CC BY
72
Патогенез, патология и экономический ущерб
УДК 619:615.015.4
ВЛИЯНИЕ КОМБИНИРОВАННОГО ПРОТИВОПАРАЗИТАРНОГО ПРЕПАРАТА АВЕРСЕКТ ПЛЮС НА ОРГАНИЗМ СОБАК
К.Г. КУРОЧКИНА доктор ветеринарных наук З.Г. МУСАЕВ аспирант
Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина, 117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: [email protected]
Введение аверсекта плюс незараженным собакам не оказывает негативного влияния на показатели неспецифической резистентности организма и белкового спектра сыворотки крови, а также на основные гематологические показатели. У инвазированных животных после дегельминтизации к 30 суткам происходит оптимизация уровней сывороточных факторов неспецифической резистентности - содержание белка, лизоцима, уровня циркулирующих иммунных комплексов и показателей крови.
Ключевые слова: неспецифичекая резистентность, общий белок, лизоцимная активность, а-, в-, Y-глобулины, циркулирующие иммунные комплексы, форменные элементы крови.
Основным звеном в системе мер борьбы с гельминтозами животных является этиотропная терапия. Для борьбы с гельминтами постоянно предлагаются новые или усовершенствуются уже имеющиеся антигельминтные препараты [1]. Поэтому в литературе представлен достаточно обширный материал по исследованиям о влиянии различных антигельминтиков на организм животных. Это влияние может проявляться как в связи с фармакологическим влиянием препарата на патологический процесс, так и побочным влиянием на различные функции клеток, тканей и органов. По существующим правилам каждое новое лекарственное средство должно быть исследовано на предмет установления его влияния на организм животного [7].
Комбинированный антигельминтный препарат, в состав которого входит аверсектин С1 и празиквантел (аверсект плюс), предназначен для дегельминтизации собак и кошек при нематодозах и цестодозах.
Цель наших исследований - изучение влияния нового комбинированного противопаразитарного препарата аверсект плюс на организм инвазированных и здоровых собак. Исследования включают изучение его влияния на гематологические и некоторые биохимические показатели, характеризующие уровень неспецифической резистентности организма (лизоцимная активность сыворотки крови, содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), протеинограмма (общий белок, альбумины, глобулины (а-, Р-, у-), соотношение альбумины/глобулины (А/Г).
Материалы и методы
В состав комбинированного антигельминтного препарата аверсект плюс (аверсектин С1 + празиквантел) входит 0,5 % аверсекта-3 и 5% празиквантела
(ДВ - 0,5 мг/кг по аверсекту-3 и мг/кг по празиквантелу). Препарат вводили подкожно в терапевтической дозе 1 мл/10 кг.
Исследования проводили в лаборатории ВИГИС и в Республиканском диагностическом центре г. Махачкалы.
Для изучения влияния препарата на организм собак сформировали две группы животных по 6 голов в каждой в возрасте от двух до четырех лет на базекинологического питомника ЛИУ-4 г. Махачкалы. В первую группу входили собаки, спонтанно инвазированные нематодами и цестодами при обнаружении 184,7 и 271,1 экз. яиц в 1 г фекалий соответственно, а вторая группа состояла из условно здоровых собак. Эту группу собак сформировали после трехкратного исследования их фекалий. Поскольку яиц гельминтов обнаружено в фекалиях не было, то животных считали свободными от гельминтов, т. е. условно здоровыми.
Для исследований кровь брали от опытных животных до введения препарата и на 7, 15 и 30-е сутки после дегельминтизации.
Исследования крови проводили по общепринятым в гематологии методам: определяли количество форменных элементов крови и ее состав: эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, выводили лейкограмму, определяли содержание гемоглобина.
Биохимические исследования крови проводили с помощью полуавтоматического биохимического анализатора «TARGA-2000». При этом в крови определяли показатели общего белка и его фракций (а-, Р-, у-глобулины).
Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроколо-метрическим методом [6].
Количественный анализ циркулирующих иммунных комплексов проводили по методу, основанному на селективной преципитации ЦИК 3,75%-ным полиэтиленгликолем с последующим измерением оптической плотности преципитата на «Spekol» при длине волны 450 нм [2]. Результаты выражали в условных единицах оптической плотности.
Эффективность препарата учитывали по результатам исследований проб фекалий количественным методом флотации с насыщенным раствором поваренной соли [4] с использованием счетной камеры ВИГИС [5] для учета количества яиц в 1 г фекалий до и через 10 сут после дегельминтизации.
Статистическую обработку полученных данных проводили по Стъюден-ту-Фишеру (с использованием ^критерия) с помощью компьютерной программы «STUDENT-2000.
Результаты и обсуждение
До введения препарата количество эритроцитов у животных первой группы находилось на уровне 7,56±0,51 х 10 /л, во второй - 5,14+0,45 х 10 /л. Количество лейкоцитов у животных первой группы составляло 7,56+0,85 х 109/л, во второй группе было выше в 1,47 раза - 13,28+2,70 х 109/л.
