CC BY
44
ВЗАИМОСВЯЗЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ В ОПУХОЛИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С ПОЛИМОРФИЗМОМ ГЕНОВ МЛУ И ЦИТОКИНОВ
В.В. ВОЛКОМОРОВ1, Е.ю. ГАРБУКОВ2, М.К. МЕРЗЛЯКОВА1,
М.М. ЦЫГАНОВ1, м.в. халюзова1, н.в. литвяков12
ГОУ ВПО «Томский государственный университет»1 НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск2
Изучена взаимосвязь уровня экспрессии генов множественной лекарственной устойчивости: MDR1 (NM_004996.3), BCRP (NM004827.2), BCRP1 (NM004915.3), LRP1 (NM005115), GSTP1 (NM 000852.2), MRP1 (NM004996.3), MRP2 (NM000392.3) и MRP3 (NM003786.2) в опухоли молочной железы до лечения с полиморфизмом генов: MDR1 Ex27-55C>T rs1045642; MRP1 Ex13+7C>T rs35605; BCRP IVS10+2227G>A rs2725264; GSTP1 Ex5-24A>G rs1695; hOGG1 977C>G (Ser326Cys) rs1052133; IL4 -590C>T rs2243250; IL6 174G>C rs1800795; IL10 -592C>A rs1800872; TNF-a -238A>G rs361525; TNF-a -308A>G rs1800629; FGFR2 IVS2+ 7033T>C rs1219648.
Материал и методы. В исследование были включены 55 больных РМЖ Т14N03M0 с морфологически верифицированным диагнозом и операбельной формой. Схема комбинированного лечения включала: 2-4 курса неоадъювантной химиотерапии; операция в объёме радикальной мастэктомии, радикальной резекции или секторальной резекции; адъювантная химиотерапия, адъювантная лучевая терапия или гормональная терапия по показаниям. Схемы НАХТ: FAC, CAF, CAXeloda (циклофосфан, доксорубицин, фторурацил, кселода), таксотер. Эффективность НАХТ оценивалась инструментальными методами (УЗИ, маммография) по критериям ВОЗ. Материалом для исследования служила мРНК, выделенная из биопсийного опухолевого материала до лечения и операционного материала после НАХТ. Оценку экспрессии генов МЛУ и мишеней проводили при помощи количественной ПЦР в режиме реального времени на амплификаторе RotorGene 6000. Экспрессию генов выражали в процентах по
отношению к гену-рефери фермента GAPDH (glyceraldehydes - 3-phosphate dehydrogenase). Генотипирование проводили с праймерами и зондами TaqMan оригинального дизайна при помощи ПЦР в режиме реального времени.
Результаты. У носителей гетерозиготного СТ генотипа MRP1 Ex13+7C>T rs35605 экспрессия гена LRP1 в опухоли молочной железы в 1,5 раза выше, чем у носителей дикого СС генотипа, также в 5 раз (р=0,0007) повышена экспрессия этого гена и гена MRP1 у носителей гетерозиготного CG генотипа гена hOGG1 977C>G (Ser326Cys) rs1052133. Установлена реципрок-ная взаимосвязь полиморфизма MDR1 Ex27-55C>T rs1045642 с экспрессией гена GSTP1, и полиморфизма GSTP1 Ex5-24A>G rs1695 с экспрессией MDR1. У носителей минорного ТТ генотипа MDR1 Ex27-55C>T rs1045642 экспрессия гена GSTP1 в опухоли достоверно выше (р=0,011) по сравнению с гетерозиготным СТ и мажорным СС генотипом и экспрессия гена MDR1 повышается у носителей гетерозиготного AG генотипа GSTP1 Ex5-24A>G rs1695. Кроме того, полиморфизм MDR1 Ex27-55C>T rs1045642 регулирует экспрессию самого гена MDR1 у носителей минорного ТТ генотипа экспрессия MDR1 выше, чем у других генотипов. С полиморфизмом BCRP lVs10+2227G> A rs2725264 экспрессия генов МЛУ не взаимосвязана. Из всех изученных полиморфных вариантв генов цитокинов установлена только взаимосвязь SNP рецептора фибробластного фактора роста FGFR2 IVS2+7033T>C rs1219648 с экспрессией гена MDR1. У носителей дикого TT генотипа экспрессия MDR1 в 3,5 раза выше (р=0,02), чем у носителей гетерозиготного и мутантного генотипов.
