CC BY
9
УДК 616.12-008.331.1-06: 616.379-008.64-056.7 008.9.
Сулаева О.М., Гончаров С.В., Свиридов М.В., Юзвенко Т.Ю., Лар'1н О.С. ВЗАеМОЗВ'ЯЗОК ПОЛ1МОРФ1ЗМУ TNF-A-308G/A з розвитком цукрового Д1АБЕТУ 2 ТИПУ
УкраТнський науково-практичний центр ендокринноТ xipypriT, м. КиТв 1нститут фiзiолоriT iM. О. О. Богомольця, м. КиТв
Фактор некрозу пухлин (TNF-a) е плейоморфним прозапальним цитокном, що в'д'грае важливу роль у розвитку нсул'норезистентност'! та патогенезi цукрового д'абету 2 типу (ЦД2). В робот'1 проведено аналiз зв'язку мiж TNF-a-308G/A пол1'морф1'змом i розвитком ЦД2 та його ускладнень. До основной групи досл'дження були включен 120 хворих на ЦД2. Гоупу порiвняння склали 66 пацiентiв, як не страждали на ЦД. Результати досл'дження продемонстрували роль наявностi алеля А у сайтi -308G>A гену TNF-a у ризику розвитку ЦД2 (OR=2,85; 95% CI 1,317-6,166; P = 0,0078). У роботi не виявлено статистично значущого зв'язку даного SNP з наявнстю д'абетично)' пол'тейропатИ, ре-тинопати, нефропатi), синдрому д'абетично)' стопи, артерiально'í гiпертензi'í, зайво)' ваги та ожи-рння. Наявностi алелю А асо^йована з ризиком атеросклеротичного ураження нижнiх юнц/вок (0R=2,201; 95% CI 1,011-4,793; P = 0,0469) i дислШемп (OR=2,65; 95% CI 1,20-5,86; P = 0,0157). Кр'м того, серед пацiентiв-носiУв алеля А було виявлено бльш висок показники С-реактивного б'тка (3,39±0,51) по^вняно з гомозиготами GG (2,12±0,24; Р = 0, 013).
Ключовi слова: цукровий дiабет 2 типу, фактор некрозу пухлин а, генетична схильнють
Робота е фрагментом НДР «Патогенез молекулярно-генетичних порушень жирового та вуглеводного обмну за цукрового дiабету 2 типу та оптимiзацiя цукрознижуючо)' терапп» (№ держреестрацп 0116U003041)
Вступ
Цитокши в^грають важливу роль у ^^ацп та регуляци запалення, яке в свою чергу вважаеться ключовим процесом, залученим у патогенез багатьох захворювань, включаючи цукровий дiабет 2 типу та його ускладнення [2,8]. Серед найбтьш потужних прозапальних цитоюшв, як в^грають важливу роль у розвитку шсулшорезистентносп та патогенезi ЦД2, е фактор некрозу пухлин-а (TNF-а) [6, 9]. Цей плейотропний цитокш продукуеться переважно активованими макрофагами, а також деякими ш-шими кл^инами, у тому чи^ лiмфоцитами (Т-штинами та натуральними ктерами), нейтрофтами, еозинофтами, опасистими кл^инами, ендотелюцитами, фiбpобластами та нейронами [9]. TNF-а в^г-рае ключову роль у таких базових процесах, як запалення, аутамунш реакцп, рют кл^ин, Т'х пpолiфе-ра^я, диференцшвання та апоптоз. Отже, не дивно, що зростання експреси TNF-a е одним з патоге-нетичних чинниш piзноманiтниx захворювань [8]. Як вщомо експреая TNF-a регулюеться на транск-рипцшному i посттранскрипцшному piвняx. ^м того, на експресш цього цитокшу можуть впливати полiмоpфiзми у регуляторних дтянках гену TNF-a [7]. На сьогодн вiдомi кiлька ваpiантiв полiмоpфiз-мiв iз замiною одного нуклеотиду (SNP) в ген TNF-a людини - найбтьш цкавими серед них е полн моpфiзми у промотерному pегiонi гену. На сьогоднi визначено, що SNPs у позицiяx - 238, - 308, - 376, - 857, - 863 