CC BY
34
11. Луценко М.Т., Андриевская И.А., Довжикова И.В. Морфофункциональная характеристика фетоплацентарного комплекса у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции и патологические изменения в органах плода // Архив патологии. 2010. Т.72, №7. С.47-49.
12. Соловьева А.С. Закономерности и механизмы изменений иммунной системы у беременных с герпесвирусной инфекцией: автореф. дис. ... д-ра мед. наук.
Томск, 2006. 36 с.
13. Хаитов Р.Н., Пинегин Б.В., Истаманов Х.Н. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии // Иммунология. 2001. №4. С.4-6.
14. Герпетическая инфекция и беременность. Методические рекомендации / В.К.Ярославский [и др.]. СПб., 1996. 32 с.
Поступила 27.06.2011
Михаил Тимофеевич Луценко, руководитель лаборатории, 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22;
Mikhail T. Lutsenko, 22 Kalinina Str., Blagoveschensk, 675000;
E-mail: [email protected]
□ □ □
УДК 577.125.3:618.36:616.523-036.65
Н.А.Ишутина
ю-3 ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ В ГОМОГЕНАТЕ ПЛАЦЕНТ ЖЕНЩИН, ПЕРЕНЕСШИХ ВО ВРЕМЯ ГЕСТАЦИИ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН,
Благовещенск
РЕЗЮМЕ
Изучен состав ю-3 полиненасыщенных жирных кислот в липидах мембран плаценты у рожениц, перенесших во время беременности обострение гер-пес-вирусной инфекции. Установлено снижение концентрации эссенциальных эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот в составе липидов плаценты при высоком титре антител Ig G к вирусу простого герпеса, что может способствовать нарушению транспорта высокоэнергетических продуктов в пуповинную кровь плода.
Ключевые слова: герпес-вирусная инфекция, поли-ненасыщенные жирные кислоты, плацента..
SUMMARY
N.A.Ishutina
ю-3 POLYUNSATURATED FATTY ACIDS IN THE HOMOGENATE OF PLACENTAS OF WOMEN
WHO SUFFERED HERPES-VIRUS INFECTION EXACERBATION DURING GESTATION
The structure of ю-3 polyunsaturated fatty acids in lipids of membranes of placentas in parturient women who suffered herpes-virus infection exacerbation during pregnancy has been examined. The decrease of concentration of essential eicosapentaenoic and doco-sahexaenoic acids in the structure of lipids of the placenta at high antibody titer IgG to a virus of simple herpes was found out; this may lead to disturbance of high-energy products to the umbilical blood of the fetus.
Key words: herpes-virus infection, polyunsaturated fatty acids, placenta..
При активации герпес-вирусной инфекции (ГВИ) во время беременности в тканях плаценты происходят различного рода изменения - от компенсаторно-при-способительских до деструктивных процессов [5, 7,
12], оказывающих существенное влияние на снижение функции плаценты, обеспечивающих развитие и жизнеспособность плода. Недостаточность функции плаценты является одной из основных причин развития плацентарной недостаточности, перинатальной заболеваемости и смертности [3, 8]. Формирование плацентарной недостаточности в значительной мере связано с изменением физико-химических свойств плазматических мембран плаценты. Структурная перестройка основных компонентов плазматических мембран является одним из наиболее общих путей регуляции их функции [3]. Липиды и входящие в их состав жирные кислоты играют существенную роль в жизнедеятельности организма, являясь энергетическими веществами, структурными компонентами клетки и исходными продуктами для синтеза биологически активных веществ. Кроме того, липиды влияют на проницаемость мембран [2, 4].
Особенно важны жирные кислоты для роста и развития плода. У беременных добавление жирных кислот в рацион питания снижает риск преждевременных родов, увеличивает продолжительность срока беременности и вес ребенка, изменяя баланс вовлеченных в обмен эйкозаноидов, и вызывает плодный рост, улучшая плацентарный ток крови [6, 15, 16]. Анализ данных литературы свидетельствует о том, что, несмотря на большое количество работ, посвященных исследованию липидного обмена при беременности, состав жирных кислот гомогенатов плацент при ГВИ остается не вполне изученным.
