Пародонтопротекторное и кариеспрофилактическое действие оральных гелей с про- и пребиотиками у крыс с экспериментальным дисбиозом, получавших высокожировой рацион Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 612.336.3+616.314-002.4-084:615.454.1+599.323.1

С. А. Шнайдер, д. мед. н., И. А. Цушко, А. П. Левицкий, д. биол. н.

Государственное учреждение «Институт стоматологии

Национальной академии медицинских наук Украины»

ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРНОЕ И КАРИЕСПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ОРАЛЬНЫХ ГЕЛЕЙ С ПРО- И ПРЕБИОТИКАМИ У КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ДИСБИОЗОМ, ПОЛУЧАВШИХ ВЫСОКОЖИРОВОЙ РАЦИОН

Введение крысам линкомицина на фоне высокожирового рациона вызывает развитие в тканях полости рта воспаления, усиливает атрофию альвеолярного отростка и увеличивает число и глубину кариозных поражений зубов. Оральные аппликации гелей, содержащих про- и пребиотики, иммуностимуляторы и адаптогены оказывают противовоспалительное, пародонтопротекторное и кариеспрофилактическое действие.

Ключевые слова: дисбиоз, высокожировой рацион, воспаление, пародонт, кариес зубов, пробиотики, пре-биотики.

С. А. Шнайдер, I. А. Цушко, А. П. Левицький

Державна установа «1нститут стоматологи Национально! академл медичних наук Украши»

ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРН1 I КАР1€СПРОФ1ЛАКТИЧШ Д11 ОРАЛЬНИХ ГЕЛ1В З ПРО- I ПРЕБ1ОТИКАМИ У ЩУР1В З ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИМ Д1ЗБ1ОЗОМ, ЯК1 ОТРИМУВАЛИ ВИСОКОЖИРОВИЙ РАЦ1ОН

Введення щурам лткомицину на тл1 високожирового рацюну викликае розвиток в тканинах порожнини рота запалення, посилюе атрофт альвеолярного вгдростка та збшьшуе число i глибину каргозних уражень зу-бгв. Оральш аплгкацИ гелгв, що мгстять про- i пребютики, гмуностимулятори i адаптогени роблять протиза-пальну, пародонтопротекторну i каргеспрофтактичну дт.

Ключовг слова: дизбюз, високожировий рацюн, запалення, пародонт, карiес зубiв, пробютики, пребютики.

S. A. Shnaider, I. A. Tsushko, A. P. Levitskij

State Establishment "The Institute of Stomatology of the National academy of medical science of Ukraine"

THE PERIODONTOPROTECTIVE AND CARIES PREVENTIVE EFFECT OF ORAL GELS WITH PRO- AND PRE-BIOTICS IN RATS WITH THE EXPERIMENTAL DYSBIOSIS, KEPT TO FATTY DIET

The aim. To reveal the periodontoprotective and cariespreventive effect of antidysbiotic preparations in rats with dysbiosis, kept to fatty diet (FD).

The materials and the methods: Dysbiosis was restored with lincomycin and FD during 20 days. The antidysbiotic preparations (like oral gels "Simbiter" and "Quertulidon") dosed at 0.3 ml/per rat .were applied on oral mucous membrane every day during 20 days. The development of inflammation was estimated according to the level of markers (MDA, elastase). The degree of atrophy of alveolar appendage was estimated with the method by Nikolaeva. The number of carious affections and their depth were calculated.

The findings. The intestinal dysbiosis + FD causes in oral tissues the development of inflammation and decrease of antioxidant - prooxidant index API, increase the degree of atrophy of alveolar appendage, the number and the depth of carious affections of teeth. The oral applications of gels "Simbiter" and "Quertulidon" have anti -inflammatory ef fect, reduce the degree of atrophy, number and depth of carious affections.

The conclusion. The antidysbiotic preparations have anti-inflammatory, periodontoprotective and cariespreventive influence.

Key words: dysbiosis, fatty diet, inflammation, periodontitis, teeth caries, probiotics, prebiotics.

Высокожировые рационы (ВЖР), особенно с большим содержанием пальмитиновой кислоты, способствуют развитию дисбиоза в тканях полости рта [1, 2]. Следствием дисбиоза может быть активизация патологических процессов в полости рта (развитие пародонтита, стоматита,

усиление кариозного процесса) [3]. Для устранения дисбиотических факторов развития стоматологической патологии предложено использовать антидисбиотические средства, представленные про- и пребиотиками, иммуномодуляторами, адаптогенами [4].

© Шнайдер С. А., Цушко И. А., Левицкий А. П., 2015.

Целью настоящего исследования стало определение пародонтопротекторной и кариеспрофи-лактической эффективности комплексных анти-дисбиотических оральных гелей, содержащих про- и пребиотики, иммуностимуляторы и адап-тогены, у крыс с экспериментальным дисбиозом, усиленным высокожировым рационом.

В качестве антидисбиотических гелей были использованы гель «Симбитер», содержащий пробиотические бактерии [5] и гель «Квертули-дон», содержащий пребиотик инулин, иммуностимулятор «Имудон» и адаптоген кверцетин [6].

Материалы и методы исследования. Эксперименты были проведены на 32 белых крысах линии Вистар (самцы, 5 месяцев, 200±12 г), распределенных в 4 равные группы: 1-ая - контроль (интактные), 2-ая - получала в течение 5 дней с питьевой водой антибиотик линкомицин в дозе 60 мг/кг [7], 3-я - в дополнение к линкомицину получала высокожировой рацион (25 % жира, из которых 60 % - пальмовое масло) в течение 20 дней, 4-ая получала линкомицин и ВЖР + еже-

дневные оральные аппликации по 0,3 мл на крысу мукозо-адгезивных гелей «Симбитер» и «Квертулидон» (оба геля производства ООО «Биохимтех», г. Одесса).

Умерщвление животных осуществляли на 21-й день опыта под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца.

В гомогенате слизистой щеки и десны определяли уровень маркеров воспаления [8]: содержание малонового диальдегида (МДА) [9] и активность эластазы [10], активность антиокси-дантного фермента каталазы [11], содержание гиалуроновой килоты [12]. Кроме того, определяли степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти по Николаевой [13], число кариозных поражений и их глубину [14]. По соотношению активности каталазы и содержания МДА рассчитывали антиоксидантно-

прооксидантный индекс АПИ [8].

Результаты подвергали стандартной статоб-работке [15].

Таблица 1

Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на уровень маркеров воспаления (МДА и эластаза) в десне крыс с кишечным дисбиозом и получавших высокожировой рацион (ВЖР) (М±т, п=8)

№№ пп Группы МДА, ммоль/кг Эластаза, мк-кат/кг

1 Контроль 16,1±1,1 7,32±0,36

2 Дисбиоз 21,4±1,8 р<0,05 8,79±0,44 р<0,05

3 Дисбиоз + ВЖР 21,6±1,4 р<0,05 р1>0,7 8,51±0,33 р<0,05 р1>0,5

4 Дисбиоз + ВЖР + АДП 17,0±1,6 р>0,3 р2<0,05 7,42±0,22 р>0,5 р2<0,05

Примечание : р - в сравнении с гр. 1; р1 - в сравнении с гр. 2; р2 - в сравнении с гр. 3.

Таблица 2

Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на уровень маркеров воспаления (МДА и эластаза) в слизистой оболочке щеки крыс с кишечным дисбиозом и получавших высокожировой рацион (ВЖР) (М±т, п=8)

№№ пп Группы МДА, ммоль/кг Эластаза, мк-кат/кг

1 Контроль 16,5±1,8 36±3

2 Дисбиоз 21,5±1,9 р>0,05 41±3 р>0,2

3 Дисбиоз + ВЖР 25,6±1,4 р<0,05 р1>0,05 59±4 р<0,01 р1<0,05

4 Дисбиоз + ВЖР + АДП 17,4±1,7 р>0,5 р2<0,05 52±7 р<0,05 р2>0,3

Примечание : см. табл. 1.

Таблица 3

Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с кишечным дисбиозом и получавших высокожировой

рацион (ВЖР) (М±т, п=8)

№№ пп Группы Каталаза, мкат/кг АПИ

1 Контроль 4,84±0,66 2,93±0,28

2 Дисбиоз 4,25±0,64 р>0,3 1,98±0,23 р>0,05

3 Дисбиоз + ВЖР 4,20±0,54 р>0,3 р:>0,7 1,64±0,19 р<0,05 р:>0,3

4 Дисбиоз + ВЖР + АДП 4,60±0,25 р>0,6 р2>0,5 2,65±0,20 р>0,3 р2<0,05

Примечание : см. табл. 1.

Таблица 4

Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на активность каталазы и индекс АПИ в слизистой оболочке щеки крыс с кишечным дисбиозом и получавших

высокожировой рацион (ВЖР) (М±т, п=8)

№№ пп Группы Каталаза, мкат/кг АПИ

1 Контроль 5,69±0,21 3,95±0,18

2 Дисбиоз 4,27±0,24 р<0,01 1,99±0,10 р<0,01

3 Дисбиоз + ВЖР 3,98±0,36 р<0,01 р:>0,3 1,55±0,11 р<0,01 р:<0,05

4 Дисбиоз + ВЖР + АДП 4,69±0,09 р<0,01 р2<0,05 2,70±0,15 р<0,05 р2<0,01

Примечание : см. табл. 1.

