CC BY
21УДК 616 - 092.9:615.383:616.831-036.88 ВЛИЯНИЕ «МЕДИАТОРНЫХ ВЕЩЕСТВ» ФЕТАЛЬНОЙ КЛЕТКИ НА ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ ТРАНСАМИНАЗНЫХ ФЕРМЕНТОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ У КРЫС ПОСЛЕ СМЕРТЕЛЬНОЙ
ГИПОБАРИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ
ЕРМЕНТЕВА ЛАЗЗАТ НУРМАХАНБЕТОВНА
кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры патологической физиологии им.В.Г.Корпачева. АО «Медицинский университет Астана», г.Астана
(Казахстан) E-mail: ermentaeva 70@mail. ru
АЙТБАЕВА ЖАЙНА БАЙДУЛЛАЕВНА
доктор медицинских наук, профессор кафедры патологической физиологии им.В.Г.Корпачева. АО «Медицинский университет Астана», г.Астана
(Казахстан)
АКПОЛАТОВА ГУЛЬНУР МОМЫНОВНА
кандидат медицинских наук, доцент кафедры патологической
физиологии им.В.Г.Корпачева. АО «Медицинский университет Астана», г.Астана
(Казахстан)
АННОТАЦИЯ
Эксперименты были выполнены на 86 белых беспородных крысах, которым в постреанимационном периоде осуществляли однократную и двукратную трансплантацию «медиаторных веществ» фетальных клеток. В опытах изучали активность трансаминазных ферментов сыворотки крови в динамике постреанимационного периода. Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что использование «медиаторных веществ» фетальных клеток не усугубляет тяжести течения постреанимационного периода после 4-минутной клинической смерти, вызванной гипобарической гипоксии. Кроме того, рассчитанные в опытных группах коэффициенты Де Ритиса не исключают вероятность активации адаптивных механизмов при действии факторов, вызывающих развитие экстремальных и терминальных состояний.
Ключевые слова: «<медиаторные вещества» фетальной клетки, постреанимационный период, трансаминазные ферменты, клеточная терапия, гипобарическая гипоксия.
THE INFLUENCE OF "MEDIATORY SUBSTANCES" OF FETAL CELLS ON CHANGES IN THE TRANSAMINASE ENZYME ACTIVITY IN BLOOD SERUM OF RATS AFTER FATAL HYPOBARIC HYPOXIA
YERMENTAEVA LAZZATNURMAKHANBETOVNA
candidate of medical sciences, senior lecturer of the Pathological Physiology Department of V.G.Korpachev, JSC "Astana Medical
University", Astana, Kazakhstan.
E-mail: ermentaeva 70@mail. ru
AITBAYEVA ZHAINA BAIDULLAYEVNA
doctor of medical sciences, professor of the Pathological Physiology
Department of V. G. Korpachev, JSC "Astana Medical University", Astana, Kazakhstan.
AKPOLATOVA GULNUR MOMYNOVNA
candidate of medical sciences, docent of the Pathological Physiology Department of V.G.Korpachev, JSC "Astana Medical
University", Astana, Kazakhstan.
ABSTRACT
The experiments were carried out on 86 white outbred rats, which had single and double transplantation of "mediatory substances" of fetal cells in the postresuscitation period. The transaminase enzyme activity of blood serum in dynamics of postresuscitation period was studied in the experiments. The results of our study suggest that the application of "mediatory substances" of fetal cells does not aggravate the severity of postresuscitation period after 4 minutes of clinical death caused by hypobaric hypoxia. In addition, calculated De Ritis coefficients in the experimental groups do not exclude the probability of activation of adaptive mechanisms under the influence of the factors, causing the development of extreme and terminal conditions.
Keywords: "mediatory substances" of fetal cells, postresuscitation period, transaminase enzymes, cell therapy, hypobaric hypoxia.
Актуальность. В последние годы в экспериментальной медицине довольно широко проводятся исследования по изучению возможностей применения при заболеваниях различных видов клеточной терапии [1, 6, 9, 11, 12]. Одним из его вариантов является использование так называемых «медиаторных веществ» фетальных клеток, получаемых при диссоциации клеток.
В процессе приготовления взвесей фетальных клеток получают надосадочную жидкость, которая состоит из белково-пептидного комплекса активных веществ, имеющей в своем составе интерлейкины 2, 6, 10, васкулоэндотелиальный фактор, гормоны пептидной структуры [4, 8].
В исследованиях было доказано, что их применение способствует восстановлению обменных процессов в организме и нормализации нарушенных звеньев гомеостаза при дизрегуляторной патологии. Кроме того, «медиаторные вещества» фетальных клеток являются мощными регуляторами, влияющими на клетки организма реципиента, корректирующими их функциональное состояние и взаимодействие и одновременно обладающими щадящим, направленным воздействием на функции регуляторных систем, что способствует восстановлению нормальной жизнедеятельности организма [5]. Ряд авторов получили результаты, свидетельствующие об улучшении состояния животных с токсическим гепатитом, при стрессе, вызванным иммобилизацией и гипоксией, при сахарном диабете, при печеночной недостаточности [10, 2, 3, 8].
