CC BY
30
DOI 10.24412/2074-5036-2021-1-42-47 УДК 619:616.995.132:616-08:616-008.8:636.7
Ключевые слова: дирофиляриоз, собаки, микрофилярии, лечение, микрофилярицидная терапия, морфологические показатели крови, биохимические показатели крови
Key words: dirofilariasis, dogs, microfilariae, treatment, microfilaricidal therapy, morphological parameters of blood, biochemical parameters of blood
Тазаян А. Н., Кривко М. С., Тамбиев Т. С.
ВЛИЯНИЕ МИКРОФИЛЯРИЦИДНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ДИРОФИЛЯРИОЗЕ СОБАК НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ
THE INFLUENCE OF MICROFILARICIDAL THERAPY IN DIROFILARIASIS OF DOGS ON MORPHOLOGICAL AND BIOCHEMICAL BLOOD PARAMETERS
ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет» Адрес: 346493, Россия, п. Персиановский, ул. Кривошлыкова, д. 24
Don State Agrarian University. Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Address: 346493, Russia, Persianovsky, Krivoshlykov st., 24
Тазаян Артур Ноярович, к. в. н., доцент, декан факультета ветеринарной медицины. E-mail: [email protected].
Tazayan Arthur Noyarovich, PhD in Veterinary Science, Associate Professor, Dean of the Faculty of Veterinary Medicine. E-mail: [email protected]. Кривко Михаил Сергеевич, к. в. н., доцент кафедры паразитологии, ветсанэкспертизы и эпизоотологии.
E-mail: [email protected]. Krivko Mikhail Sergeevich, PhD in Veterinary Science, Associate Professor of Parasitology, Veterinary and Sanitary Examination and Epizootology Dept. E-mail: [email protected]. Тамбиев Тимур Сергеевич, к. в. н., и. о. зав. кафедрой паразитологии, ветсанэкспертизы и эпизоотологии.
E-mail: [email protected]. Tambiev Timur Sergeevich, PhD in Veterinary Science, Acting Head of Parasitology, Veterinary and Sanitary Examination and Epizootology Dept. E-mail: [email protected].
Аннотация. Целью работы являлось изучение влияния микрофилярицидной терапии при дирофиляриозе собак на морфологические и биохимические показатели крови. Установлено, что при данном заболевании отмечается развитие умеренной анемии, что выражается снижением количества эритроцитов и гемоглобина. Вместе с этим отмечается увеличение скорости оседания эритроцитов, уровня лейкоцитов и эозинофилов на фоне лимфопении. Биохимические показатели крови больных собак в целом носят неспецифический характер и отображают вторичные изменения в организме и характеризуются незначительным повышением ферментов печени. Все применяемые нами препараты обладают пролонгированным действием на микрофилярии, однако препарат «Отронгхолд» показал 100 %-ный эффект уже на 30 день после начала лечения, в сравнении с препаратами «Диронет» и «Мильбемакс», у которых данный эффект развился только к 45 дню. Морфологические и биохимические показатели крови у собак, которым применяли препарат «Стронгхолд», на 30 день курса терапии соответствовали таковым у клинически здоровых животных. У собак других опытных групп данные показатели также соответствовали физиологической норме, за исключением уровня мочевины и креатинина, что является следствием повреждающего действия токсинов гельминтов, образующихся в результате болезни иммунных комплексов, а также большей токсичности препаратов «Диронет» и «Мильбемакс».
Summary. The purpose of the work was to study the effect of microfilariae therapy of dirofilariasis of dogs on morphological and biochemical blood parameters. It was found that with this disease the development of moderate anemia is noted, which is expressed by a decrease in the number of erythrocytes and hemoglobin. Together with that, there is an increase in the erythrocyte sedimentation rate, the level of leukocytes and eosinophils against the background of lymphopenia. The biochemical parameters of the blood of sick dogs are generally non-specific character and reflect secondary changes in the organism and are characterized by a slight increase in liver enzymes. All the drugs we use have a prolonged effect on microfilariae, however, "Stronghold" showed a 100 % effect as early as 30 days after the start of treatment, in comparison with "Dironet" and "Milbemax", in which this effect developed only by the 45th day. Morphological and biochemical parameters of blood in dogs receiving "Stronghold" on the 30th day of the course of therapy were the same as in clinically healthy animals. In dogs of other experimental groups, these indicators also corresponded to the physiological norm, with the exception of the level of urea and creatinine, which is a consequence of the damaging effect of helminth toxins formed as a result of the disease of immune complexes, as well as the greater toxicity of the drugs "Dironet" and "Milbemax".
