CC BY
34
УДК 639.386.1:57.085.2
Влияние слизи кожи рыб на показатели гемостаза некоторых видов животных in vitro в сравнении с коллагеном
Фомина Любовь Леонидовна, кандидат биологических наук, доцент e-mail: fomina-luba@mail.ru
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина»
Ошуркова Юлия Леонидовна, кандидат биологических наук, доцент e-mail: yul.oshurkova@yandex.ru
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина»
Кулакова Татьяна Сергеевна, кандидат сельскохозяйственных наук, доцент e-mail: dofas@yandex.ru
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина»
Жунина Ольга Александровна, кандидат биологических наук, зав. отделом биотехнологических и доклинических исследований e-mail: olga_yarova@bk.ru
Открытое акционерное общество «Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения»
Вайцель Анастасия Эдуардовна, аспирант факультета ветеринарной медицины и биотехнологий
e-mail: nastya08066@mail.ru
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина»
Аннотация. В современной фармакологии ведется активный поиск новых источников природных пептидов и разрабатываются новые методы их синтеза для дальнейшего введения белковых препаратов в производство, поэтому актуальной является работа по выявлению природных источников биологически активных пептидов, каковым является слизь кожи рыб. С целью оценки влияние слизи кожи рыб на показатели гемостаза животных in vitro в сравнении с коллагеном была исследована гемостатическая активность слизи кожи карпов (Cyprinus carpio carpio Linnaeus, 1758) и африканских клариевых сомов ((Clarias gariepinus Burchell, 1822) на кровь коровы и собаки. Установлено, что наиболее активна в гемостатическом
отношении оказалась слизь африканского клариевого сома. В работе использовались гематологические и статистические методы исследования.
Ключевые слова: рыбы, слизь, кровь, гемостаз, агрегация тромбоцитов, коллаген.
Система гемостаза представляет значительный интерес для ветеринарной медицины, так как призвана обеспечить целостность внутренней среды организма и остановку кровотечения в случае повреждения сосудистой стенки, ее проницаемость и резистентность, а также поддержание жидкого состояния крови в сосудистом русле. Различают два основных механизма остановки кровотечения при повреждении сосудов, которые в зависимости от условий могут функционировать одновременно, с преобладанием одного из механизмов - это сосудисто-тромбоци-тарный и коагуляционный гемостаз [1, 2, 3].
У разных видов животных активация данных механизмов происходит неодинаково и зависит от количества и активности тромбоцитов, прокоагулянтов, антикоагулянтов, фибринолитических и множества других факторов [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10]. Возможно, с этим аспектом связана различная эффективность гемостатиче-ских препаратов, применяемых в ветеринарной хирургической практике, где для остановки кровотечений чаще всего применяются препараты на основе биологических тканей [11, 12, 13].
В 1958 году советские ученые Б. А. Кудряшов, Г. В. Андреенко, П. Д. Улитина нашли, что слизь с кожи трески, даже разведенная в 10 раз, способна свертывать оксалатную плазму в течение 12-13 сек, и предположили, что она является богатым источником протромбокиназы [14].
Анализируя результаты наших предыдущих исследований гемостатической активности слизи кожи карпов (Cyprinus carpió carpió Linnaeus,1758), мы установили, что цельная кровь овец под ее воздействием сворачивается быстрее, а также получили достоверно более высокий индекс и скорость агрегации при использовании слизи кожи карпов как агониста тромбоцитов овец, чем при использовании АДФ, сильнейшего индуктора агрегации тромбоцитов млекопитающих. Одновременно с этим образующиеся агрегаты обладали той же устойчивостью, что и образующиеся под действием АДФ, что указывало на оптимальную структуру сгустка [15, 16, 17].
Оценке гемостатической активности слизи кожи рыб у других видов животных (травоядных и хищных) в сравнении с коллагеном (агонистом тромбоцитов) и влиянию на нее различных факторов (температуры, разведения) посвящен данный этап работы.
Цель работы: оценить влияние слизи кожи рыб на показатели гемостаза некоторых видов животных in vitro в сравнении с коллагеном.
