CC BY
11© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014
Э.А.Ахматов, Е.В.Сорокина, О.М.Игнатова, Л.С.Черкасова
ВЛИЯНИЕ СТАФИЛОКОККОВОЙ ВАКЦИНЫ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ АНТИГЕН-ПРЕЗЕНТИРУЮЩИХ КЛЕТОК
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва
Цель. Изучение влияния стафилококковой вакцины на функциональную активность антигенпрезентирующих клеток. Материалы и методы. Мышам вводили по 500 мкг вну-трибрюшинно вакцину «Стафиловак». Через различные интервалы времени у животных определяли фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов по отношению к Staphylococcus aureus 1991. Рассчитывали фагоцитарный индекс (ФИ) и фагоцитарное число (ФЧ) в мазках, сделанных после 30 и 60 мин инкубации. Дендритные клетки (ДК) получали из костномозговых предшественников при культивировании с 20 нг/мл GM-CSF и 20 нг/мл IL-4 (BioSource International Inc., Бельгия). На 6 сутки инкубации к незрелым клеткам добавляли стафилококковую вакцину (50 мкг/мл) для индукции созревания ДК. Оценку фенотипа ДК осуществляли методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител против клеточных антигенов (Beckman Culter, США). Результаты. ФИ при 30 и 60 мин инкубации повышался в 0,12 — 1,4 раза и 1,11 — 1,52 раза соответственно по сравнению с контролем. ФЧ при 30 мин инкубации клеток с микробной суспензией возрастало с 8,6 до 11,4% против 5,9% в контроле, при 60 мин инкубации — с 7,7 до 8,1% против 5,1% в контроле. В культуре ДК при инкубации их с вакциной увеличивалось содержание клеток с экспрессией маркеров межклеточной адгезии CD38, маркера антигенного представления MHCII и маркера терминальной дифференцировки ДК CD83. Также отмечена экспрессия CD34 и CD14, что может свидетельствовать о частичной направленности дифференцировки клеток в сторону макрофагов. Заключение. Вакцина «Стафиловак» при внутрибрюшинном введении мышам оказывала активирующее влияние на функциональную активность антигенпрезентирующих клеток и перитонеальных макрофагов.
Журн. микробиол., 2014, № 6, С. 48—53
Ключевые слова: дендритные клетки, «Стафиловак», иммунофенотип, фагоцитоз E.A.Akhmatov, E.V.Sorokina, O.M.Ignatova, L.S.Cherkasova
INFLUENCE OF STAPHYLOCOCCUS VACCINE ON FUNCTIONAL ACTIVITY OF ANTIGEN-PRESENTING CELLS
Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia
Aim. Study the influence of staphylococcus vaccine on functional activity of antigen-presenting cells. Materials and methods. Mice intraperitoneally received 500 ^g of «Staphylovac» vaccine. Phagocytic activity of peritoneal macrophages against Staphylococcus aureus 1991 was determined in animals at various time intervals. Phagocytic index (PI) and phagocytic number (PN) in smears made at 30 and 60 minutes of incubation were calculated. Dendritic cells (DC) were obtained from bone marrow precursors during cultivation with 20 ng/ml GM-CSF and 20 ng/ml IL-4 (BioSource International Inc., Belgium). At day 6 of incubation staphylococcus vaccine (50 ^g/ml) was added to immature cells for induction of DC maturation. DC phenotype evaluation was carried out by flow cytometry using monoclonal antibodies against cell antigens (Beckman Culter, USA). Results. PI at 30 and 60 minutes of incubation increased by 0.12 — 1.4 times and 1.11 — 1.52 times, respectively, compared with control. PN at 30 minutes of incubation of cells with microbial suspension increased from 8.6 to 11.4% against 5.9% in control, at 60 minutes of incubation — from 7.7 to 8.1% against 5.1% in control. In DC culture during their incubation with the vaccine, content of cells with expression of intercellular adhesion marker CD38, antigen presenting marker MHCII and DC terminal differentiation marker CD83 increased. Expression of CD34 and CD14 was also noted, that may give evidence on partial direction of cell differentiation to macrophages.