Уровень гемоглобина у животных первой группы был в пределах физиологической нормы - 122,72+11,54, во второй - ниже в 1,23 раза -99,24+7,63 г/л.
Содержание тромбоцитов у собак первой и второй группы колебалось в течение всего срока наблюдений в пределах физиологической нормы для данного вида животных и составляло 249,3-406,6 х 109/л.
Результаты исследований крови собак до и в динамике после дегельминтизации приведены в таблице 1.
При анализе лейкограммы выявили, что процентное соотношение клеток крови у зараженных и незараженных собак достоверно не отличались и колебания не выходили за пределы нормальных физиологических параметров. У животных зараженной группы выявили эозинофилию, достигавшую 8,56 %, тогда как у животных в первой группе этот показатель был на уровне 3,84-5,17 % в течение всего периода наблюдений (30 сут). Снижение уровня
эозинофилов в крови собак произошло после дегельминтизации к концу исследований, что связано с освобождением животных от гельминтов.
1. Кинетика гематологических показателей у собак при введении аверсекта __плюс (п = 6)_
Группа Результаты исследований, сутки после дегельминтизации
0 7 15 30
Эритроциты, х 1012/л
1 7,56+0,51 6,70+0,34 7,11+0,67 6,98+0,54
2 5,14+0,45 5,59+0,32 5,62+0,83 6,24+0,88
Лейкоциты, х 109/л
1 7,56+0,85 7,83+0,48 7,82+0,59 7,02+0,37
2 13,28+2,70 12,5+1,68 10,87+1,19 8,27+0,49
Гемоглобин, г/л
1 122,7+11,54 129,52+7,19 122,34+9,27 120,53+16,35
2 99,24+ 7,63 105,28+9,24 114,67+12,17 116,97+10,42
Тромбоциты, х 109/л
1 320,7+ 23,4 387,3+28,3 406,6+34,1 368,5+24,9
2 349,3+22,7 249,6+28,1 381,4+22,6 391,8+31,7
Результаты проведенных исследований показали, что количество эритроцитов, лейкоцитов и уровень гемоглобина у животных второй группы в течение периода испытаний находились в пределах колебаний физиологической нормы. У зараженных животных гематологические показатели были на нижней границе нормы (гемоглобин, эритроциты), а количество лейкоцитов и содержание эозинофилов отличались от уровня животных контрольной группы в 1,47 и 2,2-1,6 раза, что является следствием влияния паразитарной инвазии.
Судя по данным гематологических исследований препарат, применяемый в терапевтической дозе, не вызывает статистически достоверных изменений гематологических показателей у собак. Подобные результаты были получены при испытании аверсекта-3 на собаках [3].
При применении антигельминтного препарата, кроме его терапевтической эффективности, важно знать о его влиянии на параметры неспецифической или естественной защиты организма животного. Биохимический анализ сыворотки крови, отражающий функциональное состояние органов и систем организма, необходимо учитывать наряду с оценкой эффективности.
При анализе показателей белков крови зараженных собак (табл. 2) до лечения установлено снижение концентрации общего белка в сыворотке на 15,1 % и уровня альбуминов и у-глобулинов и небольшое процентное нарастание а- и Р-глобулиновой фракций. Соотношение альбуминов и глобулинов было 0,78, у незараженных собак - 1,14 (табл. 3).
К 30-м суткам опыта у леченых собак отмечали положительную достоверную динамику следующих показателей. Количество общего белка и уровень у-глобулинов достигали значений, полученных у незараженных собак. Снизились показатели а- и Р-глобулиновой фракции белков.
В протеинограмме отмечено повышение содержания альбуминов. К 30-м суткам этот показатель составил 30,8 %, что приближалось к средним значениям у незараженных собак. Увеличилось содержание у-глобулинов с 9,3 до 15,7 %, соотношение А/Г возросло до 0,91.
Таким образом, дегельминтизация способствовала восстановлению до нормальных значений у зараженных собак таких биохимических показателей, как общий белок, альбумины. Освобождение животных от инвазии стимулировало восстановление у-глобулиновой фракции белка до нормальных значений.
2. Биохимические показатели сыворотки крови собак первой группы после
дегельминтизации аверсектом плюс (п = 6)
Показатель До лечения Значение показателя, сутки после дегельминтизации
7 15 30
Общий белок, г/л Альбумины, % а-глобулины, % Р-глобулины, % у-глобулины, % А/Г 51,3±2,18 25,9±1,58 13,6±0,88 10,2±0,95 9,3±0,76 0,78 56,3±2,68 27,9±2,51 12,3±0,74 11,1 ±0,44 9,7±2,12 0,84 61,1±1,87 28,3±2,28 11,2±0,33 11,9±0,91 12,8±0,98 0,76 64,1±2,14 30,8±3,19 10,6±0,88 10,3±0,53 15,7±0,67 0,91
3. Биохимические показатели сыворотки крови собак второй группы
после дачи аверсекта плюс (п = 6)
Показатель До лечения Значение показателя, сутки после дачи препарата
7 15 30
Общий белок, г/л Альбумины, % а-глобулины, % Р-глобулины, % у-глобулины, % А/Г 66,4±1,79 38,9±1,08 10,1± 1,89 8,7±0,35 15,3±1,58 1,14 68,9±3,59 34,4±1,73 11,4±1,03 9,5±0,66 16,2±1,05 0,92 64,1±2,25 36,3±1,64 11,2±0,92 8,2±0,55 15,5±2,13 1,04 68,2±2,59 35,8±0,83 11,4±1,70 10,1±0,57 16,1±1,59 0,95
Восстановление показателей естественной резистентности после освобождения животных от инвазии также имеет большое значение для оценки эффективности антигельминтного препарата. Дача аверсекта плюс не оказала отрицательного влияния на эти показатели у незараженных собак при введении им испытуемого препарата (табл. 4).
