CC BY
49
выполнялось с использованием критерия Стьюдента. Значения средних величин считали статистически достоверными при р<0,05.
Результаты и их обсуждение. В группе больных с ОСОМП активность ЩФ составила 96±2,6 и/1 (р<0,001). В группе сравнения среднее значение этого показателя составило 61±2,8 И/1 (р<0,001). Активность у-ГТП в условиях острого мочевого стаза повышается до 106±5,0 И/1 (в группе сравнения среднее значение активности этого фермента в моче составило 40±2,1 И/1; р<0,001). Повышение автив-ности ЩФ и у-ГТП было зарегистрировано у всех больных.
Иные данные были получены при исследовании в моче активности ЛДГ-1. У 28 пациентов активность этого фермента находилась в пределах нормальных значений (20,2±1,2 И/1, в то время как в группе сравнения активность этого же изофермента составила 11 ± 0,9 И/1). У остальных 18 пациентов активность ЛДГ-1 была повышена и составила 43,3±2,7 И/1 (р<0,001). Различия в активности ЛДГ-1 и послужили критерием для разделения больных на 2 исследуемые группы. По нашему мнению, гиперэнзимурия при ОСОМП обусловлена повышением гидростатического давления в верхних мочевых путях при их обструкции, что ведет к нарушению кровоснабжения почечной ткани. Угнетение физиологических биоэнергетических процессов в эпителии проксимального отдела нефрона вызывает нарушение целостности щеточной каймы и выход мембраноассоциированных ферментов в мочу [7]. Одновременное повышение активность и цитозольного фермента ЛДГ-1, свидетельствует о выраженных изменениях цитомембран нефрона, а значим более глубоком ишемическом повреждении почечной паренхимы. Результаты исследования показали, что внезапно наступившая ОСОВМП оказывает определенное влияние на КОС организма (табл.1).
При ОСОВМП имеет место умеренный по степени выраженности ацидоз. Значения таких параметров как ВВ, ВЕ, 8В в группе с обструкцией ВМП отражают биохимические признаки ацидоза. Это обусловлено повышением гидростатического давления в верхних мочевых путях с последующим резким падением клубочковой фильтрации [4].Установлены более выраженные сдвиги КОС во 2 группе больных. Очевидно, данный факт связан с тем, что при сохранении острого мочевого стаза, почечный кровоток прогрессивно ухудшается, приводя к ишемии и гибели нефронов [5,6]. Наиболее чувствительны к ишемическому воздействию проксимальный извитой каналец и проксимальные сегменты прямого канальца нефрона [7], где в основном происходят секреция ионов водорода, реабсорбция бикарбоната, экскреция аммония. Очевидно, что нарушения ацидо- и аммониоге-неза в эпителии проксимального канальца нефрона, являются причинами выделительного ацидоза, имеющего место при ОСОВМП, а степень их выраженности от тяжести ишемической альтерации почечной паренхимы.
Выводы:
1) Изучение активности ферментов мочи при обструкции верхних мочевывх путей позволяет оценивать степень ишемии почечной паренхимы.
2) Вследствие негативного воздействия мочевого стаза острая суправезикальная обструкция мочевых путей является причиной развития компенсированного выделительного ацидоза. Степень ацидификации зависит от глубины повреждения эпителия канальцевого аппарата нефрона, что служит косвенным маркером тяжести альтерации почечной ткани.
Работа выполнена в рамках государственного задания Министерства образования и науки РФ.
Литература
1. Баканов, М.И. Кислотно-основное равновесие крови в норме и при патологии / М.И. Баканов // Медицинский научный и учебно-методический журнал.- 2001.- N«3.- С.17-28.
2. Окатьев, НА. Роль нарушений метаболической системы регуляции кислотно-основного равновесия в развитии некоторых патологических состояний / Н.А. Окатьева // Вюник морьско1 медицини.- 2000.- №3(11).- С.8-9.
3. Чиж, А.С. Нефрология в терапевтической практике /
А.С.Чиж, С.А.Петров, Г. А. Ящиковская.- Мн.: Вышейшая шко-ла.,1998.- 557 с.