Conclusion. «Staphylovac» vaccine during intraperitoneal administration to mice had activating influence on functional activity of antigen-presenting cells and peritoneal macrophages.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2014, No. 6, P. 48-53
Key words: dendritic cells, «Staphylovac», immune phenotype, phagocytosis ВВЕДЕНИЕ
Staphylococcus aureus вызывает гнойно-воспалительные заболевания различной локализации от легких до генерализованных форм [2]. В настоящее время существующие методы терапии и профилактики данной инфекции зачастую себя не оправдывают. Это связано с появлением устойчивости возбудителя к антибиотикам и снижением резистентности организма, приводящих к затяжному течению заболевания и его хронизации [1, 3, 4]. Повсеместная распространенность стафилококковой инфекции, сложность и недостаточная эффективность коммерческих стафилококковых иммунопрепаратов диктуют необходимость разработки новых способов лечения и профилактики данной инфекции.
В НИИВС им. И.И.Мечникова разработана сухая стафилококковая бесклеточная вакцина «Стафиловак» на основе водных экстрактов антигенов клеточной стенки наиболее иммуногенных штаммов S.aureus. Вакцина разрешена к применению в медицинской практике (Приказ МЗ РФ №144/53 от 10 апреля 1996 года). При конструировании данного препарата использован ряд оригинальных подходов, обеспечивших получение вакцины, характеризующейся невысокой реактогенностью при сохранении протективной и иммуномодулирующей активности антигенов, входящих в ее состав. Клинические исследования, проведенные на разных базах, показали, что включение данной вакцины в комплексную терапию хронических стафилококковых инфекций оказывает длительный терапевтический эффект [5, 8]. В связи разработкой промышленной технологии приготовления стафилококковой вакцины возникла необходимость проведения доклинических исследований, в рамках которых изучены молекулярно-клеточные механизмы активации врожденной и адаптивной иммунной системы.
Цель исследования — изучение влияния «Стафиловак» на эффекторы врождённого иммунитета.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Мышам линии СВА (10 — 12 г) вводили по 500 мкг внутрибрюшинно однократно вакцину «Стафиловак». Через различные интервалы времени (4, 24 и 96 ч, 7 сут после I и II иммунизации) у животных получали перитонеальные макрофаги (ПМ).
Фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов оценивали по поглотительной способности в отношении штамма S. aureus 1991; 0,4 мл взвеси культуры ПМ (10х106 кл/мл) в среде 199 («ПанЭко») смешивали с 0,6 мл взвеси микробных клеток (1х109 кл/мл) в изотоническом растворе натрия хлорида в чашках Петри. Взвесь инкубировали в течение 30 и 60 мин при 37°C и 4 % СО2. Через указанные интервалы времени клетки промывали средой 199, фиксировали в этиловом спирте и красили азур-эозином по Романовскому-Гимза. Показатели рассчитывали в мазках, сделанных после 30 и 60 мин инкубации. Определяли фагоцитарный индекс— процент клеток, вступивших в фагоцитоз; фагоцитарное число — среднее число бактерий, находящихся внутриклеточно (частное от деления общего числа поглощенных бактерий на число клеток, вступивших в фагоцитоз); коэффициент фагоцитарного числа (КФЧ), представляющий отношение ФЧ30 к ФЧ60; индекс бактерицидности фагоцитов (ИБФ) — отношение Чу/Чп х100, где Чу — число убитых внутри фагоцитов микробов; Чп — общее число поглощенных фагоцитами микробов.
У мышей линии СВА для получения предшественников ДК извлекали бедренные
4. ЖМЭИ 6 № 34
49
кости. Костно-мозговые каналы костей промывали средой RPMI-1640 («Sigma», США), костный мозг гомогенизировали, трижды осаждали центрифугированием (250 g х 5 мин) и переводили в обогащенную среду культивирования: 106 клеток в 1 мл среды RPMI-1640 c добавлением 0,1 мг/мл гентамицина сульфата («Sigma») и 10% термоинактивированной эмбриональной телячьей сыворотки. К суспензии клеток костного мозга добавляли 20 нг/мл мышиного рекомбинантного гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF) и 20 нг/мл IL-4 (BioSource International Inc., Бельгия). На третьи сутки добавляли те же цитокины. На шестые сутки инкубации производили смену среды с добавлением исследуемой стафилококковой вакцины (50 мкг/мл) для индукции созревания ДК. В качестве контроля использовали TNF-a (20 нг/мл). Через трое суток ДК отмывали от среды культивирования и определяли иммунофенотип ДК.
