CC BY
60
ЛИТЕРАТУРА
1. Аковбян В.А. Урогенитальная хламидийная инфекция: 25 лет спустя. // Гинекология. — 2004. — Т.6. №2. — С.14-22.
2. Алленов С.Н., Иванов О.Л., Ломоносов К.М и др. Иммунологические аспекты применения полиоксидония в комплексной терапии осложненного урогенитального хламидио-за. // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 2002 — №2. С.58-61.
3. Баринов А.Н., Плавинский С.Л. Использование модуляторов иммунного ответа при урогенитальном хламидиозе. Математическое моделирование эпидемического процесса заболеваемости урогенитальным хламидиозом. // Вестник дерматологии и венерологии. — 2010. — №2. — С.96-100.
4. Глазкова Л.К. Практические аспекты персистентной хламидийной инфекции // Венеролог. 2005. — №2. — С. 4-12.
5. Гуревич Г.К. Современная терапия хламидиоза// Акушерство и гинекология. — 2002. — №4. — С. 18-19.
6. Клинические рекомендации. / Под ред. А.А. Кубано-вой. — М.: Дэкс-Пресс, 2012. — 112 с.
7. Мавров Г.И., Чинов Г.П. Роль цитокинов в патогенезе хламидиоза // Украинский журнал дерматологии, венерологии и косметологии — 2004. — № 1. — С. 53-59.
8. Максикова Т.М., Калягин А.Н., Пивень Д.В. Эффективность применения дигидрокверцетина у лиц, занимающихся в группах здоровья // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2011. — №6. — С.127-130.
9. Молочков В.А. Урогенитальныий хламидиоз. — М.: Бином, 2006. — 208 с.
10. Молочков В.А., Кисина В.И., Ширшова Е.В. Современные подходы к лечению урогенитального хламидиоза // Врач. — 2006. — №2. — C.11-15.
11. Прилепская В.Н., Быковская О.В. Уреаплазменная инфекция: клиника, диагностика, лечение // Патология шейки матки. Генитальные инфекции. 2006. — №1. — С. 46-52.
12. Регистр лекарственных средств России: Энциклопедия лекарств. / Под ред. Г.Л. Вышковского. — 16 вып. — М.: РЛС — 2008, 2007. — 1456 с.
13. Рюмин Д.В. Персистирующая хламидийная инфекция // Вестник последипломного медицинского образования. — 2000. — №2. — С. 8-15.
14. Сидорова И.С., Алешкин В.А, Афафнасьев С.С. Эффективность комплексной терапии урогенитального хлами-диоза с применением иммунокорригирующих препаратов // Акушерство и гинекология. — 2002. — №4. — С. 38-41.
15. Скрипкин Ю.К., Пашинян М.Г. Вестник дерматологии и венерологии 2000. — №2. С. 49-50.
16. Labro M.T., Bavin-Chevaye C. Synergistic interaction of Josomycin with human neutrophil bacterial function in vitro // J. Antimicrob. Chemother. — 1989. — Vol 24. — P. 731-740.
17. Mozikava K., Watabe H., Araake M., et al. Modulatory effect of antibiotics on cytokine production by human monocytes in vitro // Antimicrob. Agents and Chemoter. — 1996. — Vol 40 (6). — P. 1366-1370.
Информация об авторах: 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, ИГМУ,
Малова Ирина Олеговна — д.м.н., профессор, заведующая кафедрой;
Сидорова Ирина Александровна — аспирант. Шеломенцева Наталья Николаевна — врач-дерматовенеролог.
© ИШУТИНА Н.А. — 2013
УДК 577.175.823:577.115.3:618.3:618.523
ВЛИЯНИЕ СЕРОТОНИНА И ЦИТОКИНОВ НА ЖИРНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ
БЕРЕМЕННЫХ С ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Наталия Александровна Ишутина (Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН, директор — член-кор. РАМН, д.м.н., проф. В.П. Колосов, лаборатория механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при неспецифических заболеваниях лёгких, зав. — акад. РАМН, д.м.н., проф. М.Т. Луценко)
Резюме. Изучено влияние серотонина и цитокинов на жирнокислотный состав периферической крови 30 беременных, перенесших в III триместре гестации обострение герпес-вирусной инфекции (титр антител IgG к вирусу простого герпеса 1 типа 1:12800). Установлено, что в основе механизмов нарушения жирнокислотного обмена у беременных при обострении герпесвирусной инфекции лежит увеличение антигенной нагрузки вируса простого герпеса, усиливающего в 2,6 раз синтез серотонина, определяющего формирование провоспалительного ответа и гиперпродукцию макрофагами цитотоксических количеств фактора некроза опухоли a (TNFa) в 3,8 раз, интерлейкина-1 (IL-1) в 3,6 раз, интерферона у (INFy) в 3,5 раз. Накопление данных патогенных факторов инициирует активность процессов перекисного окисления липидов и определяет дисбаланс в составе жирных кислот.