Материалы и методы исследования. Для исследования использовали слизь с кожи 12 экземпляров карпов (Cyprinus carpió carpió Linnaeus, 1758) и 9 экземпляров африканских клариевых сомов ((Clarias gariepinus Burchell, 1822). Рыбы содержались в аквариумах и УЗВ, расположенных в АкваБиоЦентре ФГБОУ ВО Вологодская ГМХА. Слизь получали по методике Шультца и др. (Schultz et al., 2007), где слизь собиралась в полиэстеровые губки, нарезанные на кусочки 2х2х1 см. Влияние слизи на цельную кровь млекопитающих определяли следующим способом: на одно предметное стекло наносили автоматическим дозатором каплю на-тивной крови животных (коровы, собаки) в объеме 100 мкл, на второе предметное
стекло - 50 мкл крови и 50 мкл слизи кожи рыб в свежем виде, после заморозки при температуре -20°С и разведенную фосфатно-солевым буфером, рН = 7.4 в соотношении 1:1. Каждые 30 сек определяли, при осторожном наклоне стекла, образование плотного сгустка. Точность метода оценивалась на основании результатов повторных определений гемостатической активности слизи с одной и той же порцией крови донора [19, 20].
Для оценки агрегационной активности слизи кожи рыб кровь собаки и коровы забирали из яремной вены в пробирки с цитратом натрия 3,8 % в соотношении 9:1, центрифугировали 10 мин при 1500 об./мин для получения обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП). Часть плазмы отбирали, а оставшуюся центрифугировали при 3000 об./мин в течение 20-ти мин, получая бедную тромбоцитами плазму. Для оценки агонистической способности слизи кожи рыб применяли количественный метод, основанный на регистрации изменений светопропускания богатой тромбоцитами плазмы с применением ФЭК по Howard M.A.
Определяли суммирующий индекс агрегации тромбоцитов (СИАТ), скорость агрегации (СА) и индекс дезагрегации тромбоцитов (ИДТ) коровы и собаки со све-жеполученной слизью кожи рыб в сравнении с коллагеном - сильнейшим активатором агрегации тромбоцитов млекопитающих. Точность метода оценивалась на основании результатов повторных определений агрегационной активности слизи с одной и той же порцией плазмы донора (не менее 9-ти определений) [15, 18, 19, 20].
Результаты обрабатывали с помощью программного пакета Microsoft Excel. Сравнение данных проводилось с применением U-критерия Манна-Уитни для независимых групп.
Результаты исследования. Качественный анализ слизи кожи рыб разных видов (севрюги (Acipenser stellatus Pallas, 1771), белуги (Huso huso Linnaeus, 1758), карпа (Cyprinus carpio carpio Linnaeus, 1758), выращенных в промышленных условиях в рыбоводческом хозяйстве ООО РТФ «Диана» Кадуйского района Вологодской области и африканского клариевого сома (Clarias gariepinus Burchell, 1822), выращенного в ООО «Аквакультура», Череповецкого района, Вологодской области) дот-блот иммуноанализом показал наличие в ней таких белков как протромбопластин и тромбопластин - инициаторов свертывания крови, а электрофорез подтвердил наличие в слизи белков с массой, соответствующей этим белкам. Иммуноблоттинг образцов слизи кожи рыб показал, что большая концентрация тромбопластина (TF) содержится в слизи севрюги, а протромбопластина (F11) больше в слизи африканского клариевого сома, что делает данные виды рыб более предпочтительными продуцентами слизи как возможной основы гемостатического препарата [21].
Слизь кожи африканского клариевого сома (Clarias gariepinus Burchell, 1822) оказалась более активна и в своем гемостатическом действии на цельную кровь коровы и собаки, чем слизь кожи карпа (табл. 1).
Анализируя данные таблицы, можно отметить присутствие гемостатической активности слизи кожи рыб разных видов, сопоставимой с коллагеном - сильнейшим активатором агрегации тромбоцитов млекопитающих. Наиболее активна в гемостатическом отношении оказалась слизь африканского клариевого сома (Clarias gariepinus Burchell, 1822). Кровь коров и собак сворачивалась при воздействии слизи кожи сомов - на 62 и 76% быстрее нативной соответственно (рис. 1).