Однако следует признать, что до настоящего момента метод терапии с использованием медиаторных веществ фетальных клеток не получил еще всесторонного изучения и патогенетического обоснования. Эксперментальных данных, посвященных изучению
механизмов действия медиаторных веществ» фетальных клеток, явно недостаточно, что требует дальнейших исследований. В связи с этим, нам представлялось интересным изучить в эксперименте влияние «медиаторных веществ» фетальных клеток на изменение активности трансаминазных ферментовсыворотки крови у крыс после смертельной гипобарической гипоксии.
Целью исследований явилось изучение трансаминазной активности ферментов сыворотки крови в динамике постреанимационного периода при условии однократного и двукратного введения «медиаторных веществ», полученных в процессе изолирования клеток фетальной печени.
Материалы и методы исследования. Эксперименты были выполнены на 86 половозрелых белых беспородных крысах. Экспериментальные животные были подразделены на 4 группы наблюдения: I группа - интактные животные (n=33); II группа -контрольные животные (n=23); III группа - опытная с однократным использованием «медиаторных веществ» фетальных клеток в восстановительном периоде после оживления (n=22). IV группа -реанимированные животные с двукратным введением «медиаторных веществ» фетальных клеток (n=8).
У подопытных животных в течение 3-х минут с аппарата Комовского моделировали подъем на 11500 м, со скоростью 107 м/сек [7]. Во время снижения барометрического давления фиксировали время появления первых судорог и агонального дыхания. Последний регистрируемый вдох соответствовал началу клинической смерти, длительность которой в наших опытах составляла 4 минуты. Реанимационные мероприятия включали в себя наружный массаж сердца и управляемую аппаратную вентиляцию легких с помощью
прибора «Вдох РП-3». В данной серии экспериментов, введение «медиаторных веществ» фетальной печени соответствовало 30-минуте от начала выполнения мероприятий по оживлению и 7-суткам постреанимационного периода. При получении взвеси фетальных клеток в качестве надосадочной жидкости получали субстрат, содержащий в себе белково-пептидный комплекс (медиаторные вещества). Доза вводимых «медиаторных веществ» составляла 0,3 мл/кг [8]. Исследование трансаминазных ферментов (АлАТ, АсАТ) проводили 14 суток после реанимации на биохимических стандартизированных анализаторах. Результаты исследований обработаны статистически с использованием t-критерия Стьюдента. Цифровая обработка материала проводилась на компьютере с помощью набора стандартных программ Microsoft Excel. Основные результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.
Изучение данных позволило установить, что через 14 суток после успешно выполненной сердечно-легочной реанимации в контрольной группе (II) показатели трансаминазной активности (АлАТ и АсАТ) сыворотки крови животных не имели достоверных отличий с интактной группой.
В III подопытной группе животных, в которой на 30-й минуте постреанимационного периода осуществляли однократное внутрибрюшинное введение «медиаторных веществ» фетальных клеток установлено, что через 14 суток уровень активности АлАТ равнялся 0,69±0,05 ммоль/л х ч. При этом значения изучаемого показателя были существенно ниже, чем в контроле (р1<0,05). В то же время на фоне однократного использования «медиаторных веществ» фетальных клеток активность АсАТ повысилась до 1,50±0,05 ммоль/л х ч.
При двукратном использовании «медиаторных веществ» фетальных клеток (IV группа) были получены данные, свидетельствующие о снижении активности АлАТ по сравнению с контролем в 2,2 раза.
Изучаемые показатели (I группа) Дни исследований № группы/количество исследований
II группа III группа IV группа
АлАТ (норма 0,96±0,04 ммоль/л ч) 14 день 0,86±0,04 p<0,05 0,69±0,05 р1<0,05 0,39±0,06 р1<0,001 р12<0,05
АсАТ (норма 1,36±0,05 ммоль/л ч) 14 день 1,43±0,06 p>0,05 1,50±0,05 р1>0,05 1,20±0,03 р1<0,02 р2<0,001
Примечание: 1 р-достоверность различий по сравнению с I группой; 2 р1-достоверность различий по сравнению с контролем; 3 р2-достоверность различий по сравнению с IV группой
Таблица 1 - Изменение активности трансаминазных ферментов сыворотки крови животных в динамике постреанимационного периода на фоне однократного и двукратного применения фетально-клеточной терапии
Показатели ферментативной активности АлАТ оказались также ниже значений, зарегистрированных в III группе наблюдения, где животным терапия «медиаторными веществами» проводилась
однократно (0,39±0,06 ммоль/л х ч против 0,69±0,05 ммоль/л х ч, р2<0,001).
