CC BY
51
УДК 615.322
ЖИРНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ МАСЛА СЕМЯН ПОДОФИЛЛА ШЕСТИТЫЧИНОЧНОГО
(PODOPHYLLUMHEXANDRUMROYLE)
Введение. В нашей стране и за рубежом широко культивируются растения рода Podophyl-lumL. семейства барбарисовых Berberidaceae, как лекарственные и декоративные. В качестве лекарственного растительного сырья используют корневища с корнями подофилла щитовидного PodophyllumpeltatumL. и подофилла Эмоди PodophyllumEmodi для получения препарата «Подо-филлин», применяемого при остроконечных кандиломах, папилломатозе мочевого пузыря, гортани, в гомеопатии [3,4]. Подофилл шеститычиночный успешно культивируется в климатических условиях Кавказских Минеральных Вод [1]. Виды подофилла включены в Британскую фармакопею и в фармакопею США [3]. Наряду с подземными органами импортируют в страны США и Европы плоды подофилла как пищевой продукт.
Объектом исследования явились семена подофилла шеститычиночного, собранные в августе 2010 года с культивируемых растений (Ставропольский край).
Цель - изучение жирнокислотного состава семян подофилла шеститычиночного.
Методика исследования. Количественное определение жирного масла семян Podophyl-lumhexandrumRoyle проводили методом циркулярной экстракции смесью спирта этилового 96% и хлороформа в соотношении1:1 в аппарате Сокслета. Содержание жирного масла в семенах составило 19-21%. Масло представляет собой вязкую жидкость желтого цвета без запаха. Определены основные константы жирного масла: Показатель преломления -1,484, кислотное число -5,24, йодное число - 106,4.
Ранее состав кислот жирного масла семян PodophyllumhexandrumRoyle изучался с использованием газожидкостной хроматографии, в ходе которой идентифицировали жирных кислот: линолевая, олеиновая, пальмитиновая, эруковая, линоленовая, стеариновая, миристиновая [2]. Применения метода храмато-масс-спектрометрии позволяет провести исследования с большей точностью.
Исследования проводили на храмато-масс-спектрометре АТ-5850/5973 AgillentTechnologies (США), с разрешающей способностью 0,5 аем во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эв. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату. Образец жирного масла анализировали на содержание свободной фракции и связанной в липидах кислой фракции. Анализ свободной фракции: жирное масло силилировали в 20 мкл БСТФА 15 мин при 80 оС и разбавляли гексаном до 100 мкл. 1 мкл смеси вводили в инжектор системы газового храматографа -масс-спектрметра (ГХ-МС) в автоматическом режиме. Анализ дает состав свободных жирных кислот, моноглицеридов, стеринов, спиртов.
Анализ суммарной, свободной и связанной в липидах кислой фракции.
Жирное масло (3-5 мг) обрабатывали в 0,4 мл IN растворе кислоты хлористоводородной в метаноле при 80 оС в течение 3 час (кислый метанолиз). Образовавшиеся при этом метиловые эфиры жирных кислот экстрагировали гексаном. Гексан упаривали, а сухой остаток силилировали в 20 мкл БСТФА 15 мин при 80 оС и разбавляли гексаном до 100 мкл. Для анализа 1 мкл смеси вводили в инжектор системы газового хроматографа-масс-спектрометра в автоматическом режиме.
Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза HP-5ms Хью-летт-Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирование температуры от 135 до 320 оС со скоростью 7град/мин. Температура инжектора и интерфейса 280 оС. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс-спектров NIST.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
С.П. ЛУКАШУК
Статья посвящена изучению подофилла шеститычиночного. (Ро(ЗорЬу11итЬехап(1гитКоу1е), культивируемого на Северном Кав-казе.В работе изложены результаты исследования компонентного состава жирного масла семян подофилла шеститычиночно-го.Впервые в масле семян подофилла шеститычиночного идентиви-цировано 20 жирных кислот: линолевая, олеиновая, гексадекановая, дегидроабиетиновая, абиетиновая, стеариновая и др.
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: подофилл шеститычиночный, жирные масла, стерины, хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС).
Результаты и обсуждения.В результате в жирном масле семян подофила шеститычи-ночного идентифицировано 30 компонентов, помимо жирных кислот, присутствуют ретинолы, токоферолы, ситостерины (табл. 1, рис. 1).