Можно отметить, что заморозка слизи и разведение буферным раствором не повлияли на ее гемостатическую способность, а в некоторых случаях (слизь кожи
карпов после заморозки и слизь кожи сомов свежая +1xPBS (фосфатно-солевой буфер, рН = 7.4)) свертывающая способность ее под влиянием этих факторов усилилась.
Таблица 1 - Скорость свертывания цельной крови коров и собак под воздействием слизи кожи рыб разных видов
Количество повторов Время образования сгустка, мин
Нативная кровь Кровь коровы Кровь собаки
12 16,6±1,64 5,39±1,42/*
Нативная кровь + коллаген 12 10,4±0,96 2±0,11*
Нативная кровь+слизь кожи карпов свежая 12 16,28±1,42 6,58±0,36/*
Нативная кровь+слизь кожи карпов после заморозки 12 12,4±1,4 2,4±0,23*
Нативная кровь+слизь кожи карпов свежая +1хРВБ (фосфатно-солевой буфер, рН = 7.4) 12 16,2±1,25 2,3±0,17*
Нативная кровь+слизь кожи сомов 9 6,32±0,41*/* 1,28±0,14*/*
Нативная кровь+слизь кожи сомов после заморозки 9 6,2±0,41*/* 4,47±0,51/*
Нативная кровь+слизь кожи сомов свежая +1хРВБ (фосфатно-солевой буфер, рН = 7.4) 9 6,56±0,56*/* 1,27±0,23*/*
* Различия с нативной кровью достоверны, (р<0,05) /* Различия с коллагеном достоверны, (р<0,05)
200
1 2 3 4 5 6 7
ш Время образования сгустка крови коровы Время образования сгустка крови собаки Нативная кровьсобакии коровы
Рисунок 1. Относительное время свертывания цельной крови коровы и собаки при воздействии слизи кожи сомов и карпов (1 - Нативная кровь + коллаген; 2 - Нативная кровь+слизь кожи карпов свежая; 3 - Нативная кровь+слизь кожи карпов после заморозки; 4 - Нативная кровь+слизь кожи карпов свежая +1хРВБ (фосфатно-солевой буфер, рН = 7.4); 5 - Нативная кровь+слизь кожи сомов; 6 - Нативная кровь+слизь кожи сомов после заморозки; 7 - Нативная кровь+слизь кожи сомов свежая +1хРВБ (фосфатно-солевой буфер, рН = 7.4))
При изучении действия слизи на агрегационную активность тромбоцитов коровы и собаки, были получены результаты, представленные в таблице 2.
Таблица 2 - Показатели агрегации тромбоцитов животных под влиянием слизи кожи рыб разных видов
Кровь коровы Кровь собаки
Показатели Слизь кожи карпов (П = 12) Слизь кожи сомов (П=9) Коллаген (П=9) Слизь кожи карпов (П = 12) Слизь кожи сомов (П=9) Коллаген (П=9)
СИАТ % 5,47±0,42 6,04±0,60 6,67±0,07 0,64±0,11* 12,77±0,23* 4,30±0,07
СА мин 0,001±0,0003* 0,018±0,003 0,019±0,001 0,116±0,0003* 0,024±0,002* 0,008±0,001
ИДТ % 2,82±0,42* 1,53±0,22* 6,21±0,32 0,22±0,42 0,61±0,22* 0,29±0,32
* Различия с коллагеном достоверны, (р<0,05)
Из полученных данных следует, что на агрегацию тромбоцитов коровы слизь кожи рыб действовала с той же активностью, что и коллаген - СИАТ не имел достоверных отличий, но скорость агрегации была выше при воздействии слизи кожи карпов. Тромбоциты собаки свежеполученная слизь кожи сомов активировала намного сильнее, чем коллаген и слизь кожи карпов СИАТ - на 66,3 и 95% выше соответственно, что согласуется с данными, полученными при определении скорости свертывания цельной крови собаки под воздействием слизи кожи рыб разных видов.
