плотности CD20 > 17.9* 103 молекул 8-летняя выживаемость составляла 43%, при меньшей плотности аналогичные показатели были зафиксированы в 73% наблюдений.

Примерно 25% случаев ХЛЛ имеет атипичный фенотип (CD5-HJTHSlg++ или FMC-7+) и в этих случаях выживаемость была достоверно короче [46,67]. Причем хромосомные аномалии (трисомия-12) были выявлены в обеих группах, что указывает на их невысокую прогностическую значимость. Более агрессивное течение В-ХЛЛ было связано с коэкспрессией CD8+CD57+, где с помощью PCR была доказана олигоклональносгь Т-лимфоцитов [ 149]. В то же время, различая два варианта ХЛЛ типичный и атипичный по иммунологическому фенотипу, не было установлено существенных клинических различий [43]. Выживаемость при типичном ХЛЛ составляла 7 лет (Me), при атипичном варианте (FMC-7+, Slg++, CD72+, CD11а+, CD1 lc+, CD49d+) - 8,2 года (Me).

Сосуществование двух клеточных популяций, различных по иммунологическому фенотипу, (CD56+ TCRyS+ и CD56+ TCRyS-) выявлено у больного с агрессивным течением лимфомы [30]. Растворимый CD38 в костном мозге при ММ может рассматриваться как прогностический фактор тяжелого течения заболевания, так как выявлена обратная корреляция с уровнем гемоглобина [63,118].

Идентичные результаты, касающиеся прогностического значения CD38 при ММ, получены и другими авторами [133]. Была установлена обратная корреляционная зависимость между CD38+ лимфоидными и миеломными клетками костного мозга и выживаемостью. Сильная экспрессия на миеломных клетках CD38 может прогнозировать развитие неврологических осложнений при ММ (периферическая полинейропатия и радикулопатия). Интересно, что при этом отсутствует экспрессия нейроадгезивной молекулы CD56 [ 117,162]. Известно так же, что CD38 при ММ экспрессирован на CD8 Т-лимфоцитах, которые имеют фенотип хронических активированных Т-клеток памяти (CD38+, HLA-DR+, CD25-, CD45RO, СВ28-). При этом CD38+ лимфоциты имеют сниженную киллерную активность, за счет частичного блокирования активных рецепторов, что ведет к прогрессированию болезни [15].

Как известно [1,2,3,6] CD38 рассматривается как лим-фоплазмоцитарный антиген и является достоверным диагностическим и прогностическим маркером ММ. В то же время он может бьггь экспрессирован на активированных Т-лимфоцитах. Оценка экспрессии CD38 на Т-лимфоцитах как активационного антигена имеет важное клиническое значение. Так при спокойном течении ХЛЛ коли-

чество Т-лимфоцитов с фенотипом CD25+ CD38+ HLA-DR+ было значительно меньше, чем при XJIJ1 с прогрессированием [124]. Установлена сильная отрицательная корреляция между CD25, CD38 экспрессией и временем без прогрессии.

Низкий риск прогрессии (15%) установлен при количестве CD25+лимфоцитов < 15% и CD38+ лимфоцитов < 30%. Длительность времени без прогрессии (Me) составляла 50 месяцев против 12 месяцев в контроле. Важное клиническое значение имеет экспрессия CD25 и Я. легкой цепи lg у больных с лимфомой мантийной зоны [57]. При этом установлено, что экспрессия указанных маркеров совпадала с короткой выживаемостью.

Большое прогностическое значение при XJI J1 имеет экспрессия циклин D1, который является маркером лим-фомы из клеток мантийной зоны. Однако этот антиген может быть экспрессирован в 32% случаев ХЛЛ [107]. При этом выживаемость без прогрессирования была значительно короче, чем в случаях ХЛЛ с типичным иммунологическим фенотипом, где нет экспрессии циклин D1.

Таким образом, анализ экспрессии часто используемых в гематологической практике дифференцировочных антигенов в аспекте клинического прогноза, показал высокую ценность этого направления исследований.

Проанализированные дифференцировочные антигены при ХЛЛ, ММ, НХЛ: СВ20, CD14, CD19, CD4, CD23, CD5, Slg, FMC-7, CD8, CD57, CD25, CyDl во многом определяют особенности клинического течения заболеваний. Высокие значения CD20 при ММ и ХЛЛ выявляются у больных с низкими показателями выживаемости. Повышенное количество CD14 клеток при ММ и ХЛЛ свидетельствует о плохом клиническом прогнозе, который заключается в тяжелом клиническом течении и короткой выживаемости. Важное диагностическое значение имеет количество CD4 позитивных клеток (>395 в/мкл), что соответствует о более длительной выживаемости при ММ.

Прогрессирующее течение ХЛЛ связано так же с повышенной концентрацией SCD23 и экспрессией CyDl опухолевыми лимфоцитами и коэкспрессией CD8+ и CD57+. Важным для клинической практики является определение CD38 и CD25 при ММ и ХЛЛ. Так, высокий процент CD38+ лимфоцитов с высокой вероятностью может прогнозировать короткую выживаемость и развитие неврологических осложнений при ММ, а высокая экспрессия CD25 и CD38 маркеров при ХЛЛ связана с короткой безрецидивной выживаемостью. При НХЛ из клеток мантийной зоны экспрессия CD25 и А на лимфоцитах выявляется у больных с короткой выживаемостью. Такая же закономерность наблюдается при ХЛЛ с атипичным (CD5-или Slg++ или FMC-7+) фенотипом.

4. Иммунофенотипическая характеристика остаточной опухоли при лимфопролиферативных заболеваниях.

Изучение иммунологического фенотипа при ЛПЗ имеет важное значение не только для понимания патогенеза опухолевого роста, проведения дифференциального диагноза и определения клинического прогноза, но и для точной характеристики объема остаточной опухоли в процессе химиотерапевтического лечения.

При ММ количество циркулирующих в крови В-пред-шесгвенников опухолевых плазмоцитов может служить критерием эффективности противоопухолевой химиотерапии. С помощью РСЯ-анализа показано [126][127], что при ММ 30% циркулирующих СО 19+ лимфоцитов принадлежала к опухолевому клону. После аутологичной трансплантации стволовых клеток количество СО 19+лимфоцитов снизилось до 14%. При этом большая часть их была нормальной. Только около 1 % этих клеток имела ЯСЯ-характерисгики опухолевого клона. Очень важным фактом в этом наблюдении является отсутствие признаков опухолевого клона на СВ34 лимфоцитах, что фактически делает возможным аутологическую пересадку стволовых клеток.

По существу аналогичные результаты были получены и другими авторами [135]. С помощью количественного аллель - специфического о лигонуклеотидного КСЯ-ана-лиза, основанного на лимитирующих разведениях, изучали наличие лимфоцитов опухолевого клона в СВ20+ и СБ19+ фракциях лимфоцитов крови при ММ.

Исследования провели у больных в ремиссии и рецидиве после высокодозной химиотерапии и пересадки стволовых клеток периферической крови. Было установлено, что в ремиссии во фракции СБ20+ лимфоцитов было мало опухолевых клеток (0-7 в 1 мл), но несколько больше чем в СОЮ- фракции. При рецидиве число опухолевых клеток повышалось во фракциях С020+ и СЭ20-.

Анализ неклоновой популяции СБ19+, С038- предшественников антителопродуцентов при ММ [128] показал, что их количество было снижено при рецидиве и повышалось в фазе ремиссии. Приведенные результаты свидетельствуют об иммуносупрессии, связанной с опухолевым процессом, а проводимая противоопухолевая химиотерапия снимает супрессивное влияние опухоли на иммунитет. В то же время противоопухолевые препараты могут избирательно подавлять определенные звенья иммунитета. Это касается флюдарабина и СБА, применение которых при ХЛЛ сопровождается значительным снижением СЭ4+ лимфоцитов и повышением частоты инфекций [54,81,90,74,72], что служит основанием для применения в этих случаях ингаляций с1§А [16].

Противоопухолевая химиотерапия при ММ и МГВ подавляет Т-лимфоциты. Установлено [131], что при этом угнетаются наивные (СБ4+, С045ЯА+) и клетки памяти (С1>4+, СЕ)4511о+). Лечение ММ ТаШопМ сопровождается повышением С08+ в крови и костном мозге, что совпадало со снижением СЭЗВ/СО138 и СБ20/С0138. Изменялись так же СОЗ/СЕ)69, СОЗ/НЬА-ОЫ [55].

Для пересадки аутологичных стволовых клеток при ММ важно чтобы маркеры опухолевого клона отсутствовали не только в С034+ стволовых клетках, но и в продуктах афереза, что определяется с помощью иммунофеноти-пического исследования [98]. Было установлено [110], что при истощении продуктов афереза мышиными антителами против СБЮ, СЭ19, СОЮ, С022, С037 антигенов в них обнаруживались лимфоциты опухолевого клона по данным РСЯ-анализа. Клинический анализ показал, что при пересадке с достаточно большим количеством лимфоцитов опухолевого клона достигалась частичная ремиссия с ранним рецидивом. При пересадке чистой фракции ство-

ловых клеток с минимальным количеством лимфоцитов опухолевого клона достигались полные и частичные ремиссии. Это очень важный факт, подтверждающий существующее положение о генерализации ММ, которая обусловлена циркулирующим клоновыми В-лимфоцитами.