Введение
Рост заболеваемости дирофиляриозом среди собак является актуальной проблемой для ветеринарной науки и практики. По отчетным данным ветеринарных служб краев, областей и республик юга России, дирофиляриоз занимает лидирующее место в сравнительном анализе этиологической структуры заболеваемости собак заразными болезнями. Данное заболевание наносит существенный ущерб как владельцам мелких домашних животных, так и служебному собаководству [1, 3, 9].
В последние годы отмечена тенденция к расширению границ распространения данной инвазии. Ее регистрируют не только в южных и восточных районах России, но и в средней полосе. Распространение возбудителя ди-рофиляриоза в европейской части России является следствием отсутствия своевременной дегельминтизации зараженных животных, повсеместного распространения комаров, высокой степени пораженности дефинитивных и промежуточных хозяев. Значительную роль в распространении и поддержании очагов дирофиляриоза оказывают служебные собаки силовых структур. Они являются важным источником распространения инвазии на различных территориях в связи с частой сменой мест их службы и перемещением по всей территории России [6-8].
Проблема распространения дирофиляриоза также связана с несвоевременной диагностикой из-за длительного латентного периода заболевания (до 5 лет), в течение которого в крови циркулируют личинки дирофилярий, и отсутствия выраженных клинических признаков болезни при малой интенсивности инвазии [2, 7].
В настоящее время ареал дирофилярио-за охватывает территорию 53 субъектов РФ с тёплым и влажным климатом. Наиболее часто заболевание регистрируется на Северном Кавказе, в Крыму, Астраханской, Волгоградской, Ростовской и Саратовской областях, Краснодарском крае, на Ставрополье, Дальнем Востоке - в Амурской области, Хабаровском и Приморском краях, на Сахалине [3, 6, 10].
Учитывая отсутствие препаратов, эффективных против взрослых дирофилярий, стратегия борьбы с дирофиляриозом собак
направлена на применение микрофилярици-дов. Однако, у отдельных животных после их применения в лечебных дозах проявляется анафилактическая реакция, особенно у собак мелких пород и при высокой микро-дирофиляриемии. Поэтому поиск оптимальных микрофилярицидных препаратов является весьма актуальным для ветеринарной практики [4].
Целью наших исследований являлось определение эффективности различных ан-тигельминтных препаратов при микрофиля-рицидной терапии собак, больных дирофи-ляриозом.
Материалы и методы
Работа выполнялась на кафедре паразитологии, ветсанэкспертизы и эпизоотологии ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет» и в ряде ветеринарных клиник г. Ростова-на-Дону. Путем микроскопии свежей капли крови было выявлено 30 инвазированых собак. Из них при помощи метода количественного обнаружения микро-филярий в сыворотке крови, были отобраны 15 животных, возрастом от трех до шести лет, с приблизительно одинаковой степенью инвазии (у всех собак отмечалась быстрая утомляемость, вялость, одышка, кашель, бледность слизистых оболочек, нарушение сердечного ритма). Для установления сравнительной эффективности различных препаратов были сформированы 4 группы животных (три опытные и одна контрольная) по 5 голов в каждой. Контролем служили клинически здоровые животные.
За две недели до предполагаемой микро-филярицидной терапии животным опытных групп была назначена поддерживающая терапия («Гепатовет», «Зоокард», ацетилсалициловая кислота), направленная на подавление агрегации тромбоцитов, поддержания работы сердца и печени.
