CC BY
3
DOI 10.31588/2413-4201-1883-247-3-192-197
УДК 636.93:619; 616. 995.132
ВЛИЯНИЕ «АРКУСИТА» НА БИОХИМИЧЕСКИЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ У СЕРЕБРИСТО-ЧЕРНОЙ ЛИСИЦЫ
(SILVER-BLACK FOX)
Окулова И.И. - к.вет.н., Домский И.А. - д.вет.н., профессор, Березина Ю.А. - к.вет.н.,
Бельтюкова З.Н. - к.вет.н.
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и
звероводства им. проф. Б.М. Житкова»
Ключевые слова: общий белок, фракции глобулинов, щелочная фосфотаза, опсонофагоцитарная реакция
Keywords: total protein, globulin fractions, alkaline phosphatase, opsonophagocytic reaction
Для коррекции и поддержания гомеостаза зверей используют пробиотики, пребиотики, сорбенты. Они различаются по биологической природе и, соответственно, по механизму действия, но существует потребность в новых биопрепаратах, которые восстанавливают нарушение нормальной микрофлоры, восстанавливают дисбактериоз [4], поддерживают гомеостаз, а также продуктивные качества и физиологическое состояние пушных зверей [5, 7]. Использование биологически активных веществ в звероводстве подтверждено многочисленными
исследованиями, и все чаще стала появляется информация о положительных результатах, полученных в результате их применения [8, 13]. Об исследованиях применения биологически активных веществ у серебристо-черной лисицы доступны единичные сведения, в них изучено влияние на биохимическую картину крови в зависимости от сезонов года, типов кормления Balakirev ^А., и др. А. Kizhina и др., изучали биохимические показатели у определенной группы норок разного пола и возраста или при введении в рацион биологически активной добавки. Березина Ю.А., [9, 10] изучала биохимическую картину крови
серебристого песца и серебристо-черной лисицы только в зависимости от пола, возраста и сезона. Использование антиоксидантных препаратов является новым направлением их практического использования в клеточном пушном
звероводстве [11, 13].
В своей работе мы использовали Аркусит, ТУ 9325-005-51022776-2007, (Разработаный институтом Биохимфизики им. Н.М. Эмануэля РАН и МГАВМиБ им. К.И. Скрябина) [1, 2], который оказывает положительное влияние на
физиологическое состояние животных, повышает защитные механизмы организма и приросты живой массы.
Материал и методы исследований. В работе было использовано поголовье серебристо-черной лисицы,
принадлежащее ООО
племзвероводческому хозяйству «Вятка» Кировской области. Из племенных самок серебристо-черной лисицы (silver-black fox) по принципу групп-аналогов сформированы 2 группы: контрольная (n=1235) и опытная (n=1164). Во время эксперимента звери обеих групп получали общехозяйственный рацион. Опытные группы лисицы в течение 2-х месяцев перед гоном и до щенения 10-дневными курсами с 10-дневными перерывами получали дополнительно к корму препарат «Аркусит» в дозе 20 мкг/кг массы тела. Навеску препарата «Аркусит» растворяли в воде, подогретой до 50 0С. Полученный раствор добавляли в корм и тщательно перемешивали. Звери контрольной группы препарат не получали.
Кровь для исследований у серебристо-черной лисицы брали (n=10 каждой группы) из латеральной подкожной вены голени (telae Vienna tibia) до начала
опытов и в конце проведения опытов.
Белковые фракции в сыворотке крови определяли нефелометрическим методом по В.Я. Антонову с соавт. [3]. Лизоцимную активность сыворотки крови - по В. Г. Дорофейчук [12]. Активность щелочной фосфатазы, аланин-
аминотрансферазы (АлАТ), аспартат-аминотрансферазы (АсАТ), глюкозы, общего белка сыворотки крови определяли на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Biochim SA» (США, 2019 г.) при помощи наборов реактивов фирмы Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по методу Т.А. Кузьминой, О.В. Смирновой [14]. Опсоно - фагоцитарную реакцию - по А.С. Лабинской.