Иммунофенотипическая идентификация С034 является важным фактором развития проблемы аутотрансплантации стволовых клеток при ММ. Было установлено [127], что у больных предлеченных мелфоланом резко снижено количество стволовых (СО 34+) клеток, что ограничивает возможность применения аутологичной трансплантации в этих случаях. Частое развитие неврологической симптоматики при ЛПЗ обусловило интерес к иммунофеноти-пической диагностике клеток СМЖ, которое позволяет идентифицировать там лимфоциты опухолевого клона. На этом основании осуществляется диагностика опухолевого поражения ЦНС при ММ и ХЛЛ и оценка остаточной опухоли при интратекальной химиотерапии [4,70,60,103]. Применение иммунофенотипического анализа в процессе лечения ХЛЛ цитостатиками и антителами против В-лимфоцитов позволило установил, важность количественного определения С05, С020 [60,32,155], а так же отношение С05+, СЭ19+ (по двойной метке) к СО 19+ - общим [104] для идентификации остаточной опухоли. На основании полученных данных была выявлена зависимость между объемом остаточной опухоли и клиническим течением болезни. Следует отметить, что полученная ремиссия на стандартной противоопухолевой химиотерапии характеризовалась достаточно большой остаточной опухолью по С05+, С019+/С019- отношению, а после трансплантации опухолевых клеток не было. Эго соответствовало клиническим результатам по длительности ремиссии: 6 и 33 месяца. Аналогичные результаты приводятся и другими авторами [21,8 8]. Было установлено, что клиническая ремиссия при ХЛЛ сопровождалась снижением СО 19+/С05+ и повышением С019-/С05+ лимфоцитов, а при лечении ИЛ-4 увеличивалось количество С095 лимфоцитов. Подтверждение супрессивного эффекта реактивного Т-кле-точного клона при рефракторной анемии В-Х Л Л [169] позволило обосновать назначение циклоспорина с хорошим клиническим результатом.

Таким образом, проблема иммунофенотипической идентификации остаточной опухоли имеет важное значение для понимания патогенеза и оптимальной терапии ЛПЗ, включая использование антител против В-лимфоцитов [85]. Показано, что количество С020+ и С019+ лимфоцитов крови отражает величину остаточной опухоли при ММ и связано с длительностью ремиссии. Наступление ремиссии сопровождается так же повышением СО 19+ и С038+ лимфоцитов, не относящихся к опухолевому клону.

При проведении аутологичной пересадки стволовых клеток при ММ необходимо очищение продуктов афере-за антителами к В-линейным антигенам, что позволяет исключить примесь опухолевых клеток и улучшить результаты лечения. Исключительно важными для проблемы аутологичной пересадки при ММ являются данные, свидетельствующие об отсутствии иммунофенотипических и генетических признаков опухолевого клона у С034клеток. Кроме того, у больных ММ леченых мелфаланом количество стволовых С034клеток значительно снижено, что

делает невозможной аутологичную пересадку стволовых клеток, а лечение флюдарабином и CDA ХЛЛ избирательно подавляет CD4, что создает предпосылки д ля развития тяжелых инфекций.

Оценка остаточной опухоли при ХЛЛ с помощью CD5+, CD19+/CD19+- общим более информативна, чем анализ по одному антигену. Иммунофенотипическая характеристика клеток СМЖ при ММ и ХЛЛ, осложненных внутриспинальным опухолевым ростом, позволяет уточнить диагноз и оптимизировать интратекальную химиотерапию этих осложнений.

II. Молекулы адгезии, биологическая роль и клиническое значение при лимфопролиферативных заболеваниях

Изучение экспрессии молекул адгезии при ЛПЗ одного из важных аспектов патогенеза опухолевого роста представляет исключительный интерес для клинической гематологии. В настоящее время разработаны их классификации с учетом биологической функции, обозначения в системе CD и взаимодействия с предполагаемыми лигандами [24,39,91,134,139,168, 121].

Выделяются несколько групп молекул клеточной адгезии (САМ) [156,7,147]. К группе семейства генов lg отно-сятся1САМ-1 (CD54), РЕСАМ-1 (CD31), LFA-3 (CD58). Для CD54 предполагаемыми лигандами могут быть LFA-1, MAC-1 (CD1 lb/CD 18), а для CD58 - LFA-2. К семейству интегринов относятся VLA-4 (а4Ы) - CD49d/CD29, VLA-5 (a5bl), LFA-1 (а4Ь2) - CD1 la/CD18, Vn - рецептор (а4ЬЗ) -CD51/CD61. Для CD49d/CD29 предполагаемыми лигандами могут быть фибронектин, VCAM-1. Для CD1 la/CD18 лигандами считаются ICAM-1. Кроме этого выделяется L-селектин - CD62L с лигандами CD 15 и CD65, протеогликан (HCAM-CD44) с лигандной активностью к коллагену и ги-алуроновой кислоте.

Более подробная классификация в системе CD семейства интегринов представлена в материалах «5-th -International Workshop on Human Leucocyte Differentiation Antigens» [143]. К семейству интегринов относятся антигены VLA1-6cLl-6цепями, что соответствуетCD49a-f. В данной классификации к молекулам адгезии отнесены CD 15s, СЕЖ, CD44R (эпитоп CD11), CD50 (ICAM-3), CD 102 ICAM-2), CD 103, CD104 (Ь4интегрин), CD51/61, CD62e (Е -селектин), CD62 L и Р.

Изучение взаимодействия дифференцировочных антигенов и молекул адгезии при ЛПЗ позволяет получить новые данные о межклеточном взаимодействии при этих заболеваниях. Так при ХЛЛ ключевой диагностический дифференцировочный антиген CD23 через систему лигандов взаимодействует с семейством 32 - интегринов. В культуре лимфоцитов показано, что взаимодействие CD23 и CD18 (LFA-1) регулирует гомо и гетероклеточную агрегацию, что может контролировать клеточный рост при ХЛЛ [13].

При ММ, осложненной почечной недостаточностью, показана высокая экспрессия рецепторов ляминина (CD49b,f) и дефицит рецепторов фибронектина (CD49d,e). Поражение почек может быть обусловлено взаимодействием Р, цепей интегрина плазматических клеток и белками эксграцеллюлярного матрикса почек [77,59].

>;

Изучение широкого спектра молекул адгезии на лимфоцитах крови и лимфоидных элементах костного мозга при плазмоклеточной лейкемии, включающих CD11а (LFA-la), CD18 (LFA-lb), CD1 lb, CD29, CD49d, CD44(H-CAM), CD54 (ICAM-l), CD56 (N-CAM), позволило выявить отличия от типичной ММ. При Плазмоклеточной лейкемии были повышена экспрессия CD38, CD54, CD 138 и снижена CD 18 и CD 11 [146,92]. На наш взгляд это очень важное положение, позволяющее понять сущность диссими-нации опухолевых процессов вообще. Для XJIJI доказано [36,136], что экспрессия ICAM-l (CD54) и VCAM (CD106) отсутствует на лимфоцитах и достаточно отчетливо представлена в сосудах и строме селезенки. На основании этих данных можно предполагать, что накопление клеток в тканях (органомегалия) происходит за счет взаимодействия стромальных молекул адгезии и их лигандов на опухолевых клетках (CD 11, CD 18), что вызывает блокирование апоптоза [95]. В соответствии с этими рассуждениями при плазмоклеточной лейкемии снижение экспрессии CD 18 и CD11 на опухолевых клетках, являющимися лигандами тканевых ICAM-l (CD54), может обуславливать их слабую адгезию к строме костного мозга и выход в циркуляцию.

Сравнительное изучение молекул адгезии на лимфоидных элементах крови и костного мозга у больных ММ и здоровых лиц выявило существенные различия [ 123]. Количество CD54 и CD56 было больше, чем в контроле и в костном мозге и крови, a CD 18 снижены и в костном мозге и в крови. Это указывает на имеющиеся нарушения экспрессии СЕЖ(H-CAM),CD54 (ICAM-l), CDlla(LFA-la), CD18 (LFA-lb), CD56 (N-CAM), что предполагает нарушение взаимодействия между опухолевыми клетками и стромой. Отмечено так же, что Т-клеточный лимфопоэз зависит от взаимодействия адгезивных молекул со стромой костного мозга и адгезия CD4+ CD8 + происходит за счетС01 la, CD49d, CD90 [167].

Исследования экспрессии молекул интегрина на опухолевых клетках при диффузной крупноклеточной лим-фоме выявило четкую зависимость с клиническими данными [153]. Отсутствие экспрессии а2 - а4 и Р, цепей интегрина было связано с достоверно большей 5-летней выживаемостью.

Очень важные клинические характеристики были получены при изучении острого миелобласгного лейкоза в зависимости от степени экспрессии CD lib, CD54, CD31, CD58 [17,53,140,119]. Экспрессия CD1 lb на опухолевых клетках была характерна для моноцитоидных вариантов OMJI и была связана с более короткой выживаемостью, а экспрессия CD54 в ремиссии свидетельствовали о минимальной остаточной опухоли.

Большое клиническое значение имеет определение в сыворотке крови растворимых молекул адгезии при ЛПЗ [75]. Изучение сывороточной концентрации SICAM и SVCAM у больных с НХЛ установило повышение уровня этих показателей (753 ng/ml и 1792 ng/ml-при норме 157и 378 - соответственно). У больных с промежуточной или высокой степенью злокачественности эти уровни значительно выше, чем в группе низкого малигнитета, и зависели от ответа на терапию и коррелировали с уровнем ЛДГ [137,165].