4. Anderhuber, F. Pyelorenal reflux. I. Actual and presumed routes / F. Anderhuber, R. Reimann // Morphol. Med.- 1982.-Vol.2(2).- P.109-122.
5. Klahr, S. The role of growth factors, cytokines and vasoactive compounds in obstructive nephropathy / S. Klahr, J. Morrissey // Semin. Nephrol.- 1998.- Vol.18(6).- P.622-632.
6. Hvistendahl, JJ. Renal hemodynamic response to gradated ureter obstruction in the pig / J.J. Hvistendahl, T.S. Pedersen,
H.H. Jorgensen // Nephron.- 1996.- Vol.74(1).- P. 168-174.
7. Venkatachalam, MA. Mechanisms of proximal tubule brush border loss and regeneration following mild renal ischemia / M.A. Venkatachalam, D.B. Jones, H.G. Rennke // Lab. Invest.-
1991.- Vol. 45.- P.355-365.
SECRETORY ACIDOSIS AS AN INDICATOR OF KIDNEY ISCHEMIC DAMAGE SEVERITY AT ACUTE UROSTASIS
L.YE. BELYI, D.A. SOLOVIEV, D.N. BOLUCHEVSKY
Ulyanovsk State University Ulyanovsk Central Clinical Hospital
Acute urinary obstruction causes ischemia and alteration of the canalicular nephron epithelium, which is the reason of acid-base balance abnormality. By the degree of acidotic shifts' intensity it is possible to judge indirectly concerning the damage intensity of kidneys' canalicular apparatus.
Key words: urostasis, obstruction of urinary tracts, ischemia, secretory acidosis.
УДК612.172.1
ВЛИЯНИЕ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ МИОКАРДА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ
В.А. МОНИЧ*, С.Л. МАЛИНОВСКАЯ*, В.Ф. ЛАЗУКИН*,
А.П. БАВРИНА*, Т.И. СОЛОВЬЕВА**, Е.И. ЯКОВЛЕВА**,
М.В. РАХЧЕЕВА**
Таблица 1
Изучалось влияние низкоинтенсивного лазерного и широкополосного света на активность СОД и процессов перекисного окисления липидов, а также на ультраструктуру миокарда после экспериментальной ишемии. Обнаружено достоверное отличие эффектов действия лазерного и широкополосного света. Ключевые слова: широкополосный свет, лазер, ишемизированное сердце, перекисное окисление липидов.
При воздействии широкополосного красного света эффект оказывается не менее значимым, чем при облучении биологического объекта светом гелий - неонового лазера той же интенсивности [11]. При этом действие оказывается не менее значимым, чем излучение гелий-неонового лазера той же интенсивности. Одним из ключевых механизмов эффектов действия красного света является регуляция процессов перекисного окисления липидов в тканях облучаемого образца. Известно, что ишемическая болезнь сердца (ИБС) сопровождается увеличением активности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в тканях миокарда [7,8,9]. Это провоцирует повреждение мембран кар-
Нижегородская Государственная медицинская академия, 603005, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, 10/1.
Научно-исследовательский институт прикладной и фундаментальной медицины, 603005, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, 10/1.
Кислотно-основное состояние при острой суправезикальной односторонней обструкции мочевых путей
Стат. показатели pH pCO2 мм.рт.ст. HCO3- ммоль/л cH+ нмоль/л BE ммоль/л BB ммоль/л SB ммоль/л
группа сравнения n M±m 23 7,44±0,004 23 40,2±0,51 23 25,2±0,17 23 39,91±0,28 23 0,24±0,07 23 53,7±0,37 23 24,1±0,26
1 группа Є й 2 * 34 7,39±0,006 <0,001 34 36,7±0,45 <0,001 34 22,78±0,28 <0,001 34 38,82±0,45 <0,05 34 1,38±0,23 <0,001 34 46,61±0,23 <0,001 34 23,07±0,19 <0,01
2 группа m 2 * % s 17 7,34±0,004 17 34,34±0,55 <0,001 17 20,36±0,93 <0,05 17 40,91±0,37 <0,001 17 4,06±0,81 <0,01 17 44,25±0,91 <0,05 17 21,0±0,72 <0,01
Примечание: р1 - достоверность отличий со значениями в группе сравнения; р2 - достоверность отличий значений в исследуемых группах.
