Влияние профилактического применения олигомерных проантоцианидинов на липидный обмен и антирадикальную активность печени крыспри поражении четыреххлористым углеродом

Спрыгин Владимир Геннадьевич; Кушнерова Наталья Федоровна; Фоменко Светлана Евгеньевна

у детей после лечения до 1,32±0,06 г/л у больных до начала лечения.

Одним из способов элиминации антигенов при хронических вирусных гепатитах является формирование циркулирующих иммунных комплексов. В то же время их значительное и стойкое повышение может быть показателем предрасположенности к развитию иммунопатологических реакций [7]. По сравнению со здоровыми донорами отмечалось повышение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК): у больных до начала лечения - 176,7±8,67 и после лечения - 144,2±7,7.

Недостаток супрессоров СБ8+- клеток усиливает выработку антител и образование иммунных комплексов, что вызывает аутоиммунные поражения. Снижение СБ4+, СБ8+ у детей с ХВГВ в репликативную фазу свидетельствует о том, что Т-клеточный пролиферативный ответ на антигены вирусов гепатита В является достаточно слабым до лечения и усиливается после проведения терапии. Это указывает на выраженный иммунодефицит Т-клеточного звена. После проведения терапии увеличилось содержание СД16+- клеток. Дефицит ЫК клеток до начала терапии сменялся ростом их содержания у детей, ответивших на лечение. Высокие показатели СБ95+ во всех обследованных группах отражают готовность клеток к апоптозу, более выраженную у больных до проведения лечения.

Снижение показателей НЬЛ-БЯ клеток означает явление иммуносупрессии, более выраженной у детей до начала лечения.

Нами выявлен дисбаланс гуморального звена иммунитета в репликативную фазу заболевания при хроническом вирусном гепатите В у детей, который определялся по состоянию В-системы. Содержание Л в репликативную фазу было более повышено у больных до начала проведения лечения. Увеличенное содержание О обусловлено длительным персистированием вируса в организме человека. Повышение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови говорит об активации гуморального звена иммунной системы на фоне хронической вирусной инфекции. Обнаруженное повышение ЦИК во всех группах, особенно у детей до проведения терапии, является показателем нарастания активности хронического гепатита.

Увеличение сывороточных иммуноглобулинов классов А, М, О и ЦИК свидетельствует о выраженной активации гуморального звена иммунитета в репликатив-ную фазу при ХВГВ у детей.

Таким образом, в иммунном статусе детей с ХВГВ в репликативную фазу до лечения и после проведения лечения отмечались признаки комбинированной иммунной недостаточности, которая проявлялась дисбалансе хелперного и супрессорного звеньев иммунитета и увеличении сывороточных иммуноглобулинов классов А, М, О и ЦИК. Выявленное повышение иммунных комплексов может определять прогрессирующее течение хронического вирусного гепатита В у детей в реплика-тивную фазу до начала лечения.

литература

1. Бондаренко А.Л. Роль НЬЛ-фенотипа в формировании хронической НСУ-инфекции // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2002. - №3. - С.40-42.

2. Молочкова О.В., Чередниченко Т.В., Гаспарян М.О. Течение гепатита С у детей // Детские инфекции. - 2002. -№1. - С.21-23.

3. Подымова С.Д. Болезни печени: руководство для врачей. - М.: Медицина, 1998. - 703 с.

4. Птицына Ю.С., Отмахова И.А., Кравченко Г.А. Содержание растворимой формы антигена СЭ38 в сыворотке больных вирусным гепатитом В // Клиническая иммунология. - 2003. - №3. - С.162-164.

5. Радченко В.Г., Шабров А.В., Зиновьева Е.Н. Основы клинической гепатологии. Заболевания печени и билиарной системы. - СПб.: Диалект; М. : Бином, 2005. - С.191-194.

6. Садыкова Ш.С. Значение иммунологических показате-

лей в прогнозе эффективности лечения препаратами интер-лейкинов 1ß и 2 ХВГ С и В: Автореф. дис... канд. мед. наук.

- Алмааты, 2010 - 29 с.