При ХЛЛ концентрация БУСАМ-1 достоверно различалась по стадиям А, В, С, и составляла 2079± 1383, 2826±1577,3882±1067 (п§/ш1). Корреляционный анализ (Брегтап) показал высокую корреляцию БУСАМ-1 и БГСАМ-1, которая составляет 0,58. Корреляции так же отмечены между ЛДГ и81САМ-1 (0,3). Учитывая изложенные данные, очевидно, что растворимые молекулы адгезии, которые являются, по-видимому, продуктом протео-лиза клеточных молекул, могут служить интегральным критерием массы опухоли при ХЛЛ. Экспрессия адгезивных молекул на опухолевых клетках при ХЛЛ может сочетаться с делецией 11 g и 6с[ и массивной лимфоаденопа-тией [115,56]. Следует подчеркнуть, что при ХЛЛ адгезия опухолевых клеток к строме костного мозга бьша значительно ниже, чем у здоровых лиц. Полученные результаты могут объяснять лейкемические варианты болезни [86]. Большой интерес для клиники представляют работы, изучающие влияние преднизолона на экспрессию молекул адгезии на циркулирующих моноцитах [52]. После назначения преднизолона значительно снижалась экспрессия 1САМ-1(С054),У1А-4(С049<1)ЛРА-3(С058).Этам объясняется противовоспалительное действие преднизолона, прерывающего контакты клеточных элементов, принимающих участие в воспалительных процессах.

Установлено, что при ММ экспрессия адгезивных молекул на опухолевых клетках С044-9у (изоформа СЕЖ) является важным прогностическим фактором, регулирующим адгезию к стромальным клеткам костного мозга [87]. Это связано с тем, что адгезивные молекулы влияют на продукцию ИЛ-6, который является аутокринным и паракринным фактором роста миеломы. Экспрессия данного маркера коррелирует с 3 стадией, низким уровнем НЬ, прогрессирующем течение болезни [ 151,164].

Интегрин УЕА-4, который экспрессируется плазматическими клетками при ММ, прикрепляется к своим лигандам стромы костного мозга УСАМ-1 и фибронектину. Это взаимодействие обеспечивает локализацию процесса в костном мозге и активизирует рост опухоли через продукцию ИЛ-6 [140]. В то же время экспрессия нейро-адгезивной молекулы С056 на опухолевых плазмоцитах не является специфической для ММ [78].

При сравнении экспрессии адгезивных молекул на плазматических клетках при М М (СО 13 8 - синдикан-1, р^ Р4), С056 и С038, которые опосредует взаимодействие с эндотелиальными клетками, установлено, что низкая экспрессия С056 коррелировала с большей инфильтрацией костного мозга по трепану и повышенным количеством плазматических клеток в крови [44,129,131]. Важной особенностью экспрессии синдикана-1 является его свойство присутствовать только на клетках с заблокированным апоп-тозом, что имеет большое клиническое значение [80].

Стромальные элементы костного мозга при ММ продуцируют более высокий уровень стромальных молекул (фибронектин), которые связывают опухолевые плазмо-циты и стимулируют их рост [61]. Процесс переход а лимфоцитов в миеломные плазматические клетки регулируется многими поверхностными маркерами, в том числе молекулами адгезии (С011а, С011с, СОЮЗ) [129].

Убедительным подтверждением регулирования опухолевого роста при ММ за счет взаимодействия адгезив-

ных молекул и стромы костного мозга является действие антиген к Ы-А-1, УЕА-4, СЕЖ в культурах костного мозга. Было показано [22], что при этом блокируется синтез ИЛ-6, который является фактором роста миеломы.

При изучении экспрессии молекул адгезии и клинического течения ХЛЛ были выявлены определенные корреляции [50,49]. Так неблагопроиягаое клиническое течение ХЛЛ было связано с экспрессией молекул адгезии суперсемей-сгва 1§ (СЭ54 и СБ58 иСБ11/СЕ)18+), атакжехоминг-рецеп-тора (СЕЖ). Благоприятное течение заболевания в этих наблюдениях отмечено при отсутствии экспрессии адгезивных молекул семейства интегринов ((3,, (32, Р3).

Интеграция цитоскелета опухолевой клетки с эксгра-целлюлярным матриксом при ХЛЛ влияет на клиническое течение болезни. Изучение экспрессии различных молекул адгезии СБ\У 49С (УЕА-З), СО\у 49с1 (УЕА-4), СБ11а/С018 (ЕРА-1), СБ50 (1САМ-3), С054(1САМ-1) показало обратную зависимость между экспрессией указанных маркеров и стадией болезни [23]. При ХЛЛ увеличение размеров печени и селезенки ассоциировалось с низкой экспрессией адгезивных молекул группы селектина (СБ26Е - <50%), а спленомегалия сочеталась с высокой экспрессией СЭ54 и СО 11а (>50%)

При изучении прогностического значения экспрессии молекул адгезии при В-ХЛЛ были выявлены корреляции с клиническими проявлениями болезни [111]. Установлено, что экспрессия С044 выявлена у больных с увеличением печени, лимфоаденопатией, СЭ54 коррелировала со стадией, прогрессированием болезни, увеличением лимфатических узлов, а экспрессия УЕА выявлена при гепато-мегамии. При «А» стадии В-ХЛЛ была высокая экспрессия С011Ь (МАС-1), что может быть связано с апоптозом, а атипичная морфология и повышение С020 отмечены при высокой экспрессии ЕРА-1 и УЕА-4 интегринов [11].

Большой интерес представляет проблема экспрессии молекул адгезии на стволовых кроветворных клетках, в связи с тем, что их оптимальное взаимодействие со стро-мой костного мозга обеспечивает нормальный морфологический состав и функцию кроветворных элементов. Известно [93,71,125], что интегрины (УЕА-4) и СЭ62Е играют основную роль в мобилизации и хоминге С034. Кроме адгезивной функции УЕА-4 может усиливать пролиферацию С034 клеток. Кроме этого антитела к УЕА-4 служат для мобилизации и концентрации С034клеток, что очень важно для решения проблемы трансплантации стволовых клеток при высокодозной противоопухолевой химиотерапии. При ОМЛ и В-ОЛЛ СЭ34 клетки имели низкую экспрессию УЕА-2, УЕА-З, но молекулы 1САМ-1 были представлены с большей частотой по сравнению с контролем. Следовательно, эти антигены могут быть использованы для идентификации минимальной резидуальной болезни. Исследование а и Р интегринов, опосредующих адгезию С034+ клеток со стромальными лигандами при ХЛЛ, показало, что этот процесс происходит под влиянием ИЛ-3 [144].

III. Клиническое значение экспрессии РАБ/АРО (С095) при лимфопролиферативных заболеваниях.

Программированная клеточная гибель (апоптоз) является фундаментальным биологическим процессом и в

настоящее время активно изучается при заболеваниях лей-кемической природы [1,2,5,150]. Рассмотрение патогенеза хронических лейкозов с позиций блокирования апоп-тоза позволяет считать кумулятивные процессы одними из ведущих в прогрессировании этих болезней. Вполне понятно, что такой важный признак опухолевой клетки, каким является стабильно воспроизводимый мембранный антиген CD95 / FAS-APO, ассоциированный с апоптозом, имеет большое клиническое значение. Если полагать, что нарастание массы опухоли связано с уменьшением активности апоптоза, то изучение экспрессии CD95 является важным направлением в прогнозировании течения болезни. Динамика экспрессии CD95 в процессе противоопухолевого лечения может представлять достаточный интерес с точки зрения эффективности воздействия на опухоль или определения формирующейся лекарственной устойчивости. Это подтверждается результатами исследований [5], где было установлено отсутствие экспрессии CD95 на опухолевых плазмоцитах костного мозга у больных с ММ в фазе сформировавшейся лекарственной устойчивости. О связи экспрессии CD95 с лекарственной устойчивостью свидетельствуют так же исследования, где установлены различия между CD95+ и CD95- миеломны-ми клеточными линиями. При CD95+ фенотипе отмечена более высокая пролиферативная активность и более высокая чувствительность опухолевых клеток к мелфалану (по LD50 более чем в 50 раз), экспрессия - Вах, более высокая экспрессия FAS/APO-1 при индукции доксоруби-цином [94]. В то же время у больных с первично установленным диагнозом ММ, опухолевые лимфоциты костного мозга экспрессировали CD95 [5], а индукция апоптоза дексаметазоном сопровождалась исчезновением синди-кан-1 с поверхности миеломной клетки [80]. Аналогичные исследования, проведенные у больных ХЛЛ, показали, что нарастание массы опухоли сопровождалось повышением экспрессии CD95. Однако это могло свидетельствовать лишь о неэффективной компенсаторной активации апоптоза. При анализе парной экспрессии: CD95 и CD20, CD95 и CD23, CD24 и CD95, CD5 и CD95, CD95 и HLA-DR, CD19 и CD25, выявленыдосговерные обратные корреляции, что позволяет расценивать нарастание массы опухоли как кумулятивный процесс.

Более глубокие исследования механизма накопления опухолевых клеток при ХЛЛ показали, что ингибирование апоптоза в CD19+ CD20+ лимфоцитах связано с их адгезией к строме костного мозга [95, 122,120]. Показана так же роль в этом процессе взаимодействия CD40, BCL-2, CD95 [96,60]. На регуляцию апоптоза при ХЛЛ индуцируемого анти-IgM влияет так же BCL-2/BAX отношение [116]. При этом отмечено, что FAS-FAS-лиганд взаимодействие является индуктором апоптоза.