Результаты и их обсуждение. В табл. 1 представлены результаты определения маркеров воспаления в десне крыс с дисбиозом, получавших ВЖР и антидисбиотические гели. Из этих данных видно, что при кишечном дисбиозе достоверно возрастает уровень МДА, тогда как уровень второго маркера воспаления - эластазы, достоверно возрастает лишь при сочетании дис-биоза с ВЖР. Аппликации антидисбиотических гелей нормализуют оба маркера воспаления в десне.

В табл. 2 представлены результаты аналогичного исследования в слизистой щеки. Из этих данных видно, что при кишечном дисбиозе достоверно возрастает содержание МДА, тогда как уровень эластазы достоверно возрастает лишь при сочетании дисбиоза с ВЖР. Оральные аппликации гелей «Симбитер» и «Квертулидон» снижают уровень обоих маркеров воспаления, но достоверно лишь уровень МДА.

В табл. 3 показана активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с дисбиозом и получавших ВЖР. Видно, что активность каталазы испытывает лишь тенденцию к снижению при дисбиозе и применении ВЖР, тогда как индекс АПИ достоверно снижается при этих воздействиях. Аппликации антидисбиотических гелей повышают оба показателя, но достоверно лишь индекс АПИ.

В табл. 4 представлены результаты определения активности каталазы и индекса АПИ в слизистой оболочке щеки крыс с кишечным дис-биозом, получавших ВЖР. Как видно из этих данных, при дисбиозе и особенно при сочетании последнего с ВЖР, достоверно снижается в щеке активность каталазы и индекс АПИ. Оральные аппликации антидисбиотических гелей достоверно повышают оба показателя, хотя и не возвращают их к уровню нормы.

На рис. 1 представлены результаты определения в десне содержания гиалуроновой кисло-

ты, из которых следует, что дисбиоз и ВЖР проявляют лишь слабую тенденцию к снижению содержания гиалуроновой кислоты в десне, которое нормализуется после аппликаций оральных гелей. Однако степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти (рис. 1) достоверно

повышается при дисбиозе с ВЖР и резко снижается после аппликаций гелей «Симбитер» и «Квертулидон», что свидетельствует о пародон-топротекторном действии антидисбиотических препаратов.

ев Н

0,75 -| 0,6

Й 0,45

« о

о 0,3 а

£ 0,15

-м

8

-е

о

1з

Л К а С

£ о

50

44

38

32

26

-20

□ контроле Д И Д+ВЖР □ Д+ВЖР+АДП

0

Рис. 1. Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на содержание гиалуроновой кислоты в десне и степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти крыс с кишечным дисбиозом (Д) и получавших высокожировой рацион (ВЖР) *-р<0,05 в сравнении с гр. 1, **- р<0,05 в сравнении с гр. 2, ***- р<0,05 в сравнении с гр. 3

о

о О

ч о с и

3 к 00 О

8 &

« О

4

о

8 &

2,4

1,6

1,2

0,8

0,4

4,0

3,2

о .. 8

а ~

« 8

3 *

к ц

£ §

ел &

1-4 С

сЗ 2,4

1,6

0,8

□ контроле Д В Д+ВЖР □ Д+ВЖР+АДП

2

0

0

Рис. 2. Влияние антидисбиотических препаратов (АДП) на пораженность зубов кариесом у крыс с кишечным дисбиозом (Д) и получавших высокожировой рацион (ВЖР) *- р<0,05 в сравнении с гр. 1, **- р<0,05 в сравнении с гр. 2, ***- р<0,05 в сравнении с гр. 3

На рис. 2 представлены данные, свидетельствующие о кариесогенном действии дисбиоза и ВЖР. Оральные аппликации антидисбиотиче-ских гелей достоверно снижают и число кариозных полостей, и глубину кариозных поражений.

Таким образом, проведенные исследования показали важную роль дисбиоза и высокожирового питания в развитии стоматологической патологии, которую можно, в значительной степени, снизить с помощью новых антидисбиотиче-

ских препаратов, содержащих про- и пребиоти-ки, иммуностимуляторы и адаптогены.

Выводы. 1. Воспроизведение кишечного дисбиоза на фоне ВЖР вызывает развитие воспаления в тканях полости рта, снижение индекса АПИ, усиление рецессии тканей пародонта и кариозного процесса.

2. Оральные аппликации антидисбиотических гелей оказывают противовоспалительное, паро-донтопротекторное и кариеспрофилактическое действие.

Список литературы

1. Velichko V. I. Development of dysbiosis in tissues of rats fed with a high fat food / V. I. Velichko, V. V. Tkachuk, A. P. Levitsky. Journal of Health Sciences. - 2014. - № 4(12). -84-92.

2. Левицкий А. П. Гиперлипидемическое и продисби-отическое действие сливочного масла / А. П. Левицкий, Е. М. Левченко, С. И. Конкин / Актуальные проблемы транспортной медицины. - 2014. - т. 2, № 4 (38-II). - С. 127-131.

3. Сравнительная лечебная эффективность оральных аппликаций мукозальных гелей с про- и пребиотиками у крыс с экспериментальным дисбиозом / А. П. Левицкий, И. А. Селиванская, А. В. Воронкова [и др.] // Актуальные проблемы транспортной медицины. - 2013. - № 4 (34). - С. 118123.

4. Левицкий А. П. Применение антидисбиотических средств в стоматологии / А. П. Левицкий // Вюник стоматологи. - 2014. - № 4. - С. 80-88.

5. Воронкова А. В. Лечебно-профилактическое действие симбиотика «Симбитер» при экспериментальном стоматите / А. В. Воронкова, Л. В. Смаглюк, А. П. Левицкий // Укр. стомат. альманах. - 2013. - № 1. - С. 5-7.

6. Томилина Т. В. Кверцетин повышает неспецифический иммунитет и снижает дисбиоз и воспаление в пародо-

нте крыс, получавших антихеликобактерную терапию / Т. В. Томилина // Вюник стоматологи. - 2014. - № 2. - С. 1923.

7. Декларацшний патент на корисну модель № 31012. Споаб моделювання дисбюзу (дисбактерюзу) / Левицький А. П., Селiванська 1.О., Щсельський Ю.В. [та in.] - № u 200711609; заявл. 22.10.2007; опубл. 25.03.2008. Бюл. № 6.

8. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: метод. рекомендации // А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса: КП ОГТ, 2010 -16 с.

9. Стальная И. Д. Метод определения малонового ди-альдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. - М. : Медицина, 1977. - С. 66-68.

10. Левицкий А. П. Методы определения активности эластазы и ее ингибиторов: методические рекомендации / А. П. Левицкий, А. В. Стефанов. - К.: ГФЦ, 2002. - 15 с.

11. Гирин С. В. Модификация метода определения активности каталазы в биологических субстратах / С. В. Ги-рин // Лабораторная диагностика. - 1999. - № 4. - С. 45-46.

12. Асатиани В. С. Новые методы биохимической фотометрии / Асатиани В. С. - М.: Наука, 1965. - С. 298.

13. Николаева А. В. Экспериментальные дистрофии тканей пародонта / А. В. Николаева, Е. С. Розовская // БЭ-БИМ. - 1965. - т. 60, № 7. - С. 46-49.

14. Експериментальне вивчення токсично! ди та спе-цифiчноi ефективносл засоб1в для догляду за порожниною рота: метод. рекомендацп / Т. П. Терешина, К. М. Косенко, А. П. Левицький [та ш.]. - К.: ДФЦ, 2003. - 42 с.

15. Лапач О. Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / Лапач О. Н., Чубенко А. В., Бабич П. Н.. - К.: Морион, 2000. -320 с.

Поступила 03.08.15

УДК [616.314.18-002.4-003.93:612.112]-089-092.9

В. Ф. Куцевляк, д. мед. н., В. И. Куцевляк, д. мед. н., И. В. Цыганова Харьковская медицинская академия последипломного образования

ОСОБЕННОСТИ ЗАЖИВЛЕНИЯ ДЫРЧАТЫХ ДЕФЕКТОВ УГЛА ЧЕЛЮСТИ КРОЛИКА ПРИ ВВЕДЕНИИ 100 ТЫС. АУТОЛОГИЧНЫХ СК КОСТНОГО МОЗГА

И ЖИРОВОЙ ТКАНИ

Проведен сравнительный анализ процессов регенерации костных дефектов угла челюсти у 32 экспериментальных животных при введении в костный дефект 100 тысяч аутологичных стволовых клеток, полученных из костного мозга (СККМ) и жировой ткани (СКЖТ) на коллапановой подложке. Тканей, обладающих ос-теогенными свойствами в группе с введением СККМ, было обнаружено вдвое больше, чем в группе сравнения. Однако грануляционная ткань в группе с введением СКЖТ к 90-м суткам была замещена клеточно-волокнистой тканью, которая также имела остеогенные свойства.

Ключевые слова: дырчатый дефект, стволовые клетки, остеогенез.

© Куцевляк В. Ф., Куцевляк В. И., Цыганова И. В., 2015.