7. Серов В.В., Бушуева Н.В., Игнатова Т.М., Апросина З.Г. Факторы вируса и хозяина в развитии и прогрессировании хронических вирусных гепатитов В и С // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2006. - №4. -С.12-23.

8. Цой Р.М., Жданюк Н.В., Пак И.В. Показатели иммунного ответа на антиген вируса гепатита В у жителей северного города // Иммунология. - 2001. - №3. - С.49-51.

9. Шахгильдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика) - М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2003.

- 384 с.

10. Sibal A., Mishra D., Arora M. Hepatitis C in childhood // J. Indian. Med. Assoc. - 2002. - Vol. 100. №2. - P.93-98.

информация об авторе: Чурбакова Ольга Владимировна - к.м.н., докторант кафедры, e-mail: [email protected], 443099 г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 3332976

влияние профилактического применения олигомерных проантоцианидинов на липидный обмен и антирадикальную активность печени крыс при поражении четыреххлористым углеродом

Владимир Геннадьевич Спрыгин, Наталья Федоровна Кушнерова, Светлана Евгеньевна Фоменко (Тихоокеанскоий океанологический институт им. В.И. Ильичева ДВО РАН, директор - акад. РАН В.А. Акуличев,

лаборатория биохимии, зав. - д.б.н., проф. Н.Ф. Кушнерова)

Резюме. Экспериментальное исследование выполнено на 50 крысах. Показано, что при интоксикации четыреххлористым углеродом (ЧХУ) в печени и плазме крови крыс отмечается снижение антирадикальной активности, основных структурных фосфолипидов мембран и метаболически активных фракций, накопление триа-цилглицеринов, свободных жирных кислот, лизофосфолипидов. Активируется перекисное окисление липидов. Профилактическое применение комплекса олигомерных проантоцианидинов (КОПЦ) до- и в период интоксикации ЧХУ, снижает уровень свободнорадикальных процессов в печени и плазме крови экспериментальных животных и сохраняет показатели липидного обмена. Профилактические свойства КОПЦ при поражении ЧХУ превосходят таковые эталонного гепатопротектора «Легалон».

Ключевые слова: четыреххлористый углерод, печень, плазма крови, олигомерные проантоцианидины, липид-ный обмен, антирадикальная активность.

influence of preventive administration of oligomeric proanthocyanidins on lipid metabolism and antiradical activity in liver of rats in carbon tetrachloride poisoning

V.G. Sprygin, N.F. Kushnerova, S.E. Fomenko (Pacific Oceanological Institute named after V.I. Iljichev, FEB RAS)

Summary. It was shown that in carbon tetrachloride (CT) poisoning in liver and blood plasma of rats is registered the impairment of antiradical activity, main membrane structural and metabolically active phospholipids fractions, accumulation of triglycerides, free fatty acids, lysophospholipids. The lipids peroxidation is activated. Preventive administration of oligomeric proanthocyanidins before and in the period of poisoning with CT, reduces the free radical reactions level in liver and blood of laboratory animals and preserves the lipid metabolism parameters. Effectiveness of preventive administration of oligomeric proanthocyanidins in CT poisoning exceeds the reference hepatoportector "Legalon".

Key words: carbon tetrachloride, liver, serum, oligomeric proanthocyanidins, lipids metabolism, antiradical activity.

Токсические поражения печени, обусловленные загрязнением окружающей среды профессиональными и бытовыми факторами, являются широко распространенной причиной заболеваемости и смертности населения [3]. Ранее нами было показано, что комплекс оли-гомерных проантоцианидинов (КОПЦ), выделенный из отжима калины, является эффективным гепатопротек-тором, восстанавливающим метаболизм печени после поражения черыреххлористым углеродом (ЧХУ) [6]. Однако многие болезни печени, заканчивающиеся выздоровлением, оставляют «след» метаболического нарушения, который сохраняется на многие годы и нередко переходит в болезнь, требующую лекарственной терапии [7]. Данный факт обусловливает необходимость профилактического применения гепатопротекторов, способных предотвратить или максимально облегчить патологические изменения в печени при воздействии токсикантов. Причем, КОПЦ являются одними из наиболее удачных препаратов для использования в качестве профилактических средств. Это, в первую очередь, связано с тем, что они в значительных количествах встречаются в растениях (виноград, яблоки, различные ягоды, какао бобы), традиционно употребляемых в пищу человеком, организм которого эволюционно адаптирован к данной группе растительных полифенолов, что делает их пригодными для длительного применения в качестве компонента ежедневной диеты.

