CC BY
47
ЖИВОТНОВОДСТВО
УДК 619-636.4.033-615.036 И.В. Киреев,
В.А. Оробец, В.С. Скрипкин, Е.И. Лавренчук
ВЛИЯНИЕ МЕБИСЕЛА НА СИСТЕМУ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ПОРОСЯТ
Ключевые слова: селен, поросята, антиоксидантная защита организма, активность ферментов, перекисное окисление липидов, живая масса, биохимические показатели, гематологические показатели.
Введение
В настоящее время селен наряду с витаминами А, Е и С считается одним из четырех главнейших компонентов неферментативного пути антиоксидантно-антирадикальной системы защиты организма [1].
Окислительный стресс, в основе которого лежит нарушение процессов сво-боднорадикального окисления, в настоящее время рассматривается как один из ведущих патогенетических механизмов возникновения болезней различной этиологии [2].
Известно, что биологическая роль селена определяется присутствием в активных центрах селенопротеинов [3]. В механизме действия селена большое значение придают формированию им активных центров таких ферментов, как глутатион-пероксидаза, глицинредуктаза, формиат-дегидрогеназа, цитохром С. Указанные свойства свидетельствуют об участии селена в первой фазе биохимической адаптации (окисление чужеродных веществ с образованием органических окисей и перекисей), а также и второй ее фазе (связывание и выведение активных метаболитов) [4].
Селен, являясь биологическим антиок-сидантом, регулирует развитие неферментативных реакций с образованием свободных радикалов, тем самым создает нормальные условия для функционирования организма в целом [5, 6].
Цель работы — определение влияния комплексного препарата «Мебисел» на показатели системы антиоксидантной защиты поросят крупной белой породы. Препарат разработан на кафедре терапии и фармакологии СтГАУ и представляет собой масляный раствор селеноорга-нического вещества, обладающего иммуностимулирующим действием.
Объекты и методы исследований
Эксперимент проводили на базе СПК «Новомарьевский» Шпаковского района Ставропольского края в зимне-весенний период. Для проведения опыта с учетом принципа аналогов сформировали две группы поросят трехмесячного возраста, по 15 голов в каждой. В технологии выращивания использовался концентратный тип кормления, а суточный рацион на начало исследования был следующим: дерть ячменя — 0,5 кг, дерть пшеницы — 0,5, дерть кукурузы — 0,3, дерть гороха — 0,2, шрот подсолнечный — 0,2, травяная мука — 0,3, обрат — 1 кг; фосфат обесфторенный — 40 г, соль — 13, пре-микс (ПК 51-8-89) — 26 г. Животным первой группы препарат «Мебисел» вводили внутримышечно однократно в дозе 1,8 мг на 10 кг по действующему веще-
ству. Поросята второй группы препарат не получали и служили контролем. Кровь для анализа брали из хвостовой вены до введения препарата и с интервалом в 15 суток. Взвешивание проводили при помощи электронных весов до начала и по окончании опыта. В качестве критических были выбраны некоторые показатели морфологического состава крови, уровень общего белка и гемоглобина, активность ферментов системы антиокси-дантной защиты организма, концентрация недоокисленных продуктов свободнора-дикальных реакций и уровень восстановленного глутатиона.
Количество лейкоцитов определяли в счетной камере Горяева, эритроцитов и гемоглобина — на эритрогемометре. Количество общего белка определяли рефрактометрическим методом. При определении показателей антиоксидантной защиты организма и продуктов свобод-норадикального окисления пользовались следующими методиками:
- активность каталазы определяли методом, основанным на способности Н2О2 образовывать с молибдатом аммония стойкий окрашенный комплекс с максимумом поглощения при 410 нм;
- активность пероксидазы по методу, основанному на определении скорости реакции окисления бензидина Н2О2 при участии фермента с образованием окрашенного продукта реакции, имеющего максимум поглощения при 520 нм;
- активность глутатионпероксидазы определяли по методу, принцип которого основан на том, что глутатионпероксида-за окисляет восстановленный глутатион, по уменьшению которого в среде инкубации определяется активность фермента;
- уровень церулоплазмина в сыворотке крови определяли методом, основанным на регистрации оптической плотности при 520 нм окрашенных продуктов, образующихся при ферментативном окислении церулоплазмином солянокислого парафенилендиамина;
- содержание восстановленного глута-тиона определяли методом, основанным на том, что SH-группа восстановленного глутатиона вступает в реакцию с 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойной) кислотой, в результате чего в эквимолярных количествах образуется окрашенный в желтый цвет тионитрофенильный анион, имеющий максимум поглощения при 412 нм;
- концентрацию диеновых конъюгатов определяли методом, в основе которого лежит принцип, заключающийся в том, что процесс перекисного окисления полиненасыщенных жирных кислот сопровождается перегруппировкой двойных связей и возникновением системы сопряженных диеновых структур, имеющей максимум поглощения при 232-234 нм с плечом в области 260-280 нм;
- количество малонового диальдегида определяли методом, основанным на том, что при высокой температуре в кислой среде малоновый диальдегид реагирует с 2-тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенного триметинового комплекса, экстрагируемого бутанолом, имеющего максимум поглощения при 532 нм;
- уровень флуоресцирующих оснований Шиффа определяли с помощью спектроколориметра «Спекол-10» с приставкой для определения флуоресценции.
Концентрацию селена определяли на атомно-абсорбционном спектрофотометре AAS-1, живую массу определяли при взвешивании на электронных весах. Данные, полученные при поведении опытов, подвергались биометрической обработке на ПК с помощью программы «Биостат».
