CC BY
50
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ТИЛОЗИНА-50 С НОВОКАИНОВОЙ БЛОКАДОЙ ПРИ ЛЕЧЕНИИ КАТАРАЛЬНОЙ БРОНХОПНЕВМОНИИ ТЕЛЯТ
Овсянников А.П., Сунагатуллин Ф.А., Хайруллин Д.Д.
Резюме
При лечений телят больных катаральной бронхопневмонией , эффективным методом является новокаиновая блокада по методу М.Ш. Шакурову, в сочетании с антибиотиком и витаминным препаратами.
COMPARATIVE EFFICACY OF THE TYLOSIN-50 WITH PROCAINE BLOCKADE IN THE TREATMENT OF CATARRHAL BRONCHOPNEUMONIA OF CALVES
Ovsyannikov A.P., Sungatullin F.A., Khayrullin D.D.
Summary
Treatment of calves of patients with catarrhal bronchopneumonia, an effective method is novocaine blockade by the method of M. sh. Shakurov, in combination with an antibiotic and vitamin preparations.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-238-2-150-154 УДК 57,023:57,085.2
ВЗАИМОСВЯЗЬ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ МАЛОНОВОГО ДИАЛЬДЕГИДА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ТКАНЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
Павлова О.Н. - д.б.н., доцент, науч. сотр., *Гуленко О.Н. - к.б.н., доцент, **Каримова Р.Г. - д.б.н., профессор, Борискин П.В. - к.м.н., науч. сотр.,
Девяткин А.А. - д.м.н., науч. сотр., Никитин А.Г. - к.б.н., Тороповский А.Н. - к.м.н.
ООО «ТестГен *Медицинского университета «Реавиз» **ФГБОУ ВО « Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: малоновый диальдегид, перекисное окисление липидов, сыворотка крови, печень, головной мозг, сердце, скелетные мышцы
Key words: malondialdehyde, lipid peroxidation, serum, liver, brain, heart, skeletal muscle
Несмотря на то, что с момента фор- концентрации которого может свидетель-
мулирования концепции перекисного ствовать о наличии аномально протекаю-
окисления липидов прошло уже довольно щих процессов в организме. Помимо этого,
много лет, остались вопросы, не затрону- МДА, образуясь при перекисном окисле-
тые систематическими количественными нии липидов, является очень активным
исследованиями. Образующиеся в резуль- веществом и может формировать различ-
тате физиологической активности свобод- ные аддукты и нерастворимые конгломе-
ные радикалы запускают окисление нена- раты с компонентами клетки, в том числе и
сыщенных жирных кислот с образованием с дезоксиаденозином и дезоксигуанозином
гидроперекисей липидов, которые влияют в молекулах ДНК, тем самым неся в себе
на состояние любых клеточных образова- мутагенный потенциал. ний. Одним из таких соединений является Концентрация МДА напрямую
малоновый диальдегид (МДА), повышение отражает степень оксидативного стресса в
организме [1,2]. Таким образом, оценка этого показателя необходима для определения причин и механизмов развития того или иного патологического процесса и предложения способов лечения заболеваний. МДА накапливается в различных органах и тканях организма, поэтому оценку распределения его концентрации удобнее всего рассматривать на экспериментальных животных [3,4,5,6]. Таким образом, цель нашего исследования состояла в изучении взаимосвязей распределения концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс.
Для реализации поставленной цели предстояло решить следующие задачи: определить концентрацию МДА в сыворотке крови и тканях печени, мозга, сердца, а также в скелетных мышечных тканях крыс; выявить взаимосвязи распределения концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс
Материал и методы исследований. Исследование проводили на 150 белых беспородных половозрелых здоровых крысах-самцах в возрасте 1 -го месяца, массой 180-200 г, которые содержались в виварии в стандартных условиях.
Исследование выполнено в соответствии с правилами лабораторной практики в Российской Федерации: приказ
Еоп -10-6 " V *К
Концентрацию МДА изучали в тканях печени, сердца, мозга и в скелетной мышечной ткани крыс, а также в сыворотке крови. Для этого крыс убивали в соответствии с этическими нормами под эфирным наркозом методом декапитации, затем проводили извлечение необходимых тканей, которые (кроме сыворотки крови) промывали физ. раствором и сразу замораживали. Гомогенаты готовили механическим измельчением тканей мас-
Минздрава СССР № 755 от 12.08.1977 г.; приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.; закон «О защите животных от жестокого обращения» от 01.12.1999 г.
Определение концентрации МДА осуществляли по методике Рогожина В.В., в соответствии с которой при высокой температуре в кислой среде малоновый диальдегид реагирует с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), образуя окрашенный три-метиновый комплекс с максимумом поглощения при длине волны 532 нм, который и регистрировали фотометрически. 0,5 мл гомогената ткани или сыворотки крови добавляли в 1 мл 15 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУК), перемешивали и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут. К 1 мл надосадочной жидкости (центрифугат должен быть прозрачен) добавляют 2 мл 0,8 %-го раствора ТБК.
