CC BY
31
Ю.А. Швед 1 а, М.И. Блинова 1, А.Ю. Билибин а,
Г.П. Пинаев 1
Создание клеточного продукта на основе клеток кожи человека - кератиноцитов и биодеградируемой полимерной плёнки
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
ulychka@mail.ru
Yu.A. Shved, М.I. Blinova, A.Yu. Bilibin, G.P. Pinaev Engineering a cell-based product from human skin cells - keratinocytes - and a biodegradable polimeric film
Проблема восстановления повреждённых тканей и органов является перспективным направлением современной регенеративной медицины. Одним из приоритетных направлений регенеративной медицины является восстановление структурной целостности кожных покровов, повреждённых в результате ожогов, трофических язв и воздействий другого рода. Для этой цели выращенный in vitro клеточный пласт эпителиальных клеток — кератиноцитов, должен быть перенесён на поражённый участок кожи. Однако для отделения клеточного пласта от поверхности культурального сосуда, необходима обработка протеолитическими ферментами. Такая обработка приводит к частичному повреждению рецепторов, находящихся на поверхности клеток. Полимерные матрицы, позволяющие культивировать на них кератиноциты человека с образованием многослойного клеточного пласта, при совместном переносе их в область повреждения, позволят исключить процедуру обработки клеток, выращиваемых по известным технологиям, протеолитическими ферментами и ускорить процесс заживления ран.
Цель исследования — разработка биодеградируемой полимерной матрицы, предназначенной для культивирования клеток кожи человека с целью их трансплантации на повреждённый участок кожи.
В процессе исследования были решены следующие задачи: отработаны условия формирования полимерных плёнок для свободного доступа к клеткам питательных веществ и отвода продуктов метаболизма и определена скорость их деградации в условиях культивирования клеток и после имплантации в организм лабораторных животных. Разработаны методы модификации поверхности полимерных плёнок и подобраны оптимальные условия для культивирования клеток кожи на этих плёнках.
В.И. Шепитько, Е.С. Якушко
Влияние трансплантации криоконсервированной плаценты на течение экспериментального неврита зрительного нерва
Высшее государственное учебное заведение Украины «Украинская медицинская стоматологическая академия», Полтава, Украина
svi_umsa@mail.ru, alyasv@yahoo.com V.l. Shepit’ko, Ye.S. Yakushko
The influence of cryopreserved placenta transplantation on the flow of optic nerve’s experimental neuritis
Исследования последних лет показали, что криокон-сервированные препараты плаценты при их трансплантации выступают в роле естественных стимуляторов защитных сил организма, оказывают иммунокорриги-
рующее, радиопротекторное, противоопухолевое, противовоспалительное действие. В то же время, механизм противовоспалительного эффекта криоконсервированной плаценты изучен недостаточно.
Целью нашего исследования было изучение влияния трансплантации криоконсервированной плаценты на морфофукциональное состояние зрительного нерва крыс при остром асептическом неврите в отдаленные сроки эксперимента.
Экспериментальная работа проведена на 60 половозрелых крысах линии «Вистар». Материалом для исследования служила ретробульбарная часть зрительного нерва крыс. Животные были распределены по трем группам: 1 группа — контрольная (20 крыс), во 2-й группе — животным (20 крысам) однократно внутрибрю-шинно был введен л-каррагинан (5 мг в 1 мл физиологического раствора), в 3-й группе (20 крыс) ^на фоне вызванного асептического воспаления однократно подкожно трансплантировано криконсервированную плаценту размерами 0,5x0,5x0,5 см. Выведение животных из эксперимента было произведено путем передозировки наркоза на 10, 14, 21 и 30-е сут. эксперимента. Материал обрабатывали по общепринятой методике, принятой в электронной микроскопии. Полутонкие срезы окрашивали толуидиновым синим, полихромным красителем и изучали в световом микроскопе.
На 10-е сут. у животных 3-й экспериментальной группы наблюдали постепенное восстановление морфологических структур зрительного нерва, в отличие от 2-й группы. Было отмечено восстановление микроскопического строения оболочек зрительного нерва. Диаметры артериол и капилляров в них не отличались от группы контроля. Венулы были еще немного расширены. Значения толщины соединительнотканных септ внутри нерва статистически не отличалась от контроля. Нервные волокна на поперечных срезах были округлой формы, покрыты миелиновой оболочкой, их средний диаметр соответствовал диаметру нервных волокон группы контроля. Объем ядер клеток макроглии и ядерно-цитоплазматическое отношение были меньше по сравнению с контролем, но достоверно больше, чем в группе животных с асептическим воспалением, что говорит о более раннем восстановлении функций клеток.
14 сут. характеризовались дальнейшим возобновлением структуры сосудисто-стромального и паренхиматозного компонентов зрительного нерва крыс 3-й экспериментальной группы. В этот период в зрительном нерве животных 2-й группы наблюдались изменения подобные таковым в 3-й группе на 10-е сут. эксперимента.
На 30-е сут. мы наблюдали практически полное восстановление морфологической структуры зрительного нерва животных, которым на фоне асептического неврита была трансплантирована криоконсервирован-ная плацента. Во 2-й группе после экспериментального неврита восстановились мозговые оболочки, микро-циркуляторное русло зрительного нерва. Нервные волокна были неправильной формы, меньшего по сравнению с контролем диаметра. Ядра клеток макроглии имели меньший, чем в контроле, объем и ядерно-цитоплазматическое отношение.
Таким образом, при трансплантации криоконсервированной плаценты зрительный нерв крыс после экспериментального неврита восстанавливался практически полностью. Морфофункциональных изменений в нервных волокнах и клетках макроглии не наблюдалось.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том V, № 3, 2010