Целью настоящей работы явилось изучение профилактического применения КОПЦ, выделенного из отжима калины (Viburnum sargentii), на показатели липид-ного обмена и антирадикальную активность печени и плазмы крови крыс при поражении ЧХУ В качестве препаратов сравнения использовали стандартизованный КОПЦ из коры сосны (Pinus maritima) «Пикногенол» (Stryka Botanicals, Switserland) и эталонный полифе-нольный гепатопротектор «Легалон»® (MADAUS AG, Германия).

Материалы и методы

Сырье (отжим после отделения сока), включающее гребни, косточки и кожицу ягод калины, экстрагировали 40% этиловым спиртом методом реперколяции. Выход экстракта составлял 1 л из 1 кг сырья. Комплекс олигомерных проантоцианидинов выделяли на колонке с обращеннофазовым сефадексом LH-20 (GE Healthcare AB, Sweden) по описанной нами методике [5]. Водный раствор олигомерных проантоцианидинов после упаривания ацетона сушили в лиофильной сушке, в результате чего получали светло-коричневый порошок, легко растворимый в воде. Стандартизацию полученного препарата проводили по содержанию олигомерных проан-тоцианидинов, которое составляло 820±20 мг/г сухой массы. Определение состава полученного комплекса осуществляли по методу, описанному нами ранее [5], который показал, что фракция проантоцианидинов содержит 7,5% мономерных катехинов (катехин, эпикате-хин), 12,5% низкомолекулярных проантоцианидинов (проантоцианидины димеры B1, B3, B4, тримеры С1 и

Т2; n=2^4) и 80% высокомолекулярных проантоцианидинов (n>5).

В эксперименте использовали белых крыс-самцов линии Вистар массой 180-200 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария. В течение 7 дней крысам внутрижелудочно через зонд один раз в день вводили водный раствор КОПЦ из калины в дозе 100 мг про-антоцианидинов на кг массы тела. Пикногенол вводили в эквивалентной дозе в виде водного раствора. Легалон вводили через зонд в дозе, соответствующей 100 мг общих полифенолов на 1 кг массы тела животных в виде взвеси в 1% крахмальном клейстере. Доза в 100 мг/кг соответствует рекомендованной дозе для проведения доклинических испытаний полифенольных гепатопротекторов [1]. Начиная с 8-го дня, животным в дорзальную шейную складку вводили 50% раствор ЧХУ на оливковом масле в дозе 2,0 мл/кг на протяжении 4-х дней [1]. Параллельно продолжали введение растительных препаратов в той же дозе один раз в день. Животные были разделены на 5 групп по 10 крыс в каждой: 1-я группа - контроль (интактные животные); 2-я группа - ЧХУ; 3-я группа - КОПЦ+(ЧХУ+КОПЦ); 4-я группа - пикногенол+(ЧХУ +пикногенол); 5-я группа - легалон+(ЧХУ+легалон). Крыс выводили из эксперимента декапитацией под легким эфирным наркозом с соблюдением правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 1986). Исследование одобрено этической комиссией Федерального государственного бюджетного учреждения науки Тихоокеанского океанологического института им. В.И. Ильичева ДВО РАН.

Экстракт общих липидов из ткани печени готовили традиционным методом [11]{Folch, 1957 #17;Folch, 1957 #15}. Фракции фосфолипидов (ФЛ) разделяли методом двумерной микротонкослойной хроматографии на стеклянных пластинках 6х6 см с суспензией силикагеля и гипса. В качестве разделяющих систем использовали смеси растворителей [14]. Идентификацию фосфолипидных фракций на хроматограммах проводили с помощью специфических реактивов [4,14,16]. Количественное определение всех фракций проводили по методу [16]. Для разделения нейтральных липидов (НЛ) использовали одномерную микротонкослойную хроматографию на силикагеле в системе растворителей гексан-серный эфир-уксусная кислота 90:10:1 (по объему) [9]. Визуализацию пятен НЛ осуществляли в йодной камере. Идентификацию пятен липидов осуществляли с помощью коммерчески доступных очищенных стандартов. Количественное содержание отдельных фракций выражали в процентах от суммы НЛ и ФЛ, соответственно. Вторичные продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) - малоновый диальдегид (МДА), определяли по методу [2]. Уровень свободнорадикаль-ных процессов оценивали по величине антирадикальной активности (АРА) печени и плазмы крови [12].

