CC BY
12функционирование компонентов ФАС в сыворотке крови и слизистой оболочке полости рта.
2. Фенигидин частично инактивировал защитные антиоксидантные ферменты; усиливал эрозию эпителиального пласта СОПР, в большей степени в условиях алиментарной полифеноль-ной недостаточности.
3. Фенигидин в условиях полифенольной недостаточности значительно снижал митотическую активность эпителиальных клеток, что свидетельствует о его патогенном влиянии на клеточный (митотический) цикл эпителиоцитов СОПР.
Список литературы
1. Воскресенский О.Н. Роль растительных полифенолов в формировании общей и местной резистентности / О.Н. Воскресенский, Е.К.Ткаченко, И.Н.Моисеев [и др.] // Матерiали сшп. «Рослинш полiфеноли та неспецифiчна резистентнють» - Вюник стомотологй. - 2006 - Спецвипуск. - с. 10-11.
2. Прохончуков А.А. Руководство по терапевтической стоматологии / А.Прохончуков, Н. Жи-жина // Под ред. А.И. Евдокимова. - М.: Медицина. -1967. - 572с.
3. Стальная И.Д. Метод определения диеновых конъюгаций ненасыщенных высших жирных кислот / И. Стальная, Т. Гаришвили // Современные методы биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. - М. - 1977. -С.63-64.
4. А.С.922637 СССР. МКИ 01 33/48. Способ определения активности глутатион-пероксидазы в биологических тканях / Пахомова В.А., Козлянина Н.П., Крюкова Г.Н. (СССР). - Опубл. 25.04.82, Бюл. №15. - 2 с.
5. Путилина Е.Ф. Определения активности глутатион-редуктазы / Путилина Е.Ф. // Методы биохимически™ исследований. - М.: Ин. Лит. - 1982. -С.181-183.
6. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / Королюк М.А., Иванова Д.И., Майорова И.Г. // Лабораторное дело. - 1988. - №1. - С. 16-18.
7. Левицкий А.П. Сравнительная оценка трёх методов определения активности фосфатаз слюны человека / Левицкий А.П., Марченко А.И., Рыбак Т.Л. // Лаб. дело. - 1972. - №10. - С. 624-625.
8. Меркулов Г.А. Курс патологической техники / Меркулов Г.А. - Л., 1969. - 423 с.
9. Пирс Э. Гистохимия / Пирс Э. - М., ИЛ., 1962. - 962 с.
10. Автандилов Г.Г. Медицинская морфомет-рия. Руководство. - М.: Медицина, 1990. - 384 с.
Поступила 09.02.10.
УДК:616.314-002-085.242-085.31:547.953.2:615.038
О. С. Волкова, Е. Н. Рябоконь, д.мед.н. Харьковский национальный медицинский университет
ВЛИЯНИЕ ЛЕЦИТИН-КАЛЬЦИЕВОГО ПРЕПАРАТА НА СОСТОЯНИЕ ЗУБОВ И КОСТНОЙ ТКАНИ ПАРОДОНТА КРЫС, ПОЛУЧАВШИХ КАРИЕСОГЕННЫЙ РАЦИОН
У крыс воспроизводили экспериментальный кариес с помощью диеты Стефана и установили достоверное увеличение числа и глубины кариозных поражений, увеличение в костной ткани альвеолярного отростка уровня маркеров воспаления (МДА, ОПА, активности эластазы, КФ) и снижение активности каталазы и индекса АПИ. Одновременное введение препарата "Лецитин-2" (сочетание лецитина и цитрата кальция) оказывало кариеспрофилактический и пародон-топротекторный эффект, резко повышало в пульпе активность ЩФ, достоверно снижало уровень маркеров воспаления в костной ткани альвеолярного отростка и увеличивало в ней активность каталазы и индекса АПИ.
Ключевые слова: кариес, пародонт, лецитин, фос-фатазы, протеазы, малоновый диальдегид, каталаза.
О. С. Волкова, Е. Н. Рябоконь
Харювский нацюнальний медичний ун1верситет
ВПЛИВ ЛЕЦИТИН-КАЛЬЩеВОГО ПРЕПАРАТУ НА СТАН ЗУБ1В I К1СТКОВО1 ТКАНИНИ ПАРОДОНТУ ЩУР1В, ЩО ОТРИМУВАЛИ КАР1еСОГЕННИЙ РАЦ1ОН
У щурiв вiдтворювали експериментальний карieс за допомогою дicти Стефана i встановили достовiрне збшьшення числа i глибини карiозних уражень, збшь-шення в юстковш тканин альвеолярного вiдростка рiвня маркерiв запалення (МДА, ЗПА, активностi ела-стази, КФ) та зниження активностi каталази i тде-кса АП1. Одночасне введення препарату "Лецитин-2" (сполучення лецитину i цитрату кальцю) здшснювало карicспрофiлактичний i пародонтопротекторний ефект, рiзко тдвищувало в пульт активтсть ЛФ, достовiрно знижувало рiвень маркерiв запалення в ю-стковш тканин альвеолярного вiдростка та тдвищувало в нш активтсть каталази i тдекса АП1. Ключов1 слова: карieс, пародонт, лецитин, фосфата-зи, протеази, малоновий дiальдегид, каталаза.
© Волкова О. С., Рябоконь Е. Н., 2010
O. S. Volkova, Y. N. Ryabokon
Kharkov National Medical University
INFLUENCE OF LECITHIN - CALCIUM
DRUG ON THE DENTAL HEALTH AND PARADONTAL OSSEOUS TISSUE OF THE RATS, WHICH WERE RECEIVED CARIESOGENIC RATION
At the experiment of the 30 white rarts we reproduced experimental caries with the help of Stefan's diet and settled trustworthy increase of number and depth of the cariesogenic defeats, augmentation of inflammation marker's level in the osseous tissue of alveolar process (MDA, OPA, activity of elastase, CP) and decrease of catalase activity and index API.
Concurrent introduction of lecithin - calcium drug "Lecitin-2" (combination of lecithin and calcium citrate) lend cariespreventive and parodontoprotective effect, sharply raise in pulp activity of Alkaline Phosphatase, trustworthy lower of inflammation marker's level in the osseous tissue of alveolar process and increased in it of catalase activity and index API.
Key words: caries, parodont, lecithin, phosphatases, proteases, malonic dialdehyde, catalase.
Заболеваемость кариесом зубов населения Украины остается высокой, распространенность достигает 95-98% в различных возрастных группах [1,2,3]. При этом наблюдается тенденция к увеличению этого заболевания. Поэтому проблема профилактики кариеса зубов остается чрезвычайно актуальной [4,5]. На сегодняшний день одним из заданий стоматологии остается необходимость разработки эффективных и доступных всем слоям населения профилактических мер [4, 5]. Экспериментальные исследования в этой отрасли помогут повлиять на поиск новых адекватных средств профилактики, которые улучшат стоматологическое здоровье населения.
Большинство отечественных и зарубежных исследователей, независимо от своих взглядов на суть кариозного процесса и механизм его возникновения, признают большую роль в этом процессе алиментарного фактора [3].
Целью настоящего исследования явилось изучение лечебно-профилактического действия лецитин-кальциевого препарата "Лецитин-2", который представляет собой сочетание в соотношении 1:1 подсолнечного лецитина и цитрата кальция (ТУ У 15.8-13903778-82-2000, разрешение МЗУ № 5.08.07/630 от 23.02.2000 г., выпускается НПА "Одесская биотехнология") при воспроизведении модели кариеса по Стефану (1955)[6].
Объектом исследования стали зубы и костная ткань пародонта.
Материалы и методы исследования. Эксперимент был проведен на 30 крысах-самцах линии Вистар в возрасте 3 месяца массой 120-190 г.
Все экспериментальные животные были разделены на 3 группы по 10 крыс в каждой: 1-ая -интактные (контроль), 2-ая - кариесогенный рацион Стефана [6, 7], 3-ая - кариесогенный рацион + препарат "Лецитин-2" в дозе 300 мг/кг живой массы перорально ежесуточно. Профилактику препаратом начинали с первого дня введения кариесогенного рациона.
Содержание экспериментальных животных и манипуляции с ними проводили согласно научно-практических рекомендаций по содержанию лабораторных животных и обращению с ними [8], положений "Европейской конвенции о защите позвоночных животных, которые используются для экспериментальных и научных целей" [911].
Через 30 дней животных, с 93% выживаемостью (2 крысы погибли в течение эксперимента), умерщвляли под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг), извлекали пульпу из резцов, вычленяли челюсти, подсчитывали число кариозных поражений зубов [7], степень атрофии альвеолярного отростка [12] и часть альвеолярного отростка нижней челюсти использовали для биохимических исследований.
В гомогенате пульпы (5 мг ткани на мл 0,9% NaQ) определяли активность щелочной (ЩФ) и кислой фосфатаз (КФ) [13]. В гомогенате костной ткани альвеолярного отростка (75 мг ткани на мл 0,1М цитратного буфера рН 6,1) определяли активность ЩФ и КФ [14], общую протеоли-тическую активность (ОПА) [14], активность эластазы [15] и каталазы [16], а также концентрацию малонового диальдегида (МДА) [17]. По соотношению активностей ЩФ и КФ рассчитывали индекс минерализации, по соотношению активностей ОПА и эластазы - индекс коллаге-нообразования [18], а по соотношению активности каталазы и концентрации МДА - антиокси-дантно-прооксидантный индекс АПИ [19].
Результаты исследований и их обсуждение. В табл. 1 представлены результаты исследования кариеспрофилактической и пародонтопро-текторной активности лецитин-кальциевого препарата. Моделирование кариеса с помощью диеты Стефана, которая считается более физиологичной, чем диета Бугаевой-Никитина [7, 20], показало достоверное увеличение пораженности зубов кариесом. Введение "Лецитина-2" снижало число кариозных поражений ^>0,05) и их глубину ^<0,05).
Что же касается атрофии альвеолярного отростка, то она достоверно снижалась по сравнению с интактным контролем.
Возможно, не очень убедительные результа- тин-2" объясняются кратковременностью опыта ты исследования кариеспрофилактических и па- (30 дней) и более зрелым возрастом животных. родонтопротекторных свойств препарата "Леци-
Таблица 1
Влияние лецитин-кальциевого препарата на поражение зубов кариесом и степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти крыс, получавших кариесогенный рацион
Количество, п Кариес Атрофия альвеолярного отростка, %
Группы Число кариозных полостей на 1 крысу Глубина кариозных поражений, баллы
Интактная (контроль) 10 4,7±0,5 4,9±0,5 22,9±0,6
Кариесогенный 9 6,4±0,4 7,4±0,5 21,6±0,8
рацион (КР) р<0,05 р<0,01 р>0,1
5,5±0,2 5,7±0,3 20,7±0,6
КР + «Лецитин-2» 9 р>0,05 р>0,05 р<0,05
р1>0,05 р1<0,05 р1>0,1
Примечание : р - показатель достоверности различий с интактной группой;
р! - показатель достоверности различий с группой «кариесогенный рацион».
В табл. 2 представлены результаты определения активности фосфатаз в пульпе зубов крыс, получавших кариесогенный рацион и препарат "Лецитин-2". Как видно из этих данных, карие-согенный рацион несколько увеличивает актив-
ность КФ (р>0,05) и, как следствие, снижает индекс минерализации (ЩФ/КФ). Одновременное введение лецитин-кальциевого препарата резко увеличивает активность ЩФ и достоверно увеличивает индекс минерализации пульпы.
Таблица 2
Влияние лецитин-кальциевого препарата на активность фосфатаз пульпы резцов крыс,
получавших кариесогенный рацион
Группы Количество, п ЩФ, мк-кат/кг КФ, мк-кат/кг ЩФ/КФ
Интактная (контроль) 10 1810±160 29,9±3,6 60,5±5,7
Кариесогенный 9 1910±110 39,2±4,8 48,7±5,1
рацион (КР) р>0,4 р>0,05 р>0,05
3820±190 34,6±3,1 110,4±9,4
КР + «Лецитин-2» 9 р<0,001 р>0,1 р<0,01
р1<0,001 р1>0,3 р!<0,001
Примечание : р - показатель достоверности различий с интактной группой; р] - показатель достоверности различий с группой «кариесогенный рацион».
Таблица 3
Влияние лецитин-кальциевого препарата на биохимические показатели костной ткани альвеолярного отростка нижней челюсти крыс, получавших кариесогенный рацион
Показатели Интактные (контроль), п=10 Кариесогенный рацион, п=9 Кариесогенный рацион + «Ле-цитин-2», п=9
МДА, ммоль/кг 3,51±0,27 7,06±0,52 р<0,001 6,24±0,58 р<0,01 р1>0,1
ОПА, мк-кат/кг 14,93±2,44 30,36±3,11 р<0,001 16,92±1,98 р>0,3 р!<0,001
Продолжение таблицы 3
2,59±0,31 5,52±0,42 4,57±0,37
Эластаза, мк-кат/кг р<0,001 р<0,001 р1>0,05
30,01±3,93 42,56±5,9 37,24±1,23
ЩФ, мк-кат/кг р>0,05 р>0,05 р1>0,3
2,88±0,49 4,31±0,56 3,85±0,42
КФ, мк-кат/кг р<0,05 р>0,1 р1>0,3
1,82±0,16 1,39±0,09 1,93±0,05
Каталаза, мкат/кг р<0,05 р >0,3 р1<0,001
Примечание : р - показатель достоверности различий с интактной группой;
р1 - показатель достоверности различий с группой «кариесогенный рацион».
В табл. 3 представлены результаты исследования ряда биохимических показателей костной ткани альвеолярного отростка нижней челюсти крыс, которые получали кариесогенный рацион и препарат "Лецитин-2".
Из представленных данных видно, что ка-риесогенный рацион достоверно увеличивает активность всех гидролаз (кроме ЩФ) и концентрацию МДА. Напротив, активность каталазы, защитного антиоксидантого фермента, достоверно снижается.
Введение крысам, получавшим кариесогенный рацион, препарата "Лецитин-2" снижает активность всех гидролаз (правда, достоверно
лишь ОПА) и существенно увеличивает активность каталазы.
В табл. 4 показаны величины функциональных индексов костной ткани пародонта, из которых изменение индексов минерализации и кол-лагеннообразования статистически недостоверны, и лишь индекс АПИ существенно снижается у крыс, получавших кариесогенный рацион, и повышается (хотя и не доходит до нормы) при введении "Лецитина-2". Эти обстоятельства свидетельствуют о благоприятном действии лецитин-кальциевого препарата на костную ткань па-родонта, что и подтверждается достоверным снижением степени атрофии (табл. 1).
Таблица 4
Влияние лецитин-кальциевого препарата на функциональные индексы костной ткани альвеолярного отростка нижней челюсти крыс, получавших кариесогенный рацион
Функциональные индексы Интактные (контроль), п=10 Кариесогенный рацион, п=9 Кариесогенный рацион + «Лецитин-2», п=9
Индекс 10,42±1,65 9,87±1,72 9,67±1,07
минерализации, ЩФ/КФ р>0,5 р>0,5 р1>0, 7
Индекс 5,76±0,85 5,50±0,79 3,70±0,74
коллагенообразования, ОПА/эластаза р>0,6 р>0,1 р1>0,1
Антиоксидантно -
прооксидантный индекс АПИ ёадаёада х10 [Ж ] 5,19±0,41 1,97±0,22 р<0,001 3,09±0,25 р<0,001 р1<0,002
Примечание : р - показатель достоверности различий с интактной группой;
р1 - показатель достоверности различий с группой «кариесогенный рацион».
Выводы. 1. Кариесогенный рацион Стефана увеличивает число кариозных поражений зубов, снижает минерализующую активность пульпы, увеличивает в костной ткани пародонта концентрацию МДА, активность эластазы, КФ и ОПА, а также снижает активность каталазы.
2. Одновременное введение крысам, получавшим кариесогенный рацион, препарата "Ле-цитин-2", содержащего лецитин и цитрат кальция, снижает пораженность зубов кариесом и степень атрофии альвеолярного отростка, увеличивает в пульпе активность ЩФ и индекс мине-
рализации, а в костной ткани пародонта снижает активность протеаз и увеличивает активность ка-талазы и индекс АПИ.
Список литературы
1. Клинико-лабораторная оценка эффективности интегральной системы профилактики основных стоматологических заболеваний / Белоклицкая Г.Ф., Саливон В.П., Пахомова В.А., Протункевич О.О // Современная стоматология.- 2006.- №4.- С.53-58.
2. Косенко К.Н. Эпидемиология основных стоматологических заболеваний у населения Украины и пути их профилактики: дис... доктора мед. наук: 14.01.22 / Константин Николаевич Косенко. - Одесса, 1993. - 263 с.
3. Левицкий А.П. Современные представления об этиологии и патогенезе кариеса зубов / А.П. Левицкий // Вюник стоматологи. - 2002. - № 4. - С. 119124.
4. Хоменко Л.А., Мурланова Т.П., Биден-
ко Н.В. Профилактика кариеса зубов у детей младшего школьного возраста // Современная стоматология. -2006.- №2.- С.66-68.