i - 1031 пов'язан з модуля^ею продукцп TNF-a, головним чином через вплив на транск-pипцiйнy активнють, що визначае дифеpенцiальнy експpесiю гена [4,7]. Серед цих полiмоpфiзмiв бiа-лельний SNP у проморному регюш у позицiT -308 асоцiйований з пщвищенням експpесiT TNF-a за умов замши гуанша (G) на аденш (A) (TNF-a-308G/A; rs1800629). TNF-a-308A алель асоцшована з бiльш ви-соким piвнем експpесiT TNF [5] та пщвищенням плазмового piвня TNF-a поpiвняно з алелем TNF-a-308G [10]. З шшого боку, пiдвищення piвня TNF-a асоцiйоване з порушенням толерантност до глюко-зи, pезистентнiстю до шсулшу, ризиком розвитку цукрового дiабетy 2 типу (ЦД2) та його ускладнень [1, 9].
Мета дослщження
Отже, метою даноТ роботи було з'ясувати наявнють зв'язку TNF-a-308G/A полiмоpфiзмy з ЦД2 та його ускладнень
Матерiал та методи дослщження
Дослiдження виконане на базi УкраТнського науково-практичного центру ендокринноТ xipypгiT. До основноТ групи були включенi 120 хворих на ЦД2, як проходили обстеження та лкування в центрк Се-pеднiй вiк хворих складав 54,69+0,57 pокiв. КpитеpiT включення: наявнють ЦД2 за нормальних показ-ниш еритроци^в та гемоглобшу. КpитеpiT виключення: па^енти з ЦД1, xвоpi у стаж термшальноТ ор-ганноТ недостатносп, з вipyсом гепатиту, особи з гестацшним дiабетом. Групу поpiвняння склали 66 па^етчв без ЦД2. Перифершну кров збирали в пpобipки з EDTA i збеpiгали при -20°C до використан-ня. Екстpакцiю геномноТ ДНК виконували з використанням QIAamp DNA Blood Mini Kit (QlAGEN, USA) вiдповiдно до iнстpyкцiй виробника. Генотипування TNF-a для полiмоpфного сайту -308G>A (rs1800629) проводили з Real-Time PCR, використовуючи тест-системи TaqMan Mutation Detection Assays Thermo Fisher Scintific (США). Для ствставлення генотишв з проявами хвороби оцшювали ная-
BHicTb ускладнень ЦД2 (периферiйна полiнейропатiя, дiабетична ретинопа™, дiабетична нефропатiя). Окрему пiдгрупу склали па^енти з синдромом дiабетичноТ стопи з виразковими дефектами. KpiM того, враховували показники артерiального тиску, наявнють ознак атеросклерозу, iшемiчноТ хвороби серця, ураження судин нижшх кiнцiвок, дан лiпiдограми, рiвнi iнсулiну та С-реактивного бтку. Отриманi ре-зультати обробляли у статистичному пакет MedCalc [3].
Результати дослщження та 1х обговорення
Проведення порiвняльного аналiзу клiнiко-лабораторних характеристик хворих дослщжуваних груп визначили бтьш високi показники iндексу маси тта, рiвнiв холестерину та триглiцеридiв серед па^ен-тiв з ЦД2(Р<0,05). Аналiз полiморфiзму гену TNF-a у сайт -308G>A серед пацiентiв з ЦД та групи порн вняння виявив розбiжностi частоти генотипiв GG, AG i AA за рахунок бтьш високоТ частки алеля А серед дiабетичних хворих (P<0,05). Серед па^ентв групи порiвняння алель А було виявлено лише у 9 хворих (13,6%), як були гетерозиготами (AG), проте в груш хворих на ЦД наявнють алеля А виявляла-ся у 40 хворих (33,3% випадш) -34 (28,3%) гетерозигот i 5 (4,2%) носив АА генотипу. У робот виявлено роль алеля А у сайт -308G^ гену TNF у зростанш ризику розвитку ЦД2 (OR=2,85; 95% CI 1,3176,166; P = 0,0078).