Микрофилярицидная терапия проводилась следующим образом. Животным первой опытной группы применяли препарат «Ди-ронет 500» перорально в дозе 1 таблетка на 10 кг массы животного один раз в 30 дней. Во второй опытной группе был назначен препарат «Мильбемакс» перорально из расчета
Таблица 1
Уровень микрофиляриемии у собак до лечения, п=15
Группа животных Применяемый препарат Количество микрофилярий в 1 мл крови
Опытная 1 «Диронет» 78
Опытная 2 «Мильбемакс» 83
Опытная 3 «Стронгхолд» 86
0,5 мг мильбемицина оксима и 5 мг празик-вантела на 1 кг массы тела один раз в 30 дней. В третьей опытной группе применяли препарат «Стронгхолд 12» наружно в виде капель на холку из расчета 6,0 мг селамектина на 1 кг массы животного один раз в 30 дней. Все назначенные препараты применяли в течение трех месяцев.
Для изучения эффективности назначенных препаратов и оценки работы внутренних органов проведены гематологические исследования. Проведение общего анализа крови собак осуществляли при помощи полуавтоматического гематологического анализатора. Определение биохимических показателей крови собак проводили на автоматическом биохимическом анализаторе с помощью соответствующих диагностических наборов.
Результаты и обсуждение
Концентрацию микрофилярий в крови определяли у всех собак из каждой опытной группы на 1, 15, 30, 45, 60, 75 и 90 сутки после применения препаратов. При исследовании опытных групп на микрофиляриемию, были получены следующие результаты (табл. 1).
Из таблицы видно, что уровень микрофи-ляриемии во всех опытных группах приблизительно одинаковый. Микрофилярии, несмотря на относительно небольшую величину, циркулируя в крови, оказывают существенное воздействие на капиллярную сеть, что может приводить к воспалительным процессам, а это в свою очередь приводит к изменению гематологических показателей крови.
Для более объективной оценки действия препаратов был проведен мониторинг мор-
Таблица 2
Показатели, ед. измерения Клинически здоровые животные Группы собак, больных дирофиляриозом
1 группа 2 группа 3 группа
Эритроциты, 1012/л 8,3±0,16 7,32±1,8 7,51±1,9 7,48±1,8
Гемоглобин, г/л 165±2,8 139,9±23,6 141,2±24,1 138,6±23,8
СОЭ, мм/ч 4,0±1,3 9,6±1,1 9,2±1,6 10,8±1,4
Лейкоциты, 109/л 9,66±0,2 13,54±4,3 13,24±4,7 13,44±4,4
Эозинофилы, % 5,5±0,2 10,7±9,8 10,5±9,9 10,4±9,8
Палочкоядерные ней-трофилы, % 4,8±0,2 12,3±14,4 11,8±14,5 13,6±14,7
Сегментоядерные, % 52,7±1,4 56,8±15,1 55,2±15,1 54,6±15,2
Лимфоциты, % 32,4±1,2 15,9±10,1 18,1±10,2 17,3±10,4
Моноциты, % 4,6±0,2 4,3±3,2 4,4±3,3 4,1±3,5
Альбумин, г/л 26,4±0,5 25,80±4,1 25,42±4,2 25,67±4,1
Общий белок, г/л 66,7±0,8 62,8±2,5 63,5±2,4 62,9±2,6
АЛТ, Е/л 82,3±9,4 92,13±42,4 93,81±45,2 89,25±43,4
Билирубин, мкмоль/л 5,3±0,95 6,5±2,2 6,6±2,5 6,3±2,3
Мочевина, ммоль/л 6,1±1,5 10,7±7,4 11,1±7,5 10,9±7,8
Глюкоза, ммоль/л 4,8±0,2 5,3±8,7 5,9±8,9 5,6±8,7
Креатинин, мкмоль/л 80±5,3 101,5±62,4 98,6±62,8 110,5±62,3
Щелочная фосфатаза, Е/л 49,4±9,7 69,6±40,2 65,7±40,3 68,6±40,2
АСТ, Е/л 34±4,8 53,6±28,3 57,7±28,4 55,9±28,7
Морфологические и биохимические показатели крови у собак до начала терапии, п=20
фологических и биохимических показателей крови до и после проведения поддерживающей и микрофилярицидной терапии (табл. 2).
