CC BY
13
АЛЛЕРГОЛОГИЯ и ИММУНОЛОГИЯ в ПЕДИАТРИИ, № 2 (21), июнь 2010
ИММУНОЛОГИЯ НЕАЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ / IMMUNOLOGY OF NON-ALLERGIC DISEASES
Honkanen J, Skarsvik S, Knip M, Vaarala O.
Poor in vitro induction of FOXP3 and ICOS in type 1 cytokine environment activated T-cells
from children with type 1 diabetes [Недостаточная индукция in vitro FOXP31 и ICOS2 в цитокиновом окружении 1 типа, активизированная Т-клетками от детей с диабетом 1 типа]
Diabetes Metab Res Rev. 2008 Nov-Dec;24(8):635-41.
Диабет 1 типа (Д1) характеризуется потерей толерантности к антигенам бета-клеток и разрушением собственной иммунной системой инсу-лин-продуцирующих бета-клеток в островках Лангерганса поджелудочной железы. Иммунологические факторы риска, связанные с Д1, обусловлены дефектами в поляризации Т-клеток и в функции регуляторных Т-клеток (Т^). Авторы в своем исследовании ставили целью изучить, связано ли ослабление индукции регулирующих механизмов в ходе генерации Т-клеточ-ных ответов на стимуляцию с Д1. Нативные Т-клетки были изолированы у 18 детей с недавно поставленным диагнозом Д1 (средний возраст 9.3 лет), 11 детей, у которых был Д1 в течение по крайней мере 1 года (средний возраст 10.6 лет) и 14 детей, не страдающих диабетом (средний возраст 8.1 лет). CD45RA + Т-клетки стимулировались РНА3 в течение 72 часов при цитокиновом
окружении 1-го типа [интерлейкин (IL)-12 и affm-IL-4] или 2-го типа (IL-4 и anti-IL-12). Т-клеточная поляризация и регулирование соотношения маркеров были проанализированы с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой. У детей с недавно диагностированным Д1 выявлена уменьшенная индукция FOXP3, ICOS и NFATc24 в T-клет-ках, активизированных в 1-м типе цитокинового окружения (p=0.007, p=0.001, и p=0.02), тогда как не было обнаружено различий между повышением регуляции маркеров активизации, T-bet5 и GATA-36 у детей с диабетом и здоровых детей. Сниженная индукция факторов, которая содействует понижающей модуляции Т-клеточных ответов на стимуляцию при 1-м типе цитокино-вого окружения, может внести свой вклад в развитие ответов аутореактивного типа 1 при Д1.
О.Р.
Axelsson S, Faresjo M, Hedman M, Ludvigsson J, Casas R.
Cryopreserved peripheral blood mononuclear cells are suitable for the assessment of immuno-
logical markers in type 1 diabetic children
[Замороженные мононуклеары периферической крови применимы для оценки иммунологических маркеров при диабете 1-го типа у детей]
Cryobiology. 2008 Dec;57(3):201-8. Epub 2008 Aug 12.
Замороженные мононуклеары периферической крови (МПК) обычно используются для оценки иммунных ответов в клинических испытаниях как по практическим причинам, так и для
минимизации межисследовательских вариаций, так и в качестве образцов, которые обычно собираются и изучаются в течение долгого времени. В этом исследовании изучен эффект криоконсер-
1 FOXP3 - транскрипционный фактор, регулирующий транскрипцию генов, ответственных за дифференцировку Т-клеток и экспрессию цито-кинов и других факторов, участвующих в супрессии иммунного ответа.
2 ICOS - inducible co-stimulator - индуицруемый костимулятор Т-клеток.
3 PHA - фитогемагглютинин - растительный алкалоид, который стимулирует процесс деления Т-лимфоцитов.
4 NFATc2 - Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 2 - нуклеарный фактор активизированных Т-клеток - транскрипционный фактор, активизирующий Т-лимфоциты.