диомиоцитов и обострение последствий ИБС. Одним из индикаторов данных процессов является накопление молекулярных продуктов перекисного окисления липидов [1,7,13]. Эксперименты, проведенные на изолированных сердцах крыс при моделировании тотальной ишемии, показали двух-кратное снижение диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА) в тканях миокарда, обусловленное облучением изолированного сердца светом гелий-неонового лазера и широкополосным красным светом [12].
Цель исследования - сравнение эффективности воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) и широкополосного красного света (ШКС) на ультраструктуру миокарда крыс и процессы перекисного окисления липидов.
Материалы и методы исследования. Эксперименты были проведены на самцах беспородных белых крыс (91 животное) массой 250-280 гр. Животных наркотизировали раствором нем-бутала в дозе 50 мг/кг внутримышечно. После трахеотомии животное подключалось к аппарату искусственной вентиляции лёгких (ИВЛ). По центральной линии груди осуществлялся разрез кожи, вскрывалась грудная клетка и затем - перикард. Моделирование ишемии осуществлялось путём окклюзии левой коронарной артерии. Под левым ушком сердца накладывалась лигатура на левую ветвь венечной артерии. Перетяжка осуществлялась в течение 5 минут. В результате развивалась острая ишемия. Животные были разделены на две опытные группы и две контрольные. В первой опытной группе (23 крысы) производилось воздействие на область сино-атриального узла светом лазера, во второй (22 крысы) - широкополосным красным светом. Световое облучение в опытных группах начиналось сразу после снятия лигатуры и продолжалось 10 минут. В обеих контрольных группах производилось вскрытие грудной клетки по методике, описанной выше. В первой контрольной группе (21 крыса) проводилось ложное облучение сердца без моделирования ишемии животных, во второй контрольной группе (25 крыс) - ложное облучение после моделирования ишемии миокарда. Запись ЭКГ выполнялась с помощью кардиографа «Полиграф», включенного в линию с ЭВМ. Анализ производился с помощью компьютерной программы «Полиспектр». Источниками света являлись гелий-неоновый лазер ЛГ-13 и люминесцентный оптоволоконный аппарат собственной разработки [10]. Длина волны в максимуме спектра люминесцентного излучения составляла 640 нм, ширина спектра излучения 70 нм. Диаметр светового пятна составлял 3 мм. Интенсивность излучения в зоне засветки 5 мВт/см2.
Уровень процессов перекисного окисления липидов оценивался по содержанию в тканях миокарда молекулярных продуктов пероксидации: диеновых конъюгатов (ДК), триеновых конъюгатов (ТК) и малонового диальгида (МДА) [5,6]. Состояние антиокидантной защиты клеток определялось по активности ферментов супероксиддисмутазы (СОД) [14].
Для электронно-микроскопического исследования брали образцы ткани из левого желудочка в области сосочковых мышц. Методика приготовления образцов соответствовала, описанной ранее [8]. Просмотр проводили на электронном микроскопе Mor-gagni 268D фирмы FEI. Морфометрические измерения осуществляли с помощью программы «AnalySIS». Статистический анализ полученных результатов проводили стандартными методами с использованием программы «Stadia».
Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием программы «Stadia». Достоверность различий между значениями сравниваемых групп определяли с использованием t-критерия Стьюдента. При множественных сравнениях вводили поправку Бонферрони [4].
Результаты и ибсуждение. Облучение миокарда как лазерным, так и широкополосным светом снижало уровень продуктов перекисного окисления в тканях миокарда (табл. 1). Исключение составили данные по триеновым конъюгатам для группы, обработанной лазерным светом. Более эффективное снижение уровня первичных продуктов ПОЛ выявлено в группе, облученной ШКС. В группе, экспонировавшейся ШКС, оно составило 26%, по отношению к контрольным образцам, а в группе, подвергавшейся действию лазерного излучения, 16%.
