CC BY
44
ВЛИЯНИЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ВВЕДЕНИЯ ГАММА-ОКСИМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА ЛИПИДОВ У ЖИВОТНЫХ, ПОДВЕРГНУТЫХ СТРЕССУ
Н.Е. Усова, Я.В. Латюшин, Ю.Г. Камскова,
ЧГПУ, г. Челябинск
При стрессе происходит нарушение липогенеза в различных органах. Предварительное введение у-оксимасляной кислоты (ГОМК) перед 6-часовым стрессом влияет на синтез фосфолипидов и других липидных компонентов в исследуемых органах.
Известно, что одним из конечных продуктов ГАМКергической системы является ГОМК. Введение ее перед эмоционально-болевым стрессом (ЭБС) в значительной степени предотвращает активацию гипофизарно-адреналовой системы [1, 3]. При этом снижается накопление гидроперекисей липидов в печени и скелетной мышце [2], усиливается литогенез в печени, а большие дозы ГОМК вызывают гипохолестеринемический эффект у больных атеросклерозом [5].
В настоящем исследовании приведены данные о влиянии предварительного введения ГОМК при ЭБС на литогенез в разных отделах головного мозга, левом желудочке сердца и печени.
Методика исследования
Опыты проведены на 56 крысах-самцах линии Вистар весом 170-190 г. Животные были разделены на 3 группы (серии), по 18 крыс в каждой серии. Первая серия - контрольная, крысы второй серии подвергались ЭБС по известному методу Десидерато с соавторами [6], а животным третьей серии до ЭБС вводили ГОМК в дозе 75 мк/кг.
Для изучения влияния ГОМК на липидный обмен у всех животных из коры больших полушарий и подкорковой области мозга, левого желудочка сердца, а также печени извлекали липиды по методу Фолча. Количество жиров оценивали весовым способом и выражали в г % на сырую ткань. Для оценки биосинтеза липидов крысам внутри-брюшинно вводили 1С14-стеарат в дозе 60 мкиори на 100 граммов веса животного. Одновременно, в опытах с введением 1С14-стеарата осуществляли фракционирование липидов на различные компоненты. Выделение фосфолипидов проводили осаждением их ацетоном с последующей троекратной очисткой и переосаждением [4]. Центрифугировали в рефрижераторной центрифуге в течение 30 мин. После трехкратного осаждения ацетоном проводили контроль на чистоту и полноту осаждения. После удаления фосфолипидов осаждали свободный холестерин дигитонином [4].
Оставшиеся липидные компоненты после извлечения фосфолипидов и свободного холестерина подвергались тонкослойной хроматографии на си-
ликогеле 5-40 м с последующей идентификацией триглицеридов, которые элюировались с гелие хлороформовой метаноловой смесью (2:1). Для хроматографии липидов в тонком слое использовали растворитель, состоящий из петролейного эфира, диэтюювого эфира, уксусной кислоты (90:10:1). Радиометрию вели с помощью ДП-100 с торцовым счетчиком БФЛ-Т-25. результаты выражали в виде удельной активности (УА - имп./мин/10 мг липидов) и общей активности (ОА - имп./мин/на количество липидов в 1 грамме свежей ткани).
Результаты и их обсуждение
Проведенные исследования показали, что при ЭБС общее содержание липидов в коре больших полушарий, подкорковой области мозга, сердце и печени крыс не изменяется. Вместе с тем, анализ полученных результатов по включению 1С14-стеарата в общие липиды свидетельствует о том, что ЭБС способствует активации липогенеза в коре больших полушарий, сердце и особенно печени. Удельная активность 1С14-стеарата в общих липидах подкорковой области при ЭБС не изменяется.
Рассмотренные выше изменения в синтезе липидов, то всей вероятности, регуляторно обусловлены и играют существенную роль в обеспечении адекватной реакции организма на ЭБС.
Анализ включения радиометки 1С14-стеарата в фосфолипиды и триглицериды исследуемых органов крыс показал, что при ЭБС биосинтез отдельных липидных фракций в различных органах изменяется по-разному (рис. 1). Так, в коре больших полушарий при развитии стресса усиливается синтез триглицеридов и снижается синтез фосфолипидов. Подобные изменения наблюдаются и в подкорковой области мозга, где одновременно удельная активность 1С14-стеарата в триглицеридах не изменяется.
Исследование сердца показало, что в нем идет усиление новообразования фосфолипидов, холестерина и угнетение построения триглицеридов. В печени в отличие от других органов ЭБС тормозит синтез как фосфолипидов, так и триглицеридов.