Обработку результатов проводили с использованием статистического пакета Instat 3.0 (GraphPad Software Inc. USA, 2005) со встроенной процедурой проверки соот-

ветствия выборки закону нормального распределения. Для определения статистической значимости различий в зависимости от параметров распределения использовали параметрический ^критерий Стьюдента или непараметрический и-критерий Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Введение ЧХУ в течение 4-х дней в дорзальную шейную складку крыс приводило к развитию типичной картины токсического гепатита со значительными изменениями биохимических показателей, характеризующих липидный обмен печени и уровень свободно-радикальных процессов. Активизация процессов ПОЛ сопровождалась повышенным образованием МДА, содержание которого в печени было увеличено в 2,7 раза (78,9±3,6, против 28,5±1,9 нмоль/г в контроле, р<0,001), что является характерным признаком токсического

Таблица 1

Влияние профилактического введения растительных препаратов (КОПЦ, пикногенол, легалон) на содержание нейтральных липидов в печени крыс при токсическом поражении четыреххлористым углеродом (в % от суммы всех фракций, М±т)

действия ЧХУ Снижение величины антирадикальной активности (АРА) плазмы крови на 44% (2,25±0,10, против 4,01±0,13 мкмоль тролокса/мл в контроле, р<0,001) и печени на 31% (3,05±0,17, против 4,4±0,18 мкмоль тролокса/г в контроле, р<0,001) свидетельствует об истощении антиоксидантной и антирадикальной защиты организма. Интоксикация ЧХУ вызывала нарушение этерифицирующей функции печени, что выражалось в снижении содержания эфиров холестерина (ЭХС) на 19% (р=0,0022) и эфиров жирных кислот (ЭЖК) на 16% (р=0,0033) (табл. 1). Кроме того, характерно отметить увеличение свободных жирных кислот (СЖК) на 10% (р=0,038), холестерина (ХС) на 12% (р=0,006) и триа-цилглицеринов (ТАГ) на 22% (р=0,008), что свидетельствует о жировой инфильтрации печени. Одновременно происходили изменения в содержании фракций фосфолипидов: снижение количества основных структурных компонентов мембран - фосфатидилхолина (ФХ) на 15% (р=0,0016) и фосфатидилэта-ноламина (ФЭ) на 21% (р<0,001) при одновременном увеличении количества их лизоформ - лизо-фосфатидилхолина (ЛФХ) и лизо-фосфатидилэтаноламина (ЛФЭ) в 2 раза (р<0,001), а также фосфа-тидной кислоты (ФК) в 2,7 раза (р<0,001) (табл. 2). Считается, что такая деградация ФЛ обусловлена резкой активацией фосфолипазы А2 в условиях воздействия ЧХУ. Кр2 оме того, отмечалось снижение содержания сфингомиелина (СМ) на 23% (р<0,001), который,

как известно, является стабилизатором мембран [13]. Обращает на себя внимание повышение количества метаболически активных фракций - фосфатидилинозита (ФИ) на 25% (р=0,0231), фосфатидилсерина (ФС) на 26% (р=0,045) и дифосфатидилглицерина (ДФГ) на 39% (р<0,001), что, по мнению некоторых авторов, связано с адаптивными реакциями, направленными на поддержание функционирования мембраносвязанных транспортных АТФаз и аденилатциклазы [10].

