CC BY
0
ВОЛГОГРАДСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО OF VOLGOGRAD STATE j
МЕДИЦИНСКОГО УНИВЕРСИТЕТА MEDICAL UNIVERSITY
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Научная статья
УДК 615.015:547.466.6:616-092.4
doi: https://doi.Org//10.19163/1994-9480-2024-21-4-125-129
Влияние нового производного ГАМК с анксиолитическим и антидепрессантным действиями на половое поведение, способность к оплодотворяемости и развитию продуктов зачатия
Е.Б. Лаврова н, |Е.А. Кузубова, Л.И. Бугаева, И.Н. Тюренков, М.В. Мальцев, А.В. Кузубов
Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия
Аннотация. В экспериментах на половозрелых крысах самках изучено влияние нового производного ГАМК - цитро-карда (цитрата 4-амино-3-фенилбутановой кислоты) на половое поведение и способность к оплодотворяемости. Цитрокард в дозах 50 мг/кг (экспериментально доказанная терапевтическая доза) и 700 мг/кг (доза, превышающая терапевтическую в 14 раз) вводили внутрижелудочно крысам самкам в течение 2 недель. Установлено, что по окончании введения в половом поведении у крыс самок, получавших цитрокард в дозе 50 мг/кг, длительность половой активности не изменялась относительно контроля, но при этом отчетливо повышалась способность к спариванию с самцами, «эмоциональные» подходы и лордозы возрастали на 43,8 % (р < 0,01) и 30,4 % (р > 0,05) соответственно. У самок, получавших цитрокард в дозе 700 мг/ кг, длительность половой активности несколько снижалась, но при этом их рецептивная способность была выше контрольных значений (количество лордозов, свидетельствующих о готовности их к спариванию, повышалось на 17,4 %, р < 0,05). Выявлено также, что при спаривании с интактными самцами у крыс самок предварительно, получавших цитрокард двухнедельным курсом, повышались процессы оплодотворяемости и показатели зачатия. Относительно контроля у самок опытных групп повышались индекс беременности, на 4,8 % (р > 0,05) и 33,3 % (р < 0,05), соответственно дозам и плодовитости, на 4,2 % (р > 0,05) и 19,0 % (р < 0,05), а также снижались у них показатели общей эмбриональной гибели плодов, как до имплантации, так и после имплантации.
Ключевые слова: производные ГАМК, антидепрессантное действие, генеративная функция, крысы самки, эстральный цикл, способность к оплодотворяемости и развитию продуктов зачатия
ORIGINAL RESEARCHES Original article
doi: https://doi.Org//10.19163/1994-9480-2024-21-4-125-129
Effects of a new GABA derivative with anxiolytic and antidepressant actions on sexual behavior, fertility, and the development of products of conception
E.B. Lavrova M,\ E.A. Kuzubova, L.I. Bugaeva, I.N. Tyurenkov, M.V. Maltsev, A.V. Kuzubov
Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia
Abstract. In experiments on adult rats, females studied the effect of a new derivative of GABA - citrocard (citrate of 4-amino-3-phenylbutanoic acid) on sexual behavior and fertility. Citrocard in doses of 50 mg/kg (experimentally proven therapeutic dose) and 700 mg/kg (dose exceeding the therapeutic 14 times) was administered intragastrically to female rats for 2 weeks. It was established that after the introduction of sexual behavior in rats of females receiving a citrocard at a dose of 50 mg/kg, the duration of sexual activity did not change relative to the control, but the ability to mate with males was clearly increased ("emotional" approaches and lordoses increased by 43,8 % (p < 0.01) and 30.4 % (p > 0.05)), respectively. In females treated with a citrocard at a dose of 700 mg/kg, the duration of sexual activity decreased slightly, but their receptive ability was higher than the control values (the number of lordoses indicating their readiness for mating increased by 17.4 % (p < 0,05). It was also revealed that when mating with intact males in rats of females previously treated with a citrocard 2-week course, fertility processes and fertility rates increased. Relative to control, in females of the experimental groups, the pregnancy index increased, by 4.8% (p > 0.05) and 33.3 % (p < 0.05), respectively, in doses and fertility, by 4.2% (p > 0 05) and 19.0% (p < 0.05), as well as their overall fetal death rates decreased, both preimplantation and postimplantation.
