CC BY
65
УДК 618.3-06:616.523:577.123
ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЗМА а-ЛИНОЛЕНОВОЙ КИСЛОТЫ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ, ОСЛОЖНЕННОЙ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
НА.Ишутина
Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН,
675000, Благовещенск, ул. Калинина, 22
РЕЗЮМЕ
В работе изучены особенности метаболизма а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных III триместра, гомогенате плацент рожениц с обострением герпес-вирусной инфекции в зависимости от титра антител IgG к вирусу простого герпеса 1 типа. Установлено, что у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в период гестации отмечается снижение концентрации а-линоленовой кислоты в плазме периферической крови на 35%, в мембранах эритроцитов на 42%. Параллельно этому в гомогенате плацент рожениц, перенесших в период беременности обострение герпес-вирусной инфекции, отмечается тенденция к снижению содержания а-линоленовой кислоты. Наиболее выраженные изменения наблюдались при титре антител IgG к вирусу простого герпеса 1 типа 1:12800. Выявленные нарушения метаболизма а-линоленовой кислоты в условиях герпес-вирусной инфекции могут способствовать недостаточной продукции защитных эй-козаноидов, синтезируемых из кислот семейства (0-3.
Ключевые слова: а-линоленовая кислота, беременность, герпес-вирусная инфекция.
SUMMARY
FEATURES OF a-LINOLENIC ACID METABOLISM IN PREGNANCY COMPLICATED BY HERPES-VIRUS
INFECTION
N.A.Ishutina
Far Eastern Scientific Center of Physiology> and Pathology> of Respiration of Siberian Branch RAMS, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation
The features of a-linolenic acid metabolism in the peripheral blood of pregnant women of III trimester and in the homogenate of placentas of parturient women with the exacerbation of herpes-virus infection depending on IgG antibodies titer to the virus of simple herpes of 1 type have been studied in this work. It was found out that pregnant women who suffered from the exacerbation of herpes-virus infection during gestation had a decrease of a-linolenic acid concentration in plasma of the peripheral blood by 35% and in membranes of erythrocytes by 42%. At the same time in the homogenate of placentas of the parturient women who suffered from the exacerbation of herpes-virus infection during pregnancy there was a decrease of a-
linolenic acid content. The most significant changes were observed at IgG antibodies titer to the virus of simple herpes of 1 type 1:12800. The revealed dys-bolism of a-linolenic acid in herpes-virus infection may lead to a poor production of protective eicosanoids synthesized from acids of co-3 family.
Key words: a-linolenic acid, pregnancy, herpes-virus infection.
Синтез насыщенных жирных кислот (ЖК) происходит в клетках печени, стенки кишечника, легочной и жировой ткани, в тканях мозга, почек, лактирующей молочной железе путем удлинения углеродной цепи. Затем, под действием ферментов-десатураз, может идти образование моноеновых (например, олеиновой 18:1, семейства ю-9) кислот. При этом организм человека не способен синтезировать линолевую (18:2 семейства ю-6) и а-линоленовую (18:3, семейства ю-3) кислоты, которые являются, вследствие этого, незаменимыми и должны поступать с пищей [3]. Однако, попадая в организм, незаменимые ЖК способны метаболизироваться с помощью процессов десатурации и элонгации в более длинноцепочечные и ненасыщенные производные. Все полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) - производные линолевой кислоты относятся к семейству ю-6, а производные а-линоленовой кислоты - к семейству ю-3. Процессы десатурации и элонгации идут с участием соответствующих ферментов - десатураз и элонгаз, общих для представителей различных семейств ЖК, вследствие чего они конкурируют за указанные ферменты, а соотношение в диете и организме ЖК определяет преимущественное образование производных того или иного семейства. Это обстоятельство является важным, поскольку оказывает влияние на проявление присущей ПНЖК регуляторной функции, которая связана с образованием их кислот с 20 углеродными атомами (эйкозеновых) биологически активных веществ - эйкозаноидов [5].