Цель работы - изучить количественный состав ю-3 эйкозапентаеновой и докозагексаеновой жирных кислот липидной фракции гомогенатов плацент при поражении организма ГВИ.
Материалы и методы исследования
Проведено исследование содержания эйкозапентае-новой и докозагексаеновой жирных кислот в 20 плацентах, взятых на сроке 36-40 недель от беременных, перенесших обострение ГВИ до и во время гестации (титр антител ^ G к вирусу простого герпеса-1 (ВПГ-1) 1:3200 и 1:12800). Материалом для исследования в контрольной группе служили 20 плацент от практически здоровых женщин на тех же сроках гестации.
Для получения гомогената плодовая часть плаценты (ворсинчатый хорион) срезалась скальпелем небольшими кусочками площадью до 2-3 см и толщиной 1 мм. Кусочки ткани помещали в химические стаканы, содержащие 200 мл физиологического раствора, отмывали от клеток крови, перемешивая на магнитной мешалке в течение 15 мин., и подсушивали на фильтровальной бумаге. Ткань растирали и гомогенизировали до однородной массы. Гомогенаты замораживали при -20°С в течение суток, затем размораживали и проводили экстракцию мембранных липидов по Фолчу [14]. Жирные кислоты, входящие в состав липидов, после их метилирования [13], определяли методом газожидкостной хроматографии на хроматографе «Кристалл 2000М» ЗАО СКБ «Хроматэк» (Россия) с пламенно-ионизационным детектором. Об-
счет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса «Хроматэк Аналитик 2,5» (Россия) по временам удерживания с использованием стандартов фирмы <^ире1со» (США). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных процентах) в общей сумме площадей пиков метилированых продуктов высших жирных кислот.
Титр антител к ВПГ-1 определяли по динамике антител IgG с помощью стандартных тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на микропланшетном ридере <^а^ах 2100» (США).
Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №226.
Полученные данные обработаны методами вариационной статистики с использованием непарного ^ критерия Стьюдента и Фишера.
Результаты исследования и их обсуждение
При изучении состава ю-3 полиненасыщенных жирных кислот липидов плацентарных мембран получены следующие данные (таблица).
Таблица
ю-3 эйкозапентаеновая и докозагексаеновая полиненасыщенные жирные кислоты в
гомогенатах плацент рожениц с обострением герпес-вирусной инфекции
Кислота Контрольная группа Титр антител ^ G к ВПГ-1
1:3200 1:12800
Эйкозапен- таеновая 1,63±0,05 1,48±0,07 1,31±0,06*
Докозагекса- еновая 6,44±0,52 5,64±0,37 4,20±0,43*
Примечание: * - различия статистически значимы при р(^)<0,05, р^)<0,05.
Установлено, что обострение ГВИ в период гестации способствовало изменению состава ю-3 полинена-сыщенных жирных кислот в липидах тканей плаценты. Так, если в течение беременности женщина перенесла обострение ГВИ с высоким по агрессивности течением (титр антител IgG к ВПГ -1 1:12800), то содержание ю-3 эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот в липидах плацентарных мембран, статистически значимо снижалось на 20 и 35%, соответственно, тогда как при титре антител 1:3200 состав данных кислот практически не отличался от показателей контрольной группы.
Известно, что ю-3 эйкозапентаеновые и докозагек-саеновые соединения не синтезируются в организме и должны поступать в него с пищей [1]. Они формируют адекватную ответную реакцию клеток организма на действие внешних патогенных факторов, регулируют липидный обмен, предупреждают развитие воспаления, образование тромбов [10].
Свободные эйкозапентаеновые и докозагексаено-вые кислоты являются важными структурными компонентами клеточных мембран; они модифицируют -ингибируют функции трансмембранных ионных каналов всех органов и тканей. Эйкозапентаеноевая кислота усиливает эффективность антиоксидантных систем организма, нормализует процессы транспорта липидов в кровяном русле, репарацию клеточных мембран, активацию иммунокомпетентных клеток, способствует улучшению всасывания жиров в желудочно-кишечном тракте [10, 11]. Биологические эффекты, оказываемые ю-3 полиненасыщенными жирными кислотами, реализуются на клеточном и органном уровнях. Являясь структурными компонентами биологических мембран клеток, ю-3 полиненасыщен-ные жирные кислоты оказывают непосредственное влияние на текучесть липидного бислоя, проницаемость мембран, мембранно-связанную ферментативную активность, функционирование мембранных рецепторов и распознавание антигенов, электрофизио-логические свойства мембран [1]. При дефиците в клетках ю-3 полиненасыщенных жирных кислот меняется синтез и биологическая активность эйкозанои-дов, которые изменяют секрецию одновалентных катионов в канальцах почек, активируют агрегацию тромбоцитов и воспаление [9].