К данному периоду в IV группе исследований установлено, что активность АсАТ была ниже, чем у контрольных животных и с однократным введением «медиаторных веществ» фетальных клеток (III группа) и составляла 1,20±0,03 ммоль/л х ч (рк0,02).
Анализ результатов показал, что в динамике восстановительного периода имело место изменение соотношения трансаминазных ферментов сыворотки крови. Так, коэффициент Де Ритиса у животных с использованием «медиаторных веществ» фетальной ткани печени (III и IY группы) в исследуемый период превышал значения, полученные в группах сравнения (I-интактная и II-контрольная).
Результаты исследования. При обобщении результатов собственных исследований мы опирались на данные, изложенные в аналитических обзорах И.М.Рослого и соавт. (2002, 2003), в которых обсуждались возможные причины, механизмы и пути появления ферментов крови. В частности, авторы указывают на то, что высокий уровень ферментемии выявленный у животных, не всегда является свидетельством выраженного цитолиза. Существенно большее значение имеют показатели соотношения трансаминазных ферментов крови, которые могут, в том числе, отражать и метаболические изменения адаптивного характера. Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что использование «медиаторных веществ» фетальных клеток не усугубляет тяжести течения постреанимационного периода после 4-минутной клинической смерти, вызванной гипобарической гипоксии. Кроме того, рассчитанные в опытных группах коэффициенты Де Ритиса, не исключают вероятность
активации адаптивных механизмов при действии факторов,
12
вызывающих развитие экстремальных и терминальных состояний. Можно предположить, что в организм дополнительно привносится комплекс биологических активных веществ (гормоны, альфа-фетопротеин, факторы роста, пептиды, цитокины, иммуноглобулины, электролиты и др.) стимулирующий саногенетические механизмы организма.
Список литературы
1. Айтбаева Ж.Б., Тимурин Д.Н., Торопеев А.В. Влияние фетальных нейроцитов на динамику показателя общего состояния крыс-самцов //Материалы V международной дистанционной научно-практической конференции «Новые технологии в медицине-2008» // Bulletin. - 2008. - Vol.3 - №1. - С. 9 - 10.
2. Акполатова Г.М. Влияние «медиаторных веществ» фетальных клеток на изменение адаптивных реакций организма при стрессе, вызванном иммобилизацией и гипоксией (экспериментальное исследование): автореф. ... канд. мед. наук: 14.00.16 - патологическая физиология. - Астана: КазГМА, 2008. - 22 с.
3. Букеева Ж.К. Влияние «медиаторных веществ» фетальных клеток на течение острого и хронического гепатита у крыс (экспериментальное исследование): автореф. канд. мед. наук: 14.00.16 - патологическая физиология. -Астана: КазГМА, 2007. - 19 с
4. Доскалиев Ж.А., Мустафин А.Х., Жетимкаринова А.Д., Стикеева Р.К. и др. Состояние симпатико-адреналовой системы после обширных резекций печени с трансплантацией медиаторов фетоткани // Астана медициналык журналы. - 2006. - №2. - С. 154-155.
5. Доскалиев Ж.А., Хамзина Н.К., Стикеева Р.К. и др. Механизм действия «медиаторов» фетальных клеток //Валеология. -2008. -№1. -С. 53-55.
6. Мухамеджанова К.М. Влияние клеточной терапии на процессы заживления ожоговой раны в постреанимационном периоде (экспериментальное исследование): автореф. ... канд. мед. наук: 14.00.16 - патологическая физиология. - Астана, 2007. - 22 с.
7. Рахимбердиев Д.С. Влияние суттигена на течение постреанимационной энцефалопатии: автореф. ... канд. мед. наук:
20.12.04.- Астана: КазГМА, 2004.-17 с.
8. Стикеева Р.К. Влияние «медиаторов» фетальных клеток на состояние липидного обмена при печеночной недостаточности // Астана медицинальщ журналы. - 2007. - №9 (45). - С. 179-181.
9. Тажибаева Д.С. Патогенетическое обоснование клеточной терапии для профилактики и лечения постреанимационной болезни и постгипоксической энцефалопатии: автореф. ...докт. мед. наук:
17.06.05. - Астана: КазГМА, 2005. -С.50
10. Таржанова Д.Ш. Влияние «медиаторов» фетальной ткани печени на течение экспериментального сахарного диабета// (экспериментальное исследование): автореф. ... канд. мед. наук: 14.00.16 - патологическая физиология. -Астана: АО «АМУ», 2009. - 21 с.
11. Dani A., Bartoli G.M., Galeotti T. The operation of the malate-aspartate shuttle in the reoxidation of glycolytic NADH in slices of fetal rat liver // BiochimBiophysActa. 1977 Dec 23;462(3):781
12. Hu X., Yang T., Li C., Zhang L., Li M., Huang W., Zhou P. Human fetal hepatocyte line, L-02, exhibits good liver function in vitro and in an acute liver failure model // Transplant Proc. 2013 Mar;45(2):695-700. doi: 10.1016/j.transproceed.2012.09.121.
