CC BY
16
РАЗДЕЛ 2. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ДИСЦИПЛИНЫ CHAPTER 2. THE THEORETICAL DISCIPLINES
ЗДОРОВЫЙ ОБРАЗ ЖИЗНИ HEALTHY LIVING
УДК 577.175.6:547.999.3
Р.М.ШАЙХЫНБЕКОВА, Б.А.ДЖУСИПБЕКОВА
С.Д.Асфендияров атындагы Цазац ¥лттыц медицина университетi, Алматы
«ЖЕЛЕ ПО-КАЗАХСТАНСКИ» ЖАНА ТАГАМДЫ^ ^ОСПАСЫНЫН, АНТИОКСИДАНТТЫ^ ^АСИЕТШ IN VIVO
ЖАГДАЙЫНДА АНЫ^ТАУ
Иммобилизациялыц стресстц эсер'ше агзаныц твзiмдiлiгiн жэне антиоксиданттардыц белсенд^^н жогарылату мацсатында зерттеуге жаца биопрепарат «желе по-Казахстанский» цолдандыц, оныц эсер'ш in vivo жагдайында зерттеп, бул препараттыц эритроциттердц стресске царсы туру MYMкiндiгiн арттырганын байцадыц. TyüÍHÓi создер: Микронутриент, гиподинамия, иммобилизациялыц стресс, антиоксидант, сапонин
Барлык элеуметпк факторлардын шшде тамактану адам денсаулыгына scepi жагынан алдыщы орынды иемденедi. Ол кдоылыс материалы жэне тiршiлiктiн K03Í ретiнде органимзде ЖYPiп жаткан химиялык YPДiстердiн езара эрекеттестiгiнiн негiзi болып саналады. ^азiрri кезде тамактану мэселесше ерекше мэн берiлуде. Микронутриенттердi жеткЫкт мелшерде тутынбау адам денсаулыгына, толы; 6ip ^лт екiлдерiнiн емiр CYPy ^зактыгы мен есiп-енуiне керi эсерi бар езектi факторлардын бiрi болып саналады [1]. Еылым мен техниканын дамыган заманында адамнын емiр CYPУ салтынын жанашыл езгеруi нэтижесiнде организмнщ стресс факторларына тезiмдiлiгiнiн темендеуi байкалады. ^оршаган ортанын колайсыз факторлары липидтердщ аскын тотыгуы YPДiсiнiн Yдеуiмен, мембрана байланыстырушы ферменттердiн белсенуiмен, эртYPлi заттарга мембрананын тандамалы еткiзгiштiгiнiн б^зылуымен сипатталатын клетка мембранасынын кдоылымдык жэне кызметпк езгерiстерiне алып келедi.
Организмнiн клеткалык денгейiнде патологиялык езгерiстердiн пайда болуына себепшi факторлардын бiрi - гипокинезия. Сондыктан организмнiн тезiмдiлiгiн жогарылатуга жэне де гиподинамиянын патологиялык езгерiстерiнiн алдын алу мен темендетуге багытталган тиiмдi жолдар мен эдiстердi iздестiру езект мэселелердiн бiрi саналады. Клетка мембанасы закымдаушы агенттердiн эрекетiне ете сезiмтал болып келетiндiктен, оларга метаболиттiк езгерктер организмнiн функцоналды жагдайын багалайтын басты алгы шарттардын бiрi ретiнде колданылылады. Ж^мыста иммобилизациялык стресстiн эсерiнен организмнщ тезiмдiлiгi мен антиоксидантык белсендiлiгiн жогарылату максатында Алматы технологиялык университетiнде дайындалган «Желе по-казахстански» жана биопрепарат колданылып зерттеу ЖYPгiзiлдi. Б^л коспа кдоамында тагамдык талшыктар мен дэрумендерден, ферментер мен макро-микроэлементтер жиынтыгы кездесетiн 17 табиги ингредиенттерден тирады. ЗЕРТТЕУ МАТЕРИАЛДАРЫ МЕН ЭД1СТЕР1 ^ойылган максат пен мiндеттерге жету yui^ тэжiрибеде in vivo жагдайында салмактары 200±20г болатын, 240 лабораториялык ересек ак егеук¥йрыктар
эритроциттерЫщ физиологиялык жэне биохимиялык касиеп^ зерттелдГ Зерттеу нысаны ретiнде эритроциттердi алуымыздыц себебi, эритроциттер мембранасыныц кдоылымы баска да ^лпалар мембранасыныц биохимиялык кдоылысыныц ерекшелiктерiмен сэйкес келедi [2] Тэжiрибелiк 2-топ егеук¥йрыктары стресс факторлары эсерЫе ^шыратылды. Иммобилизациялык стресс тудыру ушш арнайы жасалынган тар торга егеук^йрыктар 24 сагат бойы кимылсыз отыргызылды.
