Влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в крови

Якубова Ф.Т

www.afu.uz/journal

Влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в крови

Якубова Ф.Т

Алфараганус Университет

Аннотация.

В данной статье рассматривается влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в эритроцитах крови. Свойства Ver-Mol-2 против анемии были сопоставлены с Tardiferon. Результаты показали, что Ver-Mol-2, как и Tardiferon, увеличивает уровень гемоглобина в эритроцитах.

Ключевые слова: Анемия, дефицитом железа.

Введение. Анемия, связанная с дефицитом железа, является заболеванием, основанным на нехватке железа в организме человека. Железо играет важную роль в биохимических процессах, особенно в дыхании тканей. Недостаток железа может привести к таким изменениям, как сухость кожи, ломкость ногтей и выпадение волос. У женщин репродуктивного возраста потребность в железе в два раза выше, чем у мужчин. Во время беременности эта потребность увеличивается в 1,5-2 раза.

В настоящее время разработано несколько эффективных комплексных препаратов для профилактики анемии, таких как Tardiferon, Ferrum-lak и другие. Однако у этих медикаментов могут быть побочные эффекты, такие как тошнота, головокружение и диарея. В Узбекистане в основном используются Tardiferon и Ferrum-lak, производимые в Швейцарии.

Местные источники железа. Использование местных природных источников железа для создания добавок к пище против анемии является актуальным. К ним относятся верблюжье молоко, а также молочные продукты с высоким содержанием биологически доступного железа.

Влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в эритроцитах было продемонстрировано в сравнении с Tardiferon. Необходимость использования местных естественных источников в профилактике и лечении анемии возрастает, и это должно включать не только медикаменты, но и добавки к пище.

Верблюжье молоко употребляется в естественном виде. Однако производство масла, сыра и различных ферментированных молочных продуктов из верблюжьего молока не соответствует требованиям рынка. Российская Федерация, совместно с Казахстаном, производит кисломолочные продукты (кефир и кисломолочные напитки), используя верблюжье и козье молоко.

www.afu.uz/journal

Казахстан также производит напитки на основе верблюжьего молока и распространяет их через сеть магазинов в Москве.

В Узбекистане производство таких кисломолочных продуктов из верблюжьего молока отсутствует.

В 2002 году было принято постановление Кабинета Министров Республики Узбекистан, подписанное Президентом И.А. Каримовым, о обеспечении всех беременных женщин, страдающих анемией, препаратами, содержащими железо. В связи с этим актуально искать и разрабатывать местные добавки к пище против анемии на основе природных источников железа.

Целью данного исследования является сравнение уровня гемоглобина при приеме пищевой добавки Ver-Mol-2, полученной из верблюжьего молока, с коммерческим препаратом Tardiferon.

Материалы и методы. Для определения анемийных свойств данной добавки эксперименты проводились на обоих полах белых крыс с начальным весом 150-170 г. Гемолитическая анемия возникала в результате инъекции фенилгидразин сульфата в дозе 3 мг на 100 г массы тела. Лечением начинали через 5 дней после последней инъекции. Ver-Mol-2 вводили через зонд в желудок ежедневно в течение 15 дней. Контрольной группе животных давали дистиллированную воду.

Для сравнения терапевтического эффекта изучаемого Ver-Mol-2 в качестве контроля использовался Tardiferon, широко применяемый при железодефицитной анемии. Tardiferon содержит железо (в форме железа (II) сульфата), мукополисахариды и аскорбиновую кислоту (в качестве антиоксиданта). Tardiferon применялся в дозе 6 мг/кг в течение 15 дней аналогично Ver-Mol-2.

Кровь брали на 1, 3, 7, 14 день, а также через 21 и 30 дней после прекращения приема препаратов.

Результаты исследования. Полученные результаты показали, что фенилгидразин сульфат приводит к снижению уровня гемоглобина, уменьшению количества эритроцитов и увеличению процента ретикулоцитов. Уровень гемоглобина уменьшился с 138,2±1,8 (контрольная группа) до 70,6±1,5 г/л (экспериментальная группа). В первые дни после начала приема препаратов наблюдалось значительное увеличение показателей по сравнению с контролем. Уровень гемоглобина возрос с 70,6±1,5 до 85,3±2,7 г/л.