Профилактическое применение (до интоксикации) и последующее введение КОПЦ, пикногенола и лега-лона одновременно с интоксикацией ЧХУ (3-я, 4-я, 5-я группы) существенным образом изменило картину метаболических нарушений в печени. Так, величина АРА в печени крыс 3-й, 4-й и 5-й групп составляла 4,15±0,20, 4,01±0,18 и 3,95±0,21 мкмоль тролокса/г, соответственно, а в плазме крови - 3,95±0,18, 3,82±0,12 и 3,61±0,15 мкмоль тролокса/мл, что не имело статистически значимых отличий от таковой величины у контрольных животных. То есть, отмечалось снижение уровня свободнорадикаль-ных процессов и снятие напряжения в системе антиоксидантной защиты. В пользу этого свидетельствует и более низкое, чем во 2-й группе, содержание МДА в печени животных, получавших растительные препараты: у крыс 3-й и 4-й групп содержание МДА в печени статистически значимо не отличалось от контрольного уровня и составляло 33,6±2,4 и 35,1±2,9 нмоль/г, соответственно. В то же время в печени крыс, получавших легалон, величина МДА была выше, чем в контроле на 28% (36,5±2,5 нмоль/г, р<0,001).

Профилактическое применение КОПЦ, пикногенола и легало-на способствовало сохранению биохимических показателей липидного обмена печени. Так, содержание ТАГ в печени животных 3-5 групп было ниже по сравнению с контролем, при этом в группе, получавшей КОПЦ, разница составляла 22% (р=0,0049). Это может являться следствием снижения содержания СЖК, необходимых для биосинтеза ТАГ и сохранением их в виде эфиров (ЭЖК). Подтверждением является более высокое, по сравнению с контрольной группой, содержание ЭЖК в печени крыс при введении КОПЦ на 15% (р<0,0152), пикногенола на 11% (р<0,0163) и легалона на 7%. Введение препаратов сопровождалось сохранением на уровне контроля содержания фракции ЭХС. При этом, содержание ХС в печени

Таблица 2

Влияние профилактического введения растительных препаратов (КОПЦ, пикногенол, легалон) на содержание фосфолипидов в печени крыс при токсическом поражении четыреххлористым углеродом (в % от суммы всех фракций, М±т)

Фракции липидов 1-я группа Контроль (интактные) (П=10) 2-я группа ЧХУ (П=10) 3-я группа КОПЦ+ (ЧХУ+ КОПЦ) (П=10) 4-я группа пикногенол+(ЧХУ+ пикногенол) (П=10) 5-я группа легалон+ (ЧХУ+ легалон) (П=10)

ТАГ 19,20±1,12 23,48±0,902 15,07±0,642в 17,95±0,89в 18,49±0,45в

СЖК 17,24±0,32 18,95±0,641 17,12±0,50а 16,63±0,67а 16,35±0,86а

ЭЖК 16,51±0,35 13,95±0,672 19,00±0,861в 18,26±0,56 1в 17,64±0,27в

ХС 17,41±0,40 19,50±0,452 16,80±0,64б 16,42±0,98а 16,13±0,74б

ЭХС 17,20±0,54 13,90±0,752 17,30±0,51в 17,02±0,68в 18,99±1,16в

Примечания. Различия статистически значимы при: 1- р<0,05; 2- р<0,01 - по сравнению с контролем, а- р<0,05; б- р<0,01; в- р<0,001 - по сравнению со 2-й группой. ТАГ - триацилгли-церины, СЖК - свободные жирные кислоты, ЭЖК - эфиры жирных кислот, ХС - холестерин, ЭХС - эфиры холестерина.

Фракции липидов 1-я группа Контроль (интактные) (П=10) 2-я группа ЧХУ (П=10) 3-я группа КОПЦ+ (ЧХУ+ КОПЦ) (П=10) 4-я группа пикногенол+(ЧХУ+ пикногенол) (П=10) 5-я группа легалон+ (ЧХУ+ легалон) (П=10)

