наука,1995.-184 с.7. Павленко М.П., Павленко Л.Н. Долгозбережене середовище для крiоконсервацii сперми бугаiв- плiдникiв // Молочно-мясне скотарство:М iжв темат. наук. Збiрник.-Киев: Урожай, 1994.-Вип.85.-С. 70-72. 8. Хабибуллин И.Х., Каримова Л.Г., Киселёв В.Е. Технология замораживания спермы быков-производителей с применением полипропиленовых соломинок (рекомендации).-М.:Россельхозиздат, 1977.10 с.
ПОЛИМЕРЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В БИОТЕХНИКЕ РАЗМНОЖЕНИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Пронина Н.Ю., Василевский Н.М.
Резюме
В статье излагаются результаты исследований по изучению безвредности для половых клеток разных марок полиэтилена и рекомендаций их использования в качестве материала при изготовлении одноразовых стерильных полимерных приборов и инструментов, применяемых для асептического взятия, криоконсервации и хранения спермы быков-производителей в облицованных гранулах, а также искусственного осеменения коров и тёлок по Харьковской технологии.
POLYMERS AND THEIR USE BIOENGINEERING BREEDING FARM ANIMALS
Pronina N.Y., Vasilevsky N.M.
Summary
The paper presents the results of studies on the safety of germ sells of different grades of polyethylene and recommendations of their use as a material in the manufacture of disposable sterile plastic devices and tools used for aseptic taking cryopreservation and storage of semen sires in the coated beads as well as artificial insemination of cows and heifers in Kharkiv technology.
УДК:599.323.4:619:615.599.323.4:619:615
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА СУИФЕРРОВИТ-А НА ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ОРГАНИЗМЕ БЕЛЫХ КРЫС
Пудовкин Н.А. - доцент
Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова
тел. 89172136912
Ключевые слова: перекисное окисление липидов; антиоксидантная
система; малоновый диальдегид; диеновые коньюгаты; каталаза.
Keywords: peroxidant oxidation of lipids, malon dialdehyde, diene conjugates, catalase, antioxidant system.
Перекисное окисление липидов (ПОЛ) является метаболическим процессом, представленным практически во всех органах и тканях млекопитающих. Через стадию перекисных производных полиненасыщенных жирных кислот осуществляется синтез простагландинов; образование гидроперекиси холестерина является одним из звеньев синтеза некоторых стероидных гормонов; с помощью микросомальной системы ПОЛ происходит регуляция активности мембраносвязанных ферментов эндоплазматического ретикулума и, вероятно, осуществляется альтернативный путь окисления ненасыщенных жирных кислот [4].
Активные формы кислорода, образуемые в процессе ПОЛ, обеспечивают цитотаксическое действие фагоцитов, являются механизмом регуляции процесса деления клеток, обеспечивают модуляцию апоптоза, ротацию липидного и белкового компонентов биомембран [1].
Действие внешних прооксидантов и активация эндогенных механизмов генерации активированных кислородных метаболитов (О2 , Н202,) приводят к напряжению механизмов антиоксидантной зашиты и развитию окислительного стресса, который может проявляться на клеточном, тканевом и организменном уровнях [6].
Одним из таких препаратов является суиферровит-А, который синтезирован в ООО Фирма «А-БИО», г. Пущино. Суиферровит-А обладает высокой биологической активностью, повышает неспецифическую резистентность организма, нормализует водно-солевой и витаминный обмен. Витамины группы B стимулируют процессы кроветворения, в сочетании с декстраном железа усиливают эритропоэз. В то же время механизм действия данного препарата на процессы перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы до конца не изучен.
Материалы и методы. Исследования проводились в лаборатории кафедры экологии, биологии и физиологии СГАУ им Н.И. Вавилова. Препарат вводили в дозе 1 мл. Умерщвление белых крыс проводили на 5-е и 10-е сутки после введения препарата с целью взятия крови и тканей органов для биохимических исследований. Эвтаназия достигалась путем одномоментной декапитации согласно рекомендациям по деонтологии медико-биологического эксперимента [6]. Из собранной крови стандартным методом готовилась сыворотка.
Определение содержания малонового диальдегида проводили тиобарбитуровым методом [9].
Определение диеновых коньюгатов в сыворотке крови определяли
спектрометрическим методом [8].
Антиоксидантную обеспеченность организма оценивали по активности фермента каталазы в сыворотке крови и гомогенатах [5].
Результаты исследований. Известно, что диеновые коньюгаты образуются на начальных этапах перекисного окисления липидов, а малоновый диальдегид является конечным (вторичным) продуктом ПОЛ и накапливается в организме на завершающих этапах перекисного окисления биомолекул [2].
