CC BY
12
DOI 10.31588/2413-4201-1883-242-2-85-88
УДК: 619: 615.9:612
ВЛИЯНИЕ УГЛЕВОДОРОДА СКВАЛЕН НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ, МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ И РОСТ КРЫС ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ
ПРИМЕНЕНИИ
Кириллов И.Г. - аспирант
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: хроническая токсичность, белые крысы, углеводород Сквален, гематологические исследования
Keywords: chronic toxicity, white rats, Squalene hydrocarbon, hematological studies
На организм животных постоянно воздействуют разнообразные факторы, которые вызывают глубокие изменения с появлением определенных патологий [1, 2, 11].
В последние годы большое внимание уделяется разработке и изучению специфических средств, стимулирующих или подавляющих иммунные реакции организма [13, 14]. Установлено, что многие лекарственные вещества обладают способностью повышать общую сопротивляемость организма или его неспецифический иммунитет. Возникла возможность с помощью этих лекарственных препаратов корректировать иммунные процессы организма. Способность этих препаратов повышать общую резистентность организма, ускорять процессы регенерации послужила основанием для их широкого применения в комплексной терапии инфекционных и инфекционно-воспалительных заболеваний. Оказалось, что многие из средств, стимулирующих иммунный статус, оказывают положительное влияние на рост, развитие и продуктивность животных [6, 8]. Но для безопасного использования таких препаратов необходимо проведение всесторонних доклинических исследований с целью полноценного изучения параметров безвредности [3, 5].
Исходя из вышеизложенного, целью наших исследований было изучение хронической токсичности углеводорода Сква-лен.
Материал и методы исследова-
ний. Исследуемое вещество Сквален - это бесцветное масло, которое не имеет запаха и вкуса. Является ненасыщенным углеводородом, который относится к обширной группе изопреноидов. При этом обладает высокой температурой кипения, физической и химической стабильностью [4, 7].
Хроническую токсичность углеводорода сквален оценивали на 48 беспородных белых крысах обоего пола живой массой 60-75 г. Для проведения эксперимента нами было сформировано 4 группы по 12 крыс в каждой. При этом первая, вторая и третья группы были опытными, а четвертая - контрольной. Животным опытных групп внутримышечно вводили эмульсию сквалена в дозах 0,1 мл, 0,5 мл и 1,0 мл в течение 21 суток.
Опыт проводили в соответствии с «Руководством по определению доклинических исследований лекарственных средств» (А.Н. Миронов, 2012) и согласно методике Г.Н. Першина (1971), А.М. Смирнова, В.И. Дорожкина (2008) [9, 10, 12].
С момента первого введения исследуемого углеводорода и на протяжении двадцати одного дня вели наблюдение за клиническим состоянием животных. Взятие крови для гематологических исследований и измерение живой массы проводили в начале эксперимента, затем на 7, 14, 21 сутки.
Полученные пробы крови исследовали на автоматическом гематологическом анализаторе «Abacus Junior 5».
Таблица 1 - Изменение живой массы (г) подопытных крыс при длительном введении эмульсии сквалена, п=12 (М±т)_
Срок исследования Группа
1 2 3 Контрольная
0,1 мл 0,5 мл 1,0 мл
Исходные показатели 64,9±1,06 65,8±1,28 65,5±1,14 65,0±1,09
На 7 сутки 71,5±1,24 74,4±1,40* 75,3±1,48** 70,2±1,13
На 14 сутки 77,6±1,59 81,1±1,54** 86,5±1,94*** 75,8±1,30
На 21 сутки 88,9±1,70*** 90,8±1,77*** 96,7±1,89*** 81,6±1,21
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,02; *** - р<0,01; *** - р<0,001;
Таблица 2 - Морфологические показатели лабораторных животных при длительном введении эмульсии сквален, п=12 (М±т)_
Показатель I опытная 0,1 мл II опытная 0,5 мл III опытная 1,0 мл Контрольная
Исходные показатели