Оценку фенотипа ДК осуществляли методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител против клеточных антигенов. Клетки отмывали холодным фосфатно-солевым р-ром (ФСБ) с 1% фетальной телячьей сывороткой и окрашивали FITC и РЕ меченными антителами, после чего отмывали 2 раза холодным ФСБ.Результаты учитывали на проточном цитометре FC-500 (Beckman Culter, США). На ДК костного мозга мышей исследовали уровень экспрессии молекул CD34, CD38, CD 14, CD11c, CD80, CD83, CD86. Окно популяции клеток устанавливали на основе комбинации прямого и бокового светорассеяния и размера клеток. При учете результатов подсчитывали 10 000 клеток в окне. Статистическая об-
работка материала проведена при помощи программного пакета WINMDI 2.8. Достоверные отличия от значений контрольной группы (физ. раствор) ДК или от значений группы с TNF-a (зрелые ДК) находили с помощью определения ^критерия Стьюдента.
РЕЗУЛ ЬТАТЫ
Фагоцитарный индекс при введении стафилококковой вакцины статистически значимо повышался на все сроки исследования как через 30, так и 60 минут инкубации со стафилококком (табл. 1). При 60-минутной инкубации клеток с микробной суспензией количество клеток, вступивших в фагоцитоз, постепенно увеличивалось по сравнению с 30-минутной инкубацией. ФИ при 30-минутной инкубации повышался в 0,12 раза (4 ч); 1,36 (24 ч); 1,3 (96 ч); 1,43 (7 сут); 1,52 (7 сут после II иммунизации) раз по сравнению с контролем. ФИ при 60-минутной инкубации соответственно в эти сроки повышался в 1,11 раза (4 ч); 1,4 (24 ч); 1,24 (96 ч); 1,47 (7 сут); 1,52 (7 сут после II иммунизации) раз по сравнению с кон-
Таблица 1. Фагоцитарная активность макрофагов перито-неального экссудата мышей при однократном внутрибрюшинном введении стафилококковой вакцины в дозе 500 мкг
«Стафиловак» Контроль
После введения вакцины через: 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа
30 мин1 1 ч 30 мин 1 ч
Фагоцитарный индекс, %
4 ч 63,8+3,8 67,1+2,8 56,8+3,3 60,2+3,1
24 ч 77,4+3,3* 84,3+4,2*
96 ч 73,9+3,2* 75,4+3,3*
7 сут 81,2+3,5* 88,4+3,9*
7 сут 86,4+3,6* 91,7+3,3*
II иммун.
Фагоцитарное число, %
4 ч 8,6+0,4* 7,7+0,5* 5,9+0,3 5,1+0,4
24 ч 11,8+0,8* 6,5+0,5
96 ч 8,4+0,6* 5,7+0,5
7 сут 10,3+0,7* 7,2+0,7*
7 сут 11,4+2,7* 8,1+0,6*
II иммун.
Коэффициент фагоцитарного числа
4 ч 1,11+0,03 — 1,16+0,03 —
24 ч 1,8+0,04* —
96 ч 1,47+0,02* —
7 сут 1,43+0,03* —
7 сут 1,4+0,04* —
II иммун.
Индекс бактерицидности фагоцитов, %
4 ч 44,5+3,2 65,4+2,8 50,1+2,9 57,3+3,7
24 ч 49,2+3,7 77,3+2,7*
96 ч 42,7+2,7 72,6+3,7*
Примечание. 1 Время инкубации фагоцитирующих клеток (106) и S. aureus 1991(5х108); * P<0,05 по сравнению с контрольной группой по t-критерию Стьюдента.
Таблица 2. Иммунофенотип ДК, генерированных из костного мозга мышей
Препарат Содержание клеток, %
CD34 CD11c CD38 CD14 CD83 CD86 CD80 MHCII
«Стафиловак» 32,6+3,3 3+0,2 56,9+4,4* 76,7+5,1* 10,8+0,8* 2,5±0,3 38±2,9* 11±0,6* TNF-a 10,7+0,6* 39,5+2,9* 37,5+3,1* 69,3+5,1* 42,8+3,3* 9,6+1* 75,2+5,3* 52,3+4,1*
Контроль 38,6+2,9* 4,8+0,4 0,3+0,1 22,9+2,1 3,1+0,2 2,1+0,3 11,3+1,3 6,5+0,6
Примечание. * P<0,05 по сравнению с контрольной группой по t-критерию Стьюдента.