Снижение уровня молекулярных продуктов ПОЛ может быть обусловлено фотохимическими процессами, связанными с повышением активности СОД в тканях сердечной мышцы. Этот фермент является одной из важных компонент ферментативного звена системы антиоксидантной защиты клеток. При этом СОД имеет полосу поглощения в диапазоне красного света [2,3]. Про-
ведённые в данной работе измерения показали, что ШКС повышает активность супероксиддисмутазы в тканях миокарда, тогда как лазерное излучение вызывает противоположный эффект (табл. 1).
Таким образом, опыты продемонстрировали возможности компенсации последствий ишемии путём облучения миокарда низкоинтенсивным красным светом.
Таблица 1
Активность СОД, содержание диеновых и триеновых конъюгатов, малонового диальдегида в миокарде крыс в контрольных и опытных группах после моделирования ишемии и десяти минут реперфузии (
Условия опыта Активность СОД (у.е./мг тк.) ДК (опт.пл/мг ОЛ г тк.) ТК (опт.пл/мг ОЛ г тк.) МДА (опт.пл/мг ОЛ г тк.)
Первая контрольная группа (моделирования ишемии миокарда не производилось) 21,86±0,71 0,49±0,05 0,19±0,03 2,40±0,12
Вторая контрольная группа (моделирование ишемии миокарда) 16,75±0,93 0,58±0,08 0,18±0,03 3,09±0,13
Первая опытная группа (облучение миокарда НИЛИ) 13,06±0,81<* 0,49±0,04 0,21±0,03 2,43±0,09<*
Вторая опытная группа (облучение миокарда ШКС) 18,96±0,62<* 0,43±0,02<* 0,17±0,02 2,67±0,20<*
Примечание: *) - доверительные интервалы определены для уровня значимости р<0,05 по отношению ко второй контрольной группе;
ОЛ - общие липиды
Электронно-микроскопическое исследование миокарда животных контрольной серии показало, что кардиомиоциты (КМЦ) находились в состоянии сокращения; отдельные участки - пере-сокращения, а также дилатации в субсарколемальной области. В КМЦ наблюдалось умеренное расширение саркоплазматическо-го ретикулума (СПР) (табл. 2), и наличие в его просветах хлопьевидного осмиофильного материала (рис. а). Ядра большей частью были без ядрышек, имели небольшие инвагинации и маргинацию хроматина. В ряде КМЦ ядра локализовались в субсарколемаль-ной зоне. Сарколемма была набухшей, с очагами деструкции. Отмечалась гиперплазия митохондрий (МХ), их набухание, просветление матрикса, деструкция и дезориентация крист. У части МХ выявлена альтерация наружной мембраны. В саркоплазме обнаружены липидные включения, вторичные лизосомы, немногочисленные цитогранулы (ЦТГ).
При облучении НИЛИ в большинстве случаев КМЦ были в сокращённом состоянии, с участками пересокращения. Наблюдалась выраженная гетерогенность митохондрий, которая проявлялась наличием обычного вида МХ гипертрофированных форм, длиною в три саркомера (рис. в). Имело место набухание МХ (табл.2), просветление матрикса, фрагментация крист. Ядра имели незначительное просветление нуклеоплазмы и маргинацию хроматина. В некоторых КМЦ ядра находились на периферии клетки. СПР расширен. В саркоплазме были участки просветления, в отдельных случаях обнаружен диффузный внутриклеточный отёк, липидные включения, первичные и вторичные лизосо-мы. Содержание ЦТГ было незначительным.
Таблица 2
Морфометрические показатели миокарда белых крыс в постишемиче-ском периоде
Условия опыта Длина саркомера (мкм) Площадь митохондрий (мкм2) Площадь СПР (мкм2)
Интактные животные 1,68±0,08 0,49±0,06 0,02+0,003
Контроль (ложное облучение) 1,64±0,08 0,59±0,03<'' 0,05±0,01<''
Первая опытная группа (облучение миокарда НИЛИ) 1,54±0,05<** 0,82±0,03<*<** 0,13±0,04<*<**
Вторая опытная группа (облучение миокарда ШКС) 1,55±0,05<** 0,63±0,02<** 0,06±0,01<**
Примчеание: *) - доверительные интервалы определены для уровня значимости р=0,05 по отношению к контрольной группе;
**) - доверительные интервалы определены для уровня значимости р=0,05 по отношению к группе интактных животных
Во второй опытной группе (подвергнутой облучению ШКС), саркоплазма КМЦ не имела признаков просветления; наблюдались слабо набухшие МХ с сохранёнными кристами. Комплекс Гольджи хорошо выражен, в отдельных случаях гипертрофирован. Ядра с диспергированным хроматином содержали 1-
2 ядрышка. В саркоплазме выявлено значительно большее содержание ЦТГ, чем в контрольной группе и особенно в группе, облученной НИЛИ после облучения НИЛИ (рис.г).
