CC BY
7
ДК GI6.36-0IS. 1-02:615.916:546:811/.814
В. Н. Левицкая, Л. И. Бадаева
ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ ОЛОВООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ НА УЛЬТРАСТРУКТУРУ ГЕПАТОЦИТОВ ПЕЧЕНИ КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Широкое применение оловоорганических соединений в качестве стабилизаторов полиаинилхлоридпых материалов и искусственных кож вызывает необходимость изучения их токсического действии на организм. Данные литературы о токсикодинамнке оловоорганических соединений свидетельствуют о том, что при однократном и повторном воздействии на организм теплокровных они оказывают полнтроп-ное токсическое действие, выраженность которого зависит от дозы, длительности контакта и их химического строения [1. 2, 6]. К тому же отмечено, что оловоорганическнс соединения обладают кумулятивными свойствами [3—5].
Выраженный характер общетокснческого действия оловоорганических соединений и их способность к кумуляции подтверждаются выявленными сдвигами ряда показателей функционального состояния органов животных. Так, в опытах, проведенных В. Т. Мазаевым и соавт. [4], W. Seinen и соавт. [9], установлено, что органические соединения олова отрицательно влияют на функциональное состояние центральной и вегетативной нервной системы. Механизм нейротропного действия, по мненню этих авторов, в нарушении биоэлектрической активности коры мозга и чувствительности н-адреналовых структур сосудов. Оловоорганическнс соединения влияют на реакцию обмена ионов С1_ и ОН" во внутренних мнтохондриальных мембранах клеток коры мозга, вызывают облитерацию сосудов мозга, разрастание белого вещества и сглаживание мозговых извилин, блокируют нервно-мышечную передачу. В результате указанных изменений у животных при интоксикации оловоор-ганическнми соединениями развиваются атаксия, мышечная слабость, парезы, параличи, расстройство зрения и другие неврологические явления.
Органические соединения олова в большей либо меньшей степени в зависимости от дозы в остром, подостром и хроническом экспериментах на животных вызывают угнетение антитоксической, синтетической и секреторной функций печени, увеличение активности щелочной фосфа-тазы в сыворотке, почках и печени, снижение активности аминотрансферазы в крови [7].
Учитывая важную роль печени в процессах детоксика-ции чужеродных веществ, а также малую изученность морфологических изменений в печени при действии оловоорганических соединений, мы изучили ультраструктуру гепато-цнтов печени при однократном введении в желудок белых крыс '/s LDso различных представителей этой группы соединений (тнооксидиоктилолова, диоктилтноглнколята диокти-лолова и дналкилмалеата олова).
В опыте использовано 4 группы животных.
Крысам 1-й группы вводили в желудок тнооксидиокти-лолово в дозе 446 мг/кг, крысам 2-й группы — 420 мг/кг диоктилтноглнколята диоктнлолова, крысам 3-й группы — 580 мг/кг дналкилмалеата олова, крысам 4-й (контрольной) группы — растительное масло, на котором готовились препараты. Исследования проводили на 5, 15 и 30-е сутки после применения препаратов. Как у подопытных, так и у контрольных животных материал для ультраструктурных исследований отбирали из верхней зоны правой доли печени. Кусочки печени фиксировали в глутаральдегиде на фосфатном буфере, постфнксашно осуществляли в 1 % растворе четырехокиси осмия, заливку — в аралдитовых смолах. Срезы ткани изготовляли на ультрамнкротоме фирмы LKB, контрастировали по Рейнольсу и просматривали в электронном микроскопе ЭМВ-100ЛМ.
При воздействии тнооксидиоктилолова через 5, 15 и 30 сут в печени животных наблюдались ультраструктурные изменения ядер, митохондрий и эндоплазматического рети-
кулума. На 5-е сутки эксперимента в цитоплазме гепато-цитов содержались липиды, лизосомы, фагоцитомы и мие-лнноподобные структуры. Встречались очаговые расширения перинуклеарного пространства, маргинальная конденсация хроматина, гипертрофированные митохондрии с очаговой гомогенизацией матрнкса и деструкцией крист. Помимо описанных изменений ультраструктуры гепатоцитов, на 15-е сутки эксперимента выявлены также гипертрофированные митохондрии с очагово-просветленным матрнксом и короткими расширенными крнстамк. На 5-е и 15-е сутки в поле зрения обнаружено небольшое число интактных гепатоцитов. Через 30 сут от начала эксперимента отмечались значительные скопления полисом в цитоплазме, большая плотность канальцев эндоплазматического ретикулума и рибосом на их мембранах, а также наличие рибосом в мат-риксе гипертрофированных митохондрий. Указанные ультраструктурные изменения в гепатоцитах через 30 сут после введения препарата свидетельствовали об интенсификации клеточного метаболизма и могли быть отражением индуцирующего влияния тнооксидиоктилолова на процессы внутриклеточного биосинтеза.