4. Показатели естественной резистентности организма незараженных собак _после дачи аверсекта плюс (п = 6)_
Показатель Значение показателя, сутки после дачи препарата
0 7 15 30
ЦИК, ед. опт. пл. 74,60±3,26 73,53±3,19 71,83±4,01 72,02±3,28
Сывороточный лизо-цим, % 23,90±3,17 24,83±2,56 24,53±3,01 24,63±2,45
Изменения в показателях естественной резистентности организма после дачи аверсекта плюс у зараженных собак отражены в таблице 5.
5. Показатели естественной резистентности организма зараженных собак _после дегельминтизации аверсектом плюс (п = 6)_
Показатель Значение показателя, сутки после дегельминтизации
0 7 15 30
ЦИК, ед. опт. пл. 116,43±7,45 123,7±5,24 87,93±4,03 79,53±3,78
Сывороточный лизо-цим, % 18,10±2,33 16,63±1,94 20,13±2,69 22,07±2,92
Отмечено, что у инвазированных собак происходит формирование циркулирующих иммунных комплексов. Комплексы антиген-антитело форми-
руются при нейтрализации экзо- и эндогенных антигенов. Формирование ЦИК является обязательным компонентом нормального иммунного ответа. Поступающий антиген связывается с ними. Поэтому их уровень является интегральным показателем антигенной нагрузки на иммунную систему [8], и, по-видимому, увеличение их концентрации на седьмые сутки после дегельминтизации до 123,7 ед. опт. ед., связано с дополнительным поступлением в кровь антигенов гельминтов после их гибели в результате лечения, у собак из второй группы этот показатель был значительно ниже. Через месяц после дегельминтизации уровень ЦИК у собак первой группы снизился и составил 79,53 ед. опт. ед., что приближалось к значениям незараженных собак - 72,02 (Р > 0,05).
Активность сывороточного лизоцима была снижена у зараженных собак и составляла на 7-е сутки после дегельминтизации 16,1 %, у незараженных животных - 23,17 %, что в 1,44 раза ниже (Р < 0,05). Через две недели данный показатель начинал увеличиваться и к 30-м суткам составил 22,07 %, и был незначительно ниже, чем у незараженных собак - 24,63 % (Р > 0,05).
Дегельминтизация аверсектом плюс способствовала нормализации факторов естественного иммунитета, в частности, уровней сывороточных факторов неспецифической резистентности: лизоцима и ЦИК. Нормализовались основные гематологические показатели. Эффективность препарата составила 100 %.
Таким образом, после освобождения собак от инвазии регистрировали положительную динамику показателей естественной резистентности: количество циркулирующих иммунных комплексов и активность лизоцима приближались к нормативным значениям. У незараженных собак введение анти-гельминтика не вызывало отрицательного воздействия на естественную резистентность, гематологические и биохимические показатели.
Литература
1. Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение. - М., 2009. - 205 с.
2. Гриневич Ю.А., Алферов А.И. Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови // Лаб. дело. - 1981. - № 8. - С. 93-95.
3. Колесникова Н.А. Аспекты безопасного применения препаратов на основе авермектинов у собак и кошек: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. -М., 2006. - 19 с.
4. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. - М.: Колос, 1984. - С. 45-48.
5. Мигачева Л.Д., Котельников Г.А. Методические указания по использованию устройства для подсчета яиц гельминтов при диагностике нематодозов животных // Бюл. Всес. ин-та гельминтол. - 1987. - Вып. 48. - С. 81-83.
6. Методические рекомендации по определению неспецифической резистентности организма при гельминтозах. - М., 1984. - С. 7-8.
7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2005. - С. 54-68.
8. Сухоруков Ю.В., Сведенцов Е.П., Докшина И.А. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) и параметры естественного иммунитета при онкологическом выздоровлении больных острым лейкозом //Вятский мед. вестник. - 2007. - № 4. - С. 69 - 70.
Influence of a new combination anthelmintic aversect plus on dog's organism
K.G. Kurochkina, Z.G. Musaev
It's determinate that a new combination anthelmintic aversect plus at dose levels 0,5 mg/kg and 5 mg/kg of body weight according to aversect-3 and praziquantel, don't show negative effects on blood and no specific resistance of dogs.
Keywords: nonspecific resistance, lisocim activity, total albumin, a-, ß-, y-globulins, circularity immunity complexes, blood.