Пробирки помещали в кипящую водяную баню на 15 минут. После охлаждения в течение 30 минут пробы колориметрировали при 532 нм на фоне контрольной пробы (1 мл ТХУК и 2 мл ТБК). Количество МДА в пробах рассчитывали, используя молярный коэффициент экстинкции 1,5610 м- см. Концентрацию малонового диальдегида рассчитывали по формуле 1:
сой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4), со скоростью 5000 об/мин в сосуде с двойными стенками, постоянно охлаждаемым проточной водой. [2]. Цифровой материал подвергали статистической обработке.
Результаты исследований. В результате экспериментов был получен массив числовых данных концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс. Полученные результаты подвергали статистической обработке (табл.1).
Расчет: (ммоль/л), где
Х - концентрация малонового диальдегида; Еоп - оптическая плотность опытной пробы; V - объем вносимой пробы, 0,5 мл;
К - коэффициент миллимолярной экстинкции перекиси водорода, равный 1,56*105 М-1 см .
Таблица 1 - Распределение значений концентрации МДА в сыворотке крови и тканях
малых экспериментальных животных
Описательная статистика объединённых групп N M Me Min Max 25 Perc 75 Perc 10 Perc 90 Perc
сыворотка крови 150 6,31 6,35 5,30 7,90 5,90 6,70 5,70 6,90
печень 150 11,69 11,60 10,1 0 13,30 11,30 12,30 10,65 12,60
головной мозг 150 9,84 9,80 8,30 11,50 9,40 10,40 8,70 10,60
сердце 150 6,58 6,60 5,40 7,50 6,20 6,90 5,85 7,20
скелетные мышцы 150 5,86 5,80 5,10 6,70 5,60 6,20 5,30 6,40
На первом этапе проведения статистического анализа проводили проверку на соответствие нормальному распределению концентраций малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс. Для этого использовался одновыборочный критерий Колмогорова - Смирнова.
По данным, представленным в таблице 2 видно наличие прямой корреляционной связи слабой силы между концентрацией МДА в сыворотке крови и тканях печени (0,18 при р < 0,025921).
Так как никаких других взаимосвязей между концентрацией МДА в сыворотке крови и тканях крыс с помощью коэффициента корреляции Спирмена выявлено не было.
В связи с этим решено было провести анализ с использованием критериев гамма кореляции и Кенделла Тау (табл.3). Для оценки взаимосвязи
В результате было установлено, что распределение концентраций МДА в сыворотке крови и тканях не соответствует нормальному. В связи с этим при дальнейшей статистической обработке нами были применены непараметрические методы анализа.
распределения концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях малых экспериментальных животных проводили исследование корреляций внутри группы наблюдения по непараметрическому коэффициенту коре-ляции Спирмена (табл. 2), а также с использованием коэффициентов гамма корреляции и Кенделла Тау (табл.3).
По данным, представленным в таблице 3 видно, что имеется только лишь одна слабая прямая корреляционная связь между концентрацией МДА в сыворотке крови и тканях печени.
Таблица 2 - Значение р для коэффициента корреляции Спирмена по распределению
концентрации МДА в сыворотке крови и тканям крыс
Корреляция по Спирмену во всех объединённых параметрах Valid N Spearman p-level
сыворотка крови/печень 150 0,181868 2,250045 0,025921
сыворотка крови/головной мозг 150 0,009695 0,117947 0,906270
сыворотка крови/сердце 150 0,113406 1,388602 0,167040
сыворотка крови/скелетные мышцы 150 0,025319 0,308120 0,758424
Таблица 3 - Коэффициенты гамма и Кенделла Тау корреляции по распределению концентрации МДА в сыворотке крови и тканям крыс_
Коэффициент гамма корреляции
Взаимоотношения параметров Valid N Gamma Z p-level
сыворотка крови/печень 150 0,134463 2,306350 0,021091
сыворотка крови/головной мозг 150 0,007768 0,132853 0,894310
сыворотка крови/сердце 150 0,083248 1,412586 0,157778
сыворотка крови/скелетные мышцы 150 0,021870 0,367952 0,712909
Коэффициент Кенделла Тау корреляци
Взаимоотношения параметров Valid N Kendall Tau Z p-level
сыворотка крови/печень 150 0,127008 2,306350 0,021091
сыворотка крови/головной мозг 150 0,007316 0,132853 0,894310
сыворотка крови/сердце 150 0,077789 1,412586 0,157778
сыворотка крови/скелетные мышцы 150 0,020263 0,367952 0,712909
Заключение. Таким образом, все три примененные способа непараметрического корреляционного анализа для оценки взаимосвязи распределения МДА в сыворотке крови и тканях малых экспериментальных животных выявили, что при концентрации малонового диальдегида в организме животных в пределах физиологической нормы определяется только слабая прямая корреляционная связь между концентрацией МДА в сыворотке крови и тканях печени.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Гильмутдинова, М.Ш. Проокси-дантно-антиоксидантный гомеостаз скелетных мышц крыс в условиях принудительных физических нагрузок / М.Ш. Гильмутдинова, О.И. Цебржинский // Фундаментальные исследования. - 2014. -№ 5-5. - С. 1012-1015.
