Воздействие различных концентраций гипохлорита натрия на динамику параметров системы пол - антиоксиданты брюшины при перитоните в эксперименте

Кашафеева Алла Анатольевна; Гаймоленко Сергей Григорьевич; Хышиктуев Баир Сергеевич

Наиболее оправданной, на наш взгляд, представляется следующая тактика оказания на догоспитальном этапе неотложной медицинской помощи больным с неосложненными приступами ФП длительностью до 24 ч. Больным без признаков шока, острого коронарного синдрома, отека легких и синдрома Морганьи-Адамс-Стокса проводят комбинированную с диазепамом антиарит-мическую терапию, направленную на снижение частоты сокращения желудочков и возможное прекращение приступа. При сохраняющейся фибрилляции предсердий больных оставляют дома и передают в поликлинику для активного наблюдения участковым врачом.

На первичном вызове госпитализации подлежат больные с осложненным приступом ФП (острая коронарная или левожелудочковая недостаточность, коллапс, синкопальные состояния, частые или трудно купируемые пароксизмы ФП, рефрактерные к антиа-ритмической терапии и т.п.), с недостаточным после проведенной терапии снижением частоты сокращений желудочков, с впервые зарегистрированной ФП, с осложнениями антиаритмической терапии и длительностью приступа более 24 часов [9].

Учитывая склонность ФП к спонтанному восстановлению ритма более чем у половины больных [18], основ-

ЛИТЕРАТУРА

1. Вегетативные расстройства: Клиника, диагностика, лечение / Под ред. А.М. Вейна. - М.: МИА, 2003. - 752 с.

2. Ломакин В., Никитина Ю., Копылов Ф. Психосоматические аспекты фибрилляции предсердий // Врач. - 2008. - №12. - С.11-14.

3. Мазур Н.А., Овчаренко С.И., Литвинова И.В. Фибрилляция предсердий // Клиническая фармакология. -2003. - Т.12. № 3. - С.32-35.

4. Недоступ А.В., Соловьева А.Д., Санькова Т.А. Психосоматические соотношения у больных с пароксизмальной формой мерцательной аритмии // Тер. архив. - 2001.

- № 9. - С.55-61.

5. Погосова Г.В. Признание значимости психоэмоционального стресса в качестве сердечно-сосудистого фактора риска первого порядка // Кардиология. - 2007. - № 2. - С.65-72.

6. Попов С.В., Баталов РЕ., Антонченко И.В. Современные аспекты лечения фибрилляции предсердий // Болезни сердца и сосудов. - 2009. - №1. - С.30-34.

7. Преображенский Д.В., Сидоренко Б.А., Андрейченко Т.А. и др. Фибрилляция предсердий: фармакологическая кардиоверсия // Consilium medicum. - 2004. - Т.5. №5. - С.283-288.

8. Прохорович Е.А., Талибов О.Б., Тополянский А.В. Лечение нарушений ритма и проводимости на догоспитальном этапе // Лечащий врач. - 2002. - № 3. - С.56-60.

9. Руководство для врачей скорой медицинской помощи / Под ред. С.Ф. Багненко, А.Г. Мирошниченко, А.Л. Вёрткина, М.Ш. Хубутия. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.- С.92-96.

10. Санькова Т.А., Соловьева А.Д., Недоступ А.В.

ной задачей проводимой антиаритмической терапии на догоспитальном этапе следует считать не устранение приступа аритмии, а снижение частоты сокращений желудочков сердца, как при пароксизмальной, так и при персистирующей формах ФП [15].

