CC BY
22
УДК 615: 611-013.1/.2
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА «АФОБАЗОЛ» НА ПОЛОВОЕ ПОВЕДЕНИЕ И ФЕРТИЛЬНОСТЬ КРЫС-САМОК
Е.А. Кузубова, Л.И. Бугаева, Е.Б. Лаврова, М.В. Мальцев, В.И. Петров, Т.М. Авилова, Н.М. Щербакова, И.В. Харламов
Научно-исследовательский институт фармакологии ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
В экспериментах на крысах самках изучено влияние афобазола в дозах 5 мг/кг (1-я группа) и 100 мг/кг (2-я группа) на половое поведение и фертильность. Установлено, что в структуре полового поведения, у крыс самок, получавших афобазол 2-недельным курсом, статистически незначимо и дозозависимо снижались длительность половой активности и количество лордозов (соответственно на 12,5 и 37,5 %), при одновременной тенденции повышения числа эмоциональных подходов. Наряду с этим по результатам исследования фертильности у крыс самок в обеих исследуемых группах отмечено повышение индекса беременности на 14,6 % (p > 0,05), а у забеременевших самок - повышение плодовитости соответственно группам на 33,7 % (p < 0,05) и 20,4 % (p < 0,05) и дозозависимое снижение общей (до- и постимпланта-ционной) эмбриональной гибели плодов на 26,4 % (p > 0,05) и 54,5 % (p < 0,05). На основании проведенных исследований сделано заключение о наличии положительного влияния афобазола при 2-недельном введении крысам-самкам в дозах 5 и 100 мг/кг на процессы фертильности, при незначительной тенденции его депримирующего влияния на половую активность.
Ключевые слова: производные бензимидазола, доклинические исследования, генеративная функция, половое поведение, фертильность.
DOI 10.19163/1994-9480-2020-3(75)-156-158
NFLUENCE OF THE PRODUCT «AFOBAZOLE» ON SEXUAL BEHAVIOR AND FERTILITY OF RATS-FEMALES
E.A. Kuzubova, L.I. Bugaeva, E.B. Lavrova, M.V. Maltsev, V.I. Petrov, T.M. Avilova, N.M. Shherbakova, I.V. Kharlamov
Research Institute of Pharmacology FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
In experiments on female rats, the effect of afobazole at doses of 5 mg/kg (group 1) and 100 mg/kg (group 2) on sexual behavior and fertility was studied. It was found that in the structure of sexual behavior in rats of females treated with afobazole with a 2-week course, the duration of sexual activity and the number of lordoses decreased statistically insignificantly and dose-dependently (by 12,5 and 37,5 %, respectively), with a simultaneous tendency to increase the number emotional approaches. In addition, according to the results of fertility studies in female rats, an increase in the pregnancy index by 14,6 % (p > 0,05) was noted in both study groups, and in pregnant women, an increase in fertility, respectively, by 33,7 % (p < 0,05) and 20,4 % (p < 0,05) and a dose-dependent decrease in the total (pre- and post-implantation) fetal death by 26,4 % (p > 0,05) and 54,5 % (p < 0,05). Based on the studies, it was concluded that afobazole had a positive effect on 2-weekly administration to rats of females at doses of 5 mg/kg and 100 mg/kg on fertility processes, with a slight tendency of its deprimative effect on sexual activity.
Key words: benzimidazole derivatives, preclinical studies, generative function, sexual behavior, fertility.
Психотропные препараты в настоящее время широко используются лицами репродуктивного возраста как самостоятельно, так и при назначении в клинической практике. Наиболее востребованной является группа анксиолитических препаратов с низким седативно-гипнотическим действием. Среди них обращает на себя внимание препарат «Афобазол», использующийся в клинической практике в качестве анксиолитического средства с сопутствующим ноотропным действием [7].
