Влияние полиморфизма С3435Т гена MDR1 на эффективность терапии ювенильного идиопатического артрита Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Оригинальная статья

Ф.В. Рохлина1, Г.А. Новик1, Н.М. Калинина2, Н.В. Бычкова2, Ю.Н. Филиппова2, М.И. Зарайский3

1 Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет Минздрава России, Российская Федерация

2 Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М. Никифорова МЧС России, Санкт-Петербург, Российская Федерация

3 Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Российская Федерация

Влияние полиморфизма С3435Т гена MDR1 на эффективность терапии ювенильного идиопатического артрита

Контактная информация:

Рохлина Фаина Валерьевна, ассистент кафедры педиатрии им. проф. И.М. Воронцова ФП и ДПО СПбГПМУ Адрес: 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2, тел.: (921) 746-96-82, e-mail: [email protected] Статья поступила: 14.04.2013 г., принята к печати: 30.09.2013 г.

Ювенильный идиопатический артрит (ЮИА) — многофакторное заболевание; патогенез включает иммунологические и генетические факторы. MDRl-ген отвечает за устойчивость к различным цитотоксическим препаратам. Продукт MDRl-гена — Р-гликопротеин (P-gp) — действует как трансмембранный насос, влияя на действие лекарств. Целью нашего исследования было определить связь полиморфизма С3435Т гена MDR1 c уровнем экспрессии Р-протеина у детей, больных ЮИА. Всем пациентам в ходе нашего исследования был определен Р-протеин: белок определялся на лимфоцитах периферической крови до и после стимуляции интерлейкина 2. Также из крови всех больных была выделена геномная ДНК методом фенолхлороформной экстракции, и определен полиморфизм С3435Т гена MDR1 при помощи полимеразной цепной реакции. Концентрация метотрексата в сыворотке крови определялась стандартным методом флуоресцентной поляризации (ФПИА) на приборе TDxFLx фирмы Abbott. Статистическая обработка полученных в ходе исследования данных проводилась при помощи программы Statistica 6.0. Полиморфизм С3435Т MDRl-гена влияет на эффективность терапии. Определение как базального, так и стимулируемого (in vitro) Р-гликопротеина может быть использовано в качестве дополнительного критерия в оценке активности заболевания.

Ключевые слова: ювенильный идиопатический артрит, Р-гликопротеин, ген множественной лекарственной устойчивости, полиморфизм С3435Т.

(Педиатрическая фармакология. 2013; 10 (5): 46-51)

46

Ювенильный идиопатический артрит (ЮИА) — аутоиммунное заболевание, является одним из наиболее распространенных хронических заболеваний детского возраста [1, 2]. ЮИА — многофакторное заболева-

ние, патогенез которого включает как иммунологические, так и генетические факторы. Семейство генов МОЯ (ген лекарственной устойчивости) включает в себя МОЯ1 и МОЯ2 гены. МОЯ1-ген отвечает за устойчи-

F.V. Rokhlina1, G.A. Novik1, N.M. Kalinina2, N.V. Bychkova2, Y.N. Filippova2, M.I. Zarayskiy3

1 Saint Petersburg State Pediatric Medical University of the Ministry of Health of Russia, Russian Federation

2 Nikiforov All-Russian Center of Emergency and Radiation Medicine of the Ministry of Emergency Situations of Russia, Saint Petersburg, Russian Federation

3 Pavlov Saint Petersburg State Medical University, Russian Federation

Influence of C3435T Polymorphism of the Gene MDR1 on the Efficacy of Juvenile Idiopathic Arthritis Therapy

Juvenile idiopathic arthritis (JIA) is a multifactorial disease: its pathogenesis includes immunological and genetic factors. Gene MDR1 is responsible for resistance to various cytotoxic drugs. Product of gene MDR1 — P-glycoprotein (P-gp) acts as a transmembrane pump, thus affecting action of drugs. The research objective was to determine connection of C3435T polymorphism of the gene MDR1 with P-protein's expression level in children with JIA. P-protein was revealed in all the patents involved in our trial: the protein was revealed on peripheral blood lymphocytes before and after stimulation of interleukin 2. The authors also picked out genome DNA using phenol-chloroform extraction and detected C3435T polymorphism of the gene MDR1 using polymerase chain reaction. Methotrexate concentration in blood serum was determined using a standard method of fluorescent polarization (FPIA) using the Abbott apparatus TDxFLx. Statistical manipulation of the data obtained in the course of the trial was conducted using software Statistica 6.0. C3435T polymorphism of the gene MDR1 affects therapy efficacy. Determination of both basal and stimulated (in vitro) P-glycoprotein may be used as additional criterion in the evaluation of disease activity.