Проведённый электронно-микроскопический анализ показал, что в контрольной серии у животных наряду с компенсаторноприспособительными реакциями (гиперплазия МХ и умеренное расширение СПР), присутствовали деструктивные процессы (участки пересокращения саркомеров, состояние МХ пула). При облучении НИЛИ деструктивные процессы оказались более выраженными (гипертрофия МХ, расширение цистерн СПР, внутриклеточный отёк, липидные включения и малое содержание ЦТГ), что приводит к нарушению сократительной функции миокарда.
Рис. Ультраструктура кардиомиоцитов белых крыс: а) интактного животного. Х 8900; б) контрольной серии. Х 11000; в) после воздействия НИЛИ. Х 11000; г) после воздействия ШКС. Х 14000.
Я - ядро, МХ - митохондрия, Л - липидная капля, СПР - саркоплазмати-ческий ретикулум, ЯД - ядрышко, ЦГ - цитогранулы.
Таким образом, электронно-микроскопическое изучение субклеточной структуры кардиомиоцитов в постишемическом периоде выявило адаптивные изменения при воздействии ШКС (активация ядер - эухроматин, наличие ядрышек, сохранность структуры МХ и значительное содержание ЦТГ) по сравнению с контрольной группой и после воздействия НИЛИ, где преобладали деструктивные процессы.
Литература
1. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс/ В.А. Бара-бой, И.И. Брехман, В.Г Голотин, Ю.Б. Кудряшов.- СПб.: Наука,
1992.- 148 с.
2. Владимиров, Ю.А. Фотобиологические принципы применения лазерного излучения / Ю.А. Владимиров, А.Н. Осипов, Г.И. Клебанов // Биохимия.- 2004.- №1.- С. 81-103.
3. Гацура, С.В. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на размеры экспериментального инфаркта миокарда, ПОЛ и сродство гемоглобина к кислороду / С.В. Гацура, С. П. Гладких, М.Н. Титов // Бюлл. эксп. биол. и мед.- 2004.-№ 4.- С. 403-405.
4. Гланц С. Медико-биологическая статистика/ С. Гланц .— М.: Практика, 1999.- 459 с.
5. Кару, Т.Й. Молекулярный механизм лечебного действия низкоинтенсивного лазерного света /Т.Й. Кару // Докл. АН СССР.- 1986.- Т. 291 (5).- С. 463-466.
6. Пероксиды липидов и атеросклероз. Ферментативная детоксикация липидных пероксидов в крови при ишемической болезни сердца, обусловленной атеросклерозом коронарных артерий / В.З. Ланкин [и др.]// Кардиология.- 1979.- № 19(6).-С. 71-76.
7. Ланкин, В. З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях/ В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков.- М.: Наука, 2001.- 78 с.
8. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Ф.З. Меерсон.- М.: Медицина, 1984.- 269 с.
9. Меерсон, Ф.З. Адаптация к периодической гипоксии в терапии и профилактике / Ф.З. Меерсон, В.П. Твердохлиб,
В.М. Боев, В. А. Фролов.- М.: Наука, 1989.- 70 с.
10. Монич, В.А. Патент РФ N25007201 / В.А. Монич, Е.А. Монич, В.М. Голиков.- 1994.
11. Монич, В.А. Низкоинтенсивный свет как физический фактор, регулирующий деятельность сердца в постишемическом периоде / В.А. Монич, С.Л. Малиновская, О.В. Другова, И.Б. Мухина // Бюлл. эксп. биол. и мед.- 1999.- № 9.- C. 302-304.