Активация апоптоза при ХЛЛ возможна при воздействии верапамила и ИЛ-4, что сопровождалось появлением CD10 [14,88,79,101], атак же при УФО лимфоцитов ех vivo, когда FAS/APO-1 активируется в CD4 и CD8 лимфоцитах [18,118,20]. Показано так же [51], что флюдара индуцирует апоптоз через CD40 - CD40L взаимодействие. Изучение клинического значения растворимого FAS/APO-1 (CD95) в сочетании с CD38 при ХЛЛ показало, что экспрессия этих маркеров коррелировала с плохим клиничес-

ким прогнозом. При SCD95+ и CD38+ фенотипе отмечены В и С стадии болезни, короткое время удвоения массы опухоли, на 30% меньше полных ремиссий, на 38% меньше случаев с 8 летней выживаемостью [48].

Таким образом, вышеизложенное свидетельствует о том, что проблема иммунофенотипирования лимфоцитов при лимфопролиферативных заболеваниях является одним из основных направлений изучения данной патологии. Очевидный прогресс этих исследований заключается в том, что получены новые результаты, касающиеся функции дифференцировочных антигенов. Последние определяют не только линейную принадлежность опухолевых клеток, но и участвуют в процессах межклеточного взаимодействия, что оказывает существенное влияние на формирование основных синдромов ЛПЗ. Важная научная информация получена при изучении роли молекул адгезии в развитии лейкемизации, органомегалии, неврологических осложнений при ЛПЗ, что обусловлено взаимодействием опухолевых клеток с элементами стромы костного мозга и лимфоидных органов. Важным является положение о том, что при взаимодействии молекул адгезии опухолевых клеток со своими лигандами в строме органов возникают сигналы, блокирующие апоптоз, что приводит к накоплению опухолевых клеток с развитием соответствующей клинической симптоматики.

Следует подчеркнуть, что иммунофенотипирование ЛПЗ имеет очень большое клиническое значение, так как экспрессия дифференцировочных антигенов, молекул адгезии, антигена апоптоза на опухолевых клетках может являться важным фактом прогнозирования течения болезни. Вместе с тем, в интересной проблеме иммунофенотипирования ЛПЗ имеется много противоречивых и недостаточно достоверных сведений, что служит убедительной предпосылкой для продолжения исследований в этом направлении.

Литература

1. Барышников А.Ю., ЗаботинаТ.Н., Седяхина Н.П., Хо-рошко Н.Д., Туркина А.Г., Палкина Т.Н. и др.Коэкспрессия антигена CD34 ранних гемопатических предшественников и антигена FAS/APO-1, опосредующего апоптоз.Эксперименталь-ная онкология 1994,16,4-6, с. 343-347.

2. Барышников А.Ю., Шелепов В.П., Кузнецов С.В., Шишкин Ю.В. и др. Экспрессия и проявление функциональной активности FAS/APO-1/CD95 антигена, опосредующего апоптоз при гемобластозах у человека. Гематол. итрансфузиол. 1996,5, 42-44.

3. Голенков А.К., Митеров Г.Ю., Попов В.М., А.Л. Ша-хер. Клиническое значение иммунологического фенотипа Не-ходжкинских лимфом. Тер. архив, 1995,7,30-31.

4. Голенков А.К., Кисилев А.М., Кедров А.В., Седов К.В., Луцкая Т.Д., Полосухина Е.Р. Корпородез грудного позвонка графитовым эндопротезом у больной множественной миело-мой с опухолевой компрессией спинного мозга с последующей интратекальной профилактикой нейрорецидива циклофосфано-м.Труды участников конференции по противоопухолевой химиотерапии. М. 1996, с. 50-51.

5. Шишкин IO.B.CD95 опосредованный апоптоз в лейкоз-ных и нормальных кроветворных клетках. Автореферат дисс. докт. М. 2000, с. 58.

6. Ajdukovic R., Svoboda-Beuson I., Bendeljak К., KusecR. et alCD31 overexpression is associated with peor prognosis in Multiple Myeloma.The Hematologyjoumal 2001, vl, si, p.36.

7. Aladle D.A., Jawisch H.E., Awad M.A.Soluble vascular cell adhesion molecule-1 (SVCAM- l)Isitamarkerofmicrovascular complications in diabetes?Haematologica 1999,84, EHA-4, abst. beon p. 42

8. Amiot L., Onno M., Lamy T., Dauriac C., Le Prise P-G., Fauchet R., Dremon. Loss of HLA molecules in B Lymphomas is assotiated with an aggressive clinical course. Brit. j. Haematology

1998, 100, p 655-663

9. Barille S., Thabard W., Robillard N., Moreau Ph., Pineau

D., Garoussean J-L., Bataille R., Amiot M. CD130 rather than CD 126 expressoin is associated with disease activity in multiple myeloma. Brit.j. Haematol, 1999,106, p 532-535.

10. Bandonin F., Philip P. j. M., Ducailar A., Sudaka I., Alterescu R., Bayle J., Goguel A. Quatitafive expression of CD37 in lymphoproliferative disordes: a corporative study with the Matutes scoringsystem.Hematol. CellTher., 1997,39, Sip. 567.

11. BenetI., Marugan I., Martinez-Climent J.A.,TerolM. Jetal. Adhesion molecules (MA) in B-cell clinical, biological and cytogenetic correlations. The Hematology journal, 2000, VI, SI, p.

89.

12. Berger F. Indolent lymphomas. Different enfities and diagnostic problems. EHA-5-Ed. Book 5-th Congress 2000, h. 1 -6.

13. Berger R., Hilgarth M., Hubmann R., Jruber J., Shehatam M. Down regulation of CD23 expression in B-cell by counterreceptor blockade. Haematologica, 1999,84 EHA-4, abstr. book, p. 25-25

14. Berrebi A., Bassons L., Shvidel. Spontaneous apoptosis in B-cell variations according to maturation stages and enhancement with verapamil. Hematol. CellTher., 1997,39, SI p. 581.

15. Besostri B., Beggiato E., Bianchi A., Mariani S., CosciaM., Peola S., Foglietta M., Boccadoro M., Pileri A., Moretta L., Massaia M. Britt. Haematol., 2000,109,1,46-53.

16. Bezares R.F., Murro H.H., Diaz A.F., Saidon J. Prevention of infections events with immunoglobulin A (IgA) nebulisations in patients with chronic lymphoproliferative disordes treated with purine analogues. Hematol Cell Ther, 1997,39, SI p. 583-584.

17. BilaJ.,KraguljakN.,BoskovicD.,JankovicJ.Prognostic value of CD 11 b expression in acute myeloid leucemia. Haematologica,

1999, 84, p. 147.

18. Bladon I., Taylor P.C. CD4+ helper and CD8+ cytotoxicT lymphocytes are equally sensitive to apoptosis induced by extracorporeal photopheresis. The Hematology, 2000,1,1,11.

19. Bladon J., Taylor P.C. The apoptotic effect of extracorporeal photopheresis using the XTS versus NVAR system. Haematoligica, 1999, 84, p. 105.

20. Bladon I., Taylor P.C. CD4+ helper and CD8+ cytotoxic T-lymphocytes are equally sensitive to apoptosis induced by extracorporeal photopheresis. The Hematol. j, 2000, IV, SI, p. 14.

21. Blasinska-MorawiecM., Blonski J., RobakT. Serum cytokines and immunophenotype of peripheral blood lymphocytes in patients with B-cell treated with. The Hematol. j. 2000, VI, SI, p. 92.

22. Bloem A.C., LammeT., DeSmetM., KokH., Vooijs W., Wijdenes J., Boom S.E., Lokhorst H.M. Long-term bone marrow cultered stromal cells regulate myeloma tumour growth in vitro: studies with primary tumour cell and LTBMC-dependent cell lines. Brit.j. Hematol., 1998,100,166-175.

23. Blonski J.Z., Niewiadomska H., Najder M., Fronzak A., Krykowski E. Expression of surface adhesion molecules and clinical staging in B-cell chronic lymphocytic leukaemia (B-cell). Hematol CellTher, 1997,39, SI,p. 76.

24. Brouwer R.E., Zwinferman A.H., Klin-Nelemans H.C. The expression of co-stimulatory and adhesion molecules on acute myeloid leukaemia: implications for immunotherapy. Hematologica,

1999, 84, p. 135.

25. Brugnoni D., Rossi I., Tucci A., Cattaneo R., Airo P. Study of CD40 ligand expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 1995,40,440-42.

26. BumbeaH., Vladareanu A.M., CisleanuD., Barbu D. etal The variable expression of CD23 in CD5 positive lymphoproliferative disorders aclue in diagnosis and prognosis. The Hematology journal 2001, v7, s 1, p.48.

27. Caligaris-Cappio F. Relationship beetween autoimmunity and immunodeficiency in CLL. Hematol. Cell Ther., 1997,39, S1, p. 13-16.

28. Callea V., Stelitano C., Oliva B.M., Filanqeri M., Musolino

C., Morabito F., Iacopino P., Nobile ., BrugiatelliM. SurfaceCD14 positivity in B-cell chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is related with the clinical outcome. Hematol. CellTher., 1997,39, SI, p. 590.