Keywords: GABA derivatives, antidepressant effect, generative function, female rats, estrous cycle, fertility and development of conception products
В настоящее время является актуальным поиск новых высокоактивных и малотоксичных психотропных препаратов с широким диапазоном спектра фармакологического действия. В этой связи обращает на себя внимание новое производное ГАМК - цитрат
4-амино-3-фенилбутановой кислоты - цитрокард, у которого в экспериментах на крысах при внутрижелу-дочном введении в дозах 25 и 50 мг/кг, наряду с анкси-олитической, выявляется наличие антидепрессантной и ноотропной активностей [1, 2]. Токсикологическими
© Лаврова Е.Б.,\Кузубова Е.А Бугаева Л.И., Тюренков И.Н., Мальцев М.В., Кузубов А.В., 2024 © Lavrova E.B., Kuzubova EA.\ Bugaeva L.I., Tyurenkov I.N., Maltsev M.V., Kuzubov A.V., 2024
исследованиями у данного соединения была показана низкая токсичность [3], уровень его ЛД» при внутри-желудочном введении крысам составил более 3500 мг/ кг, что позволяет соотнести исследуемый цитрокард в разряд малотоксичных [4].
Учитывая приведённые сведения и возможность последующего внедрения цитрокарда в клиническую практику в качестве анксиолитического и антидепрес-сантного средства, сочли целесообразным исследовать в экспериментах на крысах его влияние на отдельные аспекты генеративной функции.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучение возможного повреждающего влияния цитрокарда на половое поведение и способность к зачатию у крыс самок.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проводились на 66 белых нелинейных половозрелых крысах самках массой 200-240 г, 3,5-месячного возраста, полученных из питомника лабораторных животных «Рапполово» (Ленинградской области) и прошедших двухнедельный карантин в виварии ВолгГМУ При проведении исследований учитывались методические рекомендации «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [5]. Экспериментальное исследование и работа одобрена региональным исследовательским этическим комитетом Волгоградской области: протокол № 2034-2017 от 15.09.2017 г.
Перед началом проведения эксперимента было сформировано 3 группы крыс самок (по 22 особи в каждой): одна - контрольная и две опытные. Опытным группам крыс субстанцию вещества цитро-карда внутрижелудочно вводили в водном растворе в дозах 50 мг/кг (терапевтическая доза) [3] и 700 мг/кг (превышающую терапевтическую дозу в 14 раз). Контрольной группе крыс самок внутрижелудочно вводили растворитель цитрокарда дистиллированную воду в дозе 5 мл/кг. Курс введения цитрокарда, а также и дистиллированной воды составлял 2 недели, что приравнивается 3-4 эстральным циклам [5]. По окончании курса введения цитрокарда у крыс самок исследовали половое поведение, а также способность к оплодотворяемости и развитию продуктов зачатия. Половое поведение в паре с интактными самцами тестировали в установке «ПЗП» (площадка зоосоциальных предпочтений [6]) в течение 1 часа. Оценивали параметры процептивного полового поведения - латентный период (с) первого «эмоционального» подхода исследуемой крысы самки к интактному самцу крысы, количеству таких подходов и длительности половой активности (с) - и рецептивного полового поведения, в котором регистрировали количество лордозов у крыс самок, свидетельствующих о ее готовности к спариванию с самцами.