Полученные данные обрабатывали с использованием пакетов программ MS Excel и Statgraphics общепринятыми методами вариационной статистики, сравнение различий между группами проводили с применением
непараметрического критерия (U) В илкоксона-Манна-Уитни. Статистически значимыми считали различия с р<0,05. Эксперименты на животных проводили в соответствии с методическими указаниями Балакирева Н.А. и др., [6]. Работа выполнена с соблюдением международных принципов Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным, принципов гуманности, изложенных в директиве Европейского сообщества (86/609/ЕС), и правил проведения работ с экспериментальными животными. Правила
проведения работ с использованием экспериментальных животных.
[Приложение к Приказу МЗ СССР № 755 от данных осуществлена с использованием пакетов программ MS Excel и Statgraphics. Для сравнения изученных показателей между разными группами был использован непараметрический критерий (U) Вилкоксона-Манна-Уитни, статистически значимыми считали различия при p<0,05.
Результат исследований. Изучение белков сыворотки крови в связи с многообразием выполняемых
биологических функций является актуальным, они поддерживают вязкость крови, осмотическое давление, транспорт многих веществ, регулируют постоянство рН крови, участвуют в свертывании крови, в иммунных процессах. Белковые фракции сыворотки крови позволяют провести дифференциацию отдельных видов гипо - и гиперпротеинемий, а также выявить профиль белковых фракций сыворотки крови при ряде заболеваний и состояний, не сопровождающихся изменениями общего содержания белка. (Таблица 1). Белковый индекс - это соотношение альбуминов к глобулинам (А/Sr), он показывает интенсивность белкового обмена. Предполагают, что от этого коэффициента зависит скорость оседания эритроцитов. Она повышается при увеличении глобулинов. У собак белковый индекс равен - 0,5-1,3, мы использовали данную норму, исходя из того, что лисица относится к семейству псовых.
Таблица 1 - Белковые фракции сыворотки крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата «Аркусит»_
Группа (n=10) Общий белок, г/л Альбумины, % а- глобулины % ß- глобулин, ы% Y- глобулин ы, % белковый индекс А/Sr
Контроль 46,6±2,01 59,5±1,98 5,7±0,53 4,6±0,48 14,0±1,0 2,4*
Опыт 67,2±2,3* 54,1±1,43 17,8±0,4* 6,7±0,3* 17,4±1,0* 1,2
Примечание: различия между группами лисиц достоверны * - Р<0,05
Как видим из таблицы № 1, у серебристо-черной лисицы после применения препарата «Аркусит» наблюдается достоверное увеличение
общего белка и в - глобулинов в 1,4 раза (Р<0,05), а и у глобулиновых фракции - в 1,2 раза (Р<0,05). Белковый индекс в контрольной группе зверей был в 2 раза
достоверно выше по сравнению с опытом, что указывает на уменьшение поступления белков с кормом, нарушение его переваривания, а, следовательно, приводит к алиментарной белковой недостаточности.
При
аспартатаминотрансферазы аланинаминотрансферазы, коэффициент де Ритиса, соотношение между
определении и
рассчитывали отражающий активностью
аминотрансфераз. В организме важно не только содержание веществ
аспартатаминотрансферазы и
аланинаминотрансферазы крови, но и их соотношение друг к другу. В результате изучения биохимических показателей крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата «Аркусит» были получены следующие результаты (Таблица 2).
Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата Аркусит
Группа (П=10) Щелочная фосфотаза, Е/л Глюкоза, ммоль/л АсАТ, Е/л AлАT, Е/л Коэф. де Ритиса
Контроль 49,26 ±2,09 3,54±0,37 61,96±6,9 102,13±2,76 0,60
Опыт: 27,28±1,03* 7,16±0,75* 58,6±5,53 88,92±4,39* 0,66
Примечание: различия между группами лисиц достоверны *- Р<0,05
Как видим из таблицы № 2, у опытной группы зверей снизилась концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови в 1,8 раза (Р<0,05), показатель АлАТ - в 1,2 (Р<0,05), а содержание глюкозы в опытной группе повысилось в 2 раза (Р<0,05), по сравнению с контрольной группой. Уровень глюкозы в крови строго постоянен, так как используется как источник энергии, и она может быть в любой момент затребована организмом. Именно, глюкозой клетка организма быстро пополняет свой энергетический запас. Понижение глюкозы
у самок серебристо-черной подготовкой к щенению и использованием энергии в
указывает о снижение запасов гликогена в печени и в мышцах, что мы наблюдаем у контрольной группы зверей. Этот период совпадает лисицы с активным организме.