Показатели, полученные под действием Tardiferon, не имели значительных отличий от показателей Ver-Mol-2.

www.afu.uz/journal

Препарат Ver-Mol-2 показал более выраженное увеличение уровня гемоглобина в течение 3 дней, что указывает на его эффективность. На 7 -й день лечения уровень гемоглобина продолжал восстанавливаться, хотя и не достиг значений контрольной группы. Лечение экспериментальных животных с использованием анемических препаратов показало увеличение уровня гемоглобина с 80,0±1,2 до 130,0±1,3 г/л.

Ver-Mol-2, используемый в качестве пищевой добавки, показал замедленное восстановление уровня гемоглобина после прекращения его приема (21 -30 день). Это наблюдение видно по показателям гемоглобина, которые не достигли прежнего уровня: 131,0 ± 1,5; 130,0 ± 1,5. На 21 -й день уровень гемоглобина в контрольной группе составил 137,0 ± 1,4, а на 30 -й день — 132,0 ± 1,5; 130,0 ± 1,5.

В контрольной группе наблюдался процесс самоизлечения, однако уровень гемоглобина у животных, получавших добавку, был значительно ниже по сравнению с контрольной группой на протяжении всего периода наблюдения и до 30 дня исследования. Уровень гемоглобина в контрольной группе составил 137,5 ± 0,5 г/л.

Таким образом, Ver-Mol-2, как и Tardiferon, увеличивает уровень гемоглобина, однако данные показывают, что Ver-Mol-2 обладает антианемическими свойствами.

Выводы. Полученные экспериментальные данные подтверждают, что Ver-Mol-2, выделенный из животных, имеет антианемические свойства. Ver-Mol-2 значительно превосходит иностранный препарат "Tardiferon" по своим свойствам, связанным с удерживанием железа. Эта добавка является дешевле, натуральнее и не имеет негативных побочных эффектов.

Ver-Mol-2 может быть использован в качестве местного антианемического средства в некоторых регионах Узбекистана, заменяя импортируемые препараты.

Список литературы

1. Белинский М.Л. Методы статистической обработки экспериментальных данных. М., 1963. С. 220.

2. Белокринская Т.Р., Кузник Б.Н., Хавинсон Б.Х. Влияние полипептидов на систему кроветворения при экспериментальной анемии. М., 1972. С. 132-133.

3. Кост Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. М., 1975. С. 25.

www.afu.uz/journal

УДК: 616.36-091.83

РОЛЬ ЯДЕРНОГО АППАРАТА ГЕПАТОЦИТОВ ПРИ РЕПАРАТИВНОЙ

РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ.

Исаева Н.З., Университет Альфраганус, кафедра «Медицина»

Аннотация.

При резекции печени, наряду с митотическим делением печеночных клеток также происходит миграция ядрышек гепатоцитов, более того данный процесс стимулируется, особенно на 7 сутки после операционного периода, что может свидетельствовать о регенераторном значение выхода ядрышка в цитоплазму клетки. Увеличение числа многоядрышковых гепатоцитов, согласно литературным данным, свидетельствует об активации белок-синтетической функции клетки печени.

Ключевые слова: печень, гепатоцит, резекция, миграция, ядрышко, регенерация.

Актуальность. Печень является уникальным органом, поддерживающим гомеостаз. Она осуществляет трансформацию экзогенных аминокислот, углеводов, липидов и витаминов, синтез сывороточных белков, образование желчи, детоксикацию и экскрецию в желчь эндогенных продуктов обмена и ксенобиотиков. Среди элементов ядерного аппарата гепатоцитов важное значение имеет очень маленькое тельце - ядрышко. Наши исследования показали, что при необходимости синтеза большого количества белка для нужд самой печени или организма, ядрышко гепатоцитов кроликов может мигрировать в цитоплазму и участвовать в синтетических процессах.[1, 2, 8] Для того чтобы установить, существует ли данный феномен выхода ядрышка не только у кроликов, но также и у других млекопитающих, нами были выбраны широко используемые лабораторные животные - белые беспородные крысы, а в качестве эксперимента - 25% резекция печени (левая латеральная доля печени). Половозрелые животные массой 180-200г под легким этаминаловым наркозом подвергались лапаротомии и производилась резекция печени по общепринятой методике. Затем животные забивались в сроки 3, 7, 15 и 30 сутки после операции. Кусочки печени обрабатывались вышеуказанными способами, а гистологические препараты как от контрольных-интактных, так и оперированных опытных животных, анализировали под микроскопом. Первое научное исследование процесса регенерации печени проведена в 1931 году. E. M. Hiqins и R.M. Anderson. Для изучения механизма регенерации применялись различные экспериментальные подходы, в основу которых было положено оценка регенерации печени, после её химического повреждения,