29. Callea V., Morabito F., Oliva B.M., Levato D.,Dattilo A., Gangemi F., Gorfida A., Lacopino P., Nobile F., Molica S., Brugiatelli M. Surface CD 14 positivity in B-cell chronic lymphocytic leukaemia is related to clinical outcome. Brit.j. Haematology, 1999,107,347-352.

30. Camera A., Pezzullo L., Villa M.R., Luciano L. Coexistence of two distinct cell population (CD56+ TCRgd-i- and CD56+ TCRgd-) in a case of aggressive CD56+ lyphoma/leukaemia. Haematologica, 2000,85, p.496 - 501.

31. Camp B.V., Vanderkerken, Bakkus M., Riet I. V. New insights into myeloma biology. 5-th Congr. of the EHA. Ed. book, 2000, Birmingham, p. 36-41.

32. Catovsky D., Pawson R., Dyer M.j.S., Barge R., Matutes E., Thornton P.D., Emmett E., Kluin-elemans J.C., Fibbe W.E., Willemenze R. Successfull treatment of T-cell prolymphocytic leukaemia with human CDw52 antibody, CAMP ATH-IH. Hematol. CellTher., 1997,39,SI,p. 599.

33. Catovsky D. How do we recognise and manage B-cell leukaemias and lyphomas? Leukaemia and Lymphoma, 1998, VI, ISS-1, p. 11.

34. Catovsky D. Morphology, atipical chronic lymphocitic leukaemia and prognistic features affecting choice of therapy.Haematologica, 1999,84 (EHA-4 ed. book), p. 92-93.

35. Chen J.R., Yn B.J., Lan-PhuongDao, Bradley C.J., Mulligan

S.P., Wiley J.S. Transendothelial migration lymphocytes in chronic lymphocytic leukaemia is impared and involves down-regulation of both L-selectionandCD23. Brit.j. Haematology, 1999,105,1,181-189.

36. Christiansen I., Sundstrom C., Torreman T. Elevated serum levels of soluble vascular cell adhesion molecule-1 (SVCAM-1) closely reflect tumor burden in chronic B-lymphocytic leukaemia. Brit.j. Haematology, 1998,4,103,1129-1137.

37. Clark P., Boswell F., Pearson C., Walker I.D., Grur I.A. Thrombin induction of ICAM-1 on monocytes and the relationship between monocytes ICAM-1 and plasma ICAM-1 in pregnancy. Haematologica, 1999,84, p. 184.

3 8. Clark E. A. Regulation of signalling the B-lymphocyte antigen receptor complex. Hematol. Cell Ther., 1997,39 SI, p. 555.

39. Clementson K.J., Clementson J.M. Hereditary disordes of platelet receptors for adhesive proteins: collagen and von Willebrand factor. Hematologica, 1999,84, p. 129.

40. Cohen P.L., Kurtin P.J., Donovan K.A., Hanson C.A. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Brit.j. Haematology, 1998,101,302-310.

41. Corin D., Vasilica M., Dumitrescu A., Dobrea C. Clinical and biological analysis of mantle cell lymphoma. A single centre experience. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 176.

42. Criel A., Verhoef G., Vlietinck R., Meccuci C. Furthear characterisation of morphologically defined typical and atypical CLL: a clinical, immunophenotypic, cytogenetic and prognostic study n 390 cases. Brit. j. of Haematol., 1997,97,383-391.

43. Criel A., Verhoef G„ Vlietinck R., Meccucci C., Billiet J., Michaux L., Van Hoof A., Boogaerts M., Van den Berghe H., De Wolf-Peeters C. Typical and atypical cell: two different entries. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p.93.

44. Daniels J.T., Davis B., McGrail L.H., Byrd C. Clonal selection of CD56+1 (8:21) AML blast: further suggestion of the adverse clinical significance of this biological marker? Brit. j. Haematology, 1999,107,381-383.

45. DArenaG., CascavillaN., MustoP., Bisogno R.C. CD79b expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia.Haematologica, 2000,85, p.556-557.

46. D Arena G., Nunziata G., Cascavilla N., Colella-Bisogno R. et al Antigenic density of surface antigens in B-ctll chronic lymphocytic leukemia evoluated by means of quantitative flow cytometry. The Hematology journal 2001, v 1, s 1, p. 42.

47. DattiloM.S., D. Levato. Clinical relevance of the intensity of CD20 antigen in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. 565-566.

48. Del Poeta G., Maurillo L., Suppo G., Venditti A. Both high CD38 and soluble APO-1/FAS (CD95) correlate with advanced stages and a poor outcome in B chronic lymphoid leukaemia (B-cell). The Hematol. j., 2000, VI, S1, p. 91.

49. De Rossi G., Zarcone D., Mauro F., Cerruti G. Adhesion molecule expression on B-cell chronic lyphocytic leukaemia (B-cell). A study of 74 cases. Leukaemia and Lymphoma, 1994, VI3, S-l, p. 124.

50. De Rossi G., Zarcone D., Mauro F.R., Cerruti G., tenca C., Molica S., Grossi C.E. Adhesion molecule expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p.575.

51. De Totero D., Tazzari P.L., Clavio M., Catellani S. Modulation of Fludarabine - induced apoptosis in chronic lymphocytic leukaemia (CLL) B-cell following CD40- CD40L interaction. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.90.

52. Dettke M., Dreer M., Horvath, Leither G., Hocker P. Treatment with prednisolone reduces the monocytes in healthy men. Haematologica, 1999,84, p.255.

53. De Waele M., Reumans W, Jochmans K., Schots Abberant expression of adhesion molecules on CD34+ cells of acute leukaemia. Brit.j. Haematology, 1998,102, l,ISH-EHA,p.l61.

54. Dighiero G. Chronic lymphocytic leukaemia treatment. Hematol. CellTher., 1997,39, SI,p. 531-540.

55. Dmoszynska A., Domanski D., Rolinski J., Bojarska-Junak A. Immunophenotype changes in multiple myeloma patients during thalidomide treatment. The Hematol. j., 2000, VI, S1, p. 167.

56. Dohner H., Stilgenbauer S., Fischer K., Bentz M., Lichter P. Cytogenetic and molecular cytogenetic analys of B-cell chronic lymphocytic leukaemia: specific chromosome aberration identify prognostic subgroup of patients and point to loci of candidate genes. Leukaemia, 1997,11.S2, p. 19-24.

57. Donfrid M., JankovicG., Cemerikic V., Kraguljac N. CD25 and Lambda expression in mantle cell lymphoma. The Hematol. j.,

2000, VI, SI, p. 173.

58. Dyer M.j.S., Siebert R., Willis T.G., Schlegelberger B. The molecular pathogenesis oh high grade non-Hodgkin's lymphoma. 5-th Congr. of the EHA, ed. book Birmingham, 2000, p. 31 -35.

59. EkblomM., Yu J. Laminins containing a5 chain are expressed in bone marrow and are adhesive to multipotent haematopoietic FDCP-mixcell Haematologica, 1999,84, p.255.

60. Elliot M.A., Letendre L., Chin-Yang Li, Hoyer J.D., Hammack J.E. Chronic lymphocytic leukaemia with symptomatic diffuse central nervous system infiltration responding to therapy with systemic fludarabine. Brit.j. Haematology, 1999,4,104,689-694.

61. Fernandes M., Alarcon G. Alternations in bone marrow stromal cells function in multiple myeloma. Brit. j. Haematology,1998,102,1, ISH-EHA, p.350.

62. Finn W.G., Thangavelu M., Gelavarthi k.K., Goolsby C.L. Karyotype correlates with peripheral blood morphology and

f-'

I

immunophenotype in chronic lymphocytic leukaemia. American j. of Clinical Pathology, 1996,105,458-467.

63. Fossa A., Brandhorst D., Seeber S., Nowrousian M.R. Relation between anemia tumor cell cycle activity in multiple myeloma. Acta Haematologica, 1997,98, SI, p.71.

64. Frassanito M.A., Silvestis F., Cafforio P., Dammacco F. CD8+/CD57+ cells and apoptosis supress T-cell function in multiple myeloma. Brit. j. Haematology, 1998,100,469-477.

65. Fujii R., Ishikawa H., Mahmond M.S., Asaoku H., Kawano M.M. MPC-1- CD49e- immature myeloma cells include CD45+ subpopulations that can proliferate in response to IL-6 in human muelomas. Brit. j. Haematology, 1999,105,1,131-140.

66. Gahn B., Wenderburg B., Troff C., Neef J., Grove D., Haferlach T., Hindemann W., Wormann B. Analisis of progenitor cell involvement in B-cell by simultaneous immunophenotypic and genotypic analysis at the single cell level. Brit. j. Haematology, 1999, 105,955-959.

67. Geister C.H., Philip P., Egelund Christensen B., Hou-Jensen K. Trisomy-12 is found in cell with both typical and atypical immunophenotype and has no prognostic significance. Hematol. CellTher., 1997,39, SI, p. 568.

68. Ginaldi L., Dastino A., De Martinis M., Loreto M.F., Marini L., Martorelli V., Quaglino D. The value of immunophenotypic analyses in the characterization of B-cell. Brit. j. Haematology, 1999, SI, 105, p.83-83.

69. Genzalez-Barca E., Domingo-Claras A., Femandes-Sevilla A_ Satar A., De La Banda E., Alouso ., Granena A. Expression of adhesion molecules in peripheral B-lyphocytes from patients with chronic tymphoprolyferative disease: relationship with clinical features. HematoL Cell Ther., 1997.39, SI, p. 76-77.

70. Golenkov A-K-, Sedov 1CV., MitinaT A., Polosukhina E.R., Baryshnikov A.G., Zabotina T.N., A.-L. Shacher, A Khal Q. Immunophenotypic identification of residua] disease in extranodal non-Hodgkin’s lymphoma and multiple myeloma. Experimental Haematol., 1995,23,8, p.763.

71. Gordon M.G., Marley S.B., Davidson R.J., Lewis J.L. CD34 - an adhesion and signalling molecule for haemopoetic progenitor cell. Brit. j. Haematology, 1998,102,1, ISH-EVA,p.l61.

72. Greil R., Gruber J., Hausmaninger H., Hohenbalken M., Lang A., Fudrik M., Seewann H., Michemayr G., Oberaiger W., Guste

G. Fludarabine monophosphate (Fludara) induction and interferon-a2b (Intron?A) maintenance therapy in patients with B-cell and immunocytic lymphoma: an Austrian multicentre phase II trial. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.97.

73. GroganT.M., Durie B.G.M., SpierC.M., Richter L., Vela

E. Myelomonocytic antigen positive multiple myeloma. Blood, 1989, 73, 763-769.

74. Hamblin T.J. Autoimmune haemolytic anaemia in patients treated with purine analogues. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. 559.

75. Hatzimichael E., Makis A.,Chaidos A., ChristouL. Soluble adhesion molecules in plasma cell leukaemia. The Hematol. j., 2000, VI,Sl,p.l63.

76. Hausor I., Simonitsch I., Ott G., Weltermann A. The plasmablastic variant of diffuse large B-cell lymphoma is associated with very poor clinical outcome.The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.182.

77. Javniak D., Dmoszynska A., Goracy A. The role of bl-integrins in pathogenesis of renal failure in patients with multiple myeloma. Haematologica, 1999,84, EHA-4, abst. book, p. 28-28.

78. Javniak D., Dmoszynska A., Goracy A., Krawczyk P. Is antigen CD56 (neural cell adhesion molecule N-CAM) characteristic of malignant plasma cell? Brit. j. Haematology, 1998,102,1,ISH-EHA, p.350.

79. Jones D.L., Wickzemasinghe R.G., Mehta A.B., Prentice

H.G. The role of induced FAS expression in the killing of B-chronic lymphocytic leukaemia cells by DNA damaging agents. Haematologica, 1999,84, p. 106.

80. Jourdan M., FerlinM., LegouffeE., Horvathova M., Liantard J., Rossi J.F., Wijdenes J., Brochier J., Klein B. The myeloma cell antigen syndecan-1 is lost by apoptotic myeloma cell. Brit. j. Haematology, 1998,100,637-646.

81. Julinsson G. Complications in the tretment of CLL with purine analogues. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. 41-44.

82. Kay N.E., LeongT., BoneN., Kyle R., Greipp P.R., Van Ness B., Oken M.M. T-helper phenotypes in the blood of myeloma patients an ECOY phase III trials E948/E3A93. Brit. j. Haematology, 1998,100,459-463.

83. Kay H.E., Leong T., Kyle R.A., Greipp P., Billadean D., Van Ness B., Bone N., Oken M.M. Circulating blood B-cells in multiple myeloma: analysis and relationship to circulating clonal cells and clinical parameters in a cohort of patients ntered on the Eastern Cooperative ocology Group phase III E9486 clinical trials. Blood, 1997,90,340-345.

84. Kowano M.M., Mahmound M.S., Ishikawa H. Loss of PAX-5 expression is possibly involved in growth of huan myeloma cells. Acta Haematologica, 1997,98, SI, p.89.

85. Keating M. J. What is the best salvage approach in relapsed B-cell patients? Leukaemia and lymphoma, 1998, vol 1, issuel, p. 10.

86. Kibaroglu A., Eksioglu-Demiralp E., Ratp S., Autan M. Increased adhesion of B chronic lymphocytic cells to the bone marrow: role of bone marrow microenvironment. Haematologica,

1999, 84, p. 163.

87. Kilber C., Schermutzki F., WollerH.D., Timpl R., Muller

C.A., Klein G. Adhesive interaction of human multiple myeloma cell lines with different extracellular matrix molecules. Cell Adhes. Commun., 1998,5(4), 307-323.

88. Kimby E., Osterborg A., Mellstedt H. Interleukin-4 (IL-4) therapy in patients with chronic lymphocytic leukaemia of B?cell type (BCLL): clinical and biological effects. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.597.

89. Kipps T.J., Cantwell M., Sharma S., Kato K. Gene therapy of chronic lymphocytic leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997,39,

SI, p.562.

90. Knauf W.U., Hingenfeld E.I., Schutte H.I., Schroder J., Kath R., Thiel E. Hematol. Cell Ther., 1997,39, Sl,p.88.

91. Koh MBC., Lowdel M.W., Prentice H.G. The GvH reaction: the cytokine storm and its effect on lymphocyte alloreactive responses. Haematologica, 1999,84, EHA-4, abst. book, p.62-62.

92. Krai M., Kopec-Szlezak J., Poglod R. Expression of cytoadhesion molecules in plasma cell leukaemia. Haematologica,

1999,84, EHA-4, abst. book, p.30-30.

93. Kronenwelt R., Lichterfeld M., Zoller M., Haas R. Mobilisation of CD34+ haemopoetic progenitor cells in vitro by VLA-4 directed antisense oligonucleotides. Haematologica, 1999,

84, p.256.

94. Kuribayashi N., Hata H., Yoshida M., SonokiT., Nagasaki A., Kimura T., Harada N., Matsuzaki. Establishement and characterization of CD95 (FAS/APO-1) - negative myeloma cell line. Acta Haematologica, 1999,101,113-118.

95. Lagneaux L., Delforge A., Bron D., De Bruyn C., Stryckmans P. Chronic lymphocytic leukaemie (CLL) CD19+ CD5+ lymphocytes but not normal CD 19+ CD5+ lymphocytes are rescued from apoptosis by contact with bone murrow (BM) stromal cells. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p.574-575.

96. Laytragoon-Lewin N., Mellstedt H. Down-regulating the apoptosis-mediated CD95 receptor and altered signal transduction through the CD40 receptor in B-chronic lyphocytic leukaemia (CLL) cells. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. S75.

97. Lazzari M., BorleriG., DastoliG., BarbuiT. Hetergeneous susceptibility of different, freshly isolated B non-Hodgkin's lymphoma cell to Rituximab and complement. The Hematol. j.,

2000, VI, SI, p.185.

98. Lemoli R.M., Martinelli G., Oliveri A., Motta M.R., Rizzi S., Terragna C., Leopardi G., Benni M., onconi S., Cantori I., Rondelli D., et. al. Selection and transplantation of antologous CD34+ B-lineage negative cell in advanced multiple myeloma patients: a pilot study. Brit. j. Haematology, 1999,107,419-428.

99. Lens S.M.A., Drillenburg P., Drijver B.F.A., Gijsvan Schijndel, Pals S.T., Van Lier R.A.W., Van Oers M.H.J. Aberrant expression and reverse signalling of CD70 on malignant B-cells. Brit. j. Haematology, 1999,106,491-503.

100. Lopez-Matas M., Rodriges-Justo M., Morilla R., Catovsky

D., Matutes E. Quantitative expression of CD23 and its ligand CD21 in chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 2000,11, p. 1140-1145.

101. Magiola M., Oliva B., Cuzzola M., Cuzzerea, et. al. Chronic lymphocytic leukaemia (CLL) B-cells express CD 10 when undergoing spontaneous apoptosis. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 90.

102. Maloun K., Magnac C., Azgui Z., Can C., et. al. VH gene expression in hairy leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998,101,171-178.

103. Marmont A.M. Leukaemic meningitis in B-cell chronic lymphacytic leukaemia. Resolution following intrathecal methotrexate. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.93.

104. Matutes E., Cabezudo E., Morilla R., Catovsky D. Analysis of resedual disease in chronic lymphocytic leukaemia by flow cytometry. Hematol. CellTher., 1997, 39, Sl,p,98.

105. Matutes E., Moreau E., Zomas A.P., Morilla A., Morilla R., et. al. Revised CLL scoring system including the monoclonal antibody SN8 (CD79b). Hematol. Cell Ther., 1997,39, S1, p. S67.

106. Mecuci C., Van den Berghe H. Cytogenetic and immunophenotype. Leukaemia and lymphoma, 1994,13, S1, p.49-51.

107. Molica S., Dattilo A., Ginlino C., Levato D. Flow cytometric expression of cyclin D1 in typical B-cell CLL allows identification of patients at high risk of disease-progression. The Hematol. j., 2000, VI, S1, p.91.

108. Monserrat E. New therapeutic issues in CLL. Hematol. CellTher., 1997, 39, S1, p. S45-S49.

109. Morel D., Pages J., Callet-Bauchu E., Baseggio L., et. al. Splenic marginal cell lymphomas in peripheral blood: arguments for the existence of a common type beside SLVL.The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 176.

110. Mitterer M., Oduncu F., Lanthaler A.J., Drexler E., Amaddi

G., Fabris P., Emmerich B., Coser P., Strava C.The relationship between monoclonal myeloma precursor B-cells in the peripheral blood stem cell harvests and the clinical response of multiple myeloma patients. Brit. j. Haematology, 1999,106,737-743.

111. Mulligan S.P., Dao L.P., Walls R.S .Diagnostic and prognostic potential of cell adhesion molecule expression in chronic B-cell leukaemias. Hematol. CellTher., 1997,39, SI, p. S77.

112. Mulligan S.P., Dao L.P. A cytokine cascade midiated spontaneous «cycle» phenomenon with fever in a B?cell chronic lymphoid leukaemia. Hematol. CellTher., 1997, 39, SI, p. 92.

113. Mulligan S.P., Dao L.P., Francis S. B-cell chronic lymphocytic leukaemia with aberrant expression of the CD8 antigen. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. 66.

114. Murasko D.M., Nelson B.J., Silver R., MotourD., KayD. Immunologic response in an eldery population with a mean age of

85. m. j. of Medicine, 1986, 81, 612-618.

115. Osier D.G. Cytogenetic and molecular genetic of chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 1999,84(EHA-4ed. book), p. 88-91.

116. Osorio L.M., Aquilar-Santelises M., de Santiago A., Mellstedt H., Jondal M. Potential role of the BCL-2 gene family in

apoptosis of B-chronic lymphocytic leukaemia cells. Hematol. Cell Ther., 1997,39, SI, p. S81-S82.

117. Pagnucco G., Bragotti L.L., Cabrlon S., Corso A., Vane-lli L. et al Multiparametria immunophenotyping of bone marrow plasma cells in Multiple Myeloma and MGUS. The Hematology journal

2001, vl, si, p. 102.

118. Pagnucco G., Ardizzone F., Maiocchi M., Vanelli L. et al Prognostic significance of CD38 and FMC7 expression in chronic lymphocytic leukemia (B-cell). The Hematology journal 2001, vl, si, p. 47.

119. Paietta E., Andersen J., Yunis J., Rowe J.M., Cassileth P.A., Tallman M.S., Bennet J.M., Wiernik P.H. Acute myeloid leukaemia expressing the leucocyte integrin CD 11 b- a new leucaemic syndrome with poor prognosis: result of an ECOG database analysis. Brit.j. Haematology, 1998,100,265-272.

120. Panayiotidis P., Ganeshaguru K.., Foroni L., Hoffbrand A.V. Expression and function of the FAS antigen in B-chronic lymphocytic leukaemia and hairy cell leukaemia. Leukaemia, 1995, 9,1127-1232.

121. Perutelli P., Cevasco M., Dini G., Comaglia-Ferraris P. Adhesion of cord blood leucocytes to extracellular matrix: a comparative approach to graft-vs-host disease.Haematologica, 1999,

84, EHA-4, abst. book, p. 61-61.

122. Pettitt A.R., Griffiths S.D., Cawley J.C. Spontaneous apoptosis in chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is inhibited by homotypic cell-cell contact involving a sialic acid-containing ligand. Brit. j. Haematology, 1998, V101, S1, p. 41 -41.

123. Poglod R., Kraj M., Kopec-Szlezak J., Kruk B. Patterns of H-CAM, I-CAM, N-CAM and LFA-1 expression on lymphoid cells in multiple myeloma. Haematologica, 1999,84, EHA-4 abstr. book, p. 31-31.

124. Prieto A., Garciaq_Suarez J., Henander M.P. reyes E., et. al. Expression of CD25 and CD38 by leukaemic B-cells improves the definition of risk of patients on early stage B-CLL patients. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 91.

125. Pruijt J.F.M., Figdor C.G., Van Kooyk G., Willemze R., Fibbe W.E. Murine haemapoietic progenitor cells do not express LFA-1. Brit. j. Haematology, 1998,102,1, ISH-EHA,p. 160.

126. Rasmussen T., Kastrup J., Knudsen L.M., Johnsen H.E. High number of clonal CD 19+ cells in the peripheral blood of patient with multiple myeloma. Brit.j. Haematology, 1999,105,1,265-267.

127. Rasmussen T., Jensen L., Hohore L., Andersen H., Johnsen

H.E. Circulating clonal cells in multiple myeloma do not express CD34 in RNA, as measured by single-cell and real-time RT-PCR assays. Brit.j. Haematology, 1999,107,818-824.

128. Rawstom A.C., Davies F.E., Owen R.G., English A., Pratt G., Child A., jack A.S., Morgan G.J. B-lymphocyte suppression in multiple myeloma is a reversible phenomenon specific to normal B-cell progenitors and plasma precursors. Brit, j. Haematology, 1998, 100,176-183.

129. Rawstron A.C., Barrans S.L., Blythe D., Davies F.E., English A., Pratt G., Child J. A., Jack .S., Morgan G.J. The degree of blood and marrow plasma cell infiltration depend on CD56 expression. Brit.j. Haematology, 1998,101, p. 48-48.

130. Rawstron A.C., Barrans S.L., Blythe D., Davies F.E., English

A., Pratt G., Child J.A., Jack A.S., Morgan G.J. Proliferative myeloma plasma cells are at the latest stage of differentiation. Brit, j. Haematology, 1998, V101, SI, p. 23-23.

131. Raya J.M., Brito M.L., Gonzales-Brito G., Caballero M.M, et. al. Blood T-helper lymphocyte subsets in patients with monoclonal gammopaties: correlations with treatment status and clinical stage. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 165.

132. Raya J.M., Brito M.L., Gonzales-Brito G., Caballero M.M, et. al. Plasma cells of patients with «smolderig» myeloma show intermediate phenotypic features between mesus and multiple myeloma. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 165.

*

133. Retter W.W., Hopp C., Murr M. A simple staging system for multiple myeloma based on the relations of CD38 positive lymphoid and myeloma cell subpopulations to predict the necessity of chemotherapy. Acta Haematologica, 1997,98, S1, p. 91.

134. Rigolin G.M., Sneddon C., Castoldi G., Mufti G.J. MDS dendritic cells are phenotypically and functionally different from those obtained in healthy subjects. Haematologica, 1999,84, EHA-

4, abstr. book, p. 79-79.

135. RottenburgerC., KielK., BosingT., Cremer W., Moldenhauer G., Ho A.D., Goldschmidt H., Moos M. Clonotypic CD20+ and CD 19+ B-cells in peripheral blood of patients with multiple myeloma post high-dose therapy and peripheral blood stem cell transplantation. Brit. j. Haematology, 1999,106,545-552.

136. Sadek I., Layed E., fernandez L.A. Difference in the expression of adhesion molecules on stimulatory normal CD 5-B?cells, normal CD5+ B-cells and chronic lymphocytic leukaemia B-cells involved in the antologous mixed lymphocyte reaction. Hematol. CellTher., 1997,39, SI, p. S77.

137. Salem M.,ElbazO., Alwady M., MabedM.,et. al. Serum levels of soluble adhesion molecules (I CAM and V CAM-1): efficient biomarkers of disease status and response to therapy in non-Hodgkin's lymphoma (NHL). aematologica, 1999,84,p. 155.

138. San Miguel J.E., Gonzalez M., Gascon A., Moro M.J., Hernandez J.M., Ortega F., et. al. Immunophenotypic heterohenity of multiple myeloma: influence on the biology and clinical course of the disease. Brit. j. Haematology, 1997,77,185-190.

139. Santini V., Gozzini A., Scappini B., Rossi-Ferrini P. TNF-a induced maturation and apoptosis are exclusively mediated by CD 120a in primary acute myeloid leukaemia blast. Haematologica,

1999,84, EHA-4, abstr. book, p. 60-60.

140. Sanz-Rodriguez F., Ruiz-Velasco N., Pascual-Salcedo D., Teixido J. Characterization of VLA-4-dependent myeloma cell adhesion to fibronectin and VCAM-1. Brit. j. Haematology, 1999,

107, 825-834.

141. Satin H.I. A., Apperley J.F., Greaves M., Lawry J., Gooding R., Graham R., Russel G., Croucher P.I. Interleukin-6 is expressed by plasma cells from patients with multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance. Brit. j. Haematology, 1998,101,287-295.

142. Schafer G.B., Neef C., Troff C., Feuring-Buske M., Hiddeman W., Wormann B. Detection of leukaemia-associated genetic markers in CD34 positive progenitor cells of patients with B-cells. Hematol. CellTher., 1997,39, SI,p. 67.

143. Schlossman S.F., Boumsell L., Gilks W., Harlan J.M., et. al. CD antigens, 1993. 5-th International Workshop on Human leykocyte Differentiation antigens, Boston, USA. Leukemia and lymphoma, 1994,13, SI, p. 59-60.

144. Schofield K.P., Duering J., Rushton G., Testa N., et. al. a4bl integrin-mediated adhesion of CD34+ cells from patients with chronic leukaemia: influence of IL-3. Brit.j. Haematology, 1998,

102, l,ISH-EHA,p. 162.

145. Schultze J.L., Seamon M.J., Michalak S., Gribben J.J., Nadler L.M. Antologous tumor infiltrating T-cells cytotoxic for follicular lymphoma cells can be expanded in vitro. Blood, 1997,89, 3806-3816.

146. Schuster-Kolbe J., Ludwig H., Adolf G.R., Heider K.H. Expression of CD44 isoform on isolated bone marrow plasma cells and peripheral CD 19+ B-cells of patients with multiple myeloma and healthy individuals. Lenk lymphoma (Switzerland) 1999,34,1-2,95-103.