Лейкоциты, х10-9/л 15,03±0,68 14,14±0,65 12,89±0,63 13,56±0,71
Лимфоциты, % 60,10±1,60 60,70±1,75 61,77±1,47 63,67±1,97
Моноциты, % 6,05±0,26 5,40±0,32 5,24±0,34 5,90±0,22
Нейтрофильные гра-нулоциты, % 33,85±1,12 33,90±1,18 32,99±1,27 30,43±1,45
Эритроциты, х10-12/л 7,36±0,31 7,38±0,25 7,32±0,21 7,43±0,26
Гемоглобин, г/л 137,67±4,12 140,17±4,42 135,08±4,58 144,83±3,94
Гематокрит, % 43,72±1,60 42,36±1,75 45,66±1,43 46,59±1,24
На 7 сутки
Лейкоциты, х10-9/л 10,44±0,52*** 11,01±0,46*** 10,02±0,39*** 12,34±0,59
Лимфоциты, % 61,60±1,05 59,27±2,23 56,73±1,96 60,17±0,88
Моноциты, % 6,97±0,14*** 6,54±0,21*** 6,37±0,14*** 6,02±0,16
Нейтрофильные гра-нулоциты, % 31,43±1,83 34,19±1,01 36,90±2,14 33,81±1,08
Эритроциты, х10-12/л 7,41±0,14 7,24±0,16 7,15±0,11 7,60±0,17
Гемоглобин, г/л 143,01±2,60 137,25±2,23 132,42±2,06 152,58±2,41
Гематокрит, % 42,15±1,31 40,31±1,02 41,54±1,18* 44,76±1,42
На 14 сутки
Лейкоциты, х10-9/л 12,72±0,78* 16,28±0,86 17,69±1,01*** 15,89±0,70
Лимфоциты, % 59,70±2,44 54,16±1,50*** 51,03± 1,12*** 58,92±2,15
Моноциты, % 5,57±0,31 6,23±0,12* 6,01±0,22 5,76±0,28
Нейтрофильные гра-нулоциты, % 34,73±1,48 39,61±1,15*** 42,96±1,03*** 35,32±1,29
Эритроциты, х10-12/л 7,46±0,10 6,89±0,09 7,03±0,08 7,62±0,06
Гемоглобин, г/л 148,75±1,95* 123,00±2,10 *** 126,50±2,35 155,67±1,78
Гематокрит, % 40,84±1,12 39,73±0,97 40,52±1,28** 44,38±1,03
На 21 сутки
Лейкоциты, х10-9/л 11,76±0,49*** 13,59±0,72 16,02±0,63*** 18,06±0,55
Лимфоциты, % 56,31±0,92 62,04±1,23 59,87±1,58 67,10±0,77
Моноциты, % 6,83±0,11** 5,25±0,25 4,40±0,30 5,34±0,29
Нейтрофильные гра-нулоциты, % 36,86±1,08 32,71±1,76 35,73±1,45 27,56±1,01
Эритроциты, х10-12/л 7,09±0,15 7,40±0,19 7,26±0,17 7,51±0,12
Гемоглобин, г/л 130,58±3,90 141,92±3,86 138,92±4,14 148,08±4,76
Гематокрит, % 44,13±1,38 46,10±1,21 43,80±1,59 42,41±1,07
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,02; *** - р<0,01; *** - р<0,001;
Результаты исследований. При
оценке физиологического состояния подопытных животных нами было установлено отсутствие каких-либо признаков токсического действия исследуемой эмульсии сквалена, а также отличий от контрольной группы.
Крысы, находящиеся в эксперименте, были активны, охотно принимали корм и пили воду, волосяной покров у них имел блеск и был гладким. При измерении температуры тела и дыхательных движений в течение 21 суток не отмечали никаких отклонений от физиологической нормы. На протяжении всего опыта гибели среди животных не наблюдали. В таблице 1 представлены изменения живой массы подопытных крыс при определении хронической токсичности эмульсии сквалена в разных дозах.
Из таблицы 2 видно, что на 14 сутки содержание гемоглобина в крови животных первой опытной группы повышается на 7,5 % (р<0,05), а во второй понижается на 12,3 % (р<0,01), по сравнению с фоновыми показателями. При этом изменения не выходят за рамки физиологической нормы.
Уровень лейкоцитов на 7 сутки после введения сквалена во всех опытных группах был ниже, чем исходные показатели и составил в первой группе 10,44±0,52 х10-9/л, во второй - 11,01±0,46 х10-9/л и в третьей - 10,02±0,39 х10-9/л. Тенденция к снижению количества лейкоцитов наблюдается у подопытных животных первой группы и на четырнадцатый, и на двадцать первый день исследования. А у крыс третьей опытной группы через 2 и 3 недели с начала эксперимента уровень лейкоцитов, наоборот, увеличивается.
По показателям лейкоформулы следует отметить, что процент лимфоцитов на 14 сутки в 1 и 2 опытных группах достоверно снижается. В то же время на фоне такого снижения отмечается достоверное увеличение процентного содержания нейтрофильных гранулоцитов.
Такое изменение уровня лейкоцитов, а также колебания в лейкоформуле в пределах физиологической нормы можно объяснить, как ответную реакцию орга-
низма на введенную эмульсию сквалена.
