CC BY
5
УДК 636.92:619:616.15:577.15/.17
ВЛИЯНИЕ МЕЛАКРИЛА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЕНОТОВИДНОЙ СОБАКИ (NUCTEREUTES
PROCYONOIDES GRAY)
Окулова И.И. - к.вет.н., Березина Ю.А. - к.вет.н., Домский И.А. - д.вет.н., профессор,
Беспятых О.Ю. - д.б.н., профессор
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства имени профессора Б.М. Житкова»
Ключевые слова: сыворотка крови, белковые фракции, лизоцим, бактерицидная активность, аланинаминотрансферазы, спартатаминотрансферазы
Keywords: blood serum, protein fractions, lysozyme, bactericidal activity, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase
Для проведения эксперимента использовали препарат мелакрил, который представляет собой аналог гормона мелатонина, образующегося в эпифизе. Мелакрил - один из биологически активных препаратов, используемых в пушном звероводстве для созревания волосяного покрова. Среди эндокринных медиаторов мелатонин играет важную роль, влияет на сезонные изменения в организме фотозависимых
млекопитающих и обладает
ингибирующим действием на иммунную и репродуктивную систему организма. Мелатонин, синтезируемый пинеальной железой, имеет важное значение в фотопериодическом контроле
биологических ритмов, а также регуляции полового созревания, адаптивных реакций и иммунного ответа [6, 8, 9]. Существует мнение, что, возможно, участвуя в координации репродуктивных, иммунных функций и физиологических процессов, мелатонин является кандидатом на роль сезонного медиатора при патологии. Согласно литературным данным, у лисиц, как и многих животных, наблюдается суточный ритм концентрации мелатонина в эпифизе [7]. Так как продукция мелатонина зависит от длины светового дня, многие животные используют её как «сезонные часы». Мелатонин может регулировать функции, зависящие от фотопериода - размножение,
миграционное поведение, сезонную линьку. У многих видов птиц и млекопитающих, которые размножаются при длинном световом дне, мелатонин подавляет секрецию гонадотропинов и снижает уровень половой активности. У животных, размножающихся при коротком световом дне, мелатонин стимулирует половую активность [3]. Имплантация препарата мелакрила, действующим началом которого является мелатонин, применяется в специализированных хозяйствах по разведению пушных зверей для ускорения линьки и формирования зимнего меха. Согласно литературным данным, установлено, что у лисиц и других млекопитающих животных имплантированный мелатонин влияет также на репродуктивную, гормональную активность и устойчивость к заболеваниям [2].
В литературных источниках мы не нашли данных об исследованиях влияния мелакрила на иммуноморфологические показатели сыворотки крови у енотовидной собаки.
Материал и методы
исследований. Для проведения эксперимента использовали препарат мелакрил, который представляет собой аналог гормона мелатонина, образуемого в эпифизе. Мелакрил является совместной разработкой НИИПЗК В.А. Афанасьева и ООО «Инполимед АО», на которую
получено авторское свидетельство СССР № 1579489. Работа проведена на пушных зверях ООО звероплем завода «Вятка» - на енотовидной собаке в возрасте 3-х лет. Для проведения эксперимента были сформированы группы: опытная и контрольная, в каждой группе по 5 зверей. Имплантация мелакрила (производства Казанской биофабрики) проведена согласно инструкции по применению препарата - в кожную складку в области шеи по 20 мг на голову. С целью изучения оценки физиологического и иммунного состояния животных утром до кормления была взята кровь из вены (V. saphena). При определении аспарт-аминотрансферазы (АсАТ) и аланин-аминотрансферазы (АлАТ) мы рассчитывали коэффициент де Ритиса, отражающий соотношение между активностью аминотрансфераз.
Содержание аланинаминотрансферазы (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ), холестерина, амилазы и активность щелочной фосфатазы - с использованием полуавтоматического анализатора «Biochim SA» и соответствующих коммерческих наборов.
Белковые фракции в сыворотке крови определены нефелометрическим методом по В.Я. Антонову [1]. Показатели бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) определены по методу О.В Смирновой и Т.А. Кузьминой [5]. Лизоцимная активность сыворотки крови по В. Г. Дорофейчуку [2]. В качестве стандарта для определения титра (количества) лизоцима в испытуемом материале служила культура Mycrococcous lysodeikticus. Полученные цифровые материалы обработаны на персональном компьютере IBM с использованием пакета статистических программ «Statgraphics» и «HG», оценка достоверности некоторых статистических показателей произведена по критерию Стьюдента. Учитывая малый объем выборки в каждой группе, для сравнения изученных показателей между разными группами был использован непараметрический критерий (U) Вилкоксона-Манна-Уитни, статистически значимыми считали различия при P<0,05.