Из полученных данных видно, что у собак, больных дирофиляриозом, развивается анемия, о чем свидетельствует снижение количества эритроцитов до 7,32±1,8*1012/л и гемоглобина до 138,6±23,8 г/л. Снижение данных показателей обусловлено депрессией красного костного мозга экзотоксинами, которые выделяются в процессе жизнедеятельности гельминтов. Кроме того, интоксикация организма животных эндо- и экзотоксинами приводит к увеличению скорости оседания эритроцитов (10,8±1,4 мм/ч - самый большой показатель в третьей группе).
Также число лейкоцитов в крови повышается, со сдвигом нейтрофилов вправо. Увеличивается содержание палочко-ядерных (13,6±14,7%) и сегментоядерных (56,8±15,1%) нейтрофилов на фоне лимфопе-нии (15,9±10,1%). Количество моноцитов существенно не меняется (4,3±3,2%).
Стоит отметить изменение количества эо-зинофилов в сравнении с контрольной группой до 10,7±9,8%, что указывает на наличие инвазии и обращает на себя внимание при появлении личиночной формы филярий.
В целом гематологические и морфологические изменения показателей крови носят неспецифический характер и отображают вторичные изменения в организме больных животных.
Анализируя биохимические показатели, стоит отметить незначительное повышение показателей ферментов печени. У опытных групп уровни аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы и билирубина были выше по сравнению с контрольной группой в 1,1, 1,7 и 1,2 раза соответственно. Также отмечали незначительное снижение содержания общего белка и альбуминов. Одновременно с этим отмечалось повышение уровня мочевины
(11,1±7,5 ммоль/л), глюкозы (5,9±8,9 ммоль/л) и креатинина (110,5±62,3 мкмоль/л) в сыворотке, что характеризует нарушения почечной фильтрации и, следовательно, указывает на воспалительные поражения почек.
Биохимические показатели крови собак, больных дирофиляриозом, в целом носят неспецифический характер и отображают вторичные изменения в организме. Ни один из вышеперечисленных показателей не может служить специфическим биомаркером для постановки диагноза.
В связи с тем, что лечение, направленное на уничтожение половозрелых паразитов, имеет ряд серьезных недостатков (высокая токсичность препаратов, аллергические реакции, эмболия сосудов мертвыми паразитами), данная терапия не проводилась.
Для уничтожения личинок проводилась микрофилярицидная терапия. Ее осуществляли с целью устранения повреждающего действия паразитов на органы и ткани организма, недопущения заражения других собак, а также для предупреждения развития половозрелых особей. Результаты микрофилярицидной терапии представлены в табл. 3.
Таким образом, видно, что все применяемые нами препараты обладают пролонгированным действием на микрофилярии, однако стоит отметить, что препарат «Стронгхолд» обладает более выраженным и быстрым действием поскольку показал 100%-ный эффект уже к 30 дню после начала лечения. Длительное применение данных препаратов с интервалом 30-35 дней губительно действует на микрофилярии, не допускает заражение других собак, предотвращает распространение инвазии и не дает возможности превращения микрофилярий в дирофилярий. Все собаки после проведенного лечения чувствовали себя хорошо, никаких отклонений не выявлено. В последующем владельцам опытных
Таблица 3
Эффективность микрофилярицидных препаратов при дирофиляриозе собак, п=15
Группа животных Применяемый препарат Промежуток исследования после применения препарата, сутки
1 15 30 45 60 75 90
Опытная 1 «Диронет» 78 40 5 - - - -
Опытная 2 «Мильбемакс» 83 38 8 - - - -
Опытная 3 «Стронгхолд» 86 25 - - - - -
но. Неполное восстановление данных показателей указывает на продолжающуюся гипохромную анемию у животных первой и второй групп, в то время как значение аналогичных критериев третьей группы соответствует физиологической норме.