Таким образом, возникновение приступа ФП на догоспитальном этапе сопровождается выраженной сим-патикотонией, что должно учитываться при проведении антиаритмической терапии. Комбинация диазепама с антиаритмическими препаратами позволяет добиться более быстрого купирования приступа. Независимо от основного заболевания и применяемых антиаритмиче-ских препаратов подавляющее число случаев ФП купируется к концу первых суток от начала лечения. Тактика оказания медицинской помощи при неосложненных приступах ФП длительностью до 24 часов на догоспитальном этапе должна быть направлена, в первую очередь, на нормализацию частоты сокращения желудочков сердца и вегетативного дисбаланса. Тактика обязательной госпитализации больных с некупированным в результате лечения на догоспитальном этапе неосложненным приступом ФП длительностью до 24 часов при первичном вызове скорой медицинской помощи несостоятельна.

Сравнительный анализ симптоматологии пароксизма мерцательной аритмии и панических атак // Кардиология. - 2004.

- Т. 44. № 6. - С.26-30.

11. Скурихина О.Н., Миллер О.Н. Уровень тревоги и депрессии у пациентов с пароксизмальной и постоянной формами фибрилляции предсердий // Вестник аритмологии. -2009. - № 55. - С.14-18.

12. АСС/АНА/ESC Guidelines for the Management of Patients with Atrial Fibrillation: Executive Summary // Eur. Heart. J. - 2006. - Vol. 27. - P. 1979-2030.

13. Bettoni M., Zimmermann M. Autonomic tone variations before the onset of paroxysmal atrial fibrillation // Circulation. -2002. - Vol. 105. - P.2753-2759.

14. Cannata D., Narbone N.B. Clinical observations on the role of the vegetative nervous system in the pathogenesis of atrial fibrillation // Cardiologia 1958. - Vol. 32. - Р.329-345.

15. Darbar D., Motsinger A.A., RitchieM.D., et al. Polymorphysm modulates symptomatic response to antiarrhythmic drug therapy in patients with lone atrial fibrillation // Heart. Rhythm. - 2007. -Vol. 4. №6. - P.743-749.

16. Friberg J., Buch P., Scharling H., et al. Rising rates of hospital admissions for atrial fibrillation // Epidemiology. - 2003.

- Vol. 14. - P.666-672.

17. Maisel W.H. Autonomic modulation preceding the onset of atrial fibrillation // J. Am. Coll. Cardiol. - 2003. - Vol. 42. -P.1269-1270.

18. SlavikR.S., Tisdale J.E.,BorzakS. Pharmacologic conversion of atrial fibrillation: a systematic review of available evidence // Prog. Cardiovasc. Dis. - 2001. - Vol. 44, №2. - P.121-152.

Информация об авторах: 644043, Омск-43, ул. Ленина, 12. Тел. (3821) 23-03-78, e-mail: [email protected], Долгих Владимир Терентьевич - заведующий кафедрой, профессор, д.м.н.,

Епифанов Вячеслав Георгиевич - старший врач, к.м.н.

ВОЗДЕЙСТВИЕ РАЗЛИЧНЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГИПОХЛОРИТА НАТРИЯ НА ДИНАМИКУ ПАРАМЕТРОВ СИСТЕМЫ «ПОЛ - АНТИОКСИДАНТЫ» БРЮШИНЫ ПРИ ПЕРИТОНИТЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

А.А. Кашафеева, С.Г. Гаймоленко, Б.С. Хышиктуев (Читинская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.В. Говорин, кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии, зав. - д.м.н., проф. Е.В. Намоконов, кафедра хирургии детского возраста, зав. - к.м.н., доц. С.Г. Гаймоленко, кафедра биохимии с курсами биоорганической химии и клинической биохимии,

зав. - д.м.н., проф. Б.С. Хышиктуев)

Резюме. При экспериментальном каловом перитоните у крыс, после орошения брюшной полости раствором гипохлорита натрия (ГХН) различной концентрации, исследованы параметры системы «перекисное окисление липидов - антиокислительная защита» в брюшине. Выявлено, что 0,09% раствор ГХН оказывает позитивное влияние

на дисбаланс в системе «ПОЛ-антирадикальная защита», характеризующееся стабилизацией антиокислительных ресурсов.

Ключевые слова: перитонит, эксперимент, гипохлорит натрия, перекисный стресс.

INFLUENCE OF SODIUM HYPOCHLORIDE OF DIFFERENT CONCENTRATIONS ON DYNAMICS OF “LIPID PEROXIDATION - ANTIOXIDANTS" SYSTEM OF PERITONEUM IN PERITONITIS IN EXPERIMENT

A.A. Kashafeeva, S.G. Gaimolenko, B.S. Khyshiktuev (Chita State Medical Academy)

Summary. In experimental fecal peritonitis in rats after peritoneum cleansing with hypochloride sodium of different concentration “lipid peroxidation - antioxidant defence” system parameters in peritoneum have been studied. 0,09% solution of hypochloride sodium was stated to effect positively upon disbalance of “peroxidation - antiradical protection” system characterizing by antioxidant resources stabilization.

Key words: peritonitis, experiment, hypochloride sodium, ioxidative stress.

Значительное число осложнений перитонита и высокая смертность от них требуют дополнительного изучения различных аспектов патогенеза и поиск оптимальных методов лечения данного заболевания [11]. Одним из основных этапов хирургического лечения перитонита является санация брюшной полости, в том числе с использованием растворов различных антисептиков. Гипохлорит натрия является одним из таких препаратов, который воздействует как на грам-положительную и грамотрицательную флору, так и на анаэробы. Индукция свободнорадикальных реакций при воздействии ГХН приводит к повышенной генерации активных форм кислорода, которые вызывают деструкцию патологических агентов (микробные тельца, токсины, детрит), окислительную модификацию белков и ферментов [10,12].

Известно, что увеличение концентрации ионов ГХН и времени экспозиции отрицательно влияет на жизнеспособность и функциональную активность нейтрофи-лов, продукцию фактора некроза опухоли мононукле-арными клетками периферической крови, активность ряда клеточных ферментов. При этом в клинических исследованиях установлено, что 3% раствор ГХН обладает выраженным некролитическим эффектом, а 5% - токсичен для клеток человеческого организма [10,12]. Рядом исследователей для обработки брюшной полости при перитонитах используется 0,06-0,09% раствор электролизного гипохлорита натрия [12], при этом отдаленные последствия и влияние его на перекисное окисление липидов изучены недостаточно.

Цель исследования - в эксперименте изучить влияние различных концентраций ГХН на локальный пере-кисный статус и антиокислительную защиту брюшины при перитоните.

Материалы и методы

Исследование проведено на 105 беспородных половозрелых крысах обоего пола с массой около 180 г, из них 24 животных служили контролем, 35 являлись группой сравнения (перитонит), у 46 крыс с перитонитом проводили санацию брюшной полости различными концентрациями раствора гипохлорита натрия с экспозицией 5 мин. Все эксперименты выполнялись в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению биомедицинских исследований с использованием животных» принятыми Международным Советом Медицинских Научных Обществ (СЮМ8) в 1985 г. Крысы содержались в условиях вивария, имели свободный доступ к пище и воде, на 7 сутки после отбора проб безболезненно усыплялись эфиром.

Животным под эфирным наркозом выполнялась срединная лапаротомия. В бессосудистой зоне брыжейки тонкого кишечника иссекался фрагмент брюшины площадью 1,5 см2, промывался в охлажденном физиологическом растворе. Каждый образец гомогенизировали в 0,05% трис-НС1-буфере (рН=7,8), центрифугировали по методу Н.Д. Ещенко, а супернатант использовали для