5. Борисенко А.В. Кариес зубов: [практическое руководство] / А.В. Борисенко - К.: Книга плюс, 2000.
- 344 с.
6. Stephan R.M., Harris N.R. // Advances in Experimental Caries Research. - Washington, 1955.- Р. 47-48.
7. Терешина Т.П., Косенко К.М., Левицький А.П., Мозгова Н.В., Близнюк Г.О. Експерименталь-не вивчення до та специфiчноi ефективносп засоб1в для догляду за порожниною рота: Метод. рекомендаций - ДФЦ МОЗУ. - К., 2003. - 42 с.
8. Науково-практичш рекомендаци з утриман-ня лабораторних тварин та роботи зними / Ю.М. Ко-жем'яшн, О.С. Хромов, М.А. Фшоненко, Г.А. Сайфет-дшова.- К.: Авщенна, 2002.- 156с.
9. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes. - Strasbourg, Council of Europe, Publications and Documents Division.- Printed in France.- Edition November, 1987.
10. Кожухов А.Н., Калиниченко И.В., Доб-ржинский А.Т. Ветеринарно- санитарные правила и нормы содержания подопытных (лабораторных) животных, соответствующие международно принятым требованиям (методические указания) // Лабораторные животные.- 1992.- Т.2.- №2.- С.27-46.
11. Иоффе Р., Добле З. Маркировка животных (практикум)// Лабораторные животные.- 1992.- Т.2.-№2.- С.58-64.
12. Николаева А. В. Влияние некоторых нейро-тропных средств на состояние тканей пародонта при раздражении верхнего шейного симпатического узла: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Харьков, 1967. -18 с.
13. Левицкий А. П., Марченко А. И., Рыбак Т. Л.
Сравнительная характеристика трех методов определения фосфатаз слюны человека // Лабораторное дело.
- 1973. - № 10. - С. 624-625.
14. Левицкий А. П., Макаренко О. А., Деньга О. В., и соавт. Экспериментальные методы иссле-
дования стимуляторов остеогенеза: Метод. рекомендации. - К.: ГФЦ, 2005. - 30 с.
15. Visser L., Braif E.R. The use of p-nitrophenyl-N-tret-lutyl-oxycarbonyl-L-alanine as substrate for elastase // Biochim. and biophys. Acta. - 1972. - V. 268, № 1. - Р. 275-280.
16. Гирин С.В. Модификация метода определения активности каталазы в биологических субстратах // Лабораторная диагностика. - 1999. - № 4. - С. 4546.
17. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тио-барбитуровой кислоты. В кн.: "Современные методы в биохимии". - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.
18. Левицький А.П., Макаренко О.А., Ходаков 1.В., Зеленша Ю.В. Ферментативний метод оцшки стану шстково1 тканини // Одеський медичний журнал. - 2006. - № 3. - С. 17-21.
19. Левицький А.П., Почтар В.М., Макаренко О.А., Гридша Л.1. Антиоксидантно-прооксидантний шдекс сироватки кровi щурiв з експериментальним стоматитом i його корекцiя зубними елшсирами // Одеський медичний журнал. - 2006. - № 6. - С. 22-25.
20. Волкова О.С., Волков С.Н. Биохимические изменения в сыворотке крови крыс, содержащихся на кариесогенной диете с добавлением фосфатидилхолина (лецитина), растительного масла и препарата кальция // Вюник стоматологи. - 2009. - № 1. - С. 6-10.
Поступила 01.03.10.
УДК 615.2:615.03-617.089.002
О. А. Макаренко, к. биол. н., К. В. Скидан, к. мед. н., М. И. Скидан
ГУ «Институт стоматологии АМН Украины» ГУ «Харьковский национальный медицинский университет»
ВЛИЯНИЕ КВЕРЦЕТИНА НА СОСТОЯНИЕ ЗУБО-ЧЕЛЮСТНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС, ПОЛУЧАВШИХ КАРИЕСОГЕННЫЙ РАЦИОН
В эксперименте на крысах показано, что содержание животных на кариесогенном рационе увеличивает не только пораженность зубов кариесом, но вызывает развитие воспалительно-дистрофических процессов в мягких и твердых тканях пародонта. Применение кверцетина в значительной степени устраняет негативные проявления содержания животных на ка-риесогенном рационе.
ОМакаренко О. А., Скидан К. В., Скидан М. И., 2010