Key words: juvenile idiopathic arthritis, P-glycoprotein, multidrug resistance gen, C3435T polymorphism. (Pediatricheskaya farmakologiya — Pediatric pharmacology. 2013; 10 (5): 46-51)

вость к различным цитотоксическим препаратам, функции MDR2-гена остаются неизвестными [3]. Продукт MDRl-гена — Р-гликопротеин (P-gp), этот белок действует как трансмембранный насос и влияет на действие многих лекарств [4, 5]. P-гликопротеин локализован на хромосоме 7q21. Полиморфизм в гене MDR1 может влиять на фармакокинетику многих лекарственных средств, например цитостатиков, включая противоопухолевые препараты [6].

В 1976 г. R. L. Juliano и V. Ling сделали открытие, что Р-гликопротеин выделен в клеточных линиях с множественной лекарственной устойчивостью. C. J. Chen с соавт. (1986) выделили ген MDR1 (множественной лекарственной устойчивости) у человека. Общепризнанно, что мембранные транспортеры, такие как P-gp, играют существенную роль в развитии множественной лекарственной устойчивости (M. M. Gottesman и V. Ling, 2006). P-gp — типичный белок транспортера АТФ-связывающей кассеты (ABC), составленный из двух половин, каждая из которых содержит трансмембранную (TMD) и нуклео-тидсвязывающую (NBD) область, и отделенный гибким пространством. Взаимодействие двух половин P-gp важно для функционирования молекулы, и гибкая область соединения необходима для надлежащего взаимодействия этих двух половин, для связи между двумя сайтами аденозинтрифосфата [7, 8].

P-гликопротеин — белок, закодированный геном MDR1, является важным «перевозчиком» для многих препаратов, а также связан со многими иммунологическими процессами и апоптозом [4]. Известно, что полиморфизм C3435T коррелирует с активностью Р-гликопротеина. A. Pawlik с коллегами провели исследование, целью которого была оценка полиморфизма C3435T гена MDR1 у взрослых пациентов с ревматоидным артритом, а также исследование возможных корреляций с восприимчивостью к болезни и активностью заболевания. Распределение получилось следующим: 3435CC — в 25 (26,9%), 3435CT — в 50 (53,8%) и 3435TT — в 17 (18,3%) случаях. Распределение генотипов C3435T MDR1 у пациентов с ревматоидным артритом (РА) существенно не отличалось от таковых в контрольной группе. По результатам данного исследования, вероятность ремиссии симптомов РА у пациентов, получавших метотрексат и глюкокортикостероиды, в 2,89 раза выше у пациентов с генотипом TT по сравнению с пациентами с генотипами CC и CT [9].

J. Chen провел исследование среди взрослых с ревматоидным артритом в китайской популяции, для того чтобы оценить, связан ли ген множественной лекарственной устойчивости (MDR1) с невосприимчивым ревматоидным артритом (RRA). Исследование было выполнено с участием 223 пациентов с ревматоидным артритом, получающих лечение, и 103 здоровых людей контрольной группы. Больные РА были разделены на две группы согласно ответу на антиревматическую терапию (DMARDs). В первую группу было включено 108 пациентов, получавших терапию с положительным эффектом, во вторую — 115 пациентов с РА, для которых терапия не дала положительного результата. Генотипы полиморфизма C3435T были определены методом полимеразной

цепной реакции (ПЦР). В результате исследования выявлено, что C3435T MDRl-генный полиморфизм может влиять на эффективность терапии РА DMARDs. Существует связь между генотипом СС гена MDRl и невосприимчивым к терапии РА [10].

M. Cizmarikova и коллеги исследовали данный полиморфизм (C3435T) у больных раком молочной железы. Оценка генотипа и частоты аллели MDRl (C3435T полиморфизм) у больных раком молочной железы (221 пациент) и здоровых участников исследования (113 человек) показала, что в группе больных аллель Т встречается чаще. Результаты данного исследования подтвердили гипотезу, что Т-аллель, как правило, ассоциируется с более низкой экспрессией MDRl и снижением функции P-gp, обеспечивая меньшую защиту клеток [11].

С другой стороны, повышенная экспрессия P-gp была обнаружена у больных эпилепсией, резистентных к проводимой терапии. Наличие генотипа СС гена MDRl у больных с эпилепсией сопровождалось более высоким уровнем P-gp, что, возможно, и приводило к формированию устойчивости к противоэпилептической терапии [12].

В Японии в 2012 г. проведено исследование среди взрослых больных с ревматоидным артритом, получающих монотерапию метотрексатом (МТХ) в дозе 4-10 мг/м2. Целью этого исследования было установить связь между концентрацией МТХ и эффективностью терапии. После проведения корреляционного анализа между концентрацией МТХ (в эритроцитах) и показателями активности (DAS28, СОЭ, СРБ) связи не установлено. Всем 55 больным в этом исследовании был определен полиморфизм С3435Т гена MDRl, и оказалось, что у больных с генотипом ТТ показатель активности заболевания DAS28 достоверно ниже, чем у пациентов с генотипом СС, что указывает на непосредственное влияние полиморфизма С3435Т гена MDRl на эффективность монотерапии МТХ [13].

Несмотря на большое количество исследований, посвященных изучению полиморфизма гена MDRl, результаты остаются противоречивыми, и требуется проведение дальнейших исследований, посвященных изучению механизмов формирования лекарственной устойчивости в детской популяции.

Целью нашего исследования было определить связь полиморфизма С3435Т гена MDRl c уровнем экспрессии Р-протеина у детей, больных ЮИА, получающих базисную терапию метотрексатом.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В наше исследование было включено 103 ребенка с ЮИА в различных формах, согласно классификации ILAR. Наиболее распространенной формой среди всех пациентов был полиартикулярный вариант ЮИА — у 46 (44,66%), олигоартрический наблюдался у 25 (24,27%), системный — у 14 (13,59%), энтезитас-социированный артрит — у 18 (17,48%). Обязательным условием включения был возраст дебюта заболевания до 17 лет, базисная терапия МТХ (внутримышечно) в дозе 15 мг/м2 не менее 3 мес на момент забора крови.

Молекулярно-генетическое исследование (полиморфизм С3435Т MDRl-гена и определение Р-гликопро-

о и

со и о

CN

О

о

se <

s

о.

<

в

и ш т

S

о.

S

Ч ш

47

R J H

n

(J R

J

П

a о

теина) было проведено в группе сравнения, представленной 26 условно здоровыми детьми в возрасте до 17 лет.

Помимо рутинных методов исследования (осмотр больных, оценка суставного статуса, биохимические показатели активности) всем пациентам был определен Р-протеин [белок определялся на лимфоцитах периферической крови до и после стимуляции интерлейкина (IL) 2]. Для определения относительного количества лимфоцитов, несущих на своей мембране MDR-рецептор, клетки гепаринизированной периферической крови, согласно инструкции фирмы-производителя, были окрашены антителами к CD 243-PE (Beckman-Coulter, США) после инкубации в условиях 37°C в атмосфере 5% СО2 в течение 3 ч в отсутствии и присутствии 5 мкл ронколейкина (интерлейкин 2 человека рекомбинантный, 1 000 000 МЕ, ООО «БИОТЕХ», Россия). В качестве негативного контроля были использованы неокрашенные антителами клетки периферической крови. Иммунофенотипирование клеток периферической крови осуществляли методом проточной цитометрии с использованием программного обеспечения СХР (Cytomics FC500, Beckman-Coulter, США) по безотмывочной технологии с применением для лизиса эритроцитов OptiLyse C (Beckman-Coulter, США). В лимфо-цитарном гейте, выделенном на основании параметров прямого и бокового светорассеяния, анализировали 5000 событий.