изучения параметров ПОЛ [4]. Для моделирования перитонита перед ушиванием раны проводилось механическое повреждение мезотелия петель тонкого кишечника марлевым шариком с последующим орошением брюшной полости 20% каловой взвесью в объеме 1 мл [7]. На следующие сутки после отбора проб для исследования (исходные данные - перитонит), брюшная полость у 16 животных обрабатывалась 0,09%, раствором электролизного ГХН (1 группа), у 14 животных - 0,045% раствором ГХН (2 группа), у 16 крыс - 0,02% раствором ГХН (3 группа), полученного на аппарате ЭДО-4. После этого выполнялось трехкратное промывание брюшной полости физиологическим раствором. Повторный отбор материала для исследования осуществляли через 30 мин после воздействия ГХН, а также на 3 и 7 дни эксперимента. В брюшине исследовали концентрацию начальных интермедиатов ПОЛ - ДК, КД и СТ [3], ТБК-активных продуктов [1], уровень оснований Шиффа [5], активность супероксиддисмутазы [2], каталазы [6], глутатионпероксидазы [9], глутатионредуктазы [2]. Содержание веществ с двойными связями, ДК, КД и СТ рассчитывалось на мг липидов, ТБК-активных продуктов - мкмоль/мг липидов, оснований Шиффа - УЕ на мг липидов, активность глутатионпероксидазы и глута-тионредуктазы выражалась в мкмоль/с мг белка, ката-лазы - в нмоль/с мг белка, супероксиддисмутазы - в %. Полученные результаты обработаны методом с использованием пакета «В^1аЪ> (8. Glantz, 1999) z-критерием. Критический уровень значимости при проверке гипотез р<0,05 [8].

Результаты и обсуждение

У животных с каловым перитонитом в первые трое суток отмечались снижение двигательной активности, пищевого инстинкта, при повышенной потребности в воде. Летальность к 7 дню составила в 1 группе - 25%, во 2 - 29% случаев, в 3 группе - 38%, тогда как в группе сравнения она приближалась к 40%.

Макроскопически у всех животных при осмотре брюшной полости в 1 и 3 сутки эксперимента выявлены гиперемия и полнокровие сосудов париетальной брюшины, брыжейки, небольшое количество мутного с неприятным запахом выпота, наложения фибрина на петлях кишечника, паренхиматозных органах, брыжейке. У 75% животных отмечались признаки пареза кишечника: увеличение диаметра кишки в 1,5 и более раза, наличие в просвете жидкости, газа. К 7 суткам определяли увеличение размеров печени в 1 и 2 группе животных в 50% случаев, в 3 группе - в 60% и в группе сравнения - в 52% случаев, у всех животных сохранялись макроскопические признаки перитонита.

У животных 1 группы в брюшине (рис. 1) отмечено снижение содержания диеновых конъюгатов, кетодие-нов и сопряженных триенов после обработки раствором гипохлорита натрия в среднем в 1,3 раза (р<0,001) относительно исходных данных. На этом фоне уровень ТБК-активных продуктов и оснований Шиффа к 3 сут-

Примечание: * - значимые различия по сравнению с перитонитом.

Рис. 1. Динамика показателей ПОЛ брюшины при экспериментальном перитоните после воздействия ГХН (100%-контроль).

кам повысился на 59% и 32% соответственно по отношению к перитониту.

Во 2 группе после обработки содержание кетодиенов и сопряженных триенов уменьшилось в 1,3 раза (р<0,05) по сравнению с исходными данными. При этом к 7 дню эксперимента концентрация начальных интермедиатов перекисного окисления липидов увеличилась в 2,1 раза (р<0,001) по отношению к перитониту и в 1,5 раза (р<0,05) по сравнению с 7 сутками 1 группы. В то время как уровень оснований Шиффа возрос на 53% (р<0,001) относительно

группы сравнения.

В 3 группе животных зарегистрировано снижение содержания кетодиенов и сопряженных триенов сразу после обработки на 22% (р<0,05) относительно исходных данных. К 7 суткам отмечался рост уровня начальных интермедиатов ПОЛ в среднем в 1,9 (р<0,001) раза по отношению к перитониту и в 1,5 раза (р<0,05) по сравнению с 1 группой крыс. При этом наблюдалось снижение содержания оснований Шиффа в 1,2 раза (р<0,05) после обработки раствором гипохлорита натрия по сравнению с исходным уровнем и увеличение в

1,8 раза (р<0,05) на 7 день эксперимента относительно группы сравнения (рис. 1).