При воздействии диоктилтноглнколята диоктнлолова на 5-е и 15-е сутки эксперимента на фоне интактных митохондрий встречались гипертрофированные митохондрии с короткими расширенными кристами. В матриксе отдельных ф митохондрий содержались миелиноподобные структуры, наличие которых указывало на нарушение процессов метаболизма. При этом для эндоплазматического ретикулума была характерна ультраструктурная дезорганизация, проявляющаяся увеличением агранулярной поверхности мембран и очаговым расширением просвета канальцев. На 30-е сутки после введения диоктилтноглнколята диоктнлолова в гепатоцитах сохранялись некоторые морфологические признаки ультраструктурной дезорганизации митохондрий и эндоплазматического ретикулума. Наблюдались очаговая фрагментация и деструкция эндоплазматического ретикулума, гомогенизация матрикса митохондрий и расширение интеркристных пространств. В цитоплазме гепатоцитов встречались вакуолярные и миелиноподобные структуры, фагоцитомы, липиды и лизосомы, что может указывать на изменение интенсивности процессов детоксикацин, биосинтеза, окислительного фосфорилирования и тканевого дыхания.
При воздействии дналкилмалеата олова через 5 и 15 сут в гепатоцитах печени крыс отмечались очаговая агрануляр-ность мембран, неравномерность ширины просвета канальцев, а также лишенные рибосом расширенные участки их. К 30-м суткам после воздействия препарата в цитоплазме гепатоцитов обнаруживались вакуолярные и миелиноподобные структуры. Наряду с этим встречались очаговые скопления электронно-плотных гранул на наружной поверхности кариолеммы возле расширенных пор, в цитоплазме— гликоген, лнпиды, полисомы, что может служить признаком интенсификации внутриклеточного метаболизма, направленного на нормализацию структуры и функции гепатоцитов.
При воздействии оловоорганических соединений на организм лабораторных животных в ультраструктуре гепатоцитов печени наблюдались фазовость деструктивных и регенеративных изменений, причем деструктивные процессы по времени и интенсивности были более выражены при интоксикации аналогичной дозой диоктилтиогликолята дио- . ктилолова, менее — тнооксидиоктилолова и минимально — дналкилмалеата олова.
Относительно поздние сроки появления процессов регенерации (30-е сутки и позже), по-видимому, могут объяс-
нить механизм кумулятивного действия органических со-^ единений олова — развитие функциональной и материальной кумуляции. Это согласуется с данными литературы о способности длительного нахождения оловоорганических соединений в организме животных при проведении опытов с меченными '"Бп изотопами [8].
Полученные данные коррелируют с результатами проведенных нами ранее биохимических исследований, свидетельствующими об угнетении активности НАДФ-Н-завнси-мых монооксигеназ — одного из чувствительных показателей при оценке воздействия этой группы соединений на организм теплокровных в условиях острого и хронического экспериментов.
Представленные материалы отчетливо демонстрируют воздействие некоторых оловоорганических стабилизаторов на ультраструктуру гепатоцнтов печени крыс. Ультраструктурные изменения в печени более выражены и имеют большую распространенность при воздействии серусодержащих оловоорганических соединений.
Выводы. 1. При однократном поступлении в организм теплокровных животных токсических доз оловоорганических стабилизаторов (тиооксидиоктилолова, диоктнл-тиогликолята диоктилолова и дналкилмалеата олова) происходят ультраструктурные изменения в гепатоцитах, зависящие от химического строения данных соединений. При этом тиосодержащие органические соединения олова наиболее токсичны.
2. Результаты изучения ультраструктурных изменений
гепатоцитов печени крыс прн воздействии оловоорганических стабилизаторов могут быть использованы при разработке гигиенических нормативов для этой группы соединений.
Литература
1. Беляева H. Н.. Быстрова Т. А., Ревазова Ю. А. и др — Гиг. и сан.. 1976, № 5, с. 36—39.
2. Заварова Т. В. Исследование алкил- и арилоловопроиз-водных в качестве термостабнлизаторов ПВХ. Дне. канд. Уфа, 1970.
3. Левицкая В. Н. — В кн.: Научная сессия по химии и технологии органических соединений серы и сернистых нефтей. 14-я. Тезисы докладов. 14-я. Рига, 1976. с. 96-97.
4. Мазаев В. Т., Игумнов А. С., Пай В. Н. и др — Гиг и сан., 1977, № 4, с. 24—28.
5. Стацек Н. К.. Кучеренко Т. В. — В кн.: Гигиена применения полимерных материалов. Киев, 1976, с. 61—62.