Результаты исследований
При анализе результатов исследований установлено увеличение количества эритроцитов и лейкоцитов в опытной группе на 5,3 и 8,7% соответственно, тогда как в контрольной группе значимых изменений по данным показателям не произошло (табл.). Уровень общего белка также возрос в первой группе на 6,4%.
Применение препарата способствовало активизации ферментативного звена ан-тиоксидантной системы защиты. Так, активность каталазы в опытной группе возросла на 11,9%, а активность пероксида-зы — на 9,9%. Наиболее значительные изменения произошли относительно глу-татионпероксидазы — ключевого фермента в нейтрализации свободных радикалов, активность которого возросла у поросят из первой группы на 49,6% и в конце опыта была выше, чем у поросят из второй группы, на 21,4%. Уровень церулоплазмина возрос на 12,6% у опытных овец и уменьшился на 8,6% у контрольных. Увеличение уровня восстановленного глутатиона в первой группе в конце опыта составило 10,3%.
Вестник Алтайского государственного аграрного университета № 12 (74), 2010
47
Таблица
Биохимические, гематологические показатели и живая масса поросят (п = 15)
Показатель До введения Через 30 дней
1-я группа 2-я группа 1-я группа 2-я группа
Эритроциты, 1012/л 7,50±0,41 7,58±0,34 7,92±0,49 7,51±0,39
Лейкоциты, 109/л 9,24±0,51 9,92±0,67 10,04± 0,64 9,76±0,71
Гемоглобин, г/л 107,1±9,4 105,3±8,9 111,3±9,8 106,1±9,2
Общий белок, г/л 67,20±4,32 66,39±5,18 71,50±5,73 66,91±5,94
Активность каталазы, мкМ Н2О2 /л-мин.-103 41,79±3,42 43,27±3,31 46,76±3,86 44,05±3,42
Активность пероксидазы, ед. опт. пл/л-с 48,11± 4,22 44,92±3,68 52,82±4,51 43,21± 3,71
Активность глутатионпероксидазы, мкМ G-SH/л мин.-103 6,13±0,54 6,74±0,48 8,17±0,61* 6,42±0,33
Церулоплазмин, мкмоль бензохинона/л мин. 315,2± 10,6 348,0± 16,2 354,9±13,3 324,4± 14,1
Диеновые конъюгаты, ед. опт. пл/мг липидов 0,27±0,02 0,24±0,02 0,20±0,02* 0,26±0,02
Малоновый диальдегид, мкмоль/л 0,58±0,04 0,53±0,04 0,45±0,03 0,55±0,05
Основания Шиффа, отн. ед/мл сыворотки 0,34±0,02 0,35±0,02 0,29± 0,02* 0,34±0,02
Глутатион восст., ммоль/л 0,52±0,04 0,47±0,03 0,58±0,04 0,49±0,03
Селен, мг% 1,11±0,14 1,38± 0,21 9,96±0,83* 1,47±0,36
Живая масса, кг 28,1±1,67 27,6±1,74 42,3±2,59 37,2±2,41
* Р<0,05 — разница между группами статистически достоверна.
Повышение активности ферментов повлияло на концентрацию побочных продуктов перекисного окисления в крови. Концентрация диеновых конъюгатов уменьшилась на 26,2%, а малонового ди-альдегида — на 22,2. Уровень флуоресцирующих оснований Шиффа уменьшился на 14,2%.
При рассмотрении динамики концентрации селена в крови в опытной группе отмечено увеличение по этому показателю в 9 раз. Положительное влияние мебисела на организм подтверждается приростом живой массы, который составил в опытной группе 14,2 кг за месяц, среднесуточный прирост — 473 г, а в контрольной группе соответственно — 9,6 кг и 319 г.
Заключение и выводы
Внутримышечное введение препарата «Мебисел» молодняку свиней способствует увеличению прироста живой массы и стабилизации гематологических показателей. Увеличение концентрации селена в крови способствует активизации антиокси-дантных ферментов, что обусловливает защиту организма поросят от чрезмерного образования гидроперекисей, и выражается это в уменьшении концентрации недоокисленных продуктов перекисных реакций до уровня физиологической нормы. Установлено положительное влияние препарата на функционирование антиок-сидантной системы, которое выражается
в увеличении уровня церулоплазмина и восстановленного глутатиона.
Библиографический список
1. Майстров В.И. Антиоксидантно-анти-радикальная и тиол-дисульфидная системы племенных бычков под влиянием комплекса биологически активных веществ /
B.И. Майстров, В.П. Галочкина, Н.С. Ще-велев // Сельскохозяйственная биология. — 2006. — № 2. — С. 64-68.
2. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова. — М.: Наука, 2001. — 343 с.
3. Burk R.F. Selenoprotein metabolism and function: evidence for more that one function for selenoprotein / R.F. Burk, K.E. Hil, A.K. Motley // J. Nutr. — 2003. — Vol. 33. — № 5. — P. 1517-1520.
4. Балым Ю.П. Экспериментальная и клиническая фармакология селеданта и эффективность применения его в ветеринарии и животноводстве: автореф. дис. ... д-ра вет. наук / Ю.П. Балым. — Воронеж, 2008. — С. 42.
5. Журавлёв А.И. Биоантиокислители и их роль в регуляции окислительных процессов / А.И. Журавлёв. — М., 1968. —
C. 7-14.
6. Papas A.M. Antioxidant status, Diet, Nutrition and Health / A.M. Papas. // Boca Ration.: CRC Press, 1999. — 650 p.
+ + +