При исследовании параметров антирадикальной защиты брюшины (рис. 2) в 1 группе животных после воздействия раствора выявлено повышение активности каталазы на 121%

(р<0,05) и уменьшение на 65%

(р<0,001) на 3 сутки по отношению к группе сравнения. На 7 день эксперимента активность изучаемых ферментов возросла: супероксиддисмутазы в 1,5 раза (р<0,001), каталазы в 2,3 раза (р<0,001), глутатионпе-роксидазы в 2,5 раза (р<0,001) и глутатионредуктазы в 1,6 раза (р<0,001) относительно группы сравнения.

Во 2 группе на 3 день эксперимента отмечалось уменьшение активности каталазы в

2,9 раза (р<0,001) по сравнению с перитонитом соответствующих суток. При этом к 7 суткам выявлен рост активности супероксиддисмутазы, глута-тионпероксидазы и глутати-онредуктазы в среднем на 41% (р<0,05) по отношению к группе сравнения.

В 3 группе после обработки раствором гипохлорита натрия повышалась скорость суперок-сиддисмутазной реакции в 1,5 раза (р<0,05) по сравнению с исходными данными и 1 группой, а активность глутатион-редуктазы в 2 раза (р<0,05) относительно перитонита. Также отмечалось уменьшение активности каталазы в среднем на 66% (р<0,001) по сравнению с 1 и 2 группой. На 3 сутки цифры данного показателя оставались на 68% (р<0,001) ниже относительно группы сравнения. При этом к 7 дню отмечалось повышение активности глутатионпе-роксидазы в 2,6 (р<0,001) раза по сравнению с соответствующими сутками перитонита и в 1,5 (р<0,001) раза

Примечание: * - значимые различия по сравнению с перитонитом.

Рис. 2. Динамика активности ферментов антирадикальной защиты брюшины при экспериментальном перитоните после воздействия ГХН (100%-контроль).

по сравнению со 2 группой животных. Величина остальных показателей снижалась в среднем на 44% (р<0,05) относительно 1 группы животных (рис. 2).

Таким образом, обработка брюшной полости 0,09% раствором гипохлорита натрия приводит к мобилиза-

ЛИТЕРАТУРА

1. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой // Лабораторное дело. -1988. - №11. - С.41-43.

2. Верболович В.П., Подгорная Л.М. Определение активности глутатионредуктазы и супероксиддисмутазы на биохимическом анализаторе // Лабораторное дело. - 1987. - №2.

- С.17-20.

3. Волчегорский И.А. и др. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопросы медицинской химии. - 1989. - №1. - С.127-131.

4. Ещенко Е.Д. Выделение и очистка субклеточных и клеточных структур // Методы биохимических исследований. / Под ред. М.И. Прохоровой. - Л.: Изд-во Ленинградского унта, 1982. - С.29-53.

5. Каган В.Е. Проблемы анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов: итоги науки и техники. -М., 1986. - 248 с.

6. Королюк М.А. и др. Метод определения каталазы // Лабораторное дело. - 1988. - № 1. - С.16-19.

ции антиоксидантных ресурсов брюшины за счет активации ферментативного звена, что наряду с умеренной интенсификацией реакций липопероксидации может являться фактором адекватных репаративных процессов.

7. Магомедов М.А. Местная клеточная регуляция в образовании послеоперационных спаек при перитоните // Хирургия. - 2004. - №6. - С.9-11.

8. Майборода А.А., Калягин А.Н., Зобнин Ю.В., Щербатых А.В. Современные подходы к подготовке оригинальной статьи в журнал медико-биологической направленности в свете концепции «доказательной медицины» // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2008. - Т. 76. №1. - С.5-8.

9. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах // Лабораторное дело. - 1986. - №12. - С.724-727.

10. Петросян Э.А. и др. Гипохлорит натрия в лечении гнойных ран // Вестник хирургии им. Грекова. - 1991. - №1.