Установлено, что исходная концентрация диеновых коньюгатов в плазме крови составила 8,73±0,70 мкмоль/мл.
После введения препарата суиферровит-А в дозе 1 мл -внутримышечно содержание в сыворотке крови молекул с двумя сопряженными связями (диеновых конъюгатов) снизилось на 16,04% (7,33±0,21 мкмоль/мл) - на 5 сутки и на 10,42% (7,82±0,54 мкмоль/мл) - на 10 сутки по сравнению с контролем (при Р<0,050).
Таким образом, результаты проведённых исследований позволяют придти к заключению, что суиферровит в изученных дозах понижает содержание диеновых коньюгатов в сыворотке крови белых крыс.
Следующим этапом наших исследований было определение содержания малонового диальдегида в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс. Результаты исследований представлены в таблице 1.
Анализируя результаты в таблице 1 можно констатировать следующее. Концентрация малонового диальдегида в сыворотке крови к 5 и 10 суткам снизилась на 20,12% и 14,71% соответственно.
1. Содержание малонового диальдегида (нмоль/г) в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс при введении препарата
суиферровит-А в дозе 1 мл.
№ п/п Показатель Контроль Сроки наблюдения
5 сутки 10 сутки
1 Сыворотка крови 7,95±0,88 6,35±0,25* 6,78±0,59*
2 Г оловной мозг 10,43±0,70 10,21±0,33 10,89±0,33
3 Легкие 14,02±0,53 12,12±0,45* 12,87±0,36*
4 Почки 12,23±0,80 10,87±0,75* 11,00±0,66*
5 Печень 13,00±1,00 11,98±0,21* 12,46±0,13
6 Сердце 7,70±0,63 6,92±0,41* 7,01±0,14*
7 Скелетные мышцы 6,41±0,22 6,12±0,74 6,26±0,26
8 Толстый кишечник 8,04±0,73 7,65±0,47 7,89±0,89
9 Тонкий кишечник 5,81±0,37 5,74±0,14 5,66±0,39
10 Желудок 8,64±0,41 8,16±0,79 8,09±0,13*
Примечание (*) Р<0,050
Содержание МДА в тканях печени снизилось на 7,84 % - 5 сутки и 4,33% - 10 сутки. В почках концентрация МДА снизилась на 12,51%(5-е сутки) и 10,06% (10-е сутки). Снижение уровня концентрации МДА в тканях печени и почек в какой-то степени можно объяснить функциональной ролью этих органов при выведении препарата из организма.
Исходная концентрация МДА в ткани головного мозга составила 10,43±0,70 нмоль/г. После введения препарата этот показатель составил к пятым суткам 10,21±0,33 нмоль/г и к 10 суткам 10,89±0,33 нмоль/г. Незначительному увеличению содержания МДА в головном мозге способствуют высокое содержание в нем легко окисляемых субстратов, таких как полиненасыщенные жирные кислоты и сравнительно низкий уровень антиоксидантов [5].
Содержание МДА в тканях легких достоверно понижается на 13,55 -9,21% по сравнению с контролем.
Исходное содержание МДА в сердечной мышце составляет 7,70±0,63 нмоль/г. После введения препарата суиферровит-А концентрация малонового диальдегида понизилась на 10,12% (6,92±0,41 нмоль/г) на пятые и на 8,96% (7,01±0,14 нмоль/г) на десятые сутки.
Среднее содержание малонового диальдегида в скелетной мускулатуре находится на уровне 6,41±0,22 нмоль/г, после введения суиферровита-А, содержание МДА снизилось на 4,58 - 2,80%
относительно контрольного значения.
В стенках желудочно-кишечного тракта уровень малонового диальдегида остался примерно на одном уровне по сравнению с контролем.
2. Активность каталазы (ммоль/л) в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс при введении препарата в дозе 1 мл.
№ Показатель Контроль Сроки наблюдения
п/п 5 сутки 10 сутки
1 Сыворотка крови 18,97±0,58 19,25±0,37* 19,12±0,87
2 Г оловной мозг 10,01±0,13 8,65±0,99* 9,29±0,69
3 Легкие 38,93±0,85 35,19±1,01* 35,85±1,12*
4 Почки 61,56±0,55 78,12±0,22* 81,69±0,33*
5 Печень 63,23±0,98 83,85±0,57* 89,25±0,99*
6 Сердце 24,36±1,23 23,98±0,77 24,25±1,09
7 Скелетные мышцы 30,29±0,98 29,99±0,89 31,01±0,33
8 Толстый кишечник 17,36±0,87 17,58±0,69 17,56±0,66
9 Тонкий кишечник 17,00±0,54 17,33±0,71 17,89±0,32
10 Желудок 18,12±0,66 19,00±0,64 18,86±0,12
Примечание (*) Р <0,050
Следующим этапом наших исследований было изучение влияния препарата суиферровит-А на активность каталазы в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс. В таблице 2 приведены результаты, характеризующие активность каталазы в тканях и органах белых крыс.