При исследовании способности самок к опло-дотворяемости и развитию продуктов зачатия исследуемых крыс самок подсаживали к интактным самцам в соотношении 2:1 на 10 дней [5]. На 20-й день всех крыс самок подвергали эвтаназии (метод дислокации шейных позвонков) и некропсии [5]. На вскрытии у самок определяли наличие беременности и рассчитывали индекс беременности. У беременных крыс самок выделяли яичники и рога матки. В яичниках подсчитывали количество жёлтых тел. В рогах матки определяли количество плодов и их возраст (по которому судили о сроках зачатия), также подсчитывали количество резорбций и мест имплантаций, рассчитывали до- и послеимплантационную эмбриональную гибель [5]. Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ: Microsoft Excel 2007, Statistica 6,0. О достоверности полученных изменений в опытных группах относительно контроля судили с помощью t-критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
По результатам исследования полового поведения у самок крыс, получавших цитрокард в дозе 50 мг/кг (1-я опытная группа), существенных различий с контролем не обнаружено (табл. 1) в таких параметрах процептивного полового поведения, как латентный период и длительность половой активности. При этом у самок в опытной группе выявлено статистически значимое увеличение количества «эмоциональных» подходов к самцу (на 43,8 %, p < 0,001) и незначимое количества лордозов (на 30,4 %, p > 0,05). В исследованиях на самках крыс, получавших цитрокард в дозе 700 мг/кг (2-я опытная группа) в процептивном половом поведении отмечено более, чем двукратное увеличение латентного периода первого «эмоционального подхода к самцу и снижение длительности половой активности на 9,5 % (p < 0,05). При этом количество «эмоциональных» подходов к интактным самцам у этих самок крыс несколько снижалось на 12,4% (p < 0,05), а количество лордозов, напротив, увеличивалось на 17,4% (p > 0,05).
Таким образом, из проведенных исследований можно предположить, что при двухнедельном введении крысам самкам цитрокард в дозе 50 мг/кг существенно не влияет на длительность их полового поведения, но при этом способствует умеренному активирующему влиянию на элементы спариватель-ного полового поведения - повышает у самок количество лордозов и количество эмоциональных подходов к самцам; цитрокард в дозе 700 мг/кг способствует снижению у крыс самок длительности полового поведения, но при этом также способствует и умеренной активации рецептивного полового поведения, что
сказывалось на незначимом, но отчетливом возрастании лордозов у них. Зафиксированное повышение элементов рецептивного полового поведения у всех
исследуемых крыс самок, получавших цитрокард, вероятно, может свидетельствовать об активирующем его влиянии на процессы спариваемости крыс.
Таблица 1
Влияние цитрокарда на половое поведение крыс самок
Регистрируемые показатели (М ± т) Группы животных (n = 22)
контрольная группа (дистиллированная вода, 10 мл/кг) опытная группа-1 (цитрокард 50 мг/кг) опытная группа-2 (цитрокард 700 мг/кг)
Латентный период половой активности (время, с) 24,00 ± 0,52 26,00 ± 1,03 56,00 ± 1,06**
Длительность половой активности (время, с) 841,00 ± 3,92 845,00 ± 12,43 761,00 ± 6,47**
Количество эмоциональных подходов к самцу 13,70 ± 0,21 19,70 ± 0,21** 12,00 ± 0,58*
Количество лордозов 2,30 ± 0,21 3,00 ± 0,37 2,70 ± 0,21
* Результаты статистически значимы относительно группы контроль прир < 0,05; ** результаты статистически значимы относительно группы контроль прир < 0,001.
Данное предположение нашло отражение в следующей серии исследований, в которой было обнаружено (табл. 2), что у 1-й опытной группы самок крыс, спаренных с интактными самцами крыс, индекс беременности и плодовитость статистически незначимо повышались на 4,8 % (р > 0,05) и 4,2 % (р > 0,05) соответственно. При этом доимплантационная гибель плодов у этих самок не различалась с данными контроля, а постимплантационная гибель плодов отчетливо снижалась на 30,0 % (р > 0,05). В исследованиях на 2-й опытной группе у самок, спаренных с интактными самцами крыс, выявлялось более отчетливое, чем в 1-й опытной группе, повышение индекса беременности -на 33,3 % (р < 0,05), относительно группы контроль-
ных самок. При этом у этой группы опытных самок крыс отмечалось статистически значимое повышение плодовитости на 19,0 % (р < 0,05) и снижение общей эмбриональной гибели плодов, как до имплантации (на 63,4 %, р < 0,05), так и после имплантации (на 19,1 %, р > 0,05).