Результат исследований.
Биохимические реакции в организме тесно взаимосвязаны. Реакции обмена веществ предельно согласованы между собой. Изменение содержания или синтеза одного компонента не может не отразиться на концентрации другого. Состав крови является одним из наиболее лабильных показателей функционального состояния организма животного, быстро и точно реагирующим на введение в корм различных добавок. Тем не менее, следует учитывать влияние сезонного фактора на биохимические показатели и
ферментативную активность крови у пушных зверей, что выражается в определенной направленности и различной степени изменений в течение года. В связи с многообразием выполняемых
биологических функций актуальным является изучение белков сыворотки крови. Такое обследование может указывать на наличие заболевания, даже если общий уровень белка в сыворотке крови в норме. Баланс белков в крови может нарушаться под воздействием самых различных факторов.
Кровь у животных исследовали через 2 недели после введения мелакрила. Полученные данные представлены в таблице 1.
Как видно из результатов, представленных в таблице, содержание альбуминов, а - и у глобулинов оставалось на уровне контроля, а содержание Р-глобулинов в контрольной группе по сравнению с опытом было достоверно выше в 1,4 раза. Увеличение Р-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеинемиях, заболеваниях печени, а также указывает о нарушении жирового обмена [10]. Величина А/Г (альбумины/глобулины) в опытной группе составила 1,17, а в контрольной - 1,32.
Анализируя отношение активности АсАТ/АлАТ (коэффициент де Ритиса) видно, что активность АсАТ в опытной группе увеличена по сравнению с контрольной группой в 2 раза (Р<0,001), но коэффициент де Ритиса в опытной группе составил 1,92, а в контрольной - 3,09. Как
известно, аланинаминотрансфераза и аспартатаминотрансфераза - ферменты (трансаминазы) плазмы крови, активность которых увеличивается при патологиях печени, поджелудочной железы, скелетной и сердечной мускулатуры. Повышение
коэффициента де Ритиса выше 1,3 указывает на заболевания сердечной мышцы, в т.ч. инфаркт миокарда, также такой показатель характерен для поражения печени токсинами.
Таблица 1 - Показатели сыворотки имплантации мелакрила
крови енотовидной собаки через 2 недели после
Показатель Опыт (n=5) Контроль(п=5)
альбумины% 53,92 ± 1,85 56,99 ± 3,64
а- глобулины% 30,26 ± 1,79 26,70 ± 8,90
Р-глобулины% 4,89 ±1,48 7,24 ± 1,85**
у-глобулины% 10,93 ±1,18 9,07 ± 0,66
величина А/Г 1,17 1,32
ЛАСК, Е/л 53,4 ± 0,95 49,55 ± 2,08
БАСК, Е/л 44,78 ± 1,55** 37,82 ± 2,03
АлАТ, Е/л 30,22 ± 2,02 39,54 ± 1,05
АсАТ, Е/л 58,20 ± 0.95** 29,50 ± 0,81
Коэффициент де РитисаАсАТ/АлАТ 1,92 3,09
ЛДГ, Е/л 200,00 ± 2,12 257,10 ± 2,28
Холестерин, ммол/л 4,02 ±1,03 4,32 ± 0,025
Щелочная фосфотаза, Е/л 57,60 ±2.03 47,38 ± 1,025
А-амилаза, Е/л 1782,00 ± 3,05*** 1542,40 ± 1,25
Примечание: **- достоверно в сравнении с контрольной группой, соответственно P<0,05
Анализ на определение
бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) является показателем активности фагоцитоза, а именно нейтрофилов и моноцитов, которые связывают и поглощают проникшие в кровь бактерии. Также он определяет антимикробные свойства крови и общее состояние иммунной системы. В нашем случае БАСК в опытной группе увеличен по сравнению с контролем в 1,2 раза ^<0,05).
Показатели содержания
холестерина, щелочной фосфотазы, лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК) как, в опытной, так и в контрольной группах остаются равными, но активность амилазы в опытной группе выше по сравнению с контрольной группой в 1,23 раза (Р<0,05). Данный факт указывает на нарушение функции поджелудочной железы.