Биологиялык белсендi косылыстар аркылы эритроциттер мембранасыныц стресс эсерше тeзiмдiлiгiн арттыру Yшiн жасалынган тэжiрибелерде жануарлар стресс эсерЫе ^шыратылмас б^рын азыгына, ягни аскорыту жолымен «Желе по Казахстански» коспасы косылып берiлдi. Жануарлардыц 100 г дене салмагына 10 мг «Желе по Казахстански» десерт косылып берЫп, келесi KYнi жануарлар 1 тэултке арнайы жасалынган тар торга кимылсыз отыргызылып, стресс факторы тудырылды. Егеук¥йрыктардан алынган канды 1000g жылдамдыкпен центрифугада 10 мин айналдыру аркылы эритроциттер белшт алынды. Плазма мен канныц ак клеткаларын бeлiп алып, к¥рамында 150мМ NaCl, 5мМ Nа2НРО4 (рН-7,4) бар инкубация ортасы (ИО) буферлi ерiтiндiмен эритроциттер ем кайтара шайылды. Тэжiрибе жасалмас б^рын алдын ала эритроциттер 10 есе буферлi ерiтiндiмен с^йылтылып, 37оС температурада 5 мин термостатта кыздырылды.
Эритроциттердщ осмостык тeзiмдiлiгi натрий хлоридшщ гипотониялык ерiтiндiлерiндегi (0,9-0,35г/100мл, 4М) 20 мин термостатта 37"С температурада кыздырылган эритроциттер гемолиз децгей бойынша аныкталды. Na2COз-тiц 0,1г/100мл концентрациялы ерiтiндiдегi эритроциттердщ толык гемолиз децгейш 100%-га багалап, канныц кызыл TYЙiршiктерiнiц гемолиз децгейi пайыздык катынаста есептелшдк Оптикалык тыгыздылыгы 540 нм толкын ^зындыгында тiркелдi. Сахарозаныц гипертониялык ертндтершдеп эритроциттердiц KYЙi аталмыш Адрасиловтыц эдiсiмен [3] аныкталды. ^анныц кызыл клеткалары сахарозаныц 0,3 жэне 0,4 М ертндтерЫе орналастырылып, 37 С температурада термостатта 60 мин кыздырылды. Эритроциттерге гиперосмостык кысым осмостык KYшi жогары натрий хлоридшщ 4М ерiтiндiсi аркылы
тудырылды. Ол ушш 100 мкл суйылтылган эритроциттер 2 мл натрий хлоридЫщ 4М ерiтiндiсiне ;осылып, 37 С температурада 5 мин ;ыздырылды. Клеткалар центрифуга кемепмен тундырылып, 540нм спектрофотометрлт тол;ын узындыгында
супернатанттагы гемоглобин мелшерi аны;талды. Эритроциттердщ ас;ын тоты;ты; гемолизi (ЭАТГ) бурыннан белгiлi Покровский мен Абрарованын эдiсiн [4] езiмiздiн лабораторияда ендеп, жетiлдiру барысында [5]
аны;талды. Сапониннiн 0,1г/100мл концентрациялы ерiтiндiсiндегi эритроциттердщ толы; гемолиз денгейiн 100%-га багалап, ;аннын ;ызыл клеткасынын ас;ын тоты;ты; гемолиз денгейi пайызды; ;атынаста есептелЫдГ Оптикалы; тыгыздыгы 540нм тол;ын узындыгында тiркелiнiп, эритроциттердiн ас;ын тоты;ты; гемолиз денгеж темендегi формула бойынша аны;талды:
А = ТГ
s - тэжiрибе Y^riciHiH экстинкциясы, ТГ - толы; гемолиз кезшдеп тэжiрибе экстинкциясы.