Наиболее высокая активность фермента у контрольных животных обнаружена в печени и почках. Полученные нами результаты согласуются с литературными данными [3].
После введения препарата происходит повышение активности каталазы в печени во все наблюдаемые сроки. Так, на 5 сутки активность фермента повысилась до 83,85 ммоль/л, а на 10 сутки она составила 89,25 ммоль/л. У контрольных животных активность фермента в тканях печени составляет 63,23 ммоль/л.
В почках также отмечается стабильное повышение активности фермента во все сроки наблюдения и она составляет соответственно на 5 и 10 сутки: 78,12 ммоль/л и 81,69 ммоль/л, по сравнению с контролем 61,56 ммоль/л.
В тканях легких, кишечника и головного мозга статистически достоверные изменения незначительны, а в некоторых случаях, активность фермента после введения препарата суиферровит-А несколько снижена в сравнении с контролем.
Так, в тканях легких показатель активности фермента составляет на 5 - 35,19 ммоль/л и на 10 сутки 35,85 ммоль/л. У контрольных животных активность каталазы - 38,93 ммоль/л.
В тканях головного мозга активность каталазы на 5 и 10 сутки составляет 15,72 и 7,19 % от уровня активности фермента контрольных животных.
В сыворотке крови максимальное увеличение активности каталазы отмечается на 5 сутки и составляет 19,25 ммоль/л, а на 10 сутки она равна - 19,12 ммоль/л, т. е. находится на уровне активности фермента контрольных животных( 18,97 ммоль/л).
Заключение. Таким образом, препарат суиферровит-А повышает активность фермента каталаза, активизируя тем самым антиоксидантную систему защиты организма и снижает накопление в организме продуктов перекисного окисления липидов, малонового диальдегида и диеновых коньюгатов.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Григлевски Р.Е. // Новости фармации и медицины, 1997, № 1 -2, С. 2-8. 2. Коган А.Х., Кудрин А.Н., Николаев СМ. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии - М., 1986, -с. 68-71. 3. Колесова О.Е., Маркин А.А., Федорова Т.Н. / / Лаб. дело, 1984, № 9, с. 540-546. 4. Королюк М.А. Медицинская биохимия // Лабораторное дело. - 1988. - №1. - С. 40. 5. Матюшин А.И., Осняч B.C., Павлова Т.Н. Деонтология медико-биологического эксперимента. - М.: МЗ РСФСР,
1987. 6. Меньшикова Е.Б., Зенков H.K. / / Терапев. Арх., 1991, № 1 1, с. 7. Стальная Е.А. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.63 -64. 8. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Орехович. — Москва: Медицина, 1977. — С. 66 -68.
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА СУИФЕРРОВИТ-А НА ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ОРГАНИЗМЕ БЕЛЫХ КРЫС
Пудовкин Н.А.
Резюме
В статье изложены результаты исследований влияния препарата суиферровит -А на процессы перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы защиты организма белых крыс.
Установлено, что препарат суиферровит -А снижает накопление в организме продуктов перекисного окисления липидов, малонового диальдегида и диеновых коньюгатов и активизирует антиоксидантную систему организма.
EFFECT OF THE PREPARATION OF A SUIFERROVIT OF LIPID PEROXIDATION IN
THE BODY OF WHITE RATS
Pudovkin N.A.
Summary
The paper presents the results of studies of the effect of the drug suiferrovit-A on lipid peroxidation and antioxidant defense system in white rats.
It is established that the drug suiferrovit-A reduces the accumulation in the body of lipid peroxidation products, malondialdehyde and diene conjugates and activates the body's antioxidant system.
УДК:599.323.4:619:615.599.323.4
БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ОРГАНИЗМЕ ЩУКИ ОБЫКНОВЕННОЙ (ESOX LUCIUS)
Пудовкин Н.А. - доцент; Поперечнева Т.Ю. - доцент; Кутепова И.Ю. - доцент Саратовский государственный аграрный университет, тел. 89172136912
Ключевые слова: селен, каталаза, малоновый диальдегид,