12. Монич, В.А. Эффекты воздействия красного света на по-стишемический миокард при реперфузии / В. А. Монич, О.В. Другова, О.В. Житникова // Бюлл. эксперимент. биол. и мед.- 2001.- Т. 131.- № 4.- С. 325-326.
13. Bagchi, D. Molecular mechanism of cardioprotection by a novel drape seed proanthocyandin extract/ D. Bagchi et al // Mutata-tion Research - 2003.- Feb. 523-524.- Р. 87-97.
14. Nishicimi, M. The occurrence of superoxide anion in rea-crion of redused phenaxinemetasultate and molecular oxygen / М. Nishicimi, А. Као, К. Yagi // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1972.- Vol. 146 (2).- Р. 849-854.
EFFECT OF LOW -POWER ELECTROMAGNETIC RADIATION ON COMPENSATION OF MYOCARDIUM FUNCTIONAL STATE AFTER ISCHEMIA
V.A. MONICH, S.L. MALINOVSKAJA, V.F. LAZUKIN,
A.P. BAVRINA, T.I. SOLOVJEVA, E.I.YAKOVLEVA,
M.V. RAXCHEEVA
Nizhny Novgorod State Medical Academy
The influence of low - power laser and wide-band red light on activities of lipid peroxidation and SOD and also on ultrastructure of the cardiac muscle tissues were investigated after modeling of ischemia of myocardium. A confident difference between the effects of laser and wide - band light was discovered.
Key words: wide-band light, laser, ischemized heard, peroxide oxidation of lipids.
УДК 616.65-002
ВИБРОМАГНИТОЛАЗЕРНАЯ ТЕРАПИЯ В КОМПЛЕКСНОЙ НЕМЕДИКАМЕНТОЗНОЙ КОРРЕКЦИИ ЭРЕКТИЛЬНОЙ ДИСФУ4НКЦИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПРОСТАТИТОМ
А.Т. ТЕРЕШИН*, И.Б. СОСНОВСКИЙ**, Г.Д. ДМИТРЕНКО***,
А.Б. ИХАЕВ****
Проведена вибромагнитолазерная терапия с использованием сексологической тренинг-терапии 40 больным хроническим абактериаль-ным простатитом с эректильной дисфункцией, в результате чего купирование алгического синдрома наступило у 80,6%, дизурического
- у 77,3%, психо-эмоционального напряжения - у 62,5%, вегетативной дистонии - у 62,5%, эректильной дисфункции - у 60%, нормализовались объем предстательной железы у 70%, гемодинамика предстательной железы - у 70%, интратестикулярная гемодинамика
- у 67,5%, гемодинамика в кавернозных и дорсальных артериях - у 60%, микционная функция мочевого пузыря - у 75%, параметры фрикционной стадии - у 62,5%, параметрированные фазы эрекци-онной составляющей - у 62,5%, функциональное состояние составляющих копулятивного цикла - у 60%, функциональная активность гипофизарно-надпочечниково-тестикулярной системы - у 60% больных с сильной и средней половыми конституциями.
Ключевые слова: хронический простатит, эректильная дисфункция, лазерная терапия.
Хронический простатит (ХП) в структуре урологической патологии занимает 35-70%, в 43-85% случаев вызывая эректильную дисфункцию (ЭД), снижение качества жизни [2,14,15]. При этом до 90% всех больных имеют абактериальный простатит, при котором современные культуральные методы исследования не позволяют установить бактериальный агент, вызывающий заболевание [12,15]. Ряд исследователей [1,2,4,12,13,15] полагают, что в большинстве случаев этиология, патогенез и
* ФГБУ «Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии Федерального медико-биологического агентства», проспект Кирова, 30, г.Пятигорск, Ставропольский край
Государственное учреждение здравоохранения «Краевой клинический онкологический диспансер», ул. Димитрова, 146, г. Краснодар, Краснодарский край, 350040
ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 им. профессора С.В. Очапов-ского, ул. 1 Мая, 167, Краснодар,
Республиканская клиническая больница, ул. Тасуева, 8, Ленинский район, г. Грозный