тролем. Как видно из табл.1, статистически значимое (p<0,05) повышение отмечалось, начиная через сутки после введения вакцины.
Фагоцитарное число при 30-минутной инкубации клеток с микробной суспензией возрастало с 8,6% (4 ч) до 11,4% (7 ч после II иммунизации) против 5,9% в контроле; при 60-минутной инкубации — с 7,7 до 8,1% против 5,1% в контроле. То есть ФЧ повышалось преимущественно при 30-минутной инкубации фагоцитов с микробной суспензией. При часовой инкубации клеток с микробными клетками было отмечено повышение ФЧ только при получении перитонеальных макрофагов через 4 часа после иммунизации и в отдаленные сроки наблюдения (7 сут).
При этом коэффициент фагоцитарного числа, определяемый как отношение среднего числа бактерий, поглощенных в течение 30 минут, к фаготированным бактериям через 1 час, статистически значимо возрастал через 24 часа (1,8) и сохранялся на повышенном уровне (1,4) во все последующие сроки наблюдения.
Индекс бактерицидности фагоцитов увеличивался при получасовой инкубации со взвесью стафилококка клеток, полученных через сутки после введения вакцины, ИБФ оставался повышенным через 96 часов. Но статистически значимая индукция бактерицидности фагоцитов наблюдалась только через 24 и 96 ч после иммунизации мышей при часовой инкубации перитонеальных макрофагов с микробами, что является закономерным процессом, поскольку для переваривания микробных патогенов необходимо определенное время.
Таким образом, стафилококковая вакцина при внутрибрюшинном введении мышам в дозе 0,5 мг оказывает стимулирующее действие на активность перитонеальных макрофагов, способствуя активному фагоцитозу микробных клеток in vitro.
Дендритные клетки были получены из костного мозга мышей при культивировании с IL-4 и GM-CSF. В качестве индуктора созревания использовали стафилококковую вакцину. Добавление в культуру TNF-a приводило к увеличению клеток с эксцентрично расположенным ядром, уплотнению цитоплазмы и наличию специфических выростов на поверхности клетки. Исследование культуры незрелых клеток во флаконах под микроскопом при проходящем свете выявляло звездчатые клеточные формы с характерными цитоплазматическим отростками. Незрелые ДК, прилипшие к пластику культурального флакона, имели вуалевидный характер с длинными тонкими отростками на поверхности. Цитоплазма содержала многочисленные вакуоли разной величины, внутри которых выявлялись разнообразные включения.
В культуре незрелых ДК увеличивалось количество незрелых клеток с экспрессией CD34 (38,6+2,9%) (табл. 2). Введение в культуру клеток TNF-a приводило к снижению численности CD34+ клеток и нарастанию клеточных типов с экспрессией адгезивных маркеров CD11c и CD38, макрофагов CD14, костимулирующих CD86 и CD80, антигенного представления MHCII. Следует отметить, что содержание в культуре активированных TNF-a клеток, экспрессирующих CD83, повышалось в 22 раза.
В культуре ДК при инкубации их с вакциной увеличивалось содержание клеток с экспрессией маркеров межклеточной адгезии CD38 (56,9+4,4%), маркера антигенного представления MHCII (11+0,6%) и маркера терминальной дифференцировки ДК CD83 (10,8+0,8%) по сравнению с незрелыми ДК (табл. 2). Однако, судя по экспрессии маркера незрелых клеток CD34 (32,6+3,3%) и макрофагального маркера CD14 (76,7+5,1%), которые обильно присутствовали на полученных клетках, можно предположить, что в культуре полученных клеток обнаруживали незрелые ДК и направление дифференци-ровки частично происходило в сторону макрофагальной линии клеток.