Заключение. В результате проведенных исследований нами
установлено, что экзогенный мелатонин корректирует обменные процессы в организме животных и обеспечивает гепатопротекторный эффект.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Антонов, Б. И. Лабораторные исследования в ветеринарии: справочник / Б. И. Антонов, Т. Ф. Яковлева,
B. И. Дерябина. - М.: Агропромиздат, 1991. - 320 с.
2. Дорофейчук, В. Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом / В. Г. Дорофейчук // Лабораторное дело. - 1968. - № 1. - C. 12.
3. Калинина, С. Н. Особенности влияния мелакрила на антиоксидантную систему норок трех окрасов /
C. Н. Калинина, М. В. Фартышева, Л. Г. Подлепина, В. А. Илюха// Кролиководство и звероводство. - 2008. -№ 6. - С. 11-13.
4. Карпищенко, А. И. Клиническая лабораторная диагностика заболеваний печени и желчевыводящих путей /
A. И. Карпищенко, А. В. Москалев,
B. В. Кузнецов, С. Н. Жерегеля. - М.: ГЭОТАР-МЕДИА, 2020. - 118 с.
5. Кузьмина, Т. А. Определение бактерицидной активности крови методом фотонефелометрии / Т. А. Кузьмина, О. В. Смирнова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1966. -№ 4. - С. 8-11.
6. Maestroni, G. J. M. Melatonin in relation to the immune system / G. J. M. Maestroni, A. Conti // Melatonin biosynthesis, physiological effect and clinical applications / Yu H.S., R. J. Reiter. - Boca Raton: CRC Press, 1993. - P. 289-310.
7. Mustonen, A. M. Seasonality,
photoperiod and nutrional status in the control of endocrinological weight-regulation: PhD Dissertations in Biology. no.18. ISSN1457-2486. - Finland: UniversityofJoensun, 2003. - 211 p.
8 . Nelson, R. J. Melatonin mediates seasonal changes in immune function / R. J. Nelson, D. L. Drazen // Annals of theNew YorkAcademy of Sciences. - 2000. -Vol. 917. - P. 404-415.
9 . S hort day lengths attenuate the symptoms of infection in Siberian hamsters / S. D. Bilbo, D. L. Drazen, N. Quan [et al.] // Proceedings of the Royal Society of London. - 2002. - Vol. 269. - P. 447-454.
ВЛИЯНИЕ МЕЛАКРИЛА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЕНОТОВИДНОЙ СОБАКИ (NUCTEREUTES
PROCYONOIDES GRAY)
Окулова И.И., Березина Ю.А., Домский И.А., Беспятых О.Ю.
Резюме
В работе показаны результаты научных исследований по изучению влияния экзогенного мелатонина на биохимические и иммунологические процессы у енотовидной собаки. Доказано, что мелакрил корректирует содержание Р-глобулиновой фракции в сыворотке крови в опытной группе зверей. Величина А/Г в опытной группе составила 1,17, а в контрольной группе 1,32, что указывает на заболевание печени и нарушение жирового обмена. При определении активности АсАТ/АлАТ (коэффициент де Ритиса) активность АсАТв опытной группе была увеличена по сравнению с контрольной группой в 2 раза (P<0,001), но коэффициент де Ритиса в опытной группе составил 1,92, а в контрольной -3,09. В результате проведенных исследований нами установлено, что экзогенный мелатонин корректирует обменные процессы в организме животных и обеспечивает гепатопротекторный эффект.
INFLUENCE OF MELACRIL ON BIOCHEMICALAND IMMUNOLOGICAL INDICATORS OF THE BLOOD OF THE ENTOVID DOG (NUCTEREUTES PROCYONOIDES GRAY)
Okulova I.I., Berezina Yu.A., Domsky I.A., Bespyatykh O.Yu.
Summary
The results of scientific studies on the effect of exogenous melatonin on biochemical and immunological processes in a raccoon dog in article showed. It has been proven that melacryl corrects the content of the P-globulin fraction in blood serum in the experimental group of animals. The value of A/G in the experimental group was 1.17, and in the control group 1.32, which indicates a liver disease and a violation of fat metabolism. When determining the activity of AST / AlAT (de Ritis coefficient), the activity of AST in the experimental group was increased by 2 times compared to the control group (P<0.001), but the de Ritis coefficient in the experimental group was 1.92, and in the control group - 3.09. As a result of our studies, we found that exogenous melatonin corrects metabolic processes in the body of animals and provides a hepatoprotective effect.