Алынган нэтижелердщ арифметикалы; орта; керсеткш орта; квадратты; ауыт;уы, орта; арифметикалы; ;aTeci есептелiнiп, Microsoft Excel багдарламасымен еццелдi. Фишер-Стьюденттщ критерий! ескертд1, параметрлер сешмдЫп Р< 0.05. ВЕРТТЕУ НЭТИЖЕЛЕР1Н ТАЛЦЫЛАУ «Желе по-казахстански» десертшщ антиоксидантты; ;асиетiн аны;тау ма;сатында десерттi 14 ^н азыгымен бiрге ;абылдаган егеукуйры;тар эритроциттершщ натрий хлоридЫщ гипотониялы; ертндшершдеп осмосты; тезiмдiлiгiн зерттеу нэтижелерi 29 суретте берiлдi. Суреттен керiнiп тургандай, ба;ылау тобымен
(0,4 г/100 мл ертндюнде - 83,7+4,12%-га, 0,45 г/100 мл ертндкшде - 49,9+0,58%-га) салыстырганда гиподинамия эсершен (0,4 г/100 мл ертнд1анде -95,7±1,05%,-га 0,45 г/100 мл ертндюнде - 75,7±2,41%-га) жануарлар эритроциттерiнен гемоглобиннiн босап шыгуы 11,9% жэне 25,8%-га жогарылады, ал кунделтт жемше "Желе по Казахстански" ;оспасы ;осылган жануарлар (0,4 г/100 мл ертндкЫде - 72,69±2,34%-га, 0,45 г/100 мл ертндюнде - 21,5±3,51%-га) эритроциттерЫен гемоглобиннiн босап шыгуы 32,1% жэне 54,2%-га азайды.
Ординат ва: гемолиз децгеш, %. Абсцисс ва: 1 - бацылау, 2 - ИС, 3 - "Желе по Казахстански" цоспасы, 4 - "Желе по
Казахстански" цоспасы + ИС. А - 0,4г/100 мл NaCl, Б - 0,45г/100 мл та.
29 сурет - Ба;ылау жэне тэжiрибелiк топ эритроциттершщ осмосты; гемолизi
Эритроциттер мембранасына стресс фактордын зиянды эсерш "Желе по Казахстански" десерт1 (0,4 г/100 мл ертнд1анде - 88,6+1,56%, 0,45 г/100 мл ертнд1анде -53,2±0,91%) 7,1% жэне 24,4%- га темендетп (р< 0.001).
Тэжiрибе жумысынын келесi сатысында, ба;ылау жэне тэжiрибелiк топ жануарлары ;анынын ;ызыл клеткаларына сахарозанын 0,3 М жэне 0,4 М ертндтершде гипертониялы; ;ысым тудырылды (30 сурет).
Ба;ылау тобымен (0,ЗМ ертнд1анде - 32,6±2,85%, 0,4М ертндкшде - 52,9+3,18%) салыстырганда гипокинезия эсерЫен жануарлар (0,ЗМ - 13,1+4,12%, 0,4М -31,6±1,88%) эритроциттершен гемоглобиннщ босап
шыгуы 36,6% жэне 33,4%-га кебейсе, ал азыгына десерт косылган жануарлар (0,ЗМ ертнд1сшде - 13,1+4,12%, 0,4М ертнд1сшде - 31,6±1,88%) эритроциттершщ гемолиз децгеж 19,2% жэне 31,3%-га азайды. Эритроциттер мембранасы тeзiмдiлiгiне стресс
фактордьщ зиянды эсерш "Желе по Казахстански" коспасы (0,ЗМ ертнд1сшде - 34,5+1,74%, 0,4М ертндкшде - 40,36±3,34%) 34,6% жэне 46,02%- га темендетп.