AG AG
Allel_TNF Allel_TNF
Рисунок. Частота реестрацП' дислт1демП' (А) та атеросклеротичного ураження apmepiü нижн1х к1нц1вок (Б) серед хворих на ЦД2 з рiзними варiантами генотипiв TNF-a-308G>A (А - носи алелi А (АА, AG) та G - гомозиготи GG). Померанчевий колiр вiдповiдае вiдсутностi ознаки, синй - наявностО
Проведення аналiзу ролi полiморфiзму TNF-a-308G^ у розвиту ускладнень ЦД2 не виявив статис-тично достовiрного зв'язку даного SNP з наявнютю дiабетичноТ полшейропати, ретинопатiТ, нефропа-ти, та синдрому дiабетичноТ стопи. Бiльш того, ми не визначили статистично значущого зв'язку мiж генотипом за TNF-a-308G^ та наявнiстю зайвоТ ваги та ожирiння як серед па^ентв з ЦД, так i у межах усiеТ вибiрки дослщжуваних хворих. Хоча при цьому у носив алеля А було виявлено бтьш висок показники С-реактивного бтка (3,39+0,51) порiвняно з гомозиготами GG (2,12+0,24; Р = 0, 013).
Враховуючи вiдомi з л^ератури факти щодо ролi полiморфiзму tNf -308G>А з патологiею серцево-судинноТ системи, ми провели аналiз щодо взяемозв'язку даного SNP з показниками кардюваскуляр-ного статусу хворих на ЦД2. При цьому було виявлено значущють наявност алелi А у ризику атеросклеротичного ураження нижшх кш^вок (0R=2,201; 95% CI 1,011-4,793; P = 0,0469) i дислтщеми (OR=2,65; 95% CI 1,20-5,86; P = 0,0157). У носив алеля А у сайт -308G^ було виявлено значно бтьш високу частоту ураження судин та порушення лтщного метаболiзму (рисунок). Незважаючи на те, що серед носив алеля А частота артерiальноТ ппертензи була бтьшою за таку порiвняно з патентами з генотипом GG, цi розбiжностi не були статистично значущими.
Висновки
Таким чином, результати даного дослщження продемонстрували роль полiморфiзму TNF-a-308G^ у розвитку ЦД2, i його зв'язок з судинними та метаболiчними розладами. Проте, у робот не виявлено зв'язку TNF-a-308G^ з розвитку органоспецифiчних ускладнень ЦД2.
Перспективи подальших дослiджень
Подальше вивчення молекулярно-генетичних детермшант розвитку цукрового дiабету 2 типу у
Том 17, Випуск 4 (60) частин£27
комбша^ею з дieю зовшшых факторiв дозволить розробити стратегiю персоналiзовано''' корекцп за-хворювання та профiлактики його ускладнень.
Лтература
1. Banerjee M. Genetic polymorphisms of cytokine genes in type 2 diabetes mellitus. / M. Banerjee, M. Saxena // World J Diabetes. - 2014. - V.5(4). -P. 493-504.
2. Dedoussis G.V.Z. Genes, Diet and Type 2 Diabetes Mellitus: A Review. / G.V.Z. Dedoussis, A. C. Kaliora // Rev Diabet Stud. - 2007. - V.4(1). - P. 13-24.