Оптимальную структуру тромбоцитарного сгустка характеризует индекс дезагрегации тромбоцитов, который был значительно ниже для крови коровы при использовании в качестве агонистов слизи кожи рыб, чем коллагена, что указывает на большую устойчивость образующихся агрегатов (рис. 2).
Образующиеся под воздействием слизи кожи сомов агрегаты тромбоцитов собаки были менее устойчивы, чем при использовании коллагена и слизи кожи карпов, но, в тоже время, намного более устойчивы, чем тромбоцитарные сгустки, образующиеся у коровы.
Заключение. Отличия плазменно-коагуляционного гемостаза рыб от млекопитающих могут объясняться тем, что физиологическую роль вторичного гемостаза у рыб может брать на себя выделяемая ими кожная слизь, в которой содержится очень большое количество фактора свертывания тканевого тромбопластина, тем самым выполняя роль гемостатика [14, 22].
Анализируя результаты исследования гемостатической активности слизи кожи рыб, мы установили, что как цельная кровь млекопитающих, так и богатая тромбоцитами плазма под ее воздействием сворачиваются быстрее, чем нативная, и результаты оказались сопоставимы с коллагеном - сильнейшим активатором агрегации тромбоцитов млекопитающих. Наиболее активна в гемостатическом отно-
шении оказалась слизь африканского клариевого сома (Clarias gariepinus Burchell, 1822), что можно объяснить отсутствием у данного вида рыб такого фактора защиты, как чешуя.
% идт, %
■
Щ _
карп свеж сом свеж коллаген корова карп свеж сом свеж коллаген собака
Рисунок 2. Индекс дезагрегации тромбоцитов коровы и собаки при воздействии слизи кожи рыб и коллагена
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ и Правительства Вологодской области в рамках научного проекта № 18-44-350002.
Список литературы:
1. Березина, Д.И. Сравнительно-физиологические аспекты системы гемостаза рыб [Текст] / Д.И. Березина, А.Э. Вайцель, Л.Л Фомина // Эволюционные и экологические аспекты изучения живой материи: сб. трудов Всероссийской научной конференции. - Череповецкий государственный университет (Череповец), 2017. - С. 38-43.
2. Баруздина, Е.С. Особенности функционирования системы гемостаза у здоровых собак в возрасте от двух до шести месяцев [Текст] / Е.С. Баруздина, Ю. Л. Ошуркова // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2016. -№ 3 (31). - С. 8-11.
3. Jagadeeswaran Р., Gregory K., Day M., Cykowski B. Thattaliyath Zebrafish: a genetic model for hemostasis and thrombosis. Thrombosis and Haemostasis., 2005, no 3 (1), рр. 46-53.
4. Баруздина, Е.С. Гендерный аспект в динамике послеоперационных изменений параметров системы гемостаза у здоровых собак [Текст] / Е.С. Баруздина, Ю.Л. Ошуркова // Ветеринарная патология. - 2016. - № 1 (55). - С. 62-69.
5. Фомина, Л.Л. Влияние половых гормонов на функционирование системы гемостаза у коров: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Л.Л. Фомина. - Ярославль, 2009. - 24 с.
6. Tavares-Dias M., Oliveira S.R. A review of the blood coagulation system of fish. Revista Brasileira de Biociências, 2009, no 2.
7. Показатели функциональной АДФ-реактивности тромбоцитов у разных видов животных [Текст] / Ю.Л. Ошуркова, Л.Л Фомина, М.В. Механикова, Е.С. Ткачева, Л.С. Кострякова // Молочнохозяйственный вестник. - 2016. - №2 (22). - С.52-59.
8. Фомина, Л.Л. Определение активности плазменно-коагуляционного звена системы гемостаза рыб клоттинговыми методами с использованием коагу-лометра [Текст] /Л.Л. Фомина, Т.С. Кулакова, Д.И. Березина // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2017. - Т. 35. № 3. - С. 54-58.
9. Тромбоэластографическая оценка коагуляционного потенциала крови у лошадей[Текст] / Ю.Л. Ошуркова, О.А. Мулллагалиева, Е.А. Воробьева, П.Н. Богданова, Е.И. Преображенская // Молочнохозяйственный вестник, 2019. - № 1 (33). - С. 40-48.