Ключевые слова: беременность, герпесвирусная инфекция, серотонин, цитокины, жирные кислоты.
INFLUENCE OF THE SEROTONIN AND CYTOKINES ON FAT-ACID COMPOSITION OF THE PERIPHERIC BLOOD IN PREGNANT WOMEN WITH THE HERPES-VIRUS INFECTION CONTAMINATION
N.A. Ishutina
(Far Eastern Scientific Center of Physiology and Respiration Pathology of Siberian Branch of RAMS)
Summary. Influence of serotonin and cytokines on fat acid composition of peripheral blood of 30 pregnant women, endured an exacerbation of herpes-virus infection in the III trimester (antiserum capacity IgG to virus of simple herpes 1 such as 1:12800) has been investigated. It has been determined, that the basis of the mechanisms of disturbance of fat-acid exchange in pregnant women in exacerbation of herpes-virus infection is the increase in antigenic load of virus of the simple herpes intensifying 2,6 times synthesis of serotonin, the proinflammatory response determining formation and hyperproduction by macrophages of cytotoxic quantities of tumor necrosis factors a (TNFa) 3,8 times, interleukin-1 (IL-1) 3,6 times, interferon у (INFy) 3,5 times. Accumulation of the given pathogenic factors initiates activity of processes of peroxide oxidation of lipids and determines disbalance in composition of fatty acids.
Key words: pregnancy, herpes viral infection, serotonin, cytokines, fatty acids.
В настоящее время установлено, что взаимодействие ственный характер. Как антигенный раздражитель, ви-вирусов с иммунной системой человека, имеет двой- рус стимулирует развитие иммунных реакций, как вну-
триклеточный паразит, подавляет функциональную активность лимфоидных клеток [2].
Вирус простого герпеса (ВПГ) относится к вирусам, способным непосредственно поражать клетки иммунной системы, репродуцироваться в них в течение длительного времени, что обусловливает их гибель или снижение функциональной активности с формированием вторичного иммунодефицитного состояния [2]. В результате антигенной регуляции у беременных с герпес-вирусной инфекцией (ГВИ) активируется синтез сенсорных нейрогормонов, главным образом, серотонина на протяжении всего периода гестации, который оказывает влияние на функциональную активность макрофагов, увеличивая продукцию ими провоспалительных цитоки-нов, а также инициирует пролиферацию Т-клеток и продукцию тиоспецифических антител [1]. Следовательно, взаимообусловленное влияние ВПГ-1 и серотонина на иммунные реакции организма женщин в период беременности является патогенетически обусловленным фактором, способным изменять характер внутри- и межклеточных обменных процессов в системе «мать-плацента-плод», в том числе липидный метаболизм.
Цель работы: Оценить регуляторное влияние серотонина и провоспалительных цитокинов (TNFa, IL-
1, INFy) на жирно-кислотный состав периферической крови беременных с обострением ГВИ (титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800) в III триместре гестации.
Материалы и методы
Основную группу исследования составили 30 беременных с обострением ГВИ (титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800) в III триместре, которые были пациентами отделения акушерского патологии беременности клиники ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН г. Благовещенска. Контрольную группу составили 30 практически здоровых беременных на том же сроке гестации.
В периферической крови женщин иммунофер-ментным методом анализа оценивали содержание TNFa, используя наборы реактивов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург); IL-1 с использованием наборов ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск); INFy с помощью наборов реактивов ООО «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург). Уровень серотонина изучали по Л.Я. Прошиной [5].
Липиды экстрагировали по Фолчу [8]. Жирные кислоты (пальмитиновая — ПК, стеариновая — СК, олеиновая — ОК, линолевая — ЛК, a-линоленовая — ЛНК, арахидоновая — АК, эйкозапентаеновая — ЭПК, до-козагексаеновая — ДГК), входящие в состав липидов, определяли методом газожидкостной хроматографии. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2,5 по временам удерживания с использованием стандартов фирмы «Supelco» (USA). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных %) в общей сумме площадей пиков метилированых продуктов высших жирных кислот.
Титр антител к ВПГ-1 определяли по динамике антител IgG с помощью стандартных тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на микропланшетном ридере «Stat-Fax 2100» (USA). Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденные Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №226. Все участники исследований подписывали протоколы добровольного информированного согласия.
