CC BY
24
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 57
Материалы и методы. Работа проведена на 40 неин- прямой кишки и некоторых форм лейкемий наблюдает-бредных беспородных крысах-самцах. Препарат вводили ся гиперэкспрессия изоформ PDE4 (A, B, D и др.), внутривенно ежедневно пятикратно в 3 суммарных дозах: что влияет на дезрегуляцию уровня циклического гуано-5, 15 и 30 мг/кг (максимальная суммарная доза превышает зинтрифосфата, обусловленную KRAS- или NRAS-он-эквитерапевтическую дозу мышей (в пересчете на крыс) когенами. Ряд спазмолитиков — ингибиторов PDE по-в 12 раз). ЛЛЛФ борхлорина растворяли в воде для инъек- казали слабый цитотоксический эффект (папаверин ций до получения рекомендованной концентрации — IC509 , 0 цМ на HCT116) и очень слабый противоопухоле-0,25 мг/мл. Срок наблюдения за животными после курса вый эффект на ксенографтах (силденафил). Нами ранее введения — 30 сут. синтезирована первичная комбинаторная библиотека Результаты. ЛЛЛФ борхлорина не оказывала влияния на основе виртуального скрининга на ингибирование на общее состояние животных, не вызывала их гибели PDE. Проведен ее первичный скрининг в МТТ-тесте и внешних проявлений токсичности, не изменяла поведен- на линиях HCT116 и K562. ческие реакции животных. Препарат в суммарной дозе Цель исследования — накопление информации по со-30 мг/кг вызывал незначительное снижение количества отношению структура — активность (SAR) для 3-амино-эритроцитов, уровня гемоглобина, показателей гематокри- изохинолинов (структурных аналогов папаверина) для того, та и увеличение количества тромбоцитов на 3-и сутки по- чтобы синтезировать и скринировать лидерные соедине-сле окончания введения с последующим восстановлением ния, активные в МТТ-тесте на линиях HCT116, K562 к 7-м суткам наблюдения. ЛЛЛФ борхлорина во всех дозах и в тестах in vivo; найти для лидерных соединений основ-вызывала умеренное дозозависимое нарушение как барь- ную молекулярную мишень, определяющую цитотоксиче-ерной (изменение активности аланинаминотрансферазы, ский эффект. аспартатаминотрансферазы), так и синтезирующей функ- Материалы и методы. Виртуальный скрининг провели ции печени (изменение показателей общего белка). Мор- в PASS-online и докингом (AutoDockTools-Vina). Библио-фологически в печени крыс (суммарная доза 30 мг/кг) тека разработана на основе скаффолда — 1-метил-3-ами-на 3-и сутки обнаруживали очаги гепатоцитов с признака- но-6,7-диметокси-изохинолина синтезом амидов и уре-ми вакуольной дистрофии, полностью исчезающие к 30-м идов. МТТ-тест проводили на линиях HCT116, K562. суткам. Препарат в суммарных дозах 15 и 30 мг/кг оказы- Соединения с IC50 менее 10 ^М передавали для фенотипи-вал влияние на функцию почек, вызывая на 3-и сутки на- ческого скрининга на 3DF-линиях Hke3-wt KRAS с PDE4A блюдения увеличение содержания креатинина примерно и Hke3-mt KRAS с PDE4B, а также для определения чуст-на 30 % и на 15-е — на 25—40 % суточного диуреза во всех вительности к 60 клеточным линиям DTP (NCI). изученных дозах. Морфологических изменений в почках Результаты. В виртуальном скрининге отбирались вир-крыс-самцов не отмечено. ЛЛЛФ борхлорина вызывала туальные соединения с вероятностью проявления ингиби-дозозависимое и обратимое к 30-м суткам изменение кле- рующей PDE-активности выше 0,4, а также способные ток ретикулоэндотелиальной системы (в селезенке и лим- образовывать водородные связи между их метоксилами фатических узлах крыс), что выражалось в большом числе и Phe372, Gln369 активного центра PDE4D (3IAK. pdb). измененных увеличенных макрофагов, предположительно Синтезированные уреиды 3-амино-изохинолина имели фагоцитировавших липосомы с борхлорином. Определены плохую растворимость, а также низкую активность в МТТ-уровни токсических доз: суммарные дозы 5 и 10 мг/кг оха- тесте: IC50 более 50 ^М. Амиды проявили лучшую раст-рактеризованы как высокие нетоксические дозы, т. е. дозы, воримость в диметилсульфоксиде и б0льшую активность не вызывающие нарушений в органах и тканях животных; на HCT116 в сравнении с К562. SAR показало, что пара-суммарная доза 30 мг/кг охарактеризована как низкая ток- замещенные амиды, в том числе и п-аминобензойной кис-сическая доза, вызывающая слабые изменения в органах лоты, были более активны по сравнению с мета-изомера-и тканях животных, обратимые к концу наблюдения. Пре- ми. В первичном МТТ-тесте были отобраны 3 лидерных парат во всех изученных дозах не вызывал функциональ- соединения: LGB-012E, LGB-014E и LGB-086. Дальней-ных и морфологических изменений в сердце и поджелу- ший скрининг выявил, что LGB-014E имело GI501,9 ^М дочной железе крыс. на T-47D в тестах DTP (NCI), а LGB-086 имело IC500,9 ^M Заключение. ЛЛЛФ борхлорина рекомендована для даль- на HCT116. Все 3 соединения показали ингибирование нейшего изучения. роста только на 3DF Hke3-mt KRAS-линиях от 38 до 60 % при 50 ^М. Чтобы показать биоактивность скаффолда бы-Г.Б. Лапа, Н.И. Моисеева ли синтезированы амиды, в которых 3-амино-изохинолин З-АМИНО-ИЗОХИНОЛИНЫ — НОВЫЕ был заменен похожим по геометрии и размерам 2-амино-ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ИНГИБИТОРЫ нафталином. Амиды 2-амино-нафталина проявили мень-ФОСФОДИЭСТЕРАЗЫ 4В (PDE4B) шую на 30 % активность в МТТ-тесте. ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Заключение. На основании вторичного МТТ-скрининга Москва были отобраны 2 лидерных соединения: LGB-014E и LGB-086. Введение. Фосфодиэстераза 4В (PDE4B) является со- Поскольку эти соединения ингибируют рост только на 3DF ставной частью сигналосомы некоторых GPCR-рецепто- Hke3-mt KRAS-линиях, то основной молекулярной мише-ров, например глюкагона, и участвует в регуляции уровня нью является PDE4B. Активность соединений обусловлена циклического аденозинмонофосфата. В линиях HCT116, именно присутствием 1-метил-3-амино-6,7-диметокси-изо-HKe3, МОКГ-4, в изолятах карцином толстого кишечника, хинолинового фрагмента.
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