ОБСУЖДЕНИЕ
Врожденный иммунитет реализуется с помощью клеток-эффекторов, участвующих в первой линии защиты от патогена, к которым относят антигенпрезентирующие клетки (АПК). Бактериальная инвазия в тканях хозяина запускает высвобождение ДНК поли-морфноядерными лейкоцитами — нейтрофильные экстрацеллюлярные ловушки, neutrophil extracellular traps (NETs), способствуя иммобилизации микробов и активации фагоцитоза макрофагами с последующим клиренсом инфекционных агентов. Однако выявлено, что S.aureus может ускользать от этих защитных механизмов путем преобразования NETs в дезоксиаденозин, который индуцирует каспаза-3-опосредованную гибель иммунных клеток. Для преобразования NETs в дезоксиаденозин требуется два фермента, нуклеаза и аденозин-синтаза, которые секретируются золотистым стафилококком и являются необходимыми для исключения макрофагов из стафилококковых абсцессов. Таким образом, патогенез стафилококковой инфекции связан с избеганием защитных сил хозяина и перепрофилированием их для уничтожения иммунной системы [16, 18].
Необходимость поиска препаратов, активирующих как врожденный иммунитет, так и специфический иммунный ответ против стафилококковой инфекции, очевидна. Таким препаратом является стафилококковая вакцина «Стафиловак». Наши эксперименты на мышах показали, что внутрибрюшинная иммунизация данной вакциной усиливает активность перитонеальных макрофагов eх vivo, способствуя активному фагоцитозу микробных клеток in vitro. Это подтверждается повышением численности клеток брюшной полости в фазе фагоцитоза, начиная с 24 часов после вакцинации (увеличение с 1,1 раза) и продолжающаяся на 7 сутки после иммунизации (увеличение в 1,5 раза) по сравнению с контрольной группой. Повторное введение вакцины приводило к некоторому повышению фагоцитарной активности, возможно, с вовлечением в иммунный ответ адаптивных механизмов, приводящих к опсонизации микробных клеток антителами, облегчающих поглощение захваченных бактерий фагоцитами.
В реализации противостафилококковых защитных механизмов существенную роль играют как профессиональные фагоциты — макрофаги, так и антигенпрезентирующие дендритные клетки костномозгового происхождения. ДК — ключевой тип клеток на всех этапах реализации эффекторных функций иммунитета, обладающий более мощным потенциалом по сравнению с другими АПК. Они обладают уникальной способностью индуцировать и регулировать иммунный ответ с активацией различных иммунокомпе-тентных клеток [6, 13]. ДК играют важную роль в инициации и регулировке иммунных реакций, направленных против вирусов, бактерий и других патогенных организмов. Этот тип клеток может запускать противоопухолевые иммунные реакции [10, 17].
В наших экспериментах клетки на 7 сутки культивирования в присутствии GM-CSF и IL-4 характеризовались нежной цитоплазмой вуалевидного характера и обильно экс-прессировали маркер CD34, что может свидетельствовать об их незрелости. При внесении в культуру вакцины или классического индуктора созревания TNF-a ДК приобретали многочисленные отростки, характерные для зрелых клеток. О созревании свидетельствует прежде всего нарастание количества клеток в стадии терминальной дифференцировки CD83+ ДК, а также снижение численности CD34+ и нарастание CD11c+, CD38+, CD86+, CD80+, MHCII+ клеток. При этом цитоплазма становилась более плотной. Однако, по сравнению с TNF-a, культура клеток с вакциной характеризовалась неоднородностью: присутствовали как зрелые, так и незрелые ДК, а также макрофаги. Таким образом, стафилококковая вакцина при введении в культуру незрелых ДК приводила к формированию смешанного пула макрофагов и зрелых ДК.
Самое важное свойство дендритных клеток — способность примировать наивные Т-лимфоциты при первом их контакте с антигеном [14], и эти клетки отличаются способностью программировать иммунный ответ по Th-1 или Th-2 типу. Этим клеткам присущи три основные функции: представление антигена иммунокомпетентным клеткам, установление и поддержание иммунологической толерантности, поддержание иммунологической памяти (совместно с В-лимфоцитами). Способность ДК эффективно представлять антиген Т-лимфоцитам активно используется для генерации специфических иммунных клеток-эффекторов и создания противоинфекционных и противоопухолевых вакцин [9, 10].
Изучается возможность использования вакцин на основе ДК для профилактики и терапии инфекционных заболеваний в отношении патогенов, для которых нет эффективных вакцин (ВИЧ, гепатит С и др.) [12], для повышения эффективности традиционных слабоиммунных вакцин путем стимуляции клеток врожденного иммунитета, для защиты от неизвестных патогенов [7], для иммунотерапии злокачественных новообразований [11, 15].