Статистическая обработка данных осуществлялась с
Таблица 1
Показатели серотонина, цитокинов, жирных кислот в периферической крови беременных с обострением ГВИ в III триместре (М±т)
Показатели Контроль Титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800 Р
Серотонин, мкмоль/л 0,53±0,07 1,40±0,05 <0,001
TNFa, пг/мл 25,0±1,02 98,40±2,8 <0,001
IL-1, пг/мл 25,80±2,20 93,30±3,40 <0,001
INFy, пг/мл 138,90±2,40 480,50±9,20 <0,001
Пальмитиновая(%) 25,9±0,76 29,0±0,82 <0,01
Стеариновая(%) 13,80±0,87 17,3±0,92 <0,01
Олеиновая(%) 16,87±0,24 13,44±0,26 <0,001
Линолевая(%) 7,10±0,22 8,30±0,17 <0,001
a-линоленовая (%) 0,62±0,06 0,40±0,04 <0,001
Арахидоновая(%) 4,20±0,15 6,31±0,22 <0,001
Эйкозапентаеновая(%) 1,40±0,07 0,96±0,06 <0,001
Докозагексаеновая (%) 8,90±0,21 6,34±0,16 <0,001
Примечание: p — значимость различий с контрольной группой.
помощью «Автоматизированной системы диспансеризации» (правообладатель «ДНЦ ФПД» СО РАМН, 2005 г., версия 2.5). Проверку нормальности распределения проводили по критерию Колмагорова-Смирнова. Анализируемые в статье данные имели нормальное распределение, поэтому проводился расчет средней арифметической (М) и ошибки средней арифметической (m). Проверку гипотезы о статистической значимости различных двух выборок проводили с помощью критерия t-Стьюдента и считали значимыми при p<0,05.
Результаты и обсуждение
Исследования, проведенные у беременных с обострением ГВИ (титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800) показали, что высокий уровень антигенной нагрузки способствовал выработки серотонина, что выражалось в увеличении его концентрации в периферической крови в 2,6 раз по сравнению с контролем (табл. 1). Обнаруженное повышение циркуляции моноамина усиливало действие антигена на лимфоидные органы, что изменяло иммунный ответ и приводило к гиперсекреции макрофагальными клетками TNFa, уровень которого в периферической крови женщин с обострением ГВИ (титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800) в III триместре повышался в 3,8 раз по сравнению с аналогичным показателем группы контроля (табл. 1).
Кроме того, у беременных с обострением ГВИ, наблюдалось усиление продукции макрофагами другого провоспалительного цитокина IL-1, участвующего совместно с TNFa в дифференцировке лимфоцитов в сторону формирования плазматических клеток. Так, при титре антител IgG к ВПГ-1 1:12800 в периферической крови беременных содержание IL-1 увеличивалось в 3,6 раз по сравнению с показателями группы контроля (табл. 1).
Следует отметить, что макрофагальные элементы при обострении ГВИ продуцируют большое количество INFy, содержание которого в периферической крови беременных III триместра увеличивалось в 3,5 раз по сравнению с аналогичным показателем группы контроля (табл. 1).
Следовательно, антигены ВПГ, циркулирующие в организме беременной, приводят к накоплению в периферической крови нейрогенных (серотонин) и иммунных провоспалительных (TNFa, IL-1, INFy) факторов, что обуславливает интенсификацию процессов пере-кисного окисления липидов (ПОЛ). Действительно в периферической крови беременных с обострением ГВИ наблюдалась активация процессов ПОЛ [3], определяющая дисбаланс в структуре основных классов жирных кислот (ЖК).
При изучении состава ЖК беременных с обостре-
нием ГВИ в III триместре было установлено увеличение концентрации ПК и СК в периферической крови на 11% и 20%, соответственно, по сравнению с контролем (табл. 1). Повышение концентрации данных ЖК в периферической крови беременных с обострением ГВИ могло быть положительным фактором, способствующим адекватной поставки высокоэнергетических продуктов в развивающийся плод. Однако чрезмерное накопление насыщенных ЖК в периферической крови приводит к увеличению микровязкости липидного бислоя мембран эритроцитов [3]. При повышении концентрации ПК увеличивается активность №,К-АТФазы и накапливается в цитозоле натрий, что является причиной задержки воды, набухания клеток [6], а, следовательно, развитием осложнений беременности.
Следует отметить, что во время обострения ГВИ в III триместре гестации содержание ОК в периферической крови беременных снижалось на 20%, по сравнению с контролем (табл. 1). Так как ОК является эндогенным биологическим антиоксидантом [4], то можно предположить, что ее обмен, характеризующийся снижением концентрации данного соединения в периферической крови беременных с ГВИ, является компенсаторным механизмом, направленным на уменьшение повреждающего действия токсических радикалов, образующихся в результате активации ПОЛ.
Одновременно в периферической крови беременных с обострением ГВИ отмечалось увеличение концентрации ш-6 ЛК на 20% и АК на 50%, по сравнению контролем (табл. 1). Избыточное накопление АК в периферической крови беременных с ГВИ является неблагоприятным фактором, в силу того, что из данного соединения образуются метаболиты (простагландины и лейкотриены 4 серии), обладающие провоспалительны-ми свойствами [7]. Поэтому изменение концентрации АК в периферической крови беременных с ГВИ может являться прогностическим фактором в оценке деструктивных изменений мембранного аппарата клеток, в том числе эритроцитов.