Также из крови всех больных была выделена геномная ДНК методом фенолхлороформной экстракции, и определен полиморфизм С3435Т гена MDR1 методом ПЦР. Амплификация проводилась на приборе ICycler (BioRad, США) по стандартной двух-праймерной схеме в конечном объеме 15 мкл с окраской SYBR Green I. Каждая проба амплифицирова-лась в двух раздельных пробирках, содержащих общий обратный праймер 5'-actataggccagagaggctgc-3' и раздельно два прямых праймера для обоих аллельных вариантов гена MDR1: 5'-gtggtgtcacaggaagaggtC-3' и 5'-gtggtgtcacaggaagaggtT-3'. Программа амплификации состояла из начальной денатурации (95°C, 3 мин) и 40 циклов, включавших денатурацию (94°C, 20 с) и отжиг праймеров + элонгация (6°C, 40 с).

Концентрация МТХ в сыворотке крови определялась стандартным методом флуоресцентной поляризации (ФПИА) на приборе TDxFLx фирмы Abbott. Для проведения этого анализа используется метка флуоресцеин.

Участниками реакции в методе ФПИА являются определяемый в биологической жидкости антиген, конъюгат антигена с меткой-флуоресцеином и специфические антитела к ним. Точная взаимосвязь между интенсивностью поляризации и концентрацией вещества устанавливается путем построения калибровочного графика.

Статистическая обработка полученных в ходе исследования данных проводилась при помощи программы Statists 6.0. Сравнительный анализ проводился с использованием стандартного критерия х2 Пирсона (Pearson Chi-square) и двустороннего критерия Фишера (Fisher Exact Test), где p < 0,01 считался статистически достоверным.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Распределение по генотипам полиморфизма С3435Т гена MDR1 у больных с ЮИА не отличалось от общепо-пуляционного. Наиболее часто встречаемый генотип СТ выявлен у 58,25% детей в группе больных ЮИА, в группе сравнения таких детей 57,69%. Детей с генотипом ТТ в основной группе 24,27%, а в группе сравнения — 34,62%. Наиболее редко встречаемым оказался генотип СС: в группе больных ЮИА — 17,48%, в группе сравнения — 7,69% детей (рис. 1).

Согласно классификации ILAR, среди больных с ЮИА была выделена группа детей с олигоартритом (n = 25). У больных данной формой заболевания в подавляющем большинстве случаев определялся генотип СТ (80%). В группе детей с полиартритом (n = 46) 21 (45,6%) ребенок имел генотип СТ, 13 (28,3%) — генотип ТТ, а 12 (26,1%) — генотип СС. В группе больных с системной формой ЮИА (n = 14) в половине случаев был выявлен генотип СТ. У пациентов с энтезитассоциированным артритом (n = 18) генотип СТ определялся у 12 (66,7%), генотип ТТ — у 5 (27,7%) и только у 1 (5,6%) — генотип СС (рис. 2).

Среди 103 обследованных нами детей 65 (63,1%) девочек и 38 (36,9%) мальчиков. В группе детей с генотипом СТ 60 детей, среди которых 23 (38,3%) мальчика и 37 (61,7%) девочек. Группа пациентов с более редким генотипом ТТ представлена 15 (60%) девочками и 10 (40%) мальчиками. Группа из 18 больных с генотипом СС состоит из 13 (72,2%) девочек и 5 (27,8%) мальчиков (рис. 3).

48

Рис. 1. Распределение по генотипам полиморфизма С3435Т гена МВИ1 у больных с ЮИА и в группе сравнения

Больные ЮИА Группа сравнения

□ СС □ СТ □ ТТ

Рис. 2. Распределение генотипов полиморфизма С3435Т гена Рис. 3. Распределение генотипов полиморфизма С3435Т МОЯ1 среди больных с ЮИА, согласно классификации ILAR МОЯ1-гена в зависимости от пола у больных ЮИА

Олиго Поли Системный Энтезит

Формы артрита при ЮИА

□ Генотип СС □ Генотип СТ □ Генотип ТТ

80 -| 70 -60 -50 -40 -30 -20 -10 -0

72,2 60

61,7

38,3

27,8

1 1

40

Н

Генотип СС Генотип СТ Генотип ТТ

□ Девочки □ Мальчики

Для оценки активности ювенильного идиопатическо-го артрита используют такие показатели, как скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и С-реактивный белок (СРБ) [14]. В группе пациентов с генотипом ТТ отмечалось статистически значимое повышение СОЭ. Можно отметить, что СРБ был выше у тех пациентов, которые являлись носителями аллеля Т (табл. 1).