Из проведенных исследований можно заключить, что у самок крыс, получавших до спаривания с самцами цитрокард в дозах 50 и 700 мг/кг, улучшаются показатели оплодотворяемости и процессов зачатия, которые сказывались на повышении индекса беременности у самок и их плодовитости, а также и снижении общей эмбриональной гибели плодов, регистрируемых в период их антенатального развития.
Таблица 2
Влияние цитрокарда на процессы зачатия у самок, спаренных с интактными самцами
Регистрируемые показатели (М ± т) Группы животных (n = 22)
контрольная группа (дистиллированная вода, 10 мл/кг) опытная группа 1 (цитрокард 50 мг/кг) опытная группа 2 (цитрокард 700 мг/кг)
Индекс беременности (%) 75,00 ± 11,18 78,6 ± 10,1 100,0 ± 0,00
Возраст эмбриона (дни) 14,4 ± 0,5 13,10 ± 0,59 14,00 ± 0,65
Количество желтых тел 11,1 ± 0,4 11,70 ± 0,61 12,4 ± 0,5
Количество плодов 9,50 ± 0,57 9,90 ± 0,51 11,30 ± 0,49*
Количество резорбций 0,40 ± 0,18 0,6 ± 0,2 0,60 ± 0,26
Места имплантаций 9,90 ± 0,44 10,40 ± 0,48 11,90 ± 0,55*
Доимплантационная гибель, % 11,20 ± 2,34 10,70 ± 2,15 4,10 ± 1,57*
Постимплантационная гибель, % 4,20 ± 2,06 5,50 ± 1,93 5,00 ± 2,09
* Результаты статистически значимы относительно группы контроль прир < 0,05.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Новое производное ГАМК цитрат 4-амино-3-фенилбутановой кислоты - цитрокард - при двухнедельном введении крысам самкам в дозах 50 и 700 мг/ кг не оказывает повреждающего влияния на половое поведение и способность к зачатию у крыс самок.
В половом поведении у самок крыс, получавших цитрокард в дозах 50 и 700 мг/кг, длительность половой активности существенно не меняется, но при этом отчётливо повышаются элементы спаривательного поведения (возрастают эмоциональные подходы к самцам и количество лордозов).
Цитрокард в дозах 50 и 700 мг/кг при двухнедельном введении крысам самкам до спаривания с ин-тактными самцами улучшает способность их к опло-дотворяемости и развитию продуктов зачатия.
СПИСОК ИСТОЧНИКОВ
1. Тюренков И.Н., Багметова В.В., Бородкина Л.Е. и др. Фенибут и его цитрат в предупреждении психоневрологических нарушений, вызванных хроническим стрессом -лишением парадоксальной фазы сна. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2012;75(6):8-13. doi: https://doi. org/10.30906/0869-2092-2012-75-6-8-13.
2. Перфилова В.Н., Иванова Л.Б., Карамышева В.И., Бородин Д.Д. Влияние новых солей фенибута на физическое и психическое развитие потомства крыс с экспериментальным гестозом. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2012;75(3):18-20.
3. Багметова В.В., Бугаева Л.И., Тюренков И.Н., Кузубова Е.А. Изучение острой токсичности цитрокарда нового производного фенибута с кардио- и нейропротектор-ным действием. Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2017;1(61):33-35.
4. Саноцкий И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ. (Токсикометрия). М.: Медицина, 1970.
5. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Ч. 1. Под общ. ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 92 с.