- С.40-43.

11. Сажин В.П., АвдовенкоА.П., ЮришевВ.А. Современные тенденции хирургического лечения перитонита // Хирургия.

- 2007. - №11. - С.36-39.

12. Эвентов В.Л., Андрианова М.Ю. Использование электролизного гипохлорита натрия в клинической практике для детоксикации и дезинфекции // Вестник интенсивной терапии. - 1998. - №2. - С.43-46.

Информация об авторах: 672000, г. Чита, ул. Балябина д.14, кв. 910, тел. (3022) 35-37-96, 35-63-06, e-mail: [email protected], Кашафеева Алла Анатольевна - ассистент, Гаймоленко Сергей Григорьевич - заведующий кафедрой, к.м.н., доцент, Хышиктуев Баир Сергеевич - заведующий кафедрой, д.м.н., профессор.

МОЛЕКУЛЯРНО-КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА

(СООБЩЕНИЕ 1)

А.И. Инжутова, А.А. Ларионов, А.Б. Салмина, М.М. Петрова (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ректор -д.м.н., проф. И.П. Артюхов, НИИ Молекулярной медицины и патобихимии, руководитель - д.м.н., проф.

А.Б. Салмина, кафедра поликлинический терапии и семейной медицины ИПО, зав. - д.м.н., проф. М.М. Петрова)

Резюме. В статье (сообщение 1, 2) представлены данные исследования молекулярно-клеточных маркеров эндотелиальной дисфункции у больных, страдающих гипертонической болезнью, рефрактерной гипертонией, ишемической болезнью сердца (ИБС) и нейроциркуляторной дистонией (НЦД). Выявлены различия в патогенезе формирования дисфункции эндотелия в изучаемых группах больных. В сообщении 1 освещены результаты исследования межклеточных взаимодействий клеток крови (лимфоциты и тромбоциты), опосредованных молекулами межклеточной адгезии (CD38 и СD31), с эндотелием сосудов; дана оценка феномена блеббинга лимфоцитов в развитии дисфункции эндотелия.

Ключевые слова: кардиоваскулярная патология, эндотелиальная дисфункция, мембран-высвобожденные микрочастицы, блеббинг.

MOLECULAR AND CELLULAR MECHANISMS OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION IN DIFFERENT PATHOLOGY. REPORT 1.

A.I. Inzhutova, A.A. Larionov, A.B. Salmina, M.M. Petrova (Krasnoyarsk State Medical University)

Summary. In the article (report 1 and report 2) is presented a study of molecular and cell markers of endothelial dysfunction in patients with cardio-vascular pathology. The report 1 shows a results of studies of intercellular interactions of blood cells (lymphocytes and platelets) with the vascular endothelium mediated by intercellular adhesion molecules CD38 and CD31.

Key words: cardiovascular pathology, endothelial dysfunction, membrane-derived microparticles, blebbing.

Активное изучение эндотелиальной дисфункции как основного звена патогенеза кардиоваскулярных заболеваний за последние десять лет открыло и продолжает выявлять новые клеточно-молекулярные элементы каскада нарушения функции эндотелия; определение их содержания в периферической крови является общедоступным и информативным маркером патологии сосудистой стенки.

К общепризнанным маркерам эндотелиальной дисфункции относятся: косвенное определение содержания оксида азота (N0) в плазме периферической крови, растворимой формы тромбоцитарно-эндотелиальной молекулы межклеточной адгезии ^РЕСАМ-1) и количества слущенных эндотелиоцитов. Как известно, N0 - основной фактор дилатации сосудистой стенки, вырабатываемый эндотелием; sPECAM-1 - это раство-

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Кашафеева Алла Анатольевна, Гаймоленко Сергей Григорьевич, Хышиктуев Баир Сергеевич

Influence of sodium hypochloride of different concentrations on dynamics of lipid peroxidation - antioxidants system of peritoneum in peritonitis in experiment