В ряде исследований, посвященных влиянию афобазола на процессы репродукции, отмечено наличие у него антитератогенной активности [6], а также отсутствие повреждающего влияния на процессы органо- и фетогенеза, регистрируемые в антенатальный и постнатальный периоды развития потомства [1, 2], что предполагает возможность широкого использования данного препарата
в акушерско-гинекологической практике. При этом сведений о влиянии афобазола на генеративную функцию, в частности на половую активность и процессы фертильности в доступной литературе представлены недостаточно.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Исследовать влияние афобазола на половую активность и фертильность крыс-самок.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проводились на 96 конвенционных белых крысах 4-месячного возраста массой 200-220 г, доставленных из ФГУП «Питомник лабораторных животных Рапполово» РАМН. Содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики, используемых для экспериментальных
и иных научных целей [5]. Для проведения экспериментов испытуемые крысы-самки были расформированы на опытные и контрольную группы по 22 особи в каждой. Афобазол вводили внутри-желудочно: 1-й опытной группе крыс-самок в дозе 5 мг/кг (что соответствует максимальной суточной дозе, используемой в клинической практике), 2-й опытной группе крыс-самок в дозе 100 мг/кг (доза, превышающая максимальную суточную дозу в 20 раз). Контрольной группе самок вводили внутрижелудочно растворитель афобазола -дистиллированную воду в дозе 5 мл/кг. Курс введения препарата и дистиллированной воды крысам-самкам составлял 15 дней, что приравнивается к 3-4 эстральным циклам [4].
По окончании введения афобазола у крыс-самок исследовали: половое поведение и фертиль-ность. Половую активность изучали в установке «открытое поле», модифицированной [3] под площадку зоосоциальных предпочтений (ПЗП), в которой у самок в паре с интактными самцами фиксировали процептивное (латентный период начала половой активности, длительность половой активности и количество подходов самки к интактному самцу) и рецептивное (число лордозов, свидетельствующих о готовности самки к спариванию) половое поведение.
Фертилизирующие свойства у самок крыс оценивали по результатам их спаривания с интакт-ными самцами в течение 10 дней в соотношении 2/1 [4]. На 20-й день крыс-самок всех исследуемых групп подвергали эвтаназии (метод дислокации шейных позвонков) и последующей некропсии. На вскрытии у самок определяли наличие беременности, по количеству забеременевших самок рассчитывали индекс беременности. У беременных самок выделяли яичники и рога матки, в яичниках подсчитывали количество желтых тел беременности, а в рогах матки - общее количество имплантированных и резорбированных плодов. На основании полученных данных рассчитывали до- и пост-имплантационную эмбриональную гибель.
Статистическую обработку данных проводили в программе Microsoft Ехсе1 и Statistica 6.0 с использованием t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Из результатов исследований полового поведения самок, получавших 2-недельным курсом афобазол в дозах 5 мг/кг (1-я опытная группа) и 100 мг/кг (2-я опытная группа), не отмечено статистически значимых изменений в структуре полового поведения (табл. 1). Так, относительно контроля у самок крыс в 1-й опытной группе выявлялась незначительная тенденция повышения количества «эмоциональных» подходов к интактным самцам на 12,3 % (p > 0,05). При этом количество лордозов у них также снижалось на 12,5 % (p > 0,05),
без существенных изменений длительности половой активности.
В исследованиях на крысах-самках, получавших афобазол в дозе 100 мг/кг (2-я опытная группа), отмечены более отчетливые изменения в половом поведении, что проявлялось в укорочении длительности половой активности на 10,2 % (р > 0,05) и снижении количества лордозов, свидетельствующих о готовности самки к спариванию, на 37,5 % (р > 0,05), с одновременным повышением «эмоциональных» подходов к интактным самцам на 16,4 % (р > 0,05).
Таблица 1
Влияние афобазола на половое поведение крыс-самок (М ± т)
Исследуемые группы самок Длительность, с Количество
латентного периода половой активности эмоциональных подходов к самцу лордозов
Контрольная группа дистиллированная вода, 10 мл/кг 20,20 ± 1,01 354,00 ± 5,59 7,30 ± 0,56 0,80 ± 0,31
Опытная группа 1, афобазол, 5 мг/кг 22, 80 ± 0,87 345,00 ± 12,07 8,2 ± 0,6 0,70 ± 0,33
Опытная группа 2, афобазол, 100 мг/кг 24, 00 ± 1,46 317,80 ± 14,08 8,50 ± 0,43 0,50 ± 0,22
*Данные статистически достоверны относительно контроля при p < 0,05.