ФХ 43,83±1,36 37,11±1,192 42,20±1,08б 42,19±1,23б 41,56±1,08а

ЛФХ 3,29±0,32 6,73±0,273 3,46±0,62в 3,89±0,33в 4,15±0,231в

СМ 9,49±0,27 7,31±0,473 11,85±0,163в 12,26±0,532в 13,11±0,342в

ФЭ 24,40±0,38 19,32±0,872 23,45±1,12б 22,87±0,85б 23,38±1,17б

ЛФЭ 2,87±0,4 6,31±0,533 2,79±0,13в 2,87±0,40в 2,14±0,43в

ФС 2,98±0,11 3,75±0,341 3,40±0,49 3,02±0,39 2,40±0,51

ФИ 7,25±0,24 9,04±0,681 6,39±0,201а 7,15±0,56а 6,76±0,45а

ФК 1,46±0,17 3,96±0,243 2,02±0,35в 1,76±0,19в 2,12±0,62а

ДФГ 4,65±0,35 6,48±0,183 4,46±0,31в 4,10±0,33в 4,58±0,73в

Примечания. Различия статистически значимы при: 1 - р<0,05; 2 - р<0,01; 3 - р<0,001 - по сравнению с контролем, а - р<0,05; б - р<0,01; в - р<0,001 - по сравнению со 2-й группой. ФХ - фосфатидилхолин, ЛФХ - лизофосфатидилхолин, СМ - сфингомиелин, ФЭ - фосфатидилэта-ноламин, ЛФЭ - лизофосфатидилэтаноламин, ФС - фосфатидилсерин, ФИ - фосфатидилинозит, ФК - фосфатидная кислота, ДФГ - дифосфатидилглицерин.

крыс 3, 4 и 5 групп было ниже по отношению к контролю на 8, 6 и 5%. По нашему мнению, это является результатом предотвращения проантоцианидинами ингибиро-вания ацил-холестерин:ацилтрансферазной реакции, а также не исключает и инактивации ими трихлорметил-радикалов [8].

Профилактическое применение КОПЦ, пикногено-ла и легалона способствовало сохранению содержания основных структурных компонентов биологических мембран ФХ и ФЭ, а также снижению соответствующих лизоформ этих фосфолипидов. В то же время при введении легалона содержание ЛФХ было выше контрольного уровня на 26% (р=0,0426). При этом необходимо отметить, что изучаемые препараты способствовали увеличению содержания СМ на 26-29% (р<0,001) по сравнению с контролем. Содержание метаболически активных фракций фосфолипидов (ФИ, ДФГ и ФК) статистически значимо не отличалось от соответствующих показателей у контрольных животных. Таким образом, профилактическое применение КОПЦ из калины и пикногенола с их последующим введением в процессе интоксикации способствовали сохранению метаболических реакций в печени, т.е. практически нейтрализовали действие радикалов, образующихся при метаболизме ЧХУ Профилактическое применение легалона и его последующее введение в период интоксикации ЧХУ также способствовало сохранению метаболической картины у экспериментальных животных, однако действие его было менее эффективным.

Известно, что в основе поражающего действия ЧХУ

ЛИТЕРАТУРА

1. Венгеровский А.И., Марков И.В., Саратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств // Ведомости Фармкомитета. - 1999. - №2. - С.9-12.

2. Гончаренко М.С., Латинова А.М. Метод оценки пере-кисного окисления липидов // Лабораторное дело. - 1985. -№1. - С.60-61.

3. Измеров Н.Ф. Концепция долгосрочного социально-экономического развития Российской Федерации на период до 2020 г. («Стратегия 2020») и сохранение здоровья работающего населения России // Мед. труда и пром. экология. - 2012. - №3. - С.1-9.

4. Кейтс М. Техника липидологии. - М.: Мир, 1975. -322 с.

5. Спрыгин В.Г., Кушнерова Н.Ф. Калина - новый нетрадиционный источник олигомерных проантоцианидинов // Химико-фармацевтический журнал. - 2004. - Т. 38. №2. -С.41-45.

6. Спрыгин В.Г., Кушнерова Н.Ф., Рахманин Ю.А. Антиоксидантное действие олигомерных проантоцианиди-нов, выделенных из калины, при поражении печени четы-реххлористым углеродом и профилактике его токсического эффекта // Гигиена и санитария. - 2003. - №3. - С.57-60.

7. Ушкалова Е.А. Лекарственные поражения печени // Фарматека. - 2003. - №10. - С.94-103.

8. Abe I., Seki T., Umehara K., et al. Green tea polyphenols: novel and potent inhibitors of squalene epoxidase // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2000. - Vol. 268. №3. - P.767-771.