Известен факт повышения гамма-глобулиновой фракции сывороточных белков у больных с аутоиммунными заболеваниями. В группе девочек с ЮИА уровень гамма-глобулина был статистически достоверно выше у больных с генотипом СТ по сравнению с пациентками с генотипом ТТ и ниже, чем у девочек с генотипом СС (табл. 2).

Нами были выделены группы больных с активной и неактивной стадией болезни на основании разработанных критериев неактивной болезни Carol A. Wallace с соавт. Неактивная болезнь — это отсутствие суставов с активным артритом, отсутствие лихорадки, сыпи, серо-зита, спленомегалии или генерализованной лимфадено-патии, связанной с ЮИА, отсутствие обострения увеита, нормальное СОЭ и СРБ [15].

Нами получено, что у детей с активной болезнью средний уровень Р-протеина (как до, так и после стимуляции IL 2) достоверно (p = 0,002) выше, чем у детей с неактивной болезнью. Данная динамика уровня Р-протеина

Рис. 4. Зависимости уровня Р-протеина от стимуляции ^ 2 у больных ЮИА в состоянии активной и неактивной болезни

свидетельствует о том, что дети в активной болезни имеют и более высокую активность МОЯ1-гена, который контролирует концентрацию цитостатического препарата в клетке (рис. 4).

о

ш т

S Q.

S

Ч ш

49

Таблица 1. Показатели активности ЮИА в обследованной группе в зависимости от полиморфизма С3435Т гена МОЯ1

Пациенты Генотип СС Генотип СТ Генотип ТТ Достоверность

Показатель 1 2 3

СОЭ (мм/ч) 11,3 ± 2,5 12,2 ± 1,44 18,72 ± 3,6 р2-3 = 0,04

СРБ (мг/л) 4,6 ± 2,1 11,2 ± 2,64 12,2 ± 4,9 р > 0,05

Таблица 2. Уровень гамма-глобулина сыворотки крови у девочек с ЮИА в зависимости от полиморфизма С3435Т гена МОЯ1

Пациенты Генотип СС (n = 12) Генотип СТ (n = 32) Генотип ТТ (n = 15) Достоверность

Показатель 1 2 3

Гамма-глобулины сыворотки крови 22,55 ± 1,23 21,59 ± 0,69 19,04 ± 0,9 р1-2 = 0,040 р2-3 = 0,023

№ Показатель СС (п = 18) СС + СТ (п = 78) СТ (п = 60) ТТ (п = 25) Достоверность

1 2 3 4

1 Уровень Р-протеина 83,05 ± 1,04 81,3 ± 0,86 80,78 ± 1,07 81,46 ± 1,25 р > 0,05

2 Уровень Р-протеина после стимуляции интерлейкина (1_) 2 85,22 ± 0,96 84,57 ± 0,58 84,38 ± 0,7 81,68 ± 2,06 р > 0,05

3 Прирост по Р-протеину после стимуляции 1_ 2 2,17 ± 1,04 3,273 ± 0,712 3,603 ± 0,870 0,22 ± 1,512 Р2-4 = 0,047 Р3-4 = 0,045

Таблица 4. Уровень Р-протеина (после стимуляции ^ 2) у мальчиков с ЮИА в зависимости от генотипа С3435Т МОЯ1-гена

Генотип Генотип СТ Генотип ТТ Генотип СС Достоверность

Показатель 1 2 3

Число больных 23 10 5

Р-протеин после стимуляции 1_ 2 85,19 ± 1,18 81,09 ± 1,85 88,9 ± 0,93 р1-2 = 0,05 Р2-3 = 0,013

50

а .в н

га

о ос га х

.в

^

(П X X и X

а

рост не отмечался, достоверных различий по распределению полиморфизма С3435Т гена МйЯ1 получено не было (рис. 5).

Уровень концентрации МТХ в сыворотке крови больных ЮИА, имеющих прирост уровня Р-протеина после стимуляции 11_ 2, был достоверно ниже, чем у пациентов, у которых прирост не определялся. Уровни альфа-1 и альфа-2 белковых фракций глобулинов сыворотки крови, был достоверно выше в группе детей, у которых не отмечался прирост Р-протеина после его стимуляции (табл. 5).