Л ИТЕРАТУРА
1. Волкова Е.Н., Бутов Ю.С., Морозов С.Г. К проблеме иммунопатогенеза гнойничковых заболеваний кожи. Вестн. дерматол. венерол. 2004, 1: 20-22.
2. Дехнич А.В., Никулин А.А., Рябкова Е.Л., Кречикова О.И., Сухорукова М.В., Козлов Р.С. Эпидемиология резистентности штаммов S. aureus, выделенных от пациентов в ОРИТ российских стационаров: результаты многоцентрового исследования. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. 2008, 10 (4): 333-344.
3. Егорова Н.Б., Ефремова В.Н., Курбатова Е.А., Грубер И.М. Данные экспериментального и клинико-иммунологического изучения бесклеточной стафилококковой вакцины «Стафиловак». Журн. микробиол. 2008, 6: 102-108.
4. Ефремова В.Н., Егорова Н.Б., Масюкова С.А. Бесклеточная антистафилококковая вакцина для лечения хронической стафилококковой инфекции. Патент РФ № 2122862 от 10.12.1998.
5. Масюкова С.А., Ефремова В.Н., Федоров С.М. Вакцинотерапия больных хронической пиодермией сухой бесклеточной стафилококковой вакциной. Вестн. дерматол. венерол. 1993, 4: 64-68.
6. Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Физиология клеток врожденной иммунной системы: Дендритные клетки . Иммунол. 2006, 6: 368-377.
7. Семенов Б.Ф., Ахматова Н.К., Киселевский М.В. и др. Клеточные и молекулярные события при введении поликомпонентной бактериальной вакцины и заражении S. typhimurium. Молекул. мед. 2005, 4: 48-54.
8. Сорокина Е.В. Бактериальные вакцины в терапии хронической пиодермии. Автореф. дис. канд.мед.наук. М., 2006.
9. Boehm T., Hess I., Swann J.B. Evolution of lymphoid tissues. Trends Immunol. 2012, 33 (6): 315-321.
10. Carreno B.M., Becker-Hapak M., Huang A. et al. IL-12p70-producing patient DC vaccine elicits Tc1-polarized immunity. J.Clin. Invest. 2013, 123 (8): 3383-3394.
11. Dannull J., Haley N.R., Archer G. et al. M. Melanoma immunotherapy using mature DCs expressing the constitutive proteasome. J. Clin. Invest. 2013, 123 (7): 3135-3145.
12. Iwatsuki K., Y&masaki O., Morizane S., Oono T. Staphylococcal cutaneous infections: invasion, evasion and aggression. J. Dermatol. Sci. 2006, 42 (3): 203-214.
13. Lee S.W., Park H.J., Kim N., Hong S. Natural killer dendritic cells enhance immune responses elicited by a-galactosylceramide-stimulated natural killer T cells. Biomed. Res. Int. 2013, 2013: 460706.
14. Li M., Jiang Y, Xu C. et al. Enhanced immune response against HIV-1 induced by a heterologous DNA prime-adenovirus boost vaccination using mannosylated polyethyleneimine as DNA vaccine adjuvant. Int. J. Nanomedicine. 2013, 8: 1843-1854.
15. Mitosek-Szewczyk K., Tabarkiewicz J., Wilczynska B. et al. Impact of cladribine therapy on changes in circulating dendritic cell subsets, T cells and B cells in patients with multiple sclerosis. J. Neurol. Sci. 2013, 332 (1-2): 35-40.
16. Nieminen J.K., Niemi M., Sipponen T. et al. Dendritic cells from Crohn's disease patients show aberrant STAT1 and STAT3 signaling. PLoS One. 2013, 7; 8 (8): e70738.
17. Tan C., Dannull J., Nair S.K. et al. Local secretion of IL-12 augments the therapeutic impact of dendritic cell-tumor cell fusion vaccination. J. Surg. Res. 2013, pii: S0022-4804(13)00671-9.
18. Thammavongsa V., Missiakas D.M., Schneewind O. Staphylococcus aureus degrades neutrophil extracellular traps to promote immune cell death. Science. 2013, 342 (6160): 863-866.
Поступила 27.02.14
Контактная информация: Ахматов Э. А.,
105064, Москва, М. Казенный пер., 5А, р.т. (495)917-49-00