5 T-bet - субпопуляция Th1.
6 GATA-3 - субпопуляция Th2.
43
АЛЛЕРГОЛОГИЯ и ИММУНОЛОГИЯ в ПЕДИАТРИИ, № 2 (21), июнь 2010
ИММУНОЛОГИЯ НЕАЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ / IMMUNOLOGY OF NON-ALLERGIC DISEASES
вирования на секрецию цитокина и хемокина и на экспрессию регуляторных маркеров, связанных с Т-клетками, в образцах, взятых у детей с диабетом 1 типа. Замороженные МПК были культивированы до и после замораживания с GAD(65)7 или с фитогемагглютинином (PHA). Была проанализирована секреция цитокинов (IL-5,-6,-10,-12,-13 - 17, IFN-gamma и TNF-alpha) и хемокинов (IP 10, MCP 1, MIP-1alpha, MIP-1beta и RANTES) в клеточном супернатанте с использованием мультиплексной флуорохром-ной методики (Luminex). Секреция FOXP3 и TGF-beta mRNA была выявлена мультиплексной полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией. Спонтанное увеличение секре-
ции IL-6,-10,-12,-13, IFN-gamma и MCP 1 и экспрессия mRNA FOXP3 и TGF-beta были обнаружены после криоконсервации. Стимуляция с GAD(65) привела к повышению уровней IL-6, IFN-gamma, TNF-alpha и MIP-1alpha, тогда как снижение секреции отмечено для IL-10 и IL-13 в замороженных МПК. Стимуляция с PHA вызвала более низкую секрецию IP 10, MCP 1 и RANTES и экспрессию FOXP3 mRNA после замораживания. Таким образом, замороженные МПК были применимы для оценки иммунологических маркеров, включенных в это исследование, даже притом, что их экспрессия могла отличаться от недавно обработанных клеток.
О.Р.
Jonson CO, Pihl M, Nyholm C, Cilio CM, Ludvigsson J, Faresjo M.
Regulatory T cell-associated activity in photopheresis-induced immune tolerance in recent
onset type 1 diabetes children [T-супрессор-ассоциированная активность при фотоферез-индуцированной иммунной толерантности у детей с недавно выявленным диабетом 1 типа]
Clin Exp Immunol. 2008 Aug;153(2):174-81. Epub 2008Jun 28.
Экстракорпоральная фотохимиотерапия (ЭКФ) продемонстрировала иммунологические эффекты. Предложен вклад в этот процесс цито-статического лимфоцитарного антигена 4 (С^А-4) вместе с рецепторами FoxP3 и трансформирующим фактором роста TGF-beta, связанных с активностью Т-супрессоров. Цель исследования состояла в том, чтобы оценить Т-супрессор-ассо-циированный эффект ЭКФ у детей с недавно выявленным диабетом 1 типа. Дети (п = 20) с диабетом 1 типа получили фотоферез с 8-метоксип-сораленом + ЭКФ или плацебо + симуляцию фереза. До лечения (1-й день) были собраны мононуклеары периферической крови (МПК) и после лечения (90-й день) были стимулированы фитогемагглютинином (ФГА) и связанной с диабетом 1 типа глутаматдекарбоксилазой 65 -GAD(65). Была количественно определена транскрипция С^А-4, зС^А-4, FoxP3 и TGF-beta mRNA. Экспрессия mRNA у пролеченных
фотоферезом в целом сохранялась в течение исследования. У детей, получавших плацебо, увеличились спонтанные С^А-4 mRNA (Р <0.05), но уменьшилась экспрессия после стимуляции GAD(65)- пептидом (Р <0.05) и ФГА (Р <0.05). Спонтанный TGF-beta (Р <0.05) увеличился, тогда как ФГА-(Р <0.01) и GAD(65)- пептид -индуцированная экспрессия (Р <0.01) TGF-beta уменьшилась в группе плацебо, но сохранялась в пролеченной группе. Без воздействия экспрессия С^А-4 и TGF-beta, стимулируемая ФГА и GAD(65)-пептидом, уменьшилась со временем, с параллельным сокращением GAD(65)-пептида и ФГА-стимулируемой экспрессии TGF-beta. Этим параметрам противодействовала ЭКФ. Результаты исследования указывают, что ЭКФ поддерживает Т-супрессор-ассоциированную активность у детей с недавно выявленным диабетом 1 типа.
О.Р.
7 GAD(65) - глутаматдекарбоксилаза - фермент, секретируемый инсулин-продуцирующими клетками поджелудочной железы.
44