При изучении кислот ш-3 семейства были выявлены отклонения в спектре отдельных ЖК прямо противоположные соединениям ш-6 семейства. В периферической крови беременных с обострением ГВИ в III триместре
наблюдалось снижение концентрации ЛНК на 35%, ЭПК на 31% и ДГК на 29%, по сравнению с контролем (табл. 1). ЛНК является первичным субстратом синтеза кислот ш-3 семейства и способна метаболизироваться с помощью процессов десатурации в более длинноцепочечные ненасыщенные производные. Следовательно, выявленное снижение концентрации ЭПК в периферической крови беременных с ГВИ, возможно, явилось результатом недостаточного поступления или образования ЛНК, что, в свою очередь, может приводить к уменьшению продукции защитных эйкозаноидов, синтезируемых из ЭПК. При этом следует отметить, что ДГК трансформируется в эйкозаноиды медленнее, чем ЭПК. Однако она является важным компонентом мембран клеток центральной нервной системы, накапливаясь в синапсах и фоторецепторах [7]. Поэтому достаточное содержание в периферической крови и адекватное поступление ДКГ с пищей является необходимым условием благоприятного течения беременности и развития плода.
Динамику изменений содержания ЭПК и ДГК можно объяснить тем, что при ГВИ интенсифицируются процессы ПОЛ, и активные формы кислорода, образующиеся в ходе свободнорадикальных реакций, атакуя мембрану, разрушают ненасыщенные ЖК с наибольшим числом двойных связей, тем самым способствуя элиминации их из мембран.
Таким образом, при обострении ГВИ в III триместре гестации в периферической крови беременных увеличивается циркуляция серотонина и провоспалительных цитокинов (ТОТа, П,-1, ЮТу), оказывающих патогенное влияние на функциональные системы организма, способствуя активации процессов ПОЛ, и определяет дисбаланс в составе ЖК. При этом отмечается увеличение концентрации насыщенных ПК и СК, приводящее к повышению микровязкости липидного бислоя; снижение концентрации антиоксиданта ОК; дисбаланс соотношения ш-6/ш-3 ЖК с преобладанием предшественников провоспалительных эйкозаноидов семейства ш-6: ЛК и АК, недостаточным содержанием незаменимых ш-3 ЛНЛ, ЭПК, ДГК, что будет являться причиной нарушения трансплацентарной передачи высокоэнергетических продуктов в кровь плода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Андриевская И.А. Состояние обмена биогенноактивных веществ и систем их инактивации у беременных, инфицированных вирусом герпеса // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. — 2003. — Вып. 13. — С. 33-36.
2. Владимирова Н.Ю., Чижова Г.В. Изучение показателей иммунного статуса у женщин с синдромом потери плода в зависимости от вида латентной моноинфекции // Медицинская иммунология. — 2004. — Т. 6, №6. — С. 547-550.
3. Ишутина Н.А. Перекисное окисление липидов и микровязкость мембран эритроцитов у женщин с обострением герпес-вирусной инфекции // Дальневосточный медицинский журнал. — 2012. — №1. — С. 59-61.
4. Способ оценки микровязкости мембран эритроцитов путем вычисления коэффициента эксимеризации пирена Кэк у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре гестации, с учетом определения процентного содержания олеиновой кислоты в мембранах эритроцитов: патент 2467334 Рос. Федерация: МПК
G01N33/53 / Луценко М.Т., Ишутина Н.А.; заявитель Луценко М.Т., Ишутина Н.А.; патентообладатель ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН. — № 2010135468/15, заяв. 24.08.2010, — опуб. 20.11.2012, Бюл. 32. — 1 с.
5. Прошина Л.Я. Исследование гистамина и серотонина в одной пробе // Лабораторное дело. — 1981. — №2. — С. 90-93.
6. Титов В.Н., Арапбаева А.А., Кухарчук К.К. и др. Изменение содержания индивидуальных С16 и С18 жирных кислот в липидах сыворотки крови с гиперлипидемией при действии фибратов // Клиническая лабораторная диагностика. — 2006. — №4. — С. 3-7.
7. Шилина Н.М., Конь И.Я. Современные представления о физиологических и метаболических функциях поли-ненасыщенных жирных кислот // Вопросы детской диетологии. — 2004. — Т. 2, №6. — С. 25-30.
8. Folch J., Lees M., Sloane G. A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biol. Chem. — 1957. — Vol. 226. — P. 497-509.
Информация об авторе: Ишутина Наталия Александровна — старший научный сотрудник, к.б.н., 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22, ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН, лаборатория механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при НЗЛ,
тел./факс: (4162) 525957, e-mail: [email protected]