3. Diez D.M. Cetinskaya-Rundel M. Openlntro Statistics (3d edition) [Electronic resource] / D.M. Diez, C.D. Barr. - 2015 - Access mode: https://www.openintro.org/stat/textbook.php?stat_book=os
4. Guzik T.J. Epigenetics and Immunometabolism in Diabetes and Aging. / Guzik T.J., Cosentino F. // Antioxid Redox Signal. - 2017. - V.11. - P, 72-99.
5. Lampropoulou I.-Th. TNF-a and Microalbuminuria in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus. / I.-Th. Lampropoulou, M. Stangou, A. Papagianni // J Diabetes Res. - 2014. - V.2014. - P. 39-42
6. Swaroop J. J. Association of TNF-a with insulin resistance in type 2 diabetes mellitus. / J. J. Swaroop, D. Rajarajeswari, J.N. Naidu // Indian J Med Res. - 2012. - V.135(1). - P. 127-130.
7. Kaiser J. TNF-alpha -308G/A and -238G/A polymorphisms and its protein network associated with type 2 diabetes mellitus. / J. Kaiser, J. Archana, A. Javeed // Saudi J Biol Sci. - 2017. - V.24(6). - P. 1195-1203.
8. Nadeem A. Gene-gene, gene-environment, gene-nutrient interactions and single nucleotide polymorphisms of inflammatory cytokines. / A. Nadeem, S. Mumtaz, A.K. Naveed // World J Diabetes. - 2015. - V.6(4). - P. 642-647.
9. Olson N.C. Circulating Levels of TNF-a Are Associated with Impaired Glucose Tolerance, Increased Insulin Resistance, and Ethnicity: The Insulin Resistance Atherosclerosis Study. / N.C. Olson, P.W. Callas, A. J. G. Hanley // J Clin Endocrinol Metab. - 2012. - V.97(3). - P. 1032-1040.
10. Zhuang L. Associations between tumor necrosis factor-alpha polymorphisms and risk of psoriasis: a meta-analysis. / L. Zhuang, W. Ma, D. Cai, H. Zhong, Q. Sun // PLoS One. - 2013. - V.8(12). - P. 18-27.
Реферат
ВЗАИМОСВЯЗЬ ПОЛИМОРФИЗМА TNF-A-308G / A С РАЗВИТИЕМ САХАРНОГО ДИАБЕТА 2 ТИПА Сулаева О.Н., Гончаров С.В., Свиридов М.В., Юзвенко Т.Ю., Ларин А.С.
Ключевые слова: сахарный диабет 2 типа, фактор некроза опухолей а, генетическая предрасположенность.
Фактор некроза опухолей (TNF-a) является плейоморфным провоспалительным цитокином, который играет важную роль в развитии инсулинорезистентности и патогенезе сахарного диабета 2 типа (СД2). В работе проведен анализ связи между TNF-a-308G/A полиморфизмом и развитием СД2 и его осложнений. В основную группу исследования были включены 120 больных СД2. Группу сравнения составили 66 пациентов, не страдавших СД. Результаты исследования продемонстрировали роль наличия аллели А в сайте -308G> А гена TNF-a в риске развития СД2 (OR = 2,85; 95% CI 1,317-6,166; P = 0,0078). Не выявлено статистически значимой связи данного SNP с наличием диабетической по-линейропатии, ретинопатии, нефропатии, синдрома диабетической стопы, артериальной гипертензии, избыточного веса и ожирения. Наличие аллели А было ассоциировано с риском атеросклеротическо-го поражения нижних конечностей (OR = 2,201; 95% CI 1,011-4,793; P = 0,0469) и дислипидемией (OR = 2,65; 95% CI 1,20-5,86; P = 0,0157). Кроме того, среди пациентов-носителей аллели А были выявлены более высокие показатели С-реактивного белка (3,39±0,51) по сравнению с гомозиготами GG (2,12±0,24; Р = 0, 013).