10. Ошуркова, Ю.Л. Анализ состояния системы гемостаза у коров в разные периоды лактации [Текст] / Ю.Л. Ошуркова, Е.Н. Соболева, И.А. Власов // Вестник ветеринарии. - 2012. - № 4 (б3) - С. 91-93
11. Биологический клей «BioGlue®» [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.mst.ru/products/biomaterials/bioglue/.
12. Кожный клей «Дермабонд» (Dermabond) // Легаси МЕД шовный материал и медицинское оборудование [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.legmed.ru/catalogue/?section = 374
13. Ксенофонтов, А.М. Экспериментальный метод применения биологического клея на основе плавательного пузыря осетра при операциях на печени [Текст] / А.М. Ксенофонтов, П.В. Никифоров, А.П. Федоров // Здоровье и образование в XXI веке. - 2012. - Т. 14. - №1. - С. 223-224.
14. Кудряшов, Б.А. и др. Тромботропин и протромбокиназа морских рыб [Текст] / Б. А. Кудряшов, Г. В. Андреенко, П. Д. Улитина // Докл. высш. школы. Биол. науки. - 1958. - №3.
15. Оценка гемостатической активности слизи кожи рыб in vitro [Текст] / Л.Л. Фомина, Т.С. Кулакова, О.А. Жунина, Ю.Л. Ошуркова, А.Е. Вайцель // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2018. - №4(40). - С. 7-11.
16. Fomina L.L., Kulakova T.S., Zhunina O.A., Oshurkova Ju.L., Vaytsel A.E. Hemostatic activity of the мucus of the skin of fish. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. November-December, 2018, RJPBCS. 9(6), Page No. 1130-1136.
17. Пат. 2652444 Рос. Федерация, МПК G01N 33/48. Способ применения слизи кожи рыб для активации агрегации тромбоцитов и свертывания крови IN VITRO [Текст] / Л.Л. Фомина, Д.И. Суров, А.Э. Вайцель, Д.И. Березина; заявитель и патентообладатель федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина» - № 2017111942/07; заявл. 07.04.2017; опубл. 26.04.2018, Бюл. № 12.
18. Вайцель, А.Э. Гемостатические свойства слизи рыб [Текст] / А.Э. Вайцель, Д.И. Березина, Л.Л. Фомина // Молодые исследователи агропромышленного и лесного комплексов - регионам. - Т. 3. Биологические науки. - 2016. - С. 158-160
19. Вайцель, А.Э. Применение слизи кожи рыб для активации агрегации тромбоцитов in vitro [Электронный ресурс] / А.Э. Вайцель, Л.Л. Фомина // Молодые исследователи агропромышленного и лесного комплексов - ре-
гионам. Т. 3. Биологические науки. - 2017. - С. 18-20. - Режим доступа: https://molochnoe.ru/resources/files/nauka/sborniki/sbornik_3.2_2017. pdf#l.
20. Вайцель, А.Э. Зависимость стресс-реакций и гемостатической активности слизи кожи карпов [Электронный ресурс] / А.Э. Вайцель // Наука и молодежь: новые идеи и решения в АПК. V Всероссийский Фестиваль науки студентов, аспирантов и молодых ученых посвященный 100-летию высшего аграрного образования в Ивановской области. Т. II: сборник материалов Всероссийских научно-методических конференций с международным участием. - Иваново: ФГБОУ ВО Ивановская ГСХА, 2018. - С. 18-22. - Режим доступа: http://ivgsha.ru/about_the_university/library/about/фестиваль науки 2018_том 2 редакция.pdf#1.
21. Фомина, Л.Л. Выделение и изучение активных компонентов слизи кожи рыб как основы гемостатического препарата [Текст]: отчет о НИР № 87818 от 09.07.2018 (РФФИ) / Л.Л. Фомина. 43 с.
22. Фомина, Л.Л. Функциональное состояние системы гемостаза рыб [Текст] / Л.Л Фомина, А.Э. Вайцель, Д.И. Березина // Молочнохозяйственный вестник. - 2015. - №2 (18). - С. 41-45.