Таким образом, выявленная нами динамика изменений концентрации ю-3 эйкозапентаеновой и докоза-гексаеновой полиненасыщенных жирных кислот в липидах клеточных мембран, а именно, недостаточное их содержание в тканях плаценты, при таком разнообразном действии затрудняет функционирование липидного бислоя и может закончиться плацентарной дисфункцией, тем самым вызвав гестационные осложнения. Установленное в исследовании снижение концентрации незаменимых ю-3 полиненасыщенных жирных кислот при обострении ГВИ в период гестации с высоким по агрессивности течением в мембранах плацент рожениц может способствовать нарушению транспорта высокоэнергетических продуктов в пуповинную кровь плода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Березов Т.Т., Коровин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 2004. С.387-392.
2. Дорофиенко Н.Н., Ишутина Н.А. Изменение состава липидного спектра сыворотки крови у женщин
во время беременности при поражении организма гер-пес-вирусной инфекцией // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2008. Вып.28. С.29-32.
3. Крукиер И.И., Погорелова Т.Н. Физико-химическая характеристика плазматических мембран плаценты женщин при плацентарной недостаточности // Акуш. и гин. 1989. №1. С.35-38.
4. Фетоплацентарная система при герпесной инфекции / М.Т.Луценко [и др.]. Благовещенск, 2003. 200 с.
5. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Состояние фетоплацентарного барьера при герпес-вирусной инфекции у беременных // Бюл. СО РАМН. 2010. №5. С.142-148.
6. Павлович С.В. Патогенетическое обоснование применения ю-3 полиненасыщенных жирных кислот при осложненном течении беременности // Акуш. и гин. 1998. №1. С.48-52.
7. Пустотина О.А., Бубнова Н.И Диагностика внутриутробной инфекции (компоненты последа и амниотической жидкости) // Акуш. и гин. 1999. №4. С.3-5.
8. Савельева Г.М. Плацентарная недостаточность. М.: Медицина, 1984. С.3-8.
9. Титов В.Н. Нарушение транспорта в клетки насыщенных жирных кислот в патогенезе эссенциальной гипертонии (обзор литературы) // Клин. лаб. диагностика. 1999. №2. С.3-9.
10. Шилина Н.М., Конь И.Я. Современные представления о физиологических и метаболических функциях полиненасыщенных жирных кислот // Вопр. детской диетологии. 2004. Т.2, №6. С.25-30.
11. Накопление эйкозапентаеновой кислоты в мембранах эритроцитов и лейкоцитов при альтеративно-экссудативном и аллергическом воспалении / Н.М.Шилина [и др.]. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2010. Т.149, №5. С.516-519.
12. Цинзерлинг В.А. Мельникова В.Ф. Перинатальные инфекции. Вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клинико-морфологических сопоставлений. Спб., 2002. С.87-102.
13. Carren J.P., Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-
seale method to the micro-seale for fatty acid methyl traus-estenif: cation of biological lipid extracts //
Chromatography. 1978. №151. P.384-390.
14. Folch J., Lees M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // J. Biol. Chem. 1957. Vol.226. P.497-509.
15. Gallagher S. Omega 3 oils and pregnancy // Midwifery Today Int. Midwife. 2004. Vol.69. P.26-31.
16. Saldeen P., Saldeen T. Women and omega-3 Fatty acids // Obstet. Gynecol. Surv. 2004. Vol.59, №10. P.722-730.
Поступила 06.10.2011
Наталия Александровна Ишутина, старший научный сотрудник, 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22;
Nataliа A. Ishutina, 22 Kalinina Str., Blagoveschensk, 675000;
E-mail: [email protected]