Общее количество лейкоцитов соответствует показателю клинически здоровых животных в третьей (9,3±0,5*109/л), во второй (11,7±0,4*109/л) и в первой группе (10,2±0,4*109/л). По-видимому, небольшое уменьшение количества лейкоцитов в крови связанно с нормализацией гомеостаза и перераспределением соотношения разных видов лейкоцитов, обеспечивающих оптимальный уровень иммунного ответа. Относительное количество эозинофилов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов снизилось. Одновременно с этим увеличилось количество моноцитов и лимфоцитов. Однако лишь в третьей группе они наиболее соответствуют показателям, характерным для клинически здоровых животных.
Биохимические показатели крови у собак третьей группы практически соответствуют таковым у здоровых животных. Такая дина-
Таблица 4
Морфологические и биохимические показатели крови собак на 30-й день терапии, п=20
Показатели, ед. измерения Клинически здоровые животные Группы собак, больных дирофиляриозом
1 группа 2 группа 3 группа
Эритроциты, 1012/л 8,3±0,1 7,7±0,5 8,1±0,6 8,5±0,6
Гемоглобин, г/л 165±2,8 146,7±3,4 158,1±3,5 168,8±3,4
СОЭ, мм/ч 4,0±1,3 5,1±1,2 5,3±1,3 4,2±1,4
Лейкоциты, 109/л 9,6±0,2 10,2±0,4 11,7±0,4 9,3±0,5
Эозинофилы, % 5,5±0,2 6,4±0,3 7,1±0,4 5,8±0,3
Палочкоядерные, % 4,8±0,1 4,9±0,3 5,2±0,3 4,3±0,4
Сегментоядерные, % 52,7±1,4 54,8±1,2 54,1±1,1 52,5±1,1
Лимфоциты, % 32,4±1,2 29,8±2,6 28,1±0,7 32,8±1,4
Моноциты, % 4,6±0,12 5,1±0,4 5,3±0,4 4,6±0,3
Альбумин, г/л 26,4±0,5 25,9±0,3 26,2±0,3 26,4±0,4
Общ. белок, г/л 66,7±0,8 66,8±0,6 66,6±0,9 66,4±0,8
АЛТ, Е/л 82,3±9,5 88,9±9,3 85,6±7,8 81,3±7,2
Билирубин, мкмоль/л 5,3±0,2 5,3±1,1 5,2±0,9 4,9±0,2
Мочевина, ммоль/л 6,0±1,5 7,9±1,1 7,2±1,7 5,8±1,5
Глюкоза, ммоль/л 4,8±0,2 4,9±0,2 4,7±0,3 4,6±0,3
Креатинин, мкмоль/л 80±5,3 94,6±12,3 90,5±4,3 79,2±5,1
Щелочная фосфотаза, Е/л 49,4±9,7 52,4±40,2 51,4±10,3 48,3±12,5
АСТ, Е/л 34±4,8 32,1±3,6 34,6±4,1 33,5±3,5
собак было предложено самостоятельно проводить обработки против паразитов и продолжать поддерживающую терапию с последующим контролем на микрофилярии.
Морфологические и биохимические показатели крови у собак трех групп после курса комплексной терапии отображают результаты терапии. Показатели опытных групп приблизились к показателям клинически здоровых животных, относительно показателей до лечения, но в первой и второй опытной группах по-прежнему указывали на наличие патологических процессов в организме, тогда как в третьей опытной группе они соответствовали таковым у клинически здоровых животных (табл. 4).
Как видно из таблицы, скорость оседания эритроцитов во всех опытных группах приближается к норме, что является следствием устранения явлений интоксикации организма продуктами жизнедеятельности гельминтов в процессе лечения (4,2±1,4 мм/ч).