www.afu.uz/journal

хирургической резекции in vivo, а также исследования пролиферации гепатоцитов в первичной культуре в присутствии факторов риска in vitra. Наиболее широко изученным примером регенерации печени является модель ее вырастания после резекции. Отмечено, что после резекции ткани печени происходит компенсаторная регенерация с образованием новых клеточных элементов путем митотического деления оставшихся. Таким образом, регенерация печени — это процесс компенсаторного роста, в котором резецированная доля не вырастает, а увеличивается, масса оставшихся долей как следствие пролиферации клеток. [5;6;12] Уровень пролиферативной активности гепатоцитов в определенной степени зависит от объема резекции: чем большая часть печени удаляется во время операции, тем выше пролиферативный пул клеток. Удаление менее 40% ткани сопровождается малым синтезом ДНК, что заставляет высказать предположение о недостаточности пускового эффекта удаления малого количества ткани (возможно, при этих обстоятельствах не развивается функциональный дефицит). Известно, что после резекции 60--70% ткани печени оставшаяся часть испытывает значительный энергетический недостаток, сохраняющийся в течение 1 -х суток. В дальнейшем происходит повышение энергетического статуса и приближение его к исходным величинам через 5-7суток. Цель исследования. Изучить влияние резекции на миграцию ядрышка и изучить роль миграции ядрышка на регенеративные процессы печени у крыс. Материалы и методы. Материалом служит печень половозрелых крыс, обоих полов. Эксперимент проведён на 25 беспородных белых крысах массой 180-200 гр. с соблюдением принципов гуманного обращения с животными, изложенными в Хельсинской декларации и Европейской конвенций по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях [2]. Животных содержали на стандартном рационе вивария со свободным доступом к корму и воде. Животные подвергались 25% резекции печени, и были декапитированы на 3, 5, 7, 15 и 30 сутки после резекции, под этаминаловым наркозом (40 мг/кг массы тела животного). Для морфометрического и светооптического исследований (микроскоп LEICA GALEN III) гистологические препараты фиксировали в 10%-м забуференном водном растворе формальдегида и проводили исследование по общепринятой методике. Морфометрическое исследование препаратов печени проводили при увеличении в 1000 раз на срезах толщиной 5 мкм, окрашенных гематоксилин -эозином, используя метод наложения точечных морфометрических сеток [1]. Определяли количество одноядерных и двуядерных гепатоцитов, диаметр гепатоцитов, ядер и ядрышек [10]. Статистическую обработку результатов исследования проводили методом вариационной статистики при помощи пакета программ «Statistica 10» с использованием параметрического t-критерия Стьюдента [3]. Различия сравниваемых величин считали статистически

www.afu.uz/journal

значимыми при р <0,05. Все экспериментальные работы выполнены с соблюдением правил биоэтики, утвержденных Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для лабораторных или иных целей.

Срезы для гистологических исследований окрашивали гематоксилин - эозином, а фотографирование препаратов производили при помощи микроскопа модели К-800М, под иммерсионным объективом (х100). Опытную группу составили 26 крыс. Материалом исследования была печень половозрелых беспородных крыс. Результаты исследования: Результаты проведенных исследований показали, что наиболее важные данные получены при анализе морфологической картины животных, подвергнутых 25% резекции печени. В ранние сроки эксперимента (3-7сутки), как фигуры митотического деления, так и выход ядрышек был незначительным (3-5%). Однако количество выходящих ядрышек заметно увеличилось на 15 сутки примерно 8-10 раз (предварительные данные), по сравнению с контролем, на небольшом участке поле зрения обнаруживалось несколько выделяющиеся ядрышки (рис.1). Гепатоциты имеют полигональную форму, цитоплазма их окрашена оксифильно, ядра содержат 2- 3 мелкие ядрышки или иногда одно крупное. На рис.1 в центре находится двуядерный гепатоциты, каждое ядро которого содержат по одному ядрышку, а рядом другой гепатоцит, в котором хорошо заметно как ядрышко выбухает в сторону цитоплазмы, очевидно, находится на стадии пенетрации ядерной оболочки.

iSSs Ч ^ ж - 4

" — MSа

i*- - \т ^ ? J«

45 й -

V 1 ^

* — »V /ЛЛ

i i Jíf.'^ ^гЛ^Л *

^ i Oak - . .ГШ . у ^¿Г

^HJF ■ 4 ^^ * Е? ш л ■_ лГГГ* -Щ

Рис. 1. Печень крысы при частичной ее резекции. Окраска Г.-Э. В одноядерном гепатоците крупное ядрышко находится на стадии выхода через ядерную оболочку. Ув. об. х100

К 30 суткам послеоперационного периода количество выделяющихся ядрышек

1

www.afu.uz/journal

(1,75±0,88) значительно убавилось, приближаясь к норме. Таким образом, при резекции печени наряду с увеличением количества митозов на 3-5 сутки эксперимента, заметно возрастает выход ядрышек (1,31±0,21**) в печеночных клетках с образованием много ядерных, так и молодых клеток. Характерной чертой митотической активности гепатоцитов при малых резекция является то, что она протекает без достижения пиковых показателей, то есть не происходит выраженной синхронизации митотических циклов гепатоцитов. Этот факт послужил основанием для некоторых авторов рассматривать восстановление массы печени после такой резекции (10-30% паренхимы печени) как своеобразную модель нарушения регенерации [Mitchell C. et al., 2005]. Считается, что подобная динамка пролиферации объясняется более поздним наступлением пика активности основных факторов роста и циклинов D1, A, E [Mitchell C. et al., 2005]. На основании этого некоторые авторы рассматривают пролиферацию гепатоцитов после малых резекций (10-30% паренхимы печени) как своеобразную модель нарушения митотического цикла гепатоцитов, при котором невозможно синхронизация пролиферации клеток [Lambotte L. et al., 1997, Li J. et al., 2009]. Полученные данные свидетельствуют не только об увеличении двуядерных гепатоцитов, но также об участии их в клеточном обновлении в печени, следовательно, в процессах регенерации органа. Одним из показателей интенсификации регенераторных процессов в печени является увеличение содержания двуядерных гепатоцитов (Т.А. Залетаева, 1963; Б.П. Солопаев 1980; Л.К. Романова, 1984; И.В. Ступин и соавт., 1995 и др.). Механизм их происхождения не совсем ясен. Большинство исследователей в настоящее время отрицают амитотическое деление ядер в любой ткани. В то же время появились косвенные подтверждения тому, что значительная часть митозов в печени является ацитокинетическими, что и приводит к образованию двуядерных гепатоцитов [2;3;4].

Через 3 суток после резекции в печени подопытных животных обнаруживалось множетсво митотически делящихся гепатоцитов. Большое количество делящихся гепатоцитов обнаруживалось вплоть до 7 суток после операции, далее их становилось меньше. Однако единичные фигуры митозов встречались и через 10 суток после операции. На завершающих этапах регенерации среди гепатоцитов чаще встречались двуядерные клетки. (8,89±2,1**)

www.afu.uz/journal

Рис 2. Печень крысы после частичной ее резекции. Окраска гематоксилин-эозином. А. В центре рисунка фигура митотического деления гепатоцита. Ув. об.х 40

Диаметр ядрышек одноядерных гепатоцитов увеличивается на 5 сутки (2,59±0,44**) и далее стабильно идет на спад. На 30 сутки (2,59±0,44**) он близок к контрольному, диаметр ядрышек двуядерных клеток резко возрастает на 5 сутки (1,97±0,31**) и начинает уменьшаться до 15 суток(1,41±0,74*), далее следует скачкообразное увеличение на 30 сутки (1,71±0,88**) отклоненное от контроля

Количество ядрышек одноядерных клеток незначительно увеличивается на 5 сутки (1,90±1,05), далее до 30 суток оно стабильно уменьшается. На 30 сутки показатель немного меньше контрольного (1,75±0,88). Число ядрышек двуядерных клеток резко снижается на 5 сутки (1,31±0,21**). До 10 дня не изменяется (1,31±0,21**). После 15 дня начинает расти (1,51±0,84**) и к 30 дню показатель приближен к контролю (1,68±0,95).

При резекции печени в регенераторных процессах наряду с митозом (3-5 сутки) участвуют и ядрышки гепатоцитов, их выход увеличивается на 15 сутки эксперимента, следовательно, в восстановлении утраченной массы органа обязательно участвуют ядрышки.

Восстановление структуры печени в постнатальном онтогенезе изучали достаточно интенсивно (Солопаев Б.П., 1970; Верин П.К., 1971; Григорьев Н.И., 1975; Втюрин Б.В., Пальцын А.А.,1975; Коваленко И.А., 1975; Палигина Л.С.,1975;Сидорова В.Ф.,1976; Дубовая Т.К. и соавт., 1977; Садовникова В.В., Садовникова И.В., Иванова Н.А., 2001; Грищенков и соавт., 2001; Батанов А.Н., 2001; Fabricant J. 1968, 1969; Rabes Н. Et al., 1976; Kirshe et al.,1980; Pezzino et al.,1980; Lope P., McMahon J., 1984; и др.). Биологический смысл двуядерных гепатоцитов долгое время оставался не ясным. В настоящее время большинство исследователей полагают, что

www.afu.uz/journal

образование двуядерных гепатоцитов из одноядерных при репаративной регенерации представляет собой резерв полиплоидизации (С.И. Телепнева, 1968; Г.Д. Туманишвили, И.Г. Кахидзе, П.В. Челидзе, 1975;)

Выводы: Анализ морфологической картины животных, подвергнутых 25%-резекции печени, в ранние сроки эксперимента (3-7 сутки), показал, что в пострезекционном периоде как фигуры митотического деления, так и выход ядрышек был очень незначительным (3-5%). Однако на 15 сутки пострезекционного периода количество двуядерных гепатоцитов и мигрирующих ядрышек заметно увеличилось. Изученные данные показали, что количество двуядерных гепатоцитов не только увеличевается, но также участвуют в клеточном обновлении печени, а, следовательно, и в процессах регенерации органа. Таким образом, можно заключить, что при резекции печени, наряду с митотическим делением печеночных клеток также происходит миграция гранулярных компонентов ядрышек гепатоцитов, более того данный процесс стимулируется, особенно на 7 сутки после операционного периода, что может свидетельствовать о регенераторном значение выхода ядрышка в цитоплазму клетки. Увеличение числа многоядрышковых гепатоцитов, согласно литературным данным, свидетельствует об активации белок-синтетической функции клетки. Так или иначе увеличение числа двуядерных и двуядрышковых гепатоцитов, вместе с гипертрофией печеночных клеток, можно расценивать как единый компенсаторно-приспособительный механизм, направленный на нормализацию структуры и функции органа.

Список литературы

1. Садриддинов А. Ф., Исаева Н. З. Этапы миграции ядрышек гепатоцитов печени у некоторых видов млекапитающих. - «Тиббиётда янги кун» 3 (31) 2020 г., 582-585 стр.

2. Садриддинов А.Ф. Значение ядрышка во взаимосвязи полиплодиии многоядерности печеночных клеток - «Австрийский журнал технических и естественных наук», январь-февраль 2014 г., №2, с.64-73;

3. Хельсинская декларация всемирной медицинской ассоциации: этические принципы медицинских исследований с участием человека в качестве объекта исследования (Сеул,2008). Морфолопя. 2010;2(4):69-72

4. Зацепина О.В. Локализация ДНК в ядрышках клеток млекопитающих. «Цитология». 1992. т. 34. № 5. С.34 -39.

5. Бабаева А.Г. Регенерация: факты и перспективы / Бабаева А.Г. - М.: Издательство РАМН, 2009. - 336 с.

6. Романова ЛП, Малышев ИИ. Роль двуядерных гепатоцитов в регенерации печени после механической травмы в раннем

www.afu.uz/journal

онтогенезе у крыс. Вестн Чувашского Ун-та. 2011; 3:398-402.

7. Скуратов АГ, Лызиков АН, Зиновкин ДА, Чешик ИА, Петренев ДР. Морфометрические параметры регенерации печени при частичной гепатэктомии и трансплантации мезенхимальных стволовых клеток в эксперименте. Весщ Нац Акад Навук Беларусь Сер Мед Навук. 2016; 4:57-65.

8. St. Mironescu and C. Dragomir, Nucleolar Behavior in Regenerating Liver of Normal and Whole-bodyirradiated Rats. Cancer Res. 1967;27:1819-1830.

9. Boisvert F.M., van Koningsbruggen S., Navascues J., Lamond A.I. The multifunctional nucleolus. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2007, 8:574-585

10. Hernandez-Verdun D The nucleolus: a model for the organization of nuclear functions. Histochem Cell Biol. 2006, 126:135-148

Влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в крови Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Якубова Ф. Т.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Якубова Ф. Т.

The effect of Ver-Mol-2 on hemoglobin levels in the blood

Текст научной работы на тему «Влияние Ver-Mol-2 на уровень гемоглобина в крови»