При исследовании
иммунологических показателей в опытной группе после применения препарата «Аркусит» отмечали достоверное увеличение ОФР, фагоцитарного индекса, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови (Таблица 3).
Таблица 3 - Иммунологические показатели у серебристо-черной лисицы до и после применения «Аркусит»
Группа (П=10) Показатель
ОФР % фагоцитарный индекс ЛАСК % БАСК %
Контроль 25,0±0,707 12,28±0,257 41,28±2,062 29,1±2,334
Опыт 35,0±1,342* 17,42±1,572* 53,86±1,601* 52,6±1,661*
Примечание: различия между группами достоверны *-Р<0,05
Как видим из таблицы № 3, лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс - в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови - в 1,8 раза (Р<0,05) у животных опытной группы.
Фагоцитарная реакция
филогенетически является одним из защитных механизмов животных и человека и характеризует его иммунную реакцию. Клеточная иммунная реакция представляет собой образование ретикулоэндотелиальной системы в ответ на введение антигена мелких долгоживущих лейкоцитов,
сенсибилизированных лимфоцитов,
которые принимают активное участие в нейтрализации болезнетворного антигена. Лизоцим - белковое вещество, фермент с молекулами небольшого размера, содержит 120 аминокислот, образующих единую полипептидную цепь. Противомикробное действие лизоцима объясняется тем, что он разрушает мукополисахаридную структуру бактериальной стенки, при этом нарушается осмотическое давление бактериальной клетки и она лизируется. Лизоцим, помимо прямой
антибактериальной активности, обладает также свойством активации клеток РЭС и стимуляции фагоцитоза, а также активизирует продукцию нормальных и иммунных антител [15].
Заключение. Применение
«Аркусита» в дозе 20 мкг/кг массы тела свидетельствует о благотворном влиянии на факторы неспецифической
резистентности серебристо-черной лисицы. Концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови у опытной группы снизилась в 1,8 раза (Р<0,001), показатель АлАТ - в 1,2 (Р<0,05). Концентрация глюкозы в опытной группе повысилась в 2 раза (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой. У животных опытной группы лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс - в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови - в 1,8 раза (Р<0,05). Аркусит стимулирует синтез гамма-глобулинов, способствует повышению опсоно-фагоцитарной, бактерицидной активности сыворотки крови. Таким образом, анализ экспериментальных данных свидетельствует, что препарат «Аркусит» обладает выраженным иммуностимулирующим эффектом,
обеспечивая активацию факторов неспецифической резистентности
организма серебристо-черной лисицы.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Архипов, А.В. Инструкция по применению Аркусита для повышения резистентности, воспроизводительных функций и профилактики стресса у сельскохозяйственных животных
/ А.В. Архипов, Ю.В. Кузнецов. - М.: Изд. «Россельхознадзор», 2007. - 3. с.
2. Архипов, А.В. Эффективность антиоксидантов в рационе телят / А.В. Архипов, М.А. Захарченко, Г.Д. Захарченко, Е.Г. Храмкова // Современные научно-практические достижения в морфологии животного мира. Материалы I Международной научно-практической конференции. - Брянск, 2011.
- С. 58
3. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии -бактериальные инфекции / Б.И. Антонов. -М.: Изд. «Агропромиздат». - 1986. - С. 7072
4. Балакирев, Н.А. Применение биологически активных веществ для повышения продуктивности норок / Н.А. Балакирев, Т.М. Демина, О.В. Растимешина // Проблемы экологической физиологии пушных зверей.
- Петрозаводск: Изд. «Карельский научный центр РАН». - 2000. - С. 71-78.
5. Балакирев, Н.А. Звероводство / Н.А. Балакирев, Г.А. Кузнецов. - М.: Издательство «Колос, С». - 2006. - 343с.
6. Балакирев, Н.А. Методические указания проведения научно-хозяйственных опытов по кормлению пушных зверей / Н.А. Балакирев, В.К. Юдин - М.: Изд. «Россельхосиздат». -1994. - 31 с.
7. Балакирев, Н.А. Особенности кормления пушных зверей в современных условиях / Н.А. Балакирев // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. - Москва. - 2013. - № 5. - С. 55-60.
8. Беспятых, О.Ю. Изучение стимуляции бутандиовой кислотой поствакцинального
противосальмонеллезного иммунитета у красной лисицы / О.Ю. Беспятых, З.Н. Бельтюкова, Ю.Н. Березина [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2009. - № 1. - С. 21.