Ординат еск гемолиз децгейi, %. Абсцисс еск 1 - бакылау, 2 - ИС, 3 - "Желе по Казахстански" коспасы 4 - "Желе по
Казахстански" коспасы + ИС. А - 0,3 М сахароза, Б - 0,4 М сахароза.
30 сурет - Бакылау жэне тэжiрибелiк топ эритроциттершщ сахароза ертндтершдеп гемолиз децгеж
Бакылау жэне тэжiрибелiк топ эритроцип^ натрий хлоридшщ 4М осмостык кысымы жогары ерiтiндiсiне орналастырылды. Осы жагдайдагы эритроциттердiц гемолизге ушырау шамалары 31 суретте керсеттдк Бакылау тобымен салыстырганда (73,84+1,54%) стресс эсершен эритроциттер гемолизi 19,9%-га артты, ал
азыгына кунделтт! коспа косылган жануарлар (47,12±4,22%) эритроциттершщ гемолиз! 26,2%-га кемщк Стресс эсерш (92,97±2,45%) "Желе по Казахстански" коспасы (75,39+2,04%) 17,5%-га темендетп (р< 0.01).
Ординат eсi: гемолиз децгеж, %. Абсцисс еск 1 - бакылау, 2 - ИС, 3 - "Желе по Казахстански" коспасы, 4 - "Желе по
Казахстански" коспасы + ИС. 31 сурет - Бакылау жэне тэжiрибелiк топ эритроциттершщ NaCl-нiц 4 М ерiтiндiсiндегi гемолиз децгеж
Эритроциттердщ ас;ын тоты;ты; тезiмдiлiгiн аны;тау нэтижесшде "Желе по Казахстански" биологиялы; белсендi ;оспаны тагамга ;осып беру, ба;ылау тобынын жануарларымен салыстырганда эритроциттер гемолизшщ темендеуiне экелiп, эритроциттердiн стреске ;арсы туру MYмкiндiгiн арттыра TYстi. Суретте
керсетiлгендей, эритроциттер мембранасынын ас;ын тоты;ты; гемолизiнiн керсеткiштерi бойынша иммобилизациялы; стресс эритроциттер гемолизш екi еседей арттырса, ал алдын ала "Желе по Казахстански" ;оспасымен ;осымша азы;тандыру стресс эсерiн айтарлы;тай шамада темендеттi (32 сурет).
Ординат еа: гемолиз денгейi, %. Абсцисс еа: Н2О2-нiн концентрациясы, мМ. 1 - ба;ылау, 2 - ИС, 3 - "Желе по Казахстански"
;оспасы, 4 - "Желе по Казахстански" ;оспасы + ИС. 32 сурет - Ба;ылау жэне тэжiрибелiк топ эритроциттершщ ас;ын тоты;ты; гемолизi
Алынган керсеткiштердi езара салыстыра отырып, ;оспа курамындагы антиоксидантты; А, С, Д, Е витаминдерi мен амин ;ыш;ылдарынын толы; жиынтыгынын болуы стресс эсершщ за;ымдаушы эсерiн азайтады, сонымен ;атар, онын курамында ферменттер мен цинк, мыс, кремний сия;ты микроэлементтердiн жиынтыгы клеткалы; денгейде организмнiн тезiмдiлiгiн арттырып, белсендi тiршiлiк етуiн ;амтамасыз етедi деп болжауга болады [6,7,8,9,10,11].
Сонымен, жануарлар рационына "Желе по Казахстански" коспасын енгiзу эритроциттер мембранасыныц гипотониялык, гипертониялык ерiтiндiдегi осмосты к жэне сутепнщ аскын тотьиындагы аскын тотыктык, сонымен катар, иммобилизациялык стресс эсерiне твзiмдiлiгi жогарылайтындьиы зерттеу нэтижелершен аныкталды. Олай болса, отандык жаца внiм - «Желе по-казахстански» десертi мембрана т^рактандырушы, протекторлык биологиялык белсендi коспалардыц бiрi болып табылады.