Уровень эритроцитов (8,5±0,6*1012/л) и гемоглобина (168,8±3,4 г/л) у животных третьей опытной группы выше, чем у второй (8,1±0,6*1012/л, 158,1±3,5 г/л) и первой (7,7±0,5*1012/л, 146,7±3,4 г/л) соответствен-
мика указывает на эффективное восстановление гомеостаза в процессе лечения. У собак первой и второй групп также отмечалась нормализация биохимических показателей крови за исключением уровня мочевины и креатинина. Совокупность этих двух показателей характеризует нарушение нормальной почечной функции, возможно, в результате повреждающего действия токсинов гельминтов, образующихся в результате болезни иммунных комплексов, а также от проводимой терапии.
В результате проведенной комплексной терапии по лечению больных животных можно сделать вывод о том, что все исследуемые препараты являются эффективными для микрофилярицидной терапии, однако более быстрый терапевтический эффект и меньшая токсичность отмечается при применении препарата «Стронгхолд». Также выяснили, что применение микрофилярицидных препаратов в сочетании с поддерживающей терапией нормализует общее состояние животных и работу внутренних органов.
Список литературы
1. Багаева У В. Эпизоотическая ситуация по гель-минтозам собак в Северной Осетии / У В. Багаева, М. М. Бочарова // Российский паразитологический журнал. 2008. № 4. С. 26-31.
2. Владыкин К. С. Методы диагностики дирофи-ляриоза у собак / К. С. Владыкин, Е. Н. Любченко // Аграрный вестник Приморья. 2016. № 2 (2). С. 10-12.
3. Владыкин К. С. Некоторые биохимические показатели крови собак при дирофиляриозе / К. С. Владыкин, Е. Н. Любченко // Аграрный вестник Приморья. 2017. № 2 (6). С. 26-27.
4. Дахно Ю. И. Микрофилярицидное действие бровермектин-гранулята с целью профилактики и химиопрофилактики дирофиляриоза у собак / Ю. И. Дахно, И. С. Дахно // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2013. № 14. С. 127-129.
5. Нагорный С. А. Дирофиляриоз собак в Новгородской области / С. А. Нагорный, Е. Ю. Криворотова, А. П. Росоловский [и др.] // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2013. № 14. С. 258-260.
6. Нагорный С. А. Дирофиляриоз собак в Ростовской области / С. А. Нагорный, Е. Ю. Криворотова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2016. № 17. С. 277-279.
7. Нагорный С. А. Заболевание служебных собак дирофиляриозом на территории Российской Федерации / С. А. Нагорный, Л. А. Ермакова, М. П. Черникова, Ю. В. Киосова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2019. № 20. С. 388-393.
8. Нагорный С. А. Инвазия dirofilaria ¿рр.: Динамика эпизоотологической ситуации на юге России / С. А. Нагорный, Л. А. Ермакова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2018. № 19. С. 318-320.
9. Нагорный С.А. Роль служебных собак в распространении дирофиляриоза / С. А. Нагорный, Е. Ю. Криворотова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2012. № 13. С. 269-270.
10. Сергиев В. П. Дирофиляриоз человека в России / В. П. Сергиев, В. Г. Супряга, Н. Н. Дарченкова, Л. А. Жукова, Т. Н. Иванова // Российский паразитологический журнал. 2012. № 4. С. 60-65.
+JF ЧОУДПО «ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ БИОЛОГИИ»
г. Санкт-Петербург
Курсы повышения квалификации
• Ветеринарная эхокардиография (теория и практика)
• Лабораторная диагностика в ветеринарии
• Ветеринарная офтальмология
• Ветеринарная рентгенология, в т.ч. персонал группы А и ответственный за рентгенобезопасность
• Ультразвуковая диагностика в ветеринарии
• Ветеринарная фармация (для лицензирования ветеринарных аптек)
Предварительная регистрация обязательна! Справки по тел. (812) 612-13-34 или (812) 232-55-92 доб. 208 График проведения и информация на сайте: www.invetbio.spb.ru/seminars.html
Лицензия Комитета по образованию Санкт-Петербурга на осуществление образовательной деятельности по образовательным программам дополнительного профессионального образования № 1093 от 04.08.2014 г.