9. Березина, Ю.А. Изменение биохимического профиля крови серебристо-черной лисицы в постн атальном онтогенезе / Ю.А. Березина,
О.Ю. Беспятых, А.Е. Кокорина // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: Наука и высшее профессиональное образование. - 2019. -№ 3 (55). - С. 252-258.
10. Березина, Ю.А. Биохимические показатели крови взрослого вуалевого песца в зависимости от пола и сезона / Ю.А. Березина, М.А. Кошурникова, И.А. Домский, О.Ю. Беспятых // Ветеринария. - 2016. - № 1. - С. 41-43.
11. Гималова, Л.Ф. Применение Биологических препаратов в звероводстве / Л.Ф. Гималова, Л.В. Герасимова, Т.Н. Кузнецова, Е.Н. Денисов // Материалы международной конференции «ЕС -Россия: 7-я Рабочая программа в области биотехнологии, сельского, лесного, рыбного хозяйства и пищи». - Уфа: Изд-во БГАУ. - 2010. - С. 102-107.
12. Дорофейчук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом / В.Г. Дорофейчук // Лабораторное дело. - 1968. - № 1- С. 12.
13. Кокорина, А.Е. Влияние добавки янтарной кислоты на иммунобиохимический профиль крови у красной лисицы / А.Е. Кокорина, О.Ю. Беспятых, Ю.А. Березина [и др.] // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2011. № 2. - С. 94-100.
14. Кузьмина, Т.А. Определение бактерицидной активности сыворотки к р ови методом фотонефелометрии / Т.А. Кузьмина, О.В. Смирнова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1966. - № 4 - С. 8-11.
15. Коляков, Я.Е. Ветеринарная иммунология / Я.Е. Коляков. - М.: Изд. «Агропромиздат», 1986. - 265 с.
ВЛИЯНИЕ «АРКУСИТА» НА БИОХИМИЧЕСКИЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ У СЕРЕБРИСТО-ЧЕРНОЙ ЛИСИЦЫ
(SILVER-BLACK FOX)
Окулова И.И., Березина Ю.А., Бельтюкова З.Н.
Резюме
Применение «Аркусита» в дозе 20 мкг/кг массы тела свидетельствует о благотворном влиянии на факторы неспецифической резистентности серебристо-черной лисицы. Концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови у опытной группы снизилась в 1,8 раза (Р<0,001), показатель АлАТ - в 1,2 (Р<0,05). Концентрация глюкозы в опытной группе повысилась в 2 раза (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой. У животных опытной группы лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс - в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови - в 1,8 раза (Р<0,05). «Аркусит» стимулирует синтез гамма-глобулинов, способствует повышению опсоно-фагоцитарной, бактерицидной активности сыворотки крови. Таким образом, анализ экспериментальных данных свидетельствует, что препарат «Аркусит» обладает выраженным иммуностимулирующим эффектом, обеспечивая активацию факторов неспецифической резистентности организма серебристо-черной лисицы.
THE EFFECT OF «ARCUSIT» ON BIOCHEMICAL AND IMMUNOLOGICAL PARAMETERS
BLOOD SERA IN SILVER-BLACK FOX (SILVER-BLACK FOX)
Okulova I.I., Domsky I.A., Berezina Yu.A., Beltyukova Z.N.
Summary
The use of «Arkusit» at a dose of 20 pg / kg of body weight indicates a beneficial effect on the factors of nonspecific resistance of the silver-black fox. The concentration of alkaline phosphatase in the blood serum in the experimental group decreased by 1.8 times (P <0.001), the ALT index - by 1.2 (P <0.05). The concentration of glucose in the experimental group increased 2 times (P <0.05) compared with the control group. In animals of the experimental group, the lysozyme activity of blood serum increased 1.3 times (P <0.05), the OPR reaction and the phagocytic index - 1.4 times (P <0.05), the bactericidal activity of blood serum - 1.8 times (P <0.05). «Arcusit» stimulates the synthesis of gamma globulins, increases the opsonophagocytic, bactericidal activity of blood serum. Thus, the analysis of experimental data indicates that the drug «Arcusit» has a pronounced immunostimulating effect, providing the activation of factors of nonspecific resistance of the body of the silver-black fox.
