ВЛИЯНИЕ ЛОКАЛЬНОЙ ГИПОТЕРМИИ НА СОХРАНЕНИЕ НЕРВНОЙ ТКАНИ У КРЫС ПОСЛЕ ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

27

эктопического кроветворения повышенной клеточности, что указывает на наличие расширенной кроветворной территории, образованной индуцированными ИЛ-1р стро-мальными клетками-предшественницами. Аналогичный эффект происходит при использовании необлученного реципиента, которому под кожу предварительно имплантировали кости от облученного сингенного донора.

Согласно нашему предположению, повышению ИЛ-1 р в крови облученных животных предшествует краткосрочное или конститутивное повышение экспрессии в костях неизвестного фактора, который попадает в кровь и стимулирует где-то в организме повышенный синтез и секрецию ИЛ-ip в периферическую кровь, что и приводит к наблюдаемому феномену. Вероятно, это происходит за счёт деметилирования промотора ИЛ-1р, поскольку эффект наблюдается в течение нескольких месяцев после облучения. Фактором, индуцирующим повышение уровня ИЛ-1 р, может являться фактор некроза опухолей альфа (ФНОа). ФНОа — один из ключевых регуляторов кроветворения и, в частности, врожденного иммунитета. Связывание ФНОа с рецепторами на поверхности клеток приводит к активации таких сигнальных каскадов, как NF-kB, JNK и каспазы-8, которые важны для активации воспаления, пролиферации и апоптоза, соответственно. ИЛ-1 р, в свою очередь, является одной из мишеней NF-kB.

Для проверки предположения мы исследовали экспрессию ФНОа в костях необлученных (n = 3) и облученных в дозе 5 Гр (n = 3) и 6 Гр (n = 5) мышей линии C57Black через 3-5 месяцев после экспозиции. Из бедер и голеней выделяли РНК, строили кДНК и проводили ПЦР в режиме реального времени на Tnfa (ФНОа). Нормализацию проводили по генам домашнего хозяйства Sdha и Rpl13a. Показано, что в костях мышей, облученных в дозе 5 Гр и 6 Гр, через несколько месяцев наблюдается повышенная экспрессия ФНОа в 2,5 ± 0,3 и 2,3 ± 0,3 раз, соответственно, по отношению к контролю. Совместно с данными других экспериментов, демонстрирующих способность ФНОа деметилировать CpG в промоторе гена Il1b, кодирующего ИЛ-1р, это усиливает гипотезу о том, что в наблюдаемом феномене ИЛ-1р является промежуточным звеном, которое регулируется ФНОа.

Наши эксперименты подтверждают важную роль ФНОа не только для кроветворных клеток, но также и для клеток кроветворного микроокружения in vivo, стромальных клеток костного мозга. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22-25-00459.

ВЛИЯНИЕ ЛОКАЛЬНОЙ ГИПОТЕРМИИ НА СОХРАНЕНИЕ НЕРВНОЙ ТКАНИ У КРЫС ПОСЛЕ ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА

С.О. Бикеева1, О.Н. Чернова2, 3, Д.Э. Сабирова1, Е.В. Федоренко1, Т.В. Балтина1

1 Институт фундаментальной медицины и биологии, Казанский Федеральный Университет, Казань, Россия

2 Кафедра морфологии человека, Северо-Западный государственный медицинский университет

им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия

3 Кафедра патологии и судебной медицины, ЧОУ ВО Медико-социальный институт, Санкт-Петербург, Россия

e-mail: sofYabikeeva01@mail.ru

Ключевые слова: травма спинного мозга, локальная гипотермия, иммуногистохимический анализ, кавитации, синап-тофизин, миелинобразующие клетки, ремиелинизация.

Целью работы явилось проведение морфометриче-ской оценки серого и белого вещества спинного мозга у крыс после травмы спинного мозга (ТСМ) и локальной гипотермии (ТСМ+ГТ).

Исследование проведено на 24 самцах крыс породы Sprague Dawley, весом 160-180 г. Все эксперименты были выполнены с соблюдением биоэтических норм. В условиях операционной, с соблюдением всех правил асептики и антисептики животным наносилась конту-зионная ТСМ на уровне Th8 по А.Р. Аллену (1911) [1]. Для нанесения локальной интраоперационной гипотермии использовался приготовленный хладагент, который на 20 минут помещался в декомпрессионном окне ламинэктомированного позвонка на твердую мозговую оболочку спинного мозга, как описано ранее [2]. Животных выводили из эксперимента на 1, 3, 7 и 21 сутки. Криосрезы окрашивали иммуногистохи-мически с антителами к синаптофизину (в разведении 1:400, ab32127, RabMAb, США) и миелину (в разведении 1:100, ab40390, Abcam, США). Проводили анализ и сравнение общего объема полостей в сером и белом веществе спинного мозга.

В результате контузионной травмы спинного мозга в зоне поражения наблюдались множественные кавитации. В группе ТСМ площадь кавитации в сером веществе в 1 сутки после травмы была на 65 % выше, чем в группе ТСМ+ГТ. В дальнейшем область кавитации в группе ТСМ снижалась. На 21 сутки площадь образованных полостей была на 40 % выше в группе ТСМ+ГТ, чем в группе ТСМ. Иммуногистохимический анализ криосрезов показал, что в клетках серого вещества передних рогов спинного мозга экспрессия синаптофи-зина, начиная с 1 суток до 7 суток, была выше в группе ТСМ+ГТ по сравнению с группой ТСМ. На 3 сутки количество миелинобразующих клеток было выше в группе ТСМ. Наибольшая концентрация миелинобразующих клеток наблюдалась в сером веществе задних рогов спинного мозга на 7 сутки в группе ТСМ+ГТ.

Таким образом, мы показали, что интраоперацион-ная локальная гипотермия способствует сохранению нервной ткани серого и белого вещества спинного мозга после ТСМ у крыс. Локальная гипотермия позволяет уменьшить степень демиелинизации аксонов в передних рогах серого вещества спинного мозга после ТСМ у крыс, способствует восстановлению синап-тических контактов между клетками и более раннему запуску процессов ремиелинизации. Работа выполнена в рамках программы «Стратегическое академическое лидерство Казанского федерального университета» (ПРИ0РИТЕТ-2030).

Литература:

1. Baltina T.V., Silantyeva D.I., Loban E. Yu.et al. Uchenye Zapiski

Kazanskogo Universiteta. Seriya Estestvennye Nauki. 2018. V.

160. № 4. P. 630.

2. lafarova G.G., Tumakaev R.F., Khazieva A.R. et al. Biofizika.

2014. V. 59. № 5. P. 1017.

Гены & Клетки XVII, №3, 2022