ЭДЕБИЕТТЕР Т1З1М1
1 Спиричев В.Б.Дефицит микронутриентов и отечественные продукты лечебно-профилактического питания для его коррекции. - М.: 1998. - 32 с.
2 Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитных мембран. - Минск: Наука и техника, изд. - Минск: Наука и техника, 1981. - 216 с.
3 Абдрасилов Б.С. Молекулярные механизмы действия тритерпеновых гликозидов даммаранового ряда на структурно-функциональное состояние мембран и клеток. - Автореф. дисс....докт. биол. наук: 14.00.31., 03.00.02. - М.: 1997. - 44 с.
4 Покровский А.А., Абрарова А.А. К вопросу перекисной резистентности эритроцитов // Вопросы питания. - 1964. - № 16. -С.44-49.
5 Мирошина Т.Н., Мурзахметова М.К., Утегалиева Р.С., Шайхынбекова Р.М., Михалкина Н.И. Корригирующее влияние индоламинов на состояние мембран эритроцитов при действии ионов кадмия // Вестник КазНУ. Сер.биол. - 2002 .- № 3. - С.80-86.
6 Stahl W., Sies H. Antioxidant defence: vitamins E and C and carotenoids // Diabetes. - 1997. - Suppl 2. - P.14-18.; Diplock A.T. Will the 'good fairies' please prove to us that vitamin E lessens human degerative disease // Free Radic. Res. - 1997. - Vol.27. -№5. - P.511-32.
7 Римарева Л.В. Биотехнологические и медико-биологические аспекты получения аминокислотных добавок на основе энзиматического гидролиза микробной биомассы // Хранение и переработка сельхозсырья. -2003. - №5. - С. 95-99.
8 Шарова. Н.Ю. Продукты микробного синтеза - новые пищевые добавки // Хранение и переработка сельхозсырья. -2003. - №5. - C. 101-104.
9 Aruoma O.I., Kaur H., Halliwell B. Oxygen free radicals and human diseases // J.R.Soc.Health. - 1991. - Vol.111, № 5. - P.172-177.
10 Brufau G., Quilez J., Angel Canela M. e.a. Evaluation of lipid oxidation after ingestion of bakery products enriched with phytosterols, beta-carotene and Спиричев В.Б.Дефицит микронутриентов и отечественные продукты лечебно-профилактического питания для его коррекции. М.: 1998. - 32 aalpha-tocopherol // Clin Nutr. - 2004. - Vol.23, № 6. -P.1390-1393.
11 Sies H., Stahl W., Sundquist A.R. Antioxidant functions of vitamins. Vitamins E and C, beta-carotene, and other carotenoids // Ann. N.Y.Acad.Sci. - 1992. - Vol.669. - P. 7-20.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНОГО СВОЙСТВА НОВОГО ПИЩЕВОГО ПРЕПАРАТА "ЖЕЛЕ ПО КАЗАХСТАНСКИ"
В УСЛОВИЯХ IN VIVO
Резюме: при действии жесткого иммобилизационного стресса изучали протекторное действие нового препарата «Желе -по Казахстански» на осмотический резистентность эритроцитов и установили, что при добавки препарата на корм животным, существенно снижаются гемолиз эритроцитов.
Ключевые слова: Микронутриент, гиподинамия, иммобилизационный стресс, антиоксидант, сапонин.
DEFINITION OF ANTIOXIDIC QUALITIES OF NEW FOOD BASED MEDICINE "KAZAKH JAM" IN VIVO
Resume: Due to impact of immobilizinq stresses,whit a view to improviinq the sustainability and active antioxidants wed new bio product "jelly on Kasakstan", its impract has been intestiqated "in vivo". We have noticed that usinq this druq erythrocytes can resist aqainst stress. Keywords: Mikronytrient, immobilizinq stresses, antioxidants, saponin.
