CC BY
22
УДК 636.1:619:616.99
Ключевые слова: естественная резистентность, нематодозы, лошади
Key words: natural resistance, nematodoses, horses
Пилип Л. В., Бякова О. В.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ПОКАЗАТЕЛИ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ НЕМАТОДОЗАХ ЛОШАДЕЙ
BIOCHEMICAL CHANGES AND INDICATORS OF NATURAL RESISTANCE OF HORSES TO NEMATODES
ФГБОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия Адрес: 610017, Россия, г. Киров, Октябрьский пр., 133. E-mail: [email protected]
Vyatka State Agricultural Academy Address: 610017, Russia, Kirov, Oktyabrskypr., 133. E-mail: [email protected]
Пилип Лариса Валентиновна, к. в. н., доцент каф. зоогигиены, физиологии и биохимии
Pilip Larisa V., Ph.D. in Veterinary Science, Associate Professor of the Dept. of Zoohygiene, Physiology and Biochemistry Бякова Ольга Викторовна, к. б. н., ст. преподаватель кафедры зоогигиены, физиологии и биохимии Byakova Olga V., Ph.D. in Biology Science, Senior Lecturer of the Dept. of Zoohygiene, Physiology and Biochemistry
Аннотация. Паразитарные заболевания лошадей распространены повсеместно. Перед дегельминтизацией не всегда проводится диагностика и обоснованный выбор антигельминтика. Комплексная оценка биохимических показателей в сочетании с факторами естественной резистентности позволяет более глубоко взглянуть на патогенез при кишечных гельминтозах и объяснить целесообразность использования в качестве средств патогенетической терапии для коррекции метаболических процессов при дегельминтизации иммуностимуляторы, антиок-сиданты, пробиотики, гепатопротекторы.
Summary. Parasitic infections in horses are widely spread everywhere. Diagnostics and selection of proper antihelminthic are not always carried out prior to dehelmintization. Comprehensive assessment of biochemical indices combined with the factors of natural resistance provides an in-depth look at the pathogenesis of intestinal helminth infestation. It also explains the applicability of immune adjuvants, antioxidants, probiotics, hepatoprotectors as means of pathogenetic therapy for correction of metabolic processes during deworming.
Введение
На сегодняшний день ситуация по паразитарным заболеваниям лошадей изучена достаточно хорошо. Однако зараженность животных гельминтозами может достигать 60-100 %. Это объясняется отсутствием своевременной диагностики, спонтанным выбором антигельминтика для профилактики и лечения, отсутствием плановой дегельминтизации как в коневодческих хозяйствах, так и в частном секторе [1, 2, 4].
Большинство паразитарных болезней способствует развитию иммунодефи-цитного состояния у животных. На этом фоне дегельминтизации являются «чрезвычайным раздражителем», нарушающим гомеостаз и приводящим к снижению иммунитета. Кровь представляет собой внутреннюю среду, которая быстро реагирует на различные воздействия и играет решающую роль в неспецифических
и специфических реакциях защиты организма [2, 3].
Целью наших исследований явилось изучение метаболических процессов в организме лошадей при нематодозной инвазии на основании биохимических изменений в сочетании с показателями естественной резистентности организма.
Материалы и методы
Исследования проводились на лошадях в возрасте 3-6 лет рысистой и вятской породы в специализированных и подсобных хозяйствах г. Кирова и Кировской области. По результатам предварительных гельминтологических исследований методом флотации по Фюллеборну было сформировано две группы животных. Первую группу составили лошади (п = 6), у которых были обнаружены яйца параскарид и кишечных стронгилят (с интенсивностью инвазии соответственно
71,1±15,1 и 483,4±46,9 яиц в 1 г фекалий). Вторая группа (контрольная) сформирована из незараженных, клинически здоровых лошадей (n = 6).
У животных кровь для исследований брали из яремной вены утром натощак, до работы. Общий белок определяли биуретовым методом. Белