CC BY
11
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
15
Г.Г. Варванина1, А.В. Смирнова12, И.Е. Трубицына1, Л.В. Винокурова1, А.С. Гуляев1, К.К. Носкова1, А.С. Дорофеев1, Ж.В. Борунова1
исследование концентрации матриксной металлопротеиназы 9, эндогенного ингибитора матриксной металлопротеиназы 1 (TIMP1), ингибитора тканей матриксной металлопротеиназы 2 (TIMP2) при заболеваниях поджелудочной железы
1ГБУЗ«МКНЦим. А.С. Логинова ДЗМ», Москва, Россия; 2ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. Ремоделирование соединительной ткани при воспалении поджелудочной железы является ключевым событием для развития опухолевых очагов при раке головки поджелудочной железы (РПЖ).
Цель исследования. Определить концентрацию матриксной металлопротеиназы 9 (ММР9), эндогенного ингибитора матриксной металлопротеиназы 1 (TIMP1) и ингибитора тканей матриксной металлопротеиназы 2 (TIMP2) в крови больных с заболеваниями поджелудочной железы.
Материалы и методы. В исследование включены 72 больных хроническим панкреатитом (ХП) и РПЖ, средний возраст 54 ± 12 лет (46 мужчин и 26 женщин). Для анализа данных больные были разделены на 4 группы: контроль — 13 (без патологий поджелудочной железы), РПЖ — 16, ХП с постнекротическими кистами — 23, ХП без кис-тозных образований — 37. В сыворотке крови определяли концентрацию ММР9, TIMP1 и TIMP2 (нг/мл) методом ELISA. Статистический анализ данных проводили c использованием непараметрического критерия Манна-Уит-ни после оценки характера распределения данных; достоверность различий считали существенной прир <0,05.
результаты. Выявлено достоверное повышение уровня ММР9 в сыворотке крови больных ХП и РПЖ по сравнению с группой контроля (р = 0,008). Также было выявлено значимое различие концентраций TIMP1 (p = 0,01), но не для TIMP2 (p >0,05) при сравнении групп контроля и РПЖ. Между группами контроля и ХП (группы с кистами и без) статистически значимых различий выявлено не было.
Заключение. Исследование изменения концентрации ММР9 и тканевых ингибиторов является перспективной темой для дальнейшего изучения хронического воспаления как фактора опухолевого роста.
А.А. Вартанян, Д.А. Хоченков, О.С. Бурова
взаимосвязь между аутофагией и железом в васкулогенной мимикрии
ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. Аутофагия, катаболический процесс удаления отработанных органелл, долгоживущих белков и продуктов распада, имеет патологически повышенную активность в опухолевых клетках. Стремительный рост злокачественной опухоли требует значительно большего расхода железа, чем метаболизм нормальных клеток.
Цель исследования. Получение экспериментального подтверждения существования взаимосвязи между аутофагией и железом в васкулогенной мимикрии (ВМ).
материалы и методы. В работе были использованы 2D-и 3D-культивирование клеток, электрофорез и вестерн-блот, проточная цитофлуориметрия, siRNA-опосредован-ный нокдаун генов, флуоресцентная микроскопия.
результаты. О базовом уровне аутофагии судили по экспрессии маркера последней стадии аутофагии — LC-3B и флуоресценции монодансилкадаверина. В клетках меланомы, формирующих сосудистоподобные структуры (СПС) на матригеле, базовый уровень аутофагии был значительно выше, чем в клетках, не способных участвовать в ВМ. Блокирование аутофагии фармакологическими ингибиторами инициации и терминальной фазы аутофагии ингибировало формирование СПС. Полученные результаты были подтверждены siRNA-опосредованным подавлением экспрессии гена BECN1, инициатора аутофагии, и ATG5, маркера необратимой стадии аутофагии. При нокдауне гена BECN1 клетки не теряли способности мигрировать, но рисунок структур, сформированных на матригеле, заметно отличался от геометрии классических СПС. Клетки меланомы с нокдауном гена ATG5 меняли форму с ве-ретеноподобной на шаровидную, сохраняли способность мигрировать, формирования СПС не наблюдалось. Низкомолекулярный ингибитор ВМ, ЛХС-1269, заметно снижал базовый уровень аутофагии. Хелатирование железа снижало на 20—25 % экспрессию CD71 и полностью блокировало формирование СПС. В присутствии донора железа клетки меланомы ненормально удлинялись, формировали в 3D-культуре СПС с многочисленными разрывами в сети. Хелатор железа повышал базовый уровень аутофагии в 2 раза. Донор железа не влиял ни на аутофагию, ни на экспрессию CD71.
Заключение. Аутофагия обеспечивает прогрессию опухоли 2 путями: способствует выживанию опухолевых клеток при стрессе и индуцирует частичную трансдиф-ференцировку опухолевых клеток в эндотелиоподобный фенотип. Хелатирование железа блокирует ВМ и повышает аутофагию.
П.И. Васильчиков, А.Д. Перенков, Д.В. Новиков, С.Г. Фомина, В.В. Новиков
механизм клеточной гибели, вызываемой рекомбинантным иммунотоксином Против муцина 1
ННГУ им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород, Россия
введение. Муцин 1 (МиС1) является перспективной мишенью для таргетной иммунотерапии онкозаболеваний в связи с изменением степени гликозилирования и гиперэкспрессией на поверхности клеток 70—80 % карцином. Ранее нами был получен рекомбинантный иммунотоксин против опухолеассоциированного МиС1 человека, представляющий собой мини-антитело (scFv) против МиС1, слитое с ротавирусным энтеротоксином №Р4, который демонстрировал специфическое взаимодействие с опухолевыми клетками человека линий Со1о-205 и MCF-7, ги-перэкспрессирующими МиС1, и выраженную цитотокси-ческую активность.
Спецвыпуск / том 17 / 2018
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