Интегративная физиология, восстановительная и адаптивная физическая культура_______________________________________
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о специфике стрессового воздействия на липидный обмен в разных органах. В коре больших полушарий активация липогенеза идет за счет усиленного образования триглицеридов, в сердце - за счет увеличения синтеза фосфолипидов и холестерина, а в печени это, видимо, связано с другими липидными компонентами, такими как НЭЖК. В этом, возможно, и проявляется своеобразие регуляции липидного обмена в печени. Ак-
тивация гипофизарно-адреналовой системы при стрессе ведет к усиленной выработке адреналина. При этом, вслед за гликогенолизом, активацией липолиза, наблюдается накопление жира в печени за счет, вероятно, реэстерификации НЭЖК из жировой ткани.
Результаты следующего эксперимента, в котором изучалось влияние ГОМК на содержание и синтез общих липидов и биосинтез фосфолипидов, триглицеридов и холестерина представлены на рис. 1.
а) 1, 3 - стресс; 2,4 - стресс + ГОМК б) \, 2,3 - стресс; 4, 5, 6 - стресс + ГОМК
350
300 ■ - - - - - -— —р-Ц- I
250 ь- —— _| _|
200 • 150 • ~зг! 1 ■ф/л Втр-ды □ своб.хол-н
100 ■ 50 - Н
ЯШ
і 2 печень
в) 1, 2, 3 - стресс; 4,5, 6 - стресс + ГОМК
Рис. 1. Биосинтез различных липидных компонентов в органах из 1С-14 стеарата в норме,
стрессе и стрессе + ГОМК
Предварительное введение ГОМК при ЭБС вызывает повышение содержания общих липидов в коре больших полушарий и подкорковой области мозга. При этом усиливается липогенез за счет 1С14-стеарата.
Существенным моментом является тот факт, что активация липогенеза в полушариях головного мозга сопряжена с усилением синтеза фосфолипидов и снижением синтеза триглицеридов. И в том, и в другом случае удельная активность 1С14-стеарата достигала нормальных величин.
Предварительное введение ГОМК, увеличивая синтез фосфолипидов в коре больших полушарий и снижая синтез триглицеридов, снимает, таким образом, изменения вызванные ЭБС. Сущест-
венно, что в подкорковой области ГОМК подобного действия не оказывает.
Анализ полученных данных в печени и сердце показал (рис. 1), что при введении ГОМК увеличивается синтез триглицеридов в сердечной мышце. При этом синтез фосфолипидов и холестерина снижается недостоверно. В печени исследуемых, напротив, активируется процесс синтеза фосфолипидов, триглицеридов и особенно холестерина.
Таким образом, видно, что ЭБС накладывает серьезный отпечаток на продукцию таких биологически важных липидов, как фосфолипиды и триглицериды, и при этом в различных органах -разный. Так, если в коре больших полушарий
284
Вестник ЮУрГУ, № 4, 2005
Усова Н.Е., Латюшин Я.В., Камскова Ю.Г
Влияние профилактического введения гамма-оксимасляной кислоты на некоторые показатели...
и печени ЭБС угнетает синтез фосфолипидов, играющих значительную роль в функционировании исследуемых органов, то ГОМК нормализует его, снимая, таким образом, действие эмоционально-болевого стресса.
Обращает на себя внимание и тот факт, что ГОМК способствует резкой активации синтеза холестерина в печени, где он является источником синтеза желчных кислот, а, поступая в кровь, может участвовать в быстром синтезе гормонов коркового слоя надпочечников.
Все изложенное, свидетельствует о том, что предварительное введение ГОМК перед шестичасовым стрессом, способно в значительной степени воздействовать на синтез фосфолипидов и других липидных компонентов в исследуемых органах, особенно в сердце и печени. Это, надо полагать, является важным элементом в механизме профилактического воздействия ГОМК при стрессе.
Литература
1. Активация биосинтеза ГАМК в головном мозге как защитный механизм при эмоциональноболевом стрессе / Ф.З. Меерсон, В.И. Павлова, Р.И. Лифшщ и др. //Доклад СССР на симпозиуме физиологов. -1978. - Т. 239. -М3.- С. 743-746.
2. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. -М.: Наука, 1981. -203 с.
3. Павлова В.И., Малышев В.В., Меерсон Ф.З. Активация ГАМК-ергической тормозной системы головного мозга при стрессе // Патол. физиол. и эксперим. терапия -1981. -№ 1.- С. 26-30.
4. Прохорова МИ., Туликова З.Н. Методы определения радиоактивного углерода (С?4) в компонентах углеводного и липидного обмена -Л., 1959.
5. Хомуло П. С. Эмоциональное напряжение и атеросклероз. -Л.: Медицина, 1982. - С. 99-131.
6. Desiderato О., Testa М., Shock-stress, gastric lesions nabituation in the chronic gastric fistula rat.' // Physiol. Behav. -1976. - V 16.-P. 67-73.