Summary
CORRELATION BETWEEN TNF-A-308G / A POLYMORPHISM AND TYPE 2 DIABETES MELLITUS Sulaieva O.M., Goncharov S.V., Sviridov M.V., Yuzvenko T.Yu., Larin O.S. Key words: diabetes mellitus, tumour necrosis factor a, genetic predisposition
Tumour necrosis factor a (TNF-a) as a pleiomorphic proinflammatory cytokine plays an important role in such processes as inflammation, autoimmune reactions, cell growth, proliferation, differentiation and apop-tosis. The increase in TNF-a expression is known as one of the pathogenetic factors of a variety of diseases. The expression of TNF-a is regulated on the transcriptional and posttranscriptional levels. In addition, the expression of this cytokine may be affected by polymorphisms in the regulatory regions of the TNF-a gene. Several variants of polymorphisms with the replacement of single nucleotide (SNP) in the human TNF-a gene promoter have been known today. The most interesting among them are polymorphisms in the promoter region of the gene. Today it has been determined that SNPs at - 238, - 308, - 376, - 857, - 863 and -1031 positions are associated with the modulation of TNF-a production, mainly due to differential expression of the gene. Among these polymorphisms, the bi allele SNP in the promoter region at site -308 is associated with an increase in the expression of TNF-a in the case of the replacement of guanine (G) with adenine (A) (TNF-a-308G/A; rs1800629). It was shown that TNF-a-308A allele is associated with a higher TNF expression and an increase in plasma TNF-a levels compared to the TNF-a-308G allele. On the other hand, elevation of TNF-a is associated with impaired glucose tolerance, insulin resistance, the risk of developing type 2 diabetes mellitus (T2D) and its complications. Therefore, this work aimed at studying the relationship between TNF-a-308G / A polymorphism and T2D development as well as its complications. The main test group included 120 patients with T2D. The control group comprised 66 non-diabetic patients. Genomic DNA extraction was performed using QIAamp DNA Blood Mini Kit (QIAGEN, USA) in line with manufacturer guideline. TNFa genotiping for polymorphous site -308G>A (rs1800629) was performed with Real-Time PCR, using test-systems TaqMan Mutation Detection Assays Thermo Fisher Scientific (USA). To compare the genotypes with T2D phenotypes we considered such complications of T2D as peripheral polyneuropathy, diabetic retinopathy, diabetic nephropathy, and diabetic foot syndrome with ulcers. In addition, the indicators
of cardiovascular risks including blood pressure, signs of atherosclerosis, coronary heart disease, and angiopathy of the lower extremities were concerned. In addition, lipidogram data, levels of insulin and C-reactive protein were taken into account when comparing data of patients with different genotypes. The frequency difference between genotypes was evaluated using x2 test. The relationship between different genotypes and clinical and laboratory data were assessed according to the ratio of risks (OR), taking into account the 95% confidence interval. The results of the study demonstrated the role of the presence of allele A in the site -308G> A of the TNF-a gene in the risk of developing T2D (OR = 2.85; 95% CI 1,317-6.166; P = 0.0078). The study revealed no statistically significant association of this SNP with the presence of diabetic polyneuropathy, retinopathy, nephropathy, diabetic foot syndrome, overweight and obesity. The presence of allele A was associated with the risk of atherosclerotic lesions of arteries of the lower extremities (OR = 2.201; 95% CI 1,011-4,793; P = 0.0469) and dyslipidemia (OR = 2.65; 95% CI 1.20-5.86; P = 0.0157). In addition, higher values of C-reactive protein (3.39+0.51) among the carriers of allele A were found compared to GG homozygotes (2.12+0.24; P = 0.013).