Таким образом, из результатов в проведенных исследованиях можно сделать заключение о наличии слабого влияния афобазола на структуру полового поведения, в котором наряду с незначительной тенденцией укорочения на длительность половой активности и снижения количества лордозов у самок повышаются мотивации «эмоциональных» подходов к интактным самцам. Учитывая, что указанные эффекты влияния афобазо-ла на половое поведение, возможно, в дальнейшем отразятся на фертильности крыс-самок, в последующих исследованиях проанализировали его влияние на процессы зачатия. Из результатов исследований, представленных в табл. 2, видно, что процессы зачатия у этих самок несколько активи-з и ро вались. При этом было отмечено повышение индекса беременности у самок как в 1-й опытной группе, так и во 2-й на 14,6 % (р > 0,05).
Зафиксировано также, что относительно контроля плодовитость у этих опытных самок возрастала на 33,7 % (р < 0,05) в 1-й опытной группе и на 20,4 % (р < 0,05) во 2-й группе. По результатам оценки эмбриональной гибели плодов выявлено о тч е тливое снижение доимплантационной гибели на 45,1 % (р > 0,05) у самок в 1-й опытной группе и на 78,2 % (р < 0,05) - во 2-й группе, тогда как гибель плодов после имплантации у этих самок изменялась несущественно.
[ЩсохпГПГО^Я^!
Таблица 2
Влияние афобазола на процессы зачатия у самок, спаренных с интактными самцами
Регистрируемые показатели (M ± m) Группы животных (n = 22)
контрольная группа (дистиллированная вода, 10 мл/кг) опытная г р уппа 1 (афобазол, 5 мг/кг) опытная группа 2 (афоба- зол 100 мг/кг)
Индекс беременности, % 83,30 ± 8,33 95,50 ± 4,55 95,50 ± 4,55
Возраст эмбриона, дни 13,8 ± 0,4 13,50 ± 0,39 13,10 ± 0,83
Количество желтых тел 11,10 ± 0,75 13,70 ± 0,76* 11,60 ± 0,41
Количество мест имплантации 9,60 ± 0,77 12,60 ± 0,75** 11,2 ± 0,4
Количество плодов 8,60 ± 0,69 11,50 ± 0,87* 10,40 ± 0,45*
Количество резорбций 1,00 ± 0,33 1,20 ± 0,18 0,90 ± 0,28
Доимплантационная гибель, % 14,20 ± 3,13 7,80 ± 2,31 3,10 ± 1,34**
Постимплантацион-ная гибель, % 10,20 ± 3,03 10,10 ± 1,86 8,00 ± 2,42
*Результаты статистически значимы относительно группы контроль при р < 0,05; **данные статистически значимы относительно группы контроль при р < 0,01.
Таким образом, на основании проведенных исследований можно заключить, что препарат афобазол при 2-недельном курсе введения в дозах 5 и 100 мг/кг улучшает качество зачатия, повышает плодовитость, не изменяет сроки наступления беременности и снижает эмбриональную гибель плодов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. Препарат «Афобазол» в дозах 5 и 100 мг/кг при внутрижелудочном 2-недельном введении крысам-самкам не оказывает повреждающего влияния на половое поведение и фертильность.
2. Препарат «Афобазол» в дозах 5 и 100 мг/кг не изменяет структуру полового поведения и улучшает качественные основы зачатия и вынашивания плодов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бугаева Л.И., Денисова Т.Д., Морозова Ю.А. и др. Исследование пренатального развития плодов крыс, получавших препарат «Афобазол» в период органогенеза // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2014. - Т. 158, № 7. - С. 64-67.
2. Бугаева Л.И., Денисова Т.Д., Морозова Ю.А., и др. Влияние препарата «Афобазол» на постнатальное развитие потомства крысят // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2016. - Т. 162, № 10. - С. 435-438.