Так как исключительно важную роль в течение беременности и формировании практически всех органов и систем новорожденного играют ю-3 ПНЖК -эйкозапентаеновая и докозагексаеновая, обладающие противовоспалительными свойствами, первичным субстратом которых является а-линоленовая кислота [4], то от содержания последней в организме зависит выработка эйкозаноидов соответствующего действия. Поэтому цель исследования состояла в изучении содержания а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных III триместра и гомогенате плацент рожениц с герпес-вирусной инфекцией (ГВИ) в зависимости от титра антител IgG к вирусу простого гер-
песа 1 типа (ВПГ-1).
Материалы и методы исследования
В периферической крови (плазма и мембраны эритроцитов) 30 беременных III триместра и гомогенате плацент 30 рожениц проведено исследование содержания а-линоленовой кислоты в зависимости от титра антител к ВПГ-1 (1:3200и 1:12800). Контрольную группу составили 30 практически здоровых женщин, сопоставимых по срокам с группами наблюдения. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в РФ», утвержденные Приказом М3 РФ от 19.06.2003 г. №226.
Для получения гомогената плодовая часть плаценты (ворсинчатый хорион) срезалась скальпелем небольшими кусочками площадью до 2-3 см и толщиной 1 мм. Кусочки ткани помещали в химические стаканы, содержащие 200 мл физиологического раствора, отмывали от клеток крови, перемешивая на магнитной мешалке в течение 15 мин, и подсушивали на фильтровальной бумаге. Ткань растирали и гомогенизировали до однородной массы. Гомогенаты замораживали при -20°С в течение суток. Затем размораживали и использовали для дальнейшего анализа.
Экстракцию липидов из плазмы крови, мембран эритроцитов и гомогената плацент проводили по методу Фолча [7]. Метиловые эфиры а-линоленовой кислоты определяли методом газожидкостной хроматографии на хроматографе «Кристалл 2000М» (Россия) с пламенно-ионизационным детектором. Метилирование осуществляли по методу ТРСаггеп [6]. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса «Хроматэк Аналитик 2,5» (Россия) по временам удерживания с использованием стандартов фирмы «8ире1со» (США). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных %) в общей сумме площадей пиков метилированых продуктов высших ЖК.
Титр антител к ВПГ-1 определяли по динамике антител в парных сыворотках с помощью стандартных тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на микропланшетном ридере «81а1>Гах 2100» (США). Полученные данные обработаны методами вариационной статистики с использованием непарного ^критерия Стьюдента и Фишера.
Результаты исследования и их обсуждение
При изучении содержания а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных и гомогенате плацент рожениц с ГВИ были получены следующие данные (табл.).
Таблица
Концентрация а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных III триместра и гомогенате плацент рожениц с ГВИ (% от суммы)
Группы Периферическая кровь Плацента
плазма эритроциты
Контрольная 0,62±0,06 0,31±0,05 0,28±0,06
Титр 3200 0,48±0,04 0,26±0,03 0,21±0,03
Титр 1:12800 0,40±0,04* 0,18±0,02* 0,16±0,04
Примечание: * - различия статистически значимы при р(1) <0,05, р(Б) <0,05
При анализе результатов исследования была выявлена однонаправленная динамика изменений концентрации а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных и гомогенате плацент рожениц с ГВИ. Как в плазме, так и в мембранах эритроцитов концентрация а-линоленовой кислоты при титре антител к ВПГ-1 1:3200 имела тенденцию к уменьшению, тогда как при титре антител 1:12800 статистически достоверно снижалась в плазме на 35%, в мембранах эритроцитов - на 42%, относительно показателя в контрольной группе.