УДК: 616.711-001-06-036.838
Шимон В.М., Котурбач I.I., Шерегiй А.А., Шимон М.В., Пушкаш 1.1. РЕАБ1Л1ТАЦ1Я ХВОРИХ З УСКЛАДНЕНОЮ ТРАВМОЮ ХРЕБТА
ДВНЗ «Ужгородський нацюнальний уыверситет»
Пошкодження спинного мозку та травми хребта е одн/ею з найактуальнших проблем в сучаснш ортопеда i травматолог). 60-70% вс/х хворих, як потребують реабШтацИ, становлять хворi з травмами i захворюваннями опорно-рухово)' системи. Значна )х частина - це хворi з ушкодженнями хребта. У ц/'й статтi проведено аналiз реабШтацИ 96 хворих з ускладненими травмами спинного мозку i хребта. Вказан основн складовi реабШтацИ таких хворих. Мета роботи - провести анал'з ефективностi реабiлiтацiйних заход 'т у пацiентiв з ушкодженнями та травмами спинного мозку, ускладненими неврологiчною симптоматикою, застосовуваних в кл/н/ц ортопеда i травматологи ЗОКЛ iм. А. Новака, м. Ужгород. У бльшостi випадк'т результати виявилися пор/вняно кращими за умови застосування реабШтацшно)' програми, використано)' нами.
Ключовi слова: хребет, ускладнена травма, реаб^та^я.
Вступ
Пошкодження спинного мозку та травми хребта е одшею з найактуальшших проблем в сучаснш ор-топеди i травматологи. Тривалють i складнють лкування, довготривала втрата працездатносп, а та-кож високий вщсоток швалщизаци призводять до значних економiчниx втрат як з боку патента, так i з боку держави, що обумовлюе медичну та со^альну значимють проблеми травм хребта.
Слщ зауважити, що 60-70% вах хворих, як потребують реаб^таци, складають xвоpi з травмами та захворюваннями опорно-руховоТ системи. Значна частина iз них - це xвоpi з пошкодженнями хребта та спинного мозку. На даний час число таких па^ен^в складае частка до складае 27,3%.
Загалом, метою реаб^таци е вщновлення не ттьки соматичного або псиxiчного здоров'я хворого, але i його со^ального статусу, високого piвня адаптаци в ам'Т та сусптьств^ тобто в кшцевому рахун-ку - забезпечення високоТ якост життя, оскльки хворих перш за все хвилюе те, як результат лкування позначиться на його професшнш дiяльностi, особистому житп, амейних вщносинах.
Мета роботи
Провести аналiз ефективност реаб^тацшних заxодiв у хворих з пошкодженнями спинного мозку та травмами хребта, ускладнених невролопчною симптоматикою, як використовують в кл^ц ор-топеди та травматологи ЗОКЛ iм. А.Новака м. Ужгород.
Матерiали та методи дослщження
В ктыц ортопеди та травматологи ЗОКЛ iм. А.Новака, м. Ужгород, за перюд з 2012 по 2017 роки прооперовано 96 хворих з ушкодженнями спинного мозку та травмами хребта, з них 39 жшок та 57 чо-ловшв. Слщ зазначити, що ва xвоpi були працездатного вку, вщ 17 до 65 рокв.
За часом, який пройшов з моменту травми до поступлення в кпшку, xвоpi розподтились наступним чином: до 8 годин - 49 хворих, до 24 годин - 20 хворих, 24 - 48 годин - 16 хворих; бтьше 48 годин -11 хворих.
Рiвень пошкодження хребта у травмованих був наступний: С3 - 6 хворих, С4 - 10 хворих, С5 - 15 хворих, С6 - 13 хворих, Th5 - 2 хворих; Th6 - 4 хворих; Th7 - 6 хворих; Th8 - 5 хворих; Th9 - 6 хворих; Th-ю - 4 хворих; Th11 - 5 хворих; Th12 - 9 хворих; L1 - 19 хворих; L2 - 4 хворих; L3 - 4 хворих. Ктьксть зламаних хреб^в (112) не сшвпадае з клькстю хворих (96), оскльки у клькох хворих було зламано к-лька хреб^в.
Згщно класифкаци F. Denis, невролопчш порушення типу A спостер^ались у 10 хворих, типу B у 12
Том 17, Випуск 4 (60) частин239