ОБСУЖДЕНИЕ

По данным литературы, около 30% пациентов с ЮИА нуждаются в назначении дополнительной генно-инженерной терапии в связи с неэффективностью базисной терапии [16]. Ген МйЯ1 отвечает за концентрацию цитостатических препаратов, в том числе у больных с артритом, и может влиять на эффективность и чувствительность больного к проводимой терапии [6, 10].

По нашим данным, достоверных различий по распределению аллелей полиморфизма С3435Т гена МйЯ1 у детей с ЮИА и условно здоровых получено не было.

Наличие генотипа ТТ сопровождается большей активностью заболевания. Уровень гамма-глобулинов в сыворотке крови у девочек был достоверно выше, и уровень

Таблица 5. Уровни альфа-1, 2-глобулинов и концентрации метотрексата в сыворотке крови у больных ЮИА в зависимости от наличия прироста Р-протеина после стимуляции интерлейкина (1_) 2

Р-протеин Прирост Р-протеина после стимуляции ^ 2 Достоверность

Показатель Есть Нет

Концентрация метотрексата 1,69 ± 0,076 2,13 ± 0,275 0,044

Альфа-1-глобулины 4,46 ± 0,13 5,09 ± 0,25 0,015

Альфа-2-глобулины 14,09 ± 0,27 15,58 ± 0,67 0,015

Уровень прироста Р-протеина после стимуляции 11_ 2 был достоверно ниже в группе с генотипом ТТ по сравнению с больными, имеющими генотип СТ и СТ + СС (табл. 3).

В то же время уровень Р-протеина после стимуляции 11_ 2 у мальчиков с генотипом ТТ был достоверно ниже, чем у мальчиков с генотипами СС и СТ (табл. 4).

При сравнении группы детей с приростом Р-протеина после стимуляции 11_ 2 и группы детей, у которых при-

Рис. 5. Распределение больных ЮИА по генотипам полиморфизма С3435Т МОЯ1-гена, учитывая наличие прироста Р-протеина после стимуляции интерлейкина (1_) 2

Есть прирост Р-протеина Нет прироста Р-протеина после стимуляции ^ 2 после стимуляции ^ 2

□ СТ □ СС □ ТТ

СОЭ был достоверно выше у детей, больных ЮИА, с генотипом ТТ вне зависимости от пола.

Общеизвестно, что Р-гликопротеин — продукт гена MDR1 — работает, как насос, выкачивая из клетки цито-статический препарат, и может привести к отсутствию эффекта от проводимой терапии [8].

В нашем исследовании использовалась методика определения уровня P-gp до и после стимуляции IL 2 лим-фоцитарной суспензии с определением процента клеток, несущих Р-протеин. Проведенные раннее исследования на культурах клеток ясно показали значение IL 2 как ростового фактора лимфоцитов и стимуляторов их функциональной активности. IL 2 отвечает за дифферен-цировку T-регуляторных лимфоцитов in vivo, активно участвуя в формировании аутоиммунных и системных заболеваний [17].

По данным, полученным в ходе исследования, у всех больных, отвечающих критериям активной болезни ЮИА, было выявлено повышение P-gp (базальный уровень, стимулированный IL 2) по сравнению с пациентами с неактивной болезнью. Несмотря на отмечающийся прирост P-gp после обработки лимфоцитов IL 2 (in vitro), у отдельных детей с ЮИА определялась более низкая концентрация МТХ в сыворотке крови, чем у остальных детей

с ЮИА. Эти данные свидетельствуют о наличии различных (не только активность MDR1) механизмов, влияющих на формирование терапевтической концентрации цито-статических препаратов в крови. Одномоментное определение концентрации метотрексата в сыворотке крови малоэффективно и не позволяет использовать данный показатель для принятия решения об изменении терапии у больных с ЮИА. Наши данные подтвердили результаты японских коллег, не установивших связи между концентрацией метотрексата в эритроцитах и эффектом от проводимой терапии у взрослых больных с ревматоидным артритом.

ВЫВОДЫ

Полиморфизм С3435Т MDR1-гена влияет на эффективность терапии. У больных ЮИА с генотипом ТТ заболевание может протекать с более высокой степенью активности по сравнению с детьми, имеющих генотипы СС и СТ.