6. Букатин М.В., Бугаева Л.И., Кузубова Е.А. Изучение влияния курсового введения бемитила на компоненты полового поведения крыс-самцов. Современные наукоёмкие технологии. 2013;1:100-101.
REFERENCES
1. Tyurenkov I.N., Bagmetova V.V., Borodkina L.E. et al. Fenibut and its citrate prevent psychoneurological disorders caused by chronic stress (paradoxical sleep deprivation). Eksperimental'naya i klinicheskaya farmakologiya = Experimental and Clinical Pharmacology. 2012;75(6):8-13. (In Russ.) doi: https://doi.org/10.30906/0869-2092-2012-75-6-8-13.
2. Perfilova V.N., Ivanova L.B., Karamysheva V.I., Borodin D.D. Effect of new phenibut salts on the physical and mental development of offspring of rats with experimental gestosis. Eksperimental'naya i klinicheskaya farmakologiya = Experimental and Clinical Pharmacology. 2012;75(3):18-20. (In Russ.).
3. Bagmetova V.V., Bugaeva L.I., Tyurenkov I.N., Kuzubova E.A. Study of acute toxicity of the cytrocardium of a new derivative of phenibut with cardio- and neuroprotective action. Vestnik Volgogradskogo gosudarstvennogo meditsinskogo universiteta = Journal of Volgograd State Medical University. 2017;1(61):33-35. (In Russ.).
4. Sanotsky I.V. Methods for determining toxicity and hazard of chemicals. (Toxicometry). Moscow; Medicine Publ., 1970. (In Russ.).
5. Guidelines for Nonclinical Studies of Medicinal Products. Part 1. Under the general ed. A.N. Mironova. Moscow; Grif i K. Publ., 2012. 92 p. (In Russ.).
6. Bukatin M.V, Bugaeva L.I., Kuzubova E.A. Studying the effect of course administration of bemitil on the components of sexual behavior of male rats. Sovremennye naukoemkie tekhnologii = Modern high technologies. 2013;1:100-101. (In Russ.).
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи. Информация об авторах
Елена Борисовна Лаврова - младший научный сотрудник лаборатории токсикологии, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия; и elena.lavrova34@mail.ru
[Елена Александровна Кузубова |- кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия; eakuzubova@mail.ru
Любовь Ивановна Бугаева - доктор биологических наук, заведующая лабораторией токсикологии, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия; li_bugaeva@mail.ru
Иван Николаевич Тюренков - член-корреспондент Российской академии наук, доктор медицинских наук, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия;fibfuv@mail.ru
Михаил Васильевич Мальцев - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия;m_maltsev_biolog@rambler.ru
Александр Васильевич Кузубов - лаборант, Волгоградский медицинский научный центр инновационных лекарственных средств с опытно-промышленным производством, Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия; akuzubov@yandex.ru
Статья поступила в редакцию 17.01.2024; одобрена после рецензирования 07.07.2024; принята к публикации 18.11.2024.
Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.
Information about the authors
Elena B. Lavrova - Junior Researcher at the Laboratory of Toxicology, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia; и elena.lavrova34@mail.ru
|Elena A. Kuzubova|- Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia; eakuzubova@mail.ru
Lyubov I. Bugaeva - Doctor of Biological Sciences, Head of the Toxicology Laboratory, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia; li_bugaeva@mail.ru
Ivan N. Tyurenkov - Corresponding Member of the Russian Academy of Sciences, Doctor of Medical Sciences, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia;fibfuv@mail.ru
Mikhail V. Maltsev - Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia;m_maltsev_biolog@rambler.ru
Alexander V. Kuzubov - laboratory assistant, Volgograd Medical Research Center for Innovative Medicines with Pilot Production, Volgograd State Medical University, Volgograd, Russia; akuzubov@yandex.ru
The article was submitted 17.01.2024; approved after reviewing 07.07.2024; accepted for publication 18.11.2024