References:
1. Berezina D.I. Comparative-physiological aspects of the fish hemostasis system. Sbornik trudov Vserossiyskoy nauchnoy konferentsii "Evolyutsionnyye i ekologicheskiye aspekty izucheniya zhivoy materii" [Proc. of the all-Russian scientific conference "Evolutionary and ecological aspects of studying living matter"]. Cherepovets, 2017, pp. 38-43 (In Russian).
2. Baruzdina E.S. Features of hemostasis system functioning in healthy dogs aged from two to six months. Aktual'nyye voprosy veterinarnoy biologii [Topical issues of veterinary biology], 2016, no. 3 (31), pp. 8-11 (In Russian).
3. Jagadeeswaran P. e.a. Zebrafish: a genetic model for hemostasis and thrombosis. Thrombosis and Haemostasis, 2005, no. 3 (1), pp. 46-53.
4. Baruzdina E.S. Gender aspect in the dynamics of postoperative changes in the parameters of the hemostasis system in healthy dogs. Veterinarnaya patologiya [Veterinary pathology], 2016, no. 1 (55), pp. 62-69 (In Russian).
5. Fomina L.L. Vliyaniye polovykh gormonov na funktsionirovaniye sistemy gemostaza u korov. Avtoref. Kand. Diss. [Influence of sex hormones on the functioning of the hemostatic system in cows. Cand. Diss. Abstr.]. Yaroslavl, 2009, 24 p.
6. Tavares-Dias M.A., e. a. Review of the blood coagulation system of fish. Revista Brasileira de Biociencias, v.7, 2009, no. 2, pp.205-224.
7. Oshurkova Y.L., e. a. Indicators of functional ADP-reactivity of platelets in different animal species. Molochnokhozyaystvennyy vestnik [Dairy Bulletin], 2016, no. 2 (22), pp. 52-59 (In Russian).
8. Fomina L.L., e. a. Determining the activity of the plasma-coagulation link in the fish hemostasis system with clotting methods using a coagulometer. Aktual'nyye voprosy veterinarnoy biologii [Topical issues of veterinary biology], 2017, vol. 35, no. 3, pp. 54-58 (In Russian).
9. Oshurkova Y.L., e. a. Thromboelastographic assessment of blood coagulation potential in horses. Molochnokhozyaystvennyy vestnik [Dairy Bulletin], 2019, no. 1 (33), pp. 40-48 (In Russian).
10. Oshurkova Y.L., e. a. Analysis of the state of the hemostasis system in cows in different periods of lactation. Vestnik veterinarii [Bulletin of veterinary medicine], 2012, no. 4 (63), pp. 91-93 (In Russian).
11. Biological glue "BioGlue®". Available at: http://www.mst.ru/products/ biomaterials/bioglue/.
12. Skin glue "Dermabond". Available at: http://www.legmed.ru/ catalogue/?section = 374
13. Ksenofontov A.M., Nikiforov P.V., Fedorov A.P. Experimental method of applying biological glue based on the swimming bladder of sturgeon in liver operations. Zdorov'ye i obrazovaniye v XXI veke [Health and education in the XXI century], 2012, vol. 14, no. 1, pp. 223-224 (In Russian).
14. Kudryashov B.A., e. a. Thrombotropin and prothrombokinase of marine fish. «Dokl. vyssh. shkoly», biol. nauki ["Tertiary education reports", biological sciences], 1958, no.3 (In Russian).
15. Fomina L.L., e. a. Assessment of hemostatic activity of fish skin mucus in vitro. Aktual'nyye voprosy veterinarnoy biologii [Topical issues of veterinary biology], 2018, no. 4(40), pp. 7-11 (In Russian).
16. Fomina L.L., e. a. Hemostatic activity of the fish skin Mucus. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences, 2018, no. 9(6), pp. 1130-1136.