9. Amenta, J.S. A rapid chemical method for quantification of

лежит свободнорадикальная деструкция мембран. Следовательно, основным результатом профилактического применения проантоцианидинов является их мебранопротекторное действие. При этом, катехины и проантоцианидины способны встраиваться и стабилизировать как внешнюю (гидрофильную), так и внутреннюю (гидрофобную) области липидного бислоя [15]. Помимо этого проантоцианидины, взаимодействуя с фосфолипидами мембран через образование водородных связей с полярными группами фосфолипидов, способны аккумулироваться как на внешней, так и на внутренней поверхности бислоя [17]. Все это создает дополнительную защиту полиненасыщенных жирных кислот фосфолипидов мембран от свободнорадикаль-ной деструкции, а также затрудняет прохождение активных форм кислорода в мембранный матрикс.

Полученные результаты дают основание заключить, что профилактическое применение олигомерных про-антоцианидинов (КОПЦ и пикногенол) дает возможность противостоять свободнорадикальной патологии в условиях интоксикации ЧХУ Олигомерные проантоциа-нидины, выступая в качестве ловушек свободных радикалов, обеспечивают сохранение основных показателей липидного обмена и антирадикальной активности печени и плазмы крови экспериментальных животных при поражении ЧХУ, проявляя выраженный мембранопро-текторный эффект. При этом эффективность профилактического применения КОПЦ и пикногенола у крыс в условиях поражения печени ЧХУ превосходит таковую от применения эталонного гепатопротектора «Легалон».

lipids separated by thin-layer chromatography // J. Lipid Res. -1964. - Vol. 5. №2. - P.270-272.

10. Ciaraldi T.P., Marinetti G.V. Hormone action at the membrane level. VIII. Adrenergic receptors in rat heart and adipocytes and their modulation by thyroxine // Biochim. Biophys. Acta. - 1978. - Vol. 541. №3. - P.334-346.

11. Folch J., Less M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // J. Biol. Chem. - 1957. - Vol. 226. №1. - P.497-509.

12. Re R., Pellegrini N., ProteggenteA., et al. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay // Free Radic. Biol. Med. - 1999. - Vol. 26. №9-10. - P.1231-1237.

13. Ridgway N.D. Interactions between metabolism and intracellular distribution of cholesterol and sphingomyelin // Biochim. Biophys. Acta. - 2000. - Vol. 1484. №2-3. - P.129-141.

14. Rouser G., Kritchevsky G., Yamamoto A. Column chromatographic and associated procedures for separation and determination of phosphatides and glicolipids // Lipid Chromatographic Analysis / Ed. G. V. Marinetti. - New York, 1967. - P.99-162.

15. Tsuchiya H. Effects of green tea catechins on membrane fluidity // Pharmacology. - 1999. - Vol. 59. №1. - P.34-44.

16. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y., Vasenden I.M. A universal reagent for phospholid analysis // J. Chromatography. - 1975. -Vol. 114. №1. - P.129-141.

17. Verstraeten S.V., Keen C.L., Schmitz H.H., et al. Flavan-3-ols and procyanidins protect liposomes against lipid oxidation and disruption of the bilayer structure // Free Radical Biology and Medicine. - 2003. - Vol. 34. №1. - P.84-92.

Информация об авторах: Спрыгин Владимир Геннадьевич — вед.н.с., к.б.н., 690041, г. Владивосток, ул. Балтийская 43, ТОИ ДВО РАН, тел. (4232) 313061, e-mail: [email protected]; Кушнерова Наталья Федоровна - заведующая лабораторией, д.б.н., профессор, e-mail: [email protected]; Фоменко Светлана Евгеньевна - вед.н.с., к.б.н., e-mail: [email protected]

антиоксидантный статус и экспрессия цитохрома p45oscc в кератиноцитах эпидермиса

больных угревой болезнью

Анна Николаевна Багрец, Валерий Андреевич Кузнецов, Татьяна Геннадьевна Рукша (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ректор - д.м.н., проф. И.П. Артюхов, кафедра патофизиологии, зав. - д.м.н. Т.Г. Рукша)

Influence of preventive administration of oligomeric proanthocyanidins on lipid metabolism and antiradical activity in liver of ratsin carbon tetrachloride poisoning