Определение как базального, так и стимулируемого (in vitro) Р-гликопротеина в лимфоцитарной суспензии может быть использовано в качестве дополнительного объективного критерия активной/неактивной болезни у больных с ЮИА.

0 1

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Harris J. G., Kessler E. A., Verbsky J. W. Update on the Treatment of Juvenile Idiopathic Arthritis. Curr Allergy Asthma Rep. 2013; 13: 337-346.

2. Bulatovic M., Heijstek M. W., Verkaaik M. et al. High Prevalence of Methotrexate Intolerance in Juvenile Idiopathic Arthritis. Art Rheumat. 2011; 63 (7): 2007-2013.

3. Chin J. E., Soffir R., Noonan K. E. et al. Structure and Expression of the Human MDR (P-Glycoprotein) Gene Family. Molecular and cellular biology. 1989. R 3808-3820.

4. Миронова Ж. А., Трофимов В. И., Симакова М. А. и др. Ген множественной лекарственной устойчивости (MDR1) — маркер терапевтической резистентности и степени тяжести заболеваний. Российский аллергологический журнал. 2010; 3: 9-13.

5. Annese V., Valvano M. R., Palmieri O. et al. World Multidrug resistance 1 gene in inflammatory bowel disease: A Meta-analysis. J Gastroenterol. 2006 June 21; 12 (23): 3636-3644.

6. Ambudkar S. V., Kimchi-Sarfaty C., Sauna Z. E. et al. P-glyco-protein: from genomics to mechanism. Oncogene. 2003; 22: 7468-7485.

7. Cantarini L., Simonini G., Frediani B. et al. Treatment strategies for childhood noninfectious chronic uveitis: an update. Expert Opin Investig Drugs. 2012; 21 (1).

8. Sauna Z. E., Kim I.-W., Ambudkar S.V.J Genomics and the mechanism of P-glycoprotein (ABCB1). Bioenerg Biomembr. 2007; 39: 481-487.

9. Pawlik A., Wrzesniewska J., Fiedorowicz-Fabrycy I. et al. The MDR1 3435 polymorphism in patients with rheumatoid arthritis. Int J Clin Pharmacol Ther. 2004 Sep; 42 (9): 496-503.

10. Chen J., Chen L., Mao N. et al. Association of the MDR1 3435 polymorphism in patients with refractory rheumatoid arthritis in a Chinese population. Rheumatol Int. 2011.

11. Cizmarikova M., Wagnerova M., Schonova L. et al. MDR1 (C3435T) polymorphism: relation to the risk of breast cancer and therapeutic outcome. The Pharmacogenomics Journal. 2010; 10: 62-69.

12. Sills G. J., Mohanraj R., Butler E. et al. Lack of Association between the C3435T Polymorphism in the Human Multidrug Resistance (MDR1) Gene and Response to Antiepileptic Drug Treatment. Epilepsia. 2005; 46 (5): 643-647.

13. Kato T., Hamada A., Mori S. et al. Genetic Polymorphisms in Meta-bollcand Cellular Transport Pathway of Methotrexate Impact Clinical Outcome of Methotrexate Monotherapy in Japanese patients with Rheumatoid Arthritis. Drug Metab Pharmacokinet. 2012; 27 (2): 192-199.

14. Jaap F., Stucki G., Piet L. C. M. van Riel. Rheumatoid Arthritis Measures Disease Activity Score (DAS), Disease Activity Score-28 (DAS28), Rapid Assessment of Disease Activity in Rheumatology (RADAR), and Rheumatoid Arthritis Disease Activity Index (RADAI). Arthritis & Rheumatism (Arthritis Care & Research). 2003 Oct. 15; 49 (5): S214-S224. Doi 10.1002/art.11407 © 2003, American College of Rheumatology.

15. Wallace C. A. Current management of juvenile idiopathic arthritis. Best Practice & Research Clinical Rheumatology. 2006. F 279-300.

16. Foeldvari I., Wierk A. Effectiveness of Leflunomide in Patients with Juvenile Idiopathic Arthritis in Clinical Practice. J Rheumatol. 2010. F. 1763-1767.

17. Кетлинский С. А., Симбирцев А. С. Цитокины. СПб.: ООО «Издательство Фолиант». 2008. С. 267-278.

3 1 0 2

О Л О К А

5

Р А

в

С Е

т

И Р ТРА

И Д

Е

51