3. Кузубова Е.А., Бугаёва Л.И., Спасов А.А., Влияние препарата бромантан на половое поведение и процессы зачатия у крыс // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2004. - Т. 67, № 3. - С. 34-37.
4. Методические рекомендации по изучению репродуктивной токсичности лекарственных средств: руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Ч. 1). - М.: Гриф и К, 2012.
5. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 01.04.2016 г. № 199н «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики» // СПС «Консуль-тантПлюс». - URL: http://www.consultant.ru/document/cons_ doc_LAW_20334.
6. Шредер О.В., Смольникова Н.М., Дурнев А.Д., Сере-денин С.Б. Влияние афобазола на тератогенные эффекты циклофосфамида у крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - № 4. - С. 414-417.
7. Шредер О. В., Соломина А. С., Цорин И. Б. и др. Влияние афобазола на когнитивное поведение потомства крыс, подвергнутых воздействию табачного дыма в период беременности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2011. - Т. 151, № 1. - С. 48-54.
REFERENCES
1. Bugaeva L.I., Denisova T.D., Morozova Yu.A., et al. Issledovaniye prenatal'nogo razvitiya plodov krys, poluchavshikh preparat «Afobazol» v period organogeneza [Study of the prenatal development of fetuses of rats receiving the drug «Afobazol» during organogenesis]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2014, vol. 158, no. 7, pp. 64-67. (In Russ.; abstr. in Engl.).
2. Bugaeva L.I., Denisova T.D., Morozova Yu.A., et al. Vliyaniye preparata «Afobazol» na postnatal'noye razvitiye potomstva krysyat [Effect of the drug «Afobazol» on the postnatal development of the offspring of rats]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2016, vol. 162, no. 10, pp. 435-438. (In Russ.; abstr. in Engl.).
3. Kuzubova E.A., Bugaeva L.I., Spasov A.A. Vliyaniye preparata bromantan na polovoye povedeniye i protsessy zachatiya u krys [Effect of the drug bromantane on sexual behavior and conception in rats]. Eksperimental'naya i klinicheskaya farma-kologiya [Experimental and clinical pharmacology], 2004, vol. 67, no. 3, pp. 34-37. (In Russ.; abstr. in Engl.).
4. Metodicheskiye rekomendatsii po izucheniyu reproduk-tivnoy toksichnosti lekarstvennykh sredstv: rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskikh issledovaniy lekarstvennykh sredstv [Guidelines for the study of reproductive toxicity of drugs: guidelines for conducting preclinical studies of drugs] (Part 1). Moscow: Grif and K, 2012. (In Russ.; abstr. in Engl.).
5. Prikaz Ministerstva zdravookhraneniya Rossiyskoy Federatsii ot 01.04.2016 g. № 199n «Ob utverzhdenii Pravil nadlezhashchey laboratornoy praktiki» [Order of the Ministry of Health of the Russian Federation dated 01.04.2016, No. 199n «On the approval of the Rules of Good Laboratory Practice»]. ATP "ConsultantPlus". URL: http://www.consultant.ru/document/ cons_doc_LAW_20334. (In Russ.; abstr. in Engl.).
6. Schroeder O.V., Smolnikova N.M., Durnev A.D., Seredenin S.B. Vliyaniye afobazola na teratogennyye effekty tsiklofosfamida u krys [The influence of afobazole on the teratogenic effects of cyclophosphamide in rats]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2008, no. 4, pp. 414-417. (In Russ.; abstr. in Engl.).
7. Schroeder O.V., Solomina A.S., Tsorin I.B., et al. Vliyaniye afobazola na kognitivnoye povedeniye potomstva krys, podvergnutykh vozdeystviyu tabachnogo dyma v period beremennosti [Effect of afobazole on the cognitive behavior of offspring of rats exposed to tobacco smoke during pregnancy]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2011, vol. 151, no. 1, pp. 48-54. (In Russ.; abstr. in Engl.).
Контактная информация Мальцев Михаил Васильевич - к. б. н., доцент кафедры фармакологии и биоинформатики, Волгоградский государственный медицинский университет, e-mail: m_maltsev_biolog@rambler.ru