Заключение. Таким образом, анализ полученных результатов показал, что длительное введение эмульсии сквалена способствует к повышению живой массы подопытных животных, не оказывает отрицательного действия на физиологическое состояние и не вызывает отклонений в морфологической картине крови.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Балашов, В.В. Применение препарата Ветостим с целью повышения эффективности специфической профилактики Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита у кур у цыплят-бройлеров и индюшат: дис. канд. вет. наук: 06.02.02 / Балашов Виктор Викторович. - Омск, 2014. -131 с.
2. Венгеренко, Л.А. Ветеринарные проблемы птицеводства и их решение / Л. А. Венгеренко // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2007. - № 3. - С. 3-8.
3. Дорожкин, В.И. Особенности естественной резистентности и обмена веществ телят под действием иммунокоррек-торов / В.И. Дорожкин, Р.А. Асрутдинова // Материалы 111 - Съезда фармакологов и токсикологов России «Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации», Санкт-Петербург. - 2011. - С. 156-159.
4. Кириллов, И.Г. Определение острой токсичности и кумулятивных свойств углеводорода сквален / И.Г. Кириллов, Р.А. Асрутдинова, Ф.Ф. Сунага-тов, Е.Г. Кириллов // Материалы V-го Международного конгресса ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии». - Санкт-Петербург. -2019. - С. 86-88.
5. Кузьминова, Е.В. Некоторые аспекты доклинических исследований об-менностабилизирующего препарата / Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, А.Ю. Вари-вода, Е.В. Тяпкина // Ветеринарный врач. -2015. - № 1. - С. 44-46.
6. Мирошкина, И.А. Исследование хронической токсичности потенциального анксиолитика ГМЛ-1 / И.А Мирошкина, А.В. Сорокина, А.В Волкова [и др.] //
Фармакокинетика и фармакодинамика. -2019. - № 1. - С. 44-53.
7. Музалевская, Е.Н. Сквален: физиологические и фармакологические свойства / Е.Н Музалевская, Л.А. Мирошниченко, В.А. Николаевский [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2015. - Том 78 (№6). - С. 30-36.
8. Набиев, Ф.Г. Современные ветеринарные лекарственные препараты: справочник / Ф.Г. Набиев, Р.Н. Ахмадеев. - 2-е изд., перераб. - Санкт-Петербург: Лань. -2011. - 816 с.
9. Першин, Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии / Г.Н. Першин. - М.: Изд. «Медицина». - 1974. - 143 с.
10. Руководство по определению доклинических исследований лекарственных средств / А.Н. Миронова. - М.: Изд. «Гриф и К». - 2012. - Ч. 1. - 944 с.
11. Сагитова, М.Г. Гигиеническое обоснование применения полисахарида «Грамо» в птицеводстве: дис. канд. биол. наук: 06.02.05 / С.М. Габдулхаевна. - Казань, 2015. - 184 с.
12. Смирнов, А.М. Научно-методологические аспекты исследования токсикологических свойств фармакологических лекарственных средств для животных / А.М. Смирнов, В.И. Дорожкин; Рос. акад. с.-х. наук. - Москва. - 2008. - 120 с.
13. Aguilar, J.C. Vaccine adjuvants revisited / J.C. Aguilar, E.G. Rodriguez // Vaccine. - 2007. - №25. - Р. 3752-3762.
14. Imani Fooladi, A. A. Synergistic effects between Staphylococcal enterotoxin type B and Monophosphoryl lipid A against mouse fibrosarcoma / А.А. Imani Fooladi, М. Sattari, М. Reza Nourani // J BUON. - 2010. - Vol. 15. - № 2. - Р. 340-347.
ВЛИЯНИЕ УГЛЕВОДОРОДА СКВАЛЕН НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ,
МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ И РОСТ КРЫС ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ
ПРИМЕНЕНИИ
Кириллов И.Г.
Резюме
В данной работе представлены результаты по определению хронической токсичности углеводорода сквален и его влияния на физиологическое состояние лабораторных крыс, живую массу и морфологическую картину крови. Проведенные исследования показали, что длительное внутримышечное введение эмульсии сквалена способствует к повышению живой массы подопытных животных, не оказывает отрицательного действия на физиологическое состояние и не вызывает отклонений в гематологических показателях.
EFFECT OF SQUALENE HYDROCARBON ON THE PHYSIOLOGICAL STATE, MORPHOLOGICAL COMPOSITION OF BLOOD AND GROWTH OF RATS WITH
LONG-TERM USE
Kirillov I.G.
Summary
This paper presents the results of determining the chronic toxicity of squalene hydrocarbon and its effect on the physiological state of laboratory rats, live weight, and the morphological picture of blood. Studies have shown that prolonged intramuscular administration of squalene emulsion helps to increase the live weight of experimental animals, does not have a negative effect on the physiological state and does not cause deviations in hematological parameters.
