CC BY
2
шению в подземных водах содержания соединении азота, фосфора и калия. Судя по изученному объекту-аналогу [4], на массиве перспективного орошения сточными водами ЖК возможно загрязнение подземных и поверхностных вод различными химическими соединениями и в первую очередь нитратами и другими биогенными веществами. В связи с этим при планировании орошения сточными водами необходим комплексный подход к решению задач по проектированию, строительству и эксплуатации оросительных систем, предусматривающий изучение санитарно-эпиде-миологических, геолого-гидрогеологических, поч-венно-мелиоративных, агрохимических и водохозяйственных особенностей с экологической оценкой процессов, протекающих в условиях интенсивного техногенного воздействия.
Литература
1. Использование сточных вод для орошения земель.—
М., 1983.
2. Керимкулов Т. И. // Эксплуатация гидромелиоративных систем и сельскохозяйственное водоснабжение.— М.,
1980.— С. 34—40.
3. Новиков В. М., Элик Э. Е., Музыненко J1. А. // Гидротехн. и мелиорация.— 1982.— № 7.— С. 83—85.
4. Хвесик М. А., Яцюта Л. ГКузька Т. Г. // Земледелие.— 1987.— № 4.— С. 36—37.
5. Шумаков Б. Б. // Вести, с.-х. науки.— 1987.— № 11.— С. 100—106.
6. Bangue de hisier: une experience dans les Cotes — du-Nord. // Cah. Ing.—Agronomes.— 1984.—Vol. 381.— P. 17—21.
7. Nahrstoffwirkung und Souderwirkungen der Lulle auf dem Grünland // Fragen der Lullerei Arbeitstag.— 1981.—
Bd. 7, N 1.— S. 135—196.
/
Поступила 22.02.89
© Л. В. АЛТОН, 1990
УДК 614.777:614.761 j:582.282.I23.2
Л. В. Алтон
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ ГРИБОВ РОДОВ
PENICILLIUM И BOTRYTIS В МОРСКОЙ И РЕЧНОЙ ВОДЕ, ЗАГРЯЗНЕННОЙ ЖИДКИМ СВИНЫМ НАВОЗОМ
Институт экспериментальной биологии АН Эстонской ССР, Таллинн
В пробах морской и речной воды часто обнаруживаются микроскопические грибы родов Pénicillium и Botrytis, попавшие туда с суши разными путями — из сточных вод, почвы, с остатками растений, деревьев и т. д. [3, 4, 6].
Имеются данные [ 1, 2], что одни виды этих грибов длительное время сохраняют в морской и речной воде жизнеспособность в инертном состоянии, а рост некоторых других видов при более благоприятных условиях температуры и наличии в воде компонентов питания продолжается.
В последние годы с переходом на пути интенсивного земледелия и вводом в эксплуатацию крупных животноводческих комплексов опасность загрязнения открытых водоемов жидким навозом повышается, так как системы переработки последнего не всегда соответствуют требованиям охраны природной среды от загрязнения. В литературе имеются малочисленные данные о воздействии жидкого свиного навоза (ЖСН) на деятельность микроорганизмов. Влияние же его на жизнедеятельность микроскопических грибов в морской и речной воде не изучено.
Целью настоящей работы являлось изучение способности к росту некоторых видов грибов p. Pénicillium и Botrytis при добавлении в среду ЖСН и установление сроков выживаемости их при разных температурах морской и речной воды, загрязненной ЖСН.
Объектами исследования служили следующие виды грибов: Pénicillium frequetans Westling,
P. canescens Sopp., P. lilacinum Thom, P. nigricans Bainier, Botrytis cinerea (Persoon.), Botrytis bassiana (Balsamo) Willemin [7], которые были выделены нами из дерново-среднеподзолистой полевой почвы ЭССР. ЖСН получен с экспериментального свиноводческого комбината опорно-показательного совхоза-техникума им. Ю. А. Гагарина Вильяндиского района и с Кехтнаского опор но-показательного совхоза-техникум а Рап-лаского района ЭССР. Использовали бесподстилочный навоз с содержанием сухого вещества 6, 7 и 15%. ЖСН стерилизовали эстостери-лом [8].
На первом этапе работы изучали способность к росту и скорость радиального роста колоний грибов Pénicillium и Botrytis на сусло-агаре (CA) и агаризованной (2 % агар-агара) морской (MA) и речной (РА) водах при добавлении в среду ЖСН в количестве 20 и 50 мл на каждые 100 мл среды (употребляли жидкую фракцию ЖСН с содержанием сухого вещества 7 %). Для сравнения были проведены посевы (без ЖСН) на CA, MA и РА. Все испытуемые виды грибов pp. Pénicillium и Botrytis предварительно выращивали на CA при температуре 18— 20 °С в течение 10 сут. После этого добавляли в каждую пробирку с чистой культурой по 5 мл стерильной морской или речной воды и полученную суспензию вносили в перечисленные выше среды (каждый вид отдельно на каждую среду). В качестве исходного материала использовали
соскоб воздушного мицелия с поверхности плотной среды. Посевы инкубировали при температурах 18—20, 4—6 и 0—2 °С. Эти температуры более близки к температурам воды в открытых водоемах, чем температура 23—25 °С, при которой обычно культивируют грибы в лабораторных условиях. Время инкубации при разных температурах определяли экспериментально по скорости появления и радиального роста колоний каждого вида грибов.
СА, богатый органическими веществами, является оптимальной средой для культивирования большинства видов грибов Pénicillium и Botrytis в лабораторных условиях, зато среды MA и РА больше соответствуют свойствам воды в открытых водоемах. Рост изучаемых видов грибов pp. Pénicillium и Botrytis на MA и РА при добавлении ЖСН считали косвенным подтверждением их способности к росту в загрязненной ЖСН морской и речной воде.
На втором этапе работы изучали сроки выживаемости и адаптационную способность отдельных видов грибов Pénicillium и Botrytis в морской и речной воде при добавлении в нее ЖСН (с содержанием сухого вещества 6 и 15 %). Опыты проводили с морской водой из Таллиннской бухты и водой реки Пирита (Северная Эстония). Качество воды определяли по унифицированным методам [5]. Состав воды (в мг/л): общий фосфор в морской воде — 0,11, в речной 0,092 Р, ортофосфаты — 0,046 и нитраты — 0,072 и 0,25 N, нитриты -
0,019 Р,
- 0,006 и
0,009 N, аммиак
0,064 и 0,070 N соответст-
венно; рН морской воды 7,8 и речной воды 8,2. В целях устранения других микроорганизмов воду стерилизовали при 0,5 атм в течение 20 мин. Затем добавляли ЖСН в пропорции 50 мл на каждые 100 мл воды. В каждую из приготовленных сред были внесены по одному виду грибов Pénicillium или Botrytis, предварительно выращенных на СА при 18—20 °С в течение 10 сут. После этого в каждую пробирку с чистой культурой добавляли по 5 мл стерильной морской или речной воды и полученную таким образом водную суспензию изучаемых видов грибов Pénicillium и Botrytis переносили в колбы с во-
дой. В качестве посевного материала использовали соскоб воздушного мицелия с поверхности плотной среды. Затем колбы с водой и посевным материалом выдерживали в течение 1 года при температуре 18—20, 4—6, 0—2 и —8— 12 °С.
Для установления периода выживаемости и адаптационной способности видов грибов Pénicillium и Botrytis в морской и речной воде при добавлении ЖСН проводили периодические (1 раз через 1—2 мес) посевы из воды на СА с выдерживанием посевов при 18—20 °С и на MA и РА при наличии в них ЖСН (50 мл на 100 мл среды с содержанием сухого вещества 6%). Посевы из воды, выдержанные при 18—20 °С, инкубировали на MA и РА при 18—20 °С, выдержанные при 4—6 и 0—2°С — при 18—20, 4—6 и 0—2 °С, выдержанные при —8— 1 2 °С — при 18— 20 и 0—2 °С. Эксперименты проводили в трех повторностях.
Исследование показало, что все изученные виды грибов Pénicillium и Botrytis (исключение составили P. lilacinum и В. bassiana) при температуре 18—20 °С были способны к росту на СА при добавлении в среду 20 мл ЖСН. P. frequetans и В. cinerea обнаружили способность к росту при добавлении ЖСН также на MA и РА (табл. 1). При повышении содержания ЖСН до 50 мл все изученные виды грибов не росли. При температуре среды 4—6°С были способны к росту при добавлении ЖСН (20 мл) только два вида на СА и один вид (В. cinerea) на РА. При дальнейшем понижении температуры выдерживания посевов (0—2 °С) грибы при добавлении ЖСН не росли, хотя на СА (без ЖСН) при этой температуре все изученные виды грибов рода Pénicillium росли (исключение составили P. lilacinum и P. nigricans). Четыре из них росли также при 0—2 °С на MA и РА
(без ЖСН).
Максимальные сроки инкубирования посевов при 18—20, 4—6 и 0—2°С составили 30—40, 60—70 и 90—100 сут соответственно, после чего эксперименты были закончены.
Время радиального роста колоний отдельных видов грибов Pénicillium и Botrytis различалось. При этом на MA и РА грибы росли зна-
Таблица 1
Рост грибов p. Pénicillium и Botrytis на различных средах
Вид грибов CA РА MA
без ЖСН с ЖСН без ЖСН с ЖСН без ЖСН с ЖСН
18—20 °с 4—6 °С 18—20 °С 4- -6 °с 18—20 °С 4—6 °С 18- -20 °С 4-6 °С 18—20 °С 4—6°С 18 -20 °С 4—6 °С
P. canescens + + + + + + + + + \
P. nigricans -h + + — *Г + - - + + - -
P. lilacinum + + - - + - - - + - - -
P. frequetans + + + + + + + - + + + -
В. bassiana + + - - + + - - + + - -
В. cinerea + + + • + + + + + + + + —Г
Примечание. рост вида отмечен,
не отмечен. ЖСН добавляли в количестве 20 мл на 100 мл среды
Таблица 2
Время радиального роста (в сут) грибов p. Pénicillium и Botrytis при добавлении ЖСН на различных средах
Вид грибов Характер роста колоний CA РА MA
без ЖСН с ЖСН без ЖСН с ЖСН без жен с жен
18— 20 °С 4-6 °С 18— 20 °С 4—6 °С • 18—20 °С 4—6 °С 18—20 °С 4—6 °С 18— 20 °С 4—6 °С 18-20 °С 4-6 °С
P. frequetans а 4 6 15 40 6 10 18 - 7 11 17 —
б 6 9 18 60 8 15 21 - 9 16 20 —
в 7 12 20 н/п 10 н/п н/п - 11 18 24 —
P. canescens а 3 8 10 - 7 15 12 - 10 15 14 —
б 5 10 15 - 10 20 17 - 15 20 19 —
в 7 15 20 - 12 н/п 23 - 20 25 25 —
Р. nigricans а 4 7 18 - 5 15 - - 10 20 - -
б 5 10 21 - 10 20 - - 15 25 - -
в 6 15 30 - 15 25 - - 20 30 - -
P. lilacinum а 4 10 - - 10 — - - 10 - -
б 7 15 - 15 — - - 15 - - -
в 9 20 - - н/п - - 20 - - -
В. bassiana а 4 7 - - 6 9 - - 7 10 - -
б 7 10 - - 8 13 - 9 14 - -
в 8 12 - 10 15 - - 12 н/п - -
В. cinerea а 5 8 13 45 6 10 14 18 8 11 19 —
б 6 11 17 60 7 14 18 27 9 15 25 —
в 9 13 19 н/п 9 17 21 н/п 11 н/п 29 —
П р и м е ч а н и е. а - - развитие колоний гриба едва заметно (диаметр колоний до 0,5 см), б- - диаметр колоний
1 см и больше, в — рост не отмечен, н/п — анализ не проводили.
чительно медленнее, чем на богатой органическими веществами среде СА. При добавлении в среду ЖСН время радиального роста колоний грибов обоих родов значительно увеличивалось по сравнению с таковым на средах без ЖСН (табл. 2). Исследование выживаемости изученных грибов обоих родов показало, что, попадая в морскую или речную воду, загрязненную ЖСН, они погибают не сразу.
Сроки их выживаемости при разных температурах воды различались. Из табл. 3 видно, что все изученные виды грибов Pénicillium и Botrytis (исключение составили P. frequetans и В. cinerea) погибали в загрязненной ЖСН морской и речной воде значительно быстрее, чем при тех же температурах в чистой (без ЖСН) воде. Угнетающее действие ЖСН на жизнеспособность отдельных видов изученных грибов было
Таблица 3
Выживаемость грибов p. Pénicillium и Botrytis (в мес) при разных температурах морской (М) и речной (Р) воды, загрязненной ЖСН
Вариант опыта Температура инкубирования, °с
Вид грибов 18- -20 4- -6 0- -2 Ф —8- -12
Р M Р M Р M Р M
P. canescens а 12 12 12 12 12 12 12 12
б 4—6 4—6 6—7 6 7 12 7—10 10—12 10—12
в 2—4 2—4 6—7 6—7 7 12 7—12 8—10 8—10
Р. nigricans а 12 12 12 12 12 12 12 12
б 4—6 4—6 6 8 6—8 10—12 10—12 12 12
в 2 4 2—4 4—6 2 4 8—10 8—10 10—12 10—12
Р. lilacinum а 5 4 5—7 5—7 10 10 3—5 3—5
б 2—4 2—4 5—7 5- 7 8—10 8—10 3—5 3—5
в 0—1 1—2 4 6 4—6 6—8 6—8 2—4 2—4
P. freguetans а 12 12 12 12 12 12 12 12
б 12 12 12 12 12 12 12 12
в 12 12 12 12 12 12 12 10—12
В. bassiana а 6—8 6—8 8—10 8 10 12 12 12 12
б 4—6 2—4 8—10 6—8 10—12 10—12 12 12
в 2 4 2—4 4—6 4 6 10—12 8—10 12 12
В. cinerea а 12 10—12 12 10—12 12 12 12 12
б 10—12 10—12 12 10 -12 12 12 12 12
в 6—8 8—10 12 10—12 10—12 10 12 12 12
Примечание, а — вода без ЖСН, бив — вода, содержащая 50 мл ЖСН с содержанием сухого вещества 15 % (б) и 6% (в) на 100 мл среды.
сильнее при тех вариантах экспериментов, где содержание сухого вещества в ЖСН было меньше, т. е. при добавлении в воду более жидких его фракций. Грибы погибали при 18— 20 °С быстрее, чем при более низких температурах выдерживания. При этом самым чувствительным к угнетающему действию ЖСН оказался P. lilacinum. Сроки выживаемости отдельных видов грибов Pénicillium и Botrytis в морской и речной воде в присутствии ЖСН колебались от нескольких недель до 1 года. Периодическими высевами из проб морской и речной воды, загрязненной ЖСН, на MA и РА при добавлении в них ЖСН было выявлено, что те виды грибов Pénicillium и Botrytis, которые не были способны к росту в присутствии ЖСН в начале наших экспериментов, не приобретали этой способности также в течение их выдерживания в морской и речной воде, загрязненной ЖСН. Поэтому данных по периодическим высевам на MA и РА при добавлении в них ЖСН в виде отдельных таблиц не приведено.
Таким образом, нами установлено, что отдельные виды микроскопических грибов родов Pénicillium и Botrytis в морской и речной воде, загрязненной ЖСН, погибают не сразу. Рост одних видов грибов в присутствии ЖСН прекращается и они сохраняют жизнеспособность лишь в инертном виде. Зато рост некоторых других видов в тех же условиях, но при бла-
гоприятных температурах среды может продолжаться. При более низких температурах воды эта способность не реализуется.
Проведенные эксперименты показали, что ЖСН следует считать сильным фактором загрязнения воды, токсическое влияние которого в более холодные сезоны года резко повышается.
Литература
1. Алтон' Л. В. // Микробиология.— 1983.— Т. 52, № 3.— С. 482—486.
2. Алтон Л. В. // Микробиол. жури.— 1985.— Т. 47, № 6.— С. 56—61.
3. Крисс А. Е. Микробиологическая океанография.— М., 1976.
4. Рудаков О. Л. Биология и условия паразитизма грибов рода Botrytis.— Фрунзе, 1957.
5. Унифицированные методы анализа вод / Под ред. Ю. Ю. Лурье.—М., 1971.
6. Coocke W. В. Our Mouldy Earth: US Department of the Interior: Federal Water Pollution Control Administration.— 1970.
7. Gilman G. I. A Manual of Soil Fungi.— 1957.
8. Tilga V. Desinfektsioon loomakesvatuses.— Tallinn, 1983.
Поступила 28.03.89
Summary. The growth ability of certain types of fungi Penicillium and Botrytis has been studied in marine and river water, contaminated by liquid swine manure (LSM). It has been found out, that addition of LSM stops P. lilacinum and B. bassiana growth. While the growth of the other types of fungi P. P. Penicillium and Botrytis, that were studied in the marine and river water, contaminated by LSM, may continue provided the temperature is favourable. The growth is discontinued at water temperature 4-6 °C and lower.
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990
\
УДК 614.777:656.6
В. П. Сиденко, Л. И. Звольский, А. Г. Власова, И. В. Парфенова, А. Г. Попов, Н. Н. Надворный
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ
ХАРАКТЕРИСТИК СУДОВЫХ СТОЧНЫХ ВОД ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОГО ОБОСНОВАНИЯ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ
СХЕМ НОВОГО ВОДООХРАННОГО ОБОРУДОВАНИЯ
ВНИИ гигиены водного транспорта Минздрава СССР, Одесса: Одесский медицинский институт им. Н. И. Пирогова
Среди факторов, приводящих к загрязнению Мирового океана, определенное место занимает морской флот. С увеличением интенсивности судоходства связано попадание в водоемы различных биотехнических и абиотических загрязнителей. В последнее десятилетие в литературе все чаще описываются случаи интоксикации, возникающей у людей как в результате непосредственного контакта с загрязненной водой, так и под воздействием вредных веществ, кумулирован-ных в рыбе, моллюсках, водорослях [1].
Одним из путей решения проблемы предотвращения загрязнения с судов являются совершенствование существующих и разработка новых способов и устройств очистки судовых сточных вод, включая создание замкнутых рециркуляционных фановых систем. Для апробирования новой техно-
логии очистки стоков требуется всесторонняя гигиеническая оценка ее в плане профилактики заболеваемости лиц, контактирующих с загрязненными водами, а также устранения вредного влияния на водоем и его биоту стоков с судов.
Целью работы явилась сравнительная гигиеническая оценка в эксперименте на животных токсичности неочищенных судовых сточных вод и вод, прошедших в стендовых условиях необходимую физико-химическую очистку и обеззараживание.
Исследования проведены на здоровых половозрелых белых крысах линии Вистар массой 220— 250 г (по 10 крыс в группе). Неочищенные сточные воды получали из камеры накопителя на судах, оборудованных установками очистки и обеззараживания сточных вод. В условиях лабораторного