17. Fomina L.L., e. a. Sposob primeneniya slizi kozhi ryb dlya aktivatsii agregatsii trombotsitov i svertyvaniya krovi IN VITRO [Method of applying fish skin mucus for activation of platelet aggregation and blood clotting IN VITRO]. Patent RF, no. 2017111942/07, 2018.
18. Vaytsel' A.E. Hemostatic properties of fish mucus. Molodyye issledovateli agropromyshlennogo i lesnogo kompleksov - regionam. Tom. 3. Biologicheskiye nauki [Young researchers of agro-industrial and forest complexes - to regions. Vol. 3. Biological sciences], 2016, pp. 158-160 (In Russian).
19. Vaytsel' A.E., Fomina L.L. Applying fish skin mucus to activate platelet aggregation in vitro. Molodyye issledovateli agropromyshlennogo i lesnogo kompleksov - regionam. Tom. 3. Biologicheskiye nauki [Young researchers of agro-industrial and forest complexes - to regions. Vol. 3. Biological sciences], 2017, pp. 18-20 (In Russian).
20. Vaytsel' A.E. Dependence of stress reactions and hemostatic activity of carp skin mucus. Nauka i molodezh': novyye idei i resheniya v APK.V Vserossiyskiy Festival' nauki studentov, aspirantov i molodykh uchenykh posvyashchennyy 100-letiyu vysshego agrarnogo obrazovaniya v Ivanovskoy oblasti. Tom II: sbornik materialov Vserossiyskikh nauchno-metodicheskikh konferentsiy s mezhdunarodnym uchastiyem [Science and youth: new ideas and solutions in the agro-industrial complex. V all-Russian science festival of students, postgraduates and young scientists dedicated to the 100th anniversary of higher agricultural education in the Ivanovo region. Volume II: collection of materials of all-Russian scientific and methodological conferences with international participation], Ivanovo, 2018, pp. 18-22. (In Russian).
21. Fomina L.L. Vydeleniye i izucheniye aktivnykh komponentov slizi kozhi ryb kak osnovy gemostaticheskogo preparata. Otchet o NIR № 878-18 ot 09.07.2018 (RFFI) [Isolating and studying the active components of fish skin mucus as the basis of a hemostatic drug. Research Report no. 878-18 of 09.07.2018 (RFBR)], 43 p.
22. Fomina L.L., e. a. Functional state of the fish hemostasis system. Molochnokhozyaystvennyy vestnik [Dairy Bulletin], 2015, no. 2 (18), pp. 41-45 (In Russian).
The effect of fish skin mucus on hemostasis indicators of some animal species in vitro in comparison with collagen
Fomina Lyubov' Leonidovna, Candidate of Science (Biology), associate professor e-mail: fomina-luba@mail.ru
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "The Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy."
Oshurkova Yulia Leonidovna, Candidate of Science (Biology), associate professor e-mail: yul.oshurkova@yandex.ru
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "The Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy."
Kulakova Tatyana Sergeyevna, Candidate of Science (Agriculture), associate professor
e-mail: dofas@yandex.ru.
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "The Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy."
Zhunina Olga Aleksandrovna, Candidate of Science (Biology), Head of Biotechnology and Preclinical Research Department e-mail: olga_yarova@bk.ru
Joint Stock Company «Russian Research Center for Molecular Diagnostics and Therapy»
Vaytsel Anastasiya Eduardovna, graduate student, the Faculty of Veterinary Medicine and Biotechnology
e-mail: nastya08066@mail.ru
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "The Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy."
Abstract: Modern pharmacology is actively searching for new sources of natural peptides and developing new methods of their synthesis for further introduction of protein preparations into production, so it is necessary to identify the natural sources of biologically active peptides, such as fish skin mucus. In order to assess the effect of fish skin mucus on animal hemostasis indicators in vitro in comparison with collagen, the hemostatic activity of skin mucus of carp (Cyprinus carpio carpio Linnaeus, 1758) and African clarias catfish (Clarias gariepinus Burchell, 1822) on the blood of cows and dogs was studied. It was found that the most active in the hemostatic relation was the mucus of the African Clary catfish. Hematological and statistical methods of research were used in this work.
Keywords: fish, mucus blood, hemostasis, platelet aggregation, collagen