147. Shehata M., Hilgarth M., Berger R., Berer A., et. al. Hairy cell adhesion to bone marrow fibroblasts via VLA-4/VCAM-1 is regulated by TGF-b. Haematologica, 1999,84, p. 257.

148. Schwarzmaier J.D., Shehata M., Hilgarth, Hubman R., Treil R. The role of soluble CD23 in differentiation between stable and progressive forms of B-CLL. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 102

149. Serrano D., Monteiro J., batliwala F., Chiorazzi N., Gregersen P.K. Clonal expansion within the CD4+ CD57+ and CD8+ CD57+ T-cell subjects in B?cell. Hematol. Cell Ther., 1997,39S1, p. S72-S73.

150. Skov S., Bregenholt S., Claesson M.H. Class I ligation of human T-cells activates the ZAP 70 and p561CK tyrosine kinases leads tj an alternative phenotype of th TCR/CD3 S-chain and induces apoptosis. Journal of Immunology, 1997,158, p. 3189-3196.

151. Stauder R., Bechter O., van Driel N., Thaler J., et. al. CD44-9v - expression represents a new independent prognostic parameter in multiple myeloma. Brit.j. Haematology, 1998,102,1, ISH-EHA, p. 345.

152. Suut L., O'Connor S.J.M., Richards S.J., Jones R.A., Roberts

B.E., et. al. Trisomy 12 is seen within a specific subtype of B-cell chronic lymphoproliferative disease affecting the peripheral blood/ bone marrow and co-segrates with elevated expression of CD 11a. Brit.j. Haematology, 1998,101,165-170.

153. Terol M., Lopez_Guillermo A., Bosch F., Montoto S., et. al. Expression of b-integrin (b ITG) adhesion molecules in diffuse large-cell lymphoma (DLCL). Correlation with initial characteristics and outcome. Haematologica, 1999,84, p. 119.

154. Truman J.P., ChoqueuxC., Tchopp J., erdenne J., Le Deist

F., Charron D., Mooney N. HLA class II mediated death is induced via FAS/FAS ligand interaction in human splenic B-lymphocytes. Blood, 1997,89, p. 1996-2007.

155. Tsekouras C., Angelopoulon M.K., Pangalis G. A. Treatment of B-chronic lymphocytic leukaemia with monoclonal antibodies. Hematol. CellTher., 1997,39, SI, p. S102.

156. Turner M., Masek L.C., Hardy C.L., Parker C., Sweetenham W. Comparative adhesion of human haemopoietic cell lines to extracellular matrix components, bone marrow stromal and endothelial cultures. Brit.j. Haematology, 1998,100,112-122.

157. VallespiT., Miguel R., VilliamorN., Rozman M., Bosch F., Aquilar J.L, Montserrat E., Campo E. Hematol. CellTher., 1997, 39, SI, p. S90.

158. Vant Veer M.B., Gratama W. Quality assesment for immunophenotyping of leukaemia and lymphomas: the Dutch experience. Leukaemia and lymphoma, 1994, V13, SI, p. 77-79.

159. Vassilakopoulos T.P., Angelopoulou M.K., Gribabis D.A., Ronsson P. A., Pangalis G.A. The evolution of immunoglobulin disorders in B-chronic lymphocytic leukaemia (B?cell). Hematol. CellTher., 1997,39, SI,p. S72.

160. Villario A., Chilosi M., Adami F., Montaga 1., Deaglio S., Malavasi F., Caligaris?Cappio F. Human myeloma cells express the CD38 ligand CD31. Brit.j. Haematology, 1999,105,p. 441-444.

161. Vidovic A., Cemerikic V., Petrovic M., Colovic M. T-cell-rich B-cell lymphoma. A clinicopatological study of eleven cases. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 177.

162. Vladareanu A.M., Gherasim R., Bajenaru O., Mut Popescu

D., et. al. Neurological disorders in multiple myeloma. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 166.

163. Werda L., Zdzilowska E., Mensah P., Skotnicki A.B. The role of BCL-2 in apoptosis of B-chronic lymphocytic leukaemia. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 11-12.

164. Wierbowska A., Urbanska E., Rys H., Robak T. Circulating IL-6 type cytokines and SIL-6R in patients with multiple myeloma. Brit.j. Haematology, 1999,105,412-419.

165. WolowiecD., Frydecka I., Kopelko-Slowic K., Potocrek

S. et al Concentration of serum soluble form of ICAM-1 and e-selectin in patients with different phases of non-Hodgkins lymphoma. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 140.

166. Woodle E.S., Smith D.M., Bluestone J.A., OKirkman W.M., Green D.R., Skowronski E.W. Anti-human class IMHC antibodies induce apoptosis by a pathway that is distinct from the AS antigen-mediated pathway. Journal of Immunology, 1997, 158, p. 21 Sell 64.

167. Lipori D., Barda-Saad M., Ben-Hamo H., Rozenszajn L.A., et. al. Regulation of stroma dependent T-cell lymphopoiesis: involvement of novel sets of adhesion molecules. Brit. j. Haematology, 1998,102,1 ISH-EHA,p. 160-161.

168. Zweegman S., Veenhof M.A., Huijqens P.C., Drager A.M. Adhesion of megakaryocytic prigenitors to fibroblasts in an in vitro

stroma model: role of TPO, VLA-4 and VLA-5. Haematologica,

1999,84, EHA-4, abstr. book, p. 56-56.

169. Yamada O., Wang Yun-Hua, Moto J.I.T., Mizoguchi H. Clonal T-cell proliferation cansing pure red cell aplasia in chronic B-cell lymphocytic leukaemia successful treatment with cyclosporine following in vitro abrogtion of erythroid colony-suppressing activity. Brit. j. Haematology, 1998,101, p. 335-337.

170. Yuones A., Shell V., Consoli U., Clodi K., Zhao S., Palmer J.L., Thomas E.K., Armitage R.J., AndreeffM. Elevated levels of biologically active soluble CD40 ligand in the serum of patients with chronic lymphocytic leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998,100, p. 135-141.

Клиническое значение растворимых молекул адгезии ($Сй50 - 1САМ - 3), апоптоза (эСОЭб) и эШ-А класса I при лимфопролиферативных заболеваниях

А.К.Голенков, Т.А.Митина, В.В.Новиков, О.Т.Тагиров В.В.Королева, М.А.Крыжанов,Т.Д Луцкая, Д.В.Новиков, А.Ю. Барышников МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Нижегородский госуниверситет

В настоящее время достаточно большое внимание уделяется изучению роли растворимых молекул диффе-ренцировочных лейкоцитарных антигенов в патогенезе лимфопролиферативных заболеваний (множественная миелома - ММ, хронический лимфолейкоз - ХЛЛ, лимфо-мы - НХЛ). Функция растворимых молекул остается в значительной степени не уточненной, хотя существуют гипотезы, объясняющие их происхождение и участие в процессах межклеточного взаимодействия. [1,5,8].

Основными механизмами, обеспечивающими поступление растворимых молекул в жидкие среды организма является протеолиз или альтернативный сплайсинг м-РНК с образованием Б-фрагмента молекулы, содержащий участок, подверженный протеолитическому расщеплению.

Основная роль растворимых молекул в межклеточном взаимодействии, а также взаимодействии между клетками и стромой заключается в регуляции этих процессов [6]. Иммунорегуляторная функция реализуется по гуморально-опосредованному механизму, когда для связи с лигандом не нужен межклеточный контакт и, более того, он становится невозможным после состоявшегося гуморального взаимодействия.

Проблема растворимых молекул, имеющих свои гомологи на поверхностях опухолевых клеток в виде мембранных рецепторов, включает в себя и проблему растворимых лигандов к этим молекулам.

Известно, что РАБ-лиганд (РАБ-Ь) и СЕМО-лигавд (СЕМО-Ь) - это трансмембранные протеины, которые экспрессированы преимущественно на активированных Т-лимфо-

и микробиологии

цитах. В последнее время идентифицированы их растворимые гомологи. Изучение их функции in vitro показало, что при ХЛЛ CD40/sCD40L взаимодействие блокирует апоптоз в опухолевых клетках, опосредуемый FAS-L или флюдарабином. Добавление в культуру in vitro антител к CD40L или растворимого CD40 индуцировало апоптоз [12].

Очень важна роль растворимых молекул в клинической гематологии в связи с возможностью использования их в качестве интегрального показателя массы опухоли и факторов клинического прогноза. Установлено, что при ХЛЛ и НХЛ sVCAM-I, sICAM-I и sE-селектин находятся в прямой зависимости от массы опухоли и связаны со стадией заболевания [5,8,9,11]. Высокий уровень sAPO-1/FAS (CD95) коррелировал с большой массой опухоли и прогнозом при ХЛЛ [7]. Растворимый CD23 (sCD23) имеет важное значение для дифференциации стабильной и прогрессирующих форм ХЛЛ [10].

В связи с изложенным, представляет большой интерес изучение концентрации растворимых молекул адгезии (sCD50), апоптоза (sCD95) и sHLA-класс I при ММ, ХЛЛ и НХЛ в зависимости от клинических характеристик болезни с учетом проводимой противоопухолевой химиотерапии.

Материалы и методы

В настоящее исследование включено 22 больных, из них у 14 диагностирована ММ, у 5 - ХЛЛ, у 3 - НХЛ (лим-фома из клеток мантийной зоны в фазе лейкемизации -1, лимфоцитарная лимфома генерализированная - у 2).