Таким образом, нормальная генетическая изменчивость играет существенную роль в регуляции экспрессии генов множественной
лекарственной устойчивости в опухолевой ткани молочной железы.
ОСОБЕННОСТИ СОСТАВА ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ИНФИЛЬТРАТА В ПЕРВИЧНОЙ ОПУХОЛИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ РАЗВИТИИ ЛОКАЛЬНЫХ РЕЦИДИВОВ И МУЛЬТИЦЕНТРИЧЕСКОМ РОСТЕ
С.В. ВТОРУШИН12, М.В. ЗАВЬЯЛОВА12, Н.С. ТЕЛЕГИНА1
ГОУВПО «СибГМУРосздрава», г. Томск1 НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск2
Актуальность. Рак молочной железы является наиболее распространенным злокачественным новообразованием у женщин. Представляло интерес оценить качественный состав иммунокомпетентных клеток в воспалительной инфильтрации рака молочной железы в случаях множественного роста опухоли и при возникновении локальных рецидивов.
Целью настоящего исследования явилось изучение качественного состава клеток воспалительного инфильтрата в опухоли рака молочной железы при развитии локальных рецидивов и мультицентрическом росте.
Материал и методы. Исследовался операционный материал от 61 больной инвазивным протоковым раком молочной железы Т12М0 без предоперационной терапии. Средний возраст пациенток составил 56,8±9,8 года. Хирургическое лечение проводилось в объеме радикальной мастэктомии или радикальной резекции молочной железы. В послеоперационном периоде 96 % больным проводилась адъювантная терапия. Срок наблюдения за больными составил 5 лет. Для морфологического исследования операционный материал обрабатывался по стандартной методике. Оценивалась ткань первичных опухолевых узлов. Иммуногисто-химическое исследование проводилось по стандартной методике. Для оценки качественного состава клеток воспалительного инфильтрата применяли антитела фирмы <^ако» к рецептору CD 3 (клон иСНТ1), CD8 (клон С8/144В), CD20 (клон L26) к CD4 (клон №6), к CD 25 (клон 4С9), к CD68 (клон 514Н12), cD 117 (клон
T595). к CD 138 (клон 5F7. рабочее разведение 1:100). фирмы «Biogenex» к CD45 LCA (клон PD7/26/16&2B1. RTU. мышиные). Оценка состава клеток проводилась полуколичественным способом как вблизи различных морфологических структур инвазивного компонента опухоли. так и в строме опухоли. Обработка полученных данных выполнялась с использованием пакета программ «Statistica 6.0 for Windows».
Результаты. Было показано. что в строме опухолевого узла при мультицентрическом характере роста степень общей инфильтрации воспалительными элементами не отличается от инфильтрации при уницентрическом варианте рака молочной железы. Однако на этом фоне при мультилокальном росте имелись отличия качественного состава воспалительного инфильтрата. проявляющиеся уменьшением инфильтрации В-лимфоцитами (CD20+) (%2=16.5; p=0.0008). Т лимфоцитами-хелперами (CD4+) (p=0.016). Т лимфоцитами-эффекторами (CD8+) (%2=9.2; p=0.025) и полным отсутствием тучных клеток (х2=12.2; p=0.006). Степень выраженности и состав воспалительного инфильтрата вокруг различных типов структур инвазивного протоковго рака не отличались при разных вариантах роста опухоли. При сравнении опухолей женщин. у которых возникли локальные рецидивы. с пациентками без каких-либо форм прогрессии также были обнаружены существенные различия в составе воспалительной инфильтрации. В случаях развития рецидивов реже наблюдалась инфильтрация вблизи дискретных групп опухолевых клеток CD4+ и CD8+ лимфоцитами в сравнении