6. Чарыев О. Г. — Изв. АН ТССР. Серия биол. наук, 1975 № 1, с. 93—94.
7. Aldridge W. N. — In: New Chem. and Appl. Symp 17-st meeting. New York, 1976, p. 6—7.
8. H er ok J., Gotte H. — In: Biol, and Sei. Mexico. 1961,
p. 177—188.
9. Seinen W. №.. Ellems M. I. — Toxicol, appl. Pharmacol. 1976, v. 35. p. 63-75.
Поступила 10.01.84
УДК 614.7:579.842.14]-078:616.98:579.842.14/-022.3
Л. П. Плахотя
ВЫЖИВАЕМОСТЬ САЛЬМОНЕЛЛ В АЭРОЗОЛЬНОМ СОСТОЯНИИ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТА
Минский медицинский институт
Повсеместное распространение сальмонеллезной инфекции, неуклонный рост заболеваемости с преимущественным вовлечением в эпидемический процесс детей раннего возраста, усиление внутрибольиичного распространения саль-монеллезов диктуют необходимость дальнейшего изучения путей и факторов передачи этой инфекции среди людей.
Основным путем передачи возбудителя инфекции при сальмонеллезах является пищевой, что обусловлено заражением исходного пищевого сырья или обсеменением пищевых продуктов в процессе обработки, транспортировки и реализации [4, 9]. Ввиду высокой резистентности сальмонелл к неблагоприятным факторам внешней среды не исключены случаи заражения сальмонеллезом через воду [6, 10]. Особую актуальность в настоящее время приобретают внутрибольничные заболевания, вызываемые преимущественно госпитальными штаммами сальмонеллы тнфиму-риум. Внутрибольничные вспышки охватывают чаще всего детей раннего возраста, ослабленных больных, пожилых людей и распространяются контактно-бытовым путем [1, 7]. В последние годы в литературе широко обсуждается вопрос о возможности аэрогенного пути распространения сальмонеллезной инфекции [1, 2]. Имеется ряд сообщений, указывающих на участие пылевого фактора в возникновении госпитальных вспышек сальмонеллезов, вызываемых различными сероварамн сальмонелл [8, 12, 14, 15].
Распространение сальмонелл аэрогенным путем возможно и при использовании бытовых сточных вод для дождевания полей орошения прн определенных способах очистки отработанных вод на очистных сооружениях, что приводит к загрязнению атмосферного воздуха кишечной микрофлорой, в том числе и патогенной, и распространению патогенных бактерий токами воздуха на значительные расстояния [3, II, 13]. Несмотря на наличие неблагоприятных факторов внешней среды, сальмонеллы выживают в воздухе лучше, чем коли-бактерии, используемые в качестве индикаторных бактерий микробного загрязнения воздуха [16].
В связи с возможностью участия воздуха в качестве фактора передачи сальмонеллезной инфекции мы сочли необходимым изучить длительность сохранения сальмонелл в воздухе в условиях статической герметичной камеры.
Для изучения длительности сохранения сальмонелл в искусственно созданном аэрозоле нами была использована установка для получения полидисперсного бактериального аэрозоля [5]. В качестве тест-микроорганизма применяли эталонный штамм сальмонеллы тнфимуриум 433, типичный по морфологическим, серологическим и биохимическим свойствам. Культуру выращивали на мясо-пептонном агаре прн температуре 37 °С в течение 18—20 ч, после чего смывали физиологическим раствором и готовили бактериальную суспензию для расчета 200 млн. микробных клеток на 1 мл по оптическому стандарту мутности Института им. Л. А. Тарасевича. Для получения суспензии требуемой концентрации в качестве растворителя использовали 0,85 % раствор хлористого натрия и 0,1 % раствор желатина в физиологическом растворе. Приготовленную бактериальную взвесь заливали в приемник генератора аэрозоля, в качестве которого служил пневматический распылитель от аэрозольного ингалятора АИ-1 с отбойником. При подаче в генератор воздуха со скоростью 6 л/мни в течение 20 мин в камере создавался бактериальный аэрозоль в концентрации 100—200 тыс. жизнеспособных микробных клеток в 1 м-' (по результатам посева воздуха после распыления). Исследуемые пробы воздуха с частицами бактериального аэрозоля отбирали с помощью аппарата Кротова через каждые 30 мни на чашки со средой Эндо, которые выдерживали в термостате при 37 °С в течение 48 ч, после чего подсчитывали число выросших колоний н делали пересчет на 100 л воздуха. Выборочно проверяли биохимические и серологические свойства выросших на среде колоний микроорганизмов. Рассчитав затем количество микробных клеток, приходящихся на единицу объема воздуха в исходном аэрозоле (сразу после распыления) и после экспонирования