В гомогенате плацент рожениц, перенесших в период беременности обострение ГВИ, концентрация а-линоленовой кислоты имела тенденцию к уменыпению как при титре антител к ВПГ-1 1:3200, так и при повышении титра до 1:12800. Недостаток а-линоленовой кислоты может стать причиной неврологических нарушений, зрительных функций, повреждения кожных покровов. Данная кислота обладает мембранопротекторным, противовоспалительным действием, регулирует функции половых желез и надпочечников, нормализует реологические свойства клетки [1]. Поэтому недостаточное содержание а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных и гомогенате плацент рожениц с ГВИ может неблагоприятно сказываться на функциональном состоянии клетки, приводя к увеличению микровязкости и снижению текучести [2].
Таким образом, обострение ГВИ в период гестации сопровождается уменьшением содержания первичного продукта синтеза ю-3 длинноцепочечных ПНЖК - а-линоленовой кислоты в периферической крови беременных и гомогенате плацент рожениц. Это может приводить к недостаточной продукции защитных эй-козаноидов, синтезируемых из кислот семейства ю-3. Патегенетичеки обоснованным представляется дополнительное включение в схему лечения беременных с обострением ГВИ препаратов, нормализующих жидкостное состояние липидов клеточных мембран - ю-3 ПНЖК, способствующих образованию противоспали-тельных эйкозаноидов.
method for the isolation and purification of total lipids
from animals tissues // J. Biol. Chem. 1957. Vol.226. P.497-509.
REFERENCES
1. Ishutina N.A., Dorofienko N.N., Andrievskaya I.A., Dovzhikova I.V., Bolelova S.M. Bulleten'fiziologii ipa-tologii dyhaniya 2006; 23(Suppl.): 16-17.
2. Kon' I.Ya., Shilina N.M., Vol'fson S.B. Lechaschiy vrach 2006; 4:55-59.
3. Severin E.S, editor. Biokhimiya: uchebnik dlyci VUZov [Biochemistry: textbook for Universities]. Moscow: GEOTAR-MED; 2004.
4. Sidel'nikova V.M. Russkiy meditsinskiy zhurnal 2008; 16(6): 1—6.
5. Calder P.C. Fatty acid metabolism and eicosanoid synthesis Clin. Nutr. 2001; 20(Suppl.4):l-5.
6. Carren J.P, Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-
seale method to the micro-seale for fatty acid methyl traus-estenif: cation of biological lipid extracts.
Chromatography 1978; 151:384-390.
7. Folch J., Lees М., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animals tissues. J. Biol. Chem. 1957; 226:497-509.
Поступ ила 19.04.2012
Контактная информация
Наталия Александровна Ишутина, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при НЗЛ, Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН,
675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22.
E-mail: [email protected] orrespondence should be addressed to Nataliya A. Ishutina,
PhD, Senior staff scientist of Laboratory of Etiopathogenesis Mechanisms and Recoveiy Processes of the Respiratory System at Non-Specific Pulmonaiy Lung Diseases, Far Eastern Scientific Center of Physiology> and Pathology> of Respiration of Siberian Branch RAMS,
22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation.
E-mail: [email protected]
ЛИТЕРАТУРА
1. Изменение микровязкости мембран эритроцитов крови у беременных, инфицированных вирусом герпеса / Н.А.Ишутина [и др.] // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2006. Вып.23 (приложение). С. 16-17.
2. Конь И.Я., Шилина Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты в профилактике и лечении болезней детей и взрослых // Леч. врач. 2006. №4. С.55-59.
3. Биохимия: учебник для ВУЗов / под ред. Е.С.Северина. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. С.417-426.
4. Сидельникова В.М. Применение омега-3 поли-ненасыщенных жирных кислот для профилактики и комплексного лечения тромбофилических нарушений при беременности // Рус. мед. журн. 2008. Т.16, №6. С.1-6.
5. Calder PC. Fatty acid metabolism and eicosanoid synthesis // Clin. Nutr. 2001. Vol.20, Suppl.4. P.l-5.
6. Carren J.P, Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-
seale method to the micro-seale for fatty acid methyl traus-estenif: cation of biological lipid extracts //
Chromatography. 1978. №151. P.384-390.
7. Folch J., Lees М., Sloane-Stanley G.H. A simple