Таблица 1
Результаты идентификации химического состава жирного масла семян подофилла шеститычиночного
№/п Время, мин Содержание, % Название
1. 6,667 0,11 додекановая кислота
2. 7,691 0,19 гексадекан
3. 9,482 0,49 тетрадекановая кислота
4. 10,927 0,11 пентадекановая кислота
5. 12,012 0,15 7-гексадеценовая кислота
6. 12,073 0,43 9-гексадеценовая кислота
7. 12,351 13,66 гексадекановая кислота
8. 12,643 0,37 склорен
9. 12,710 0,10 мети-ди-третбутил-гидроксифинил-пропионат
10. 12,805 0,06 гексадеканол
11. 13,422 0,28 гептадеценовая кислота
12. 13,707 0,26 гептадекановая кислота
13. 14,535 5,98 дегидроабиетон
14. 14,691 20,88 линолевая кислота
15. 14,799 9,55 леиновая кислота
16. 14,847 4,74 цис-вакценовая кислота
17. 14,935 0,39 сандаракопимарадиен
18. 15,043 4,29 стеариновая кислота
19. 17,010 1,13 изопимаровая кислота
20. 17,261 0,69 эйкозеновая кислота
21. 17,580 0,70 эйкозановая кислота
22. 18,055 2,71 метил-дегидроабиетат
23. 18,584 18,70 дегидроабиетиновая кислота
24. 18,808 3,23 абиетиновая кислота
25. 18,930 2,71 абиетиновая кислота
26. 19,879 0,50 окозеновая кислота
27 22,049 0,44 тетракозеновая кислота
28. 27,652 0,42 эргостенил
29. 27,977 0,26 стигмастерил
30. 28,676 6,49 ситостерол
Сумма 100,00
Рис. 1. Хроматограмма липидных фракций семян подофилла шеститычиночного
Жирное масло семян подофилла шеститычиночного представлено 30 компонентами, которое также обогащено производными ретинола, токоферола и ситостерина .
Из приведенных данных видно, что нейтральные липиды значительно обога-щают такие вещества как тритерпенолы, стеролы и их эфиры. Эти соединения обладают высокой биологической активностью [4].
Основными по содержанию являются жирные кислоты: линолевая (кислота семейства ю-6), гексаденовая, олеиновая (ю-9), дегидроабиетиновая, эйкозадиеновая и стеариновая примерно в одинаковых количествах.
Выводы. Изучен химический состав масла семян подофилла шеститычиночного методом хромато-масс-спектрометрии. Экспериментально в жирном масле семян подофилла шеститычиночного установлено наличие 20 жирных кислот. Преобладающими в количественном отношении являются кислоты: линолевая (20,88%), дегидроабиетиновая (18,70%), гексадекановая (13,66%), олеиновая (9,55%), стеариновая (4,29%), додекановая (2,71%). Кроме того, идентифицированы соединения ситостерол (6,49%), дегидроабиетон (5,98%), эргостенил (0,42%), стигмастерил (0,26%) и др.
1. Лукашук, С.П. Интродукция видов РснЗорЬуПиш в регионе Кавказских Минеральных Вод / С.П. Лукашук, Л.Н. Меликова // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: материалы 58-й международной конф. по фармации и фармакологии. - Пятигорская ГФА, 2003. - С. 54-56
2. Международный стандарт ГОСТ 30418-96. Масла растительные. Метод определения жирнокис-лотного состава.-Введ. 1998.-01.01. Минск.: Из-во стандартов, 1996. - 7 с.
3. Фармакопея США ГЭОТАР - Медиа, т.1 - 2009 - С.1 398
4. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учеб. пособие / под.ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. - СПБ.: СпецЛит, 1999. -С. 228.
Литература
FATTY ACID COMPOSITION OF SEED OIL OF PODOPHYLLUM HEXASTEMNOUS (PODOPHYLLUM HEXANDRUM ROYLE)
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
e-mail: [email protected]
SP. LUKASHUK
Article is devoted to the study of podofillium hexastemnous (Podophyllum hexandrum Royle), cultivating in the North Cau-casus.This paper presents the results of the study of the component composition of fatty seed oil of podofillium hexastemn-ous.For the first time in the seed oil of podofillium hexastemnous 20 fatty acids were indentified: linoleic, oleic, hexadecanoic, dehydroabietic, abietic, stearic, etc.
Key words: podofillium hexastemnous, fatty oils, sterols, gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS).