2. Грибанова, Е.А. Влияние гумата калия на систему ПОЛ-АО печени цыплят-бройлеров / Е.А. Грибанова, Р.Г. Каримова, О.Н. Павлова // Ученые записки Ка-
занской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -
2015. - Т. 222. - №2. - С. 68-72.
3. Коробейникова, О.Н. Модификация определения продуктов перекисного окисления липидов в реакции с тиобарбитуро-вой кислотой / О.Н. Коробейникова // Лаб. дело. - 1989. - № 7. - C. 8-10.
4. Ксейко, Д.А. Процессы перекис-ного окисления липидов в норме и патологии / Д. А. Ксейко // Система перекис-ного окисления липидов - антиоксиданты в норме и патологии. - 2008. - С. 6-48.
5. Павлова, О.Н. Морфофункциональ-ные изменения печени крыс на фоне нагрузки фитогепатопротекторами / О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, В.В. Зайцев, О.Н. Гуленко, В.В. Леонов // Монография. -
2016. - 144 с.
6. Irshad, M. Superoxide dismutase and total anti-oxidant levels in various forms of liver diseases / M. Irshad, P.S. Chaudhuri, Y.K. Joshi // Hepatol. Res. - 2002. - Vol. 23, N 3. - P. 178-184.
ВЗАИМОСВЯЗЬ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ МАЛОНОВОГО ДИАЛЬДЕГИДА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ТКАНЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
Павлова О.Н., Гуленко О.Н., Каримова Р.Г., Борискин П.В., Девяткин А.А.,
Никитин А.Г., Тороповский А.Н. Резюме
В живых организмах постоянно протекают свободнорадикальные реакции
153
перикисного окисления липидов, в результате которых изменяется структура многих молекул. Так в белках окисляются некоторые аминокислоты, запуская протелиолетическую активность клетки, еще более подвержены окислению жирные кислоты, порождающие свободные радикалы. Одним из продуктов перекисного окисления липидов является малоновый диальдегид, в результате превращений которого в организме образуются нерастворимые липид-белковые комплексы - липофусцины.
В зависимости от активности процессов перекисного окисления изменяется концентрация малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях, коррелирующая с показателем уровня эндогенной интоксикации и развитием оксидативного стресса в организме, сопровождающего тяжелые патогенные состояния при широчайшем спектре заболеваний.
Для достижения цели исследования - изучения взаимосвязей распределения концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс, были решены следующие задачи: определена концентрация малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях печени, мозга, сердца, а также в скелетных мышечных тканях крыс; выявлена взаимосвязь распределения концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях крыс.
INTERRELATION OF THE DISTRIBUTION OF CONCENTRATION OF THE LITTLE DIALDEHYDE IN THE SERUM OF THE BLOOD AND TISSUES OF SMALL ANIMALS
ANIMALS
Pavlova O.N., Gulenko O.N., Karimova R.G., Boriskin P.V., Devyatkin A.A.,
Nikitin A.G., Toropovsky A.N.
Summary
In living organisms, free radical reactions of lipid peroxidation occur constantly, as a result of which the structure of many molecules changes. Thus, some amino acids are oxidized in proteins, triggering the pro teloioletic activity of the cell, and the fatty acids, which generate free radicals, are even more susceptible to oxidation. One of the products of lipid peroxidation is malonic dialdehyde, as a result of transformations of which insoluble lipid-protein complexes are formed in the body — lipofuscin.
Depending on the activity of peroxidation processes, the concentration of malondialdehyde in the blood serum and tissues changes, correlating with the indicator of the level of endogenous intoxication and the development of oxidative stress in the body, accompanying severe pathogenic states with the broadest spectrum of diseases. When achieving the goal of the study - studying the relationship of distribution of the concentration of malondialdehyde in serum and tissues of rats, the following tasks were solved: the concentration of malondialdehyde in serum and tissues of the liver, brain, heart, and skeletal muscle tissues of rats was determined; The relationship between the distribution of the concentration of malonic dialdehyde in the serum and tissues of rats was revealed.
The article presents the results of non-parametric correlation analysis to assess the relationship between the distribution of the concentration of malonic dialdehyde in serum and tissues of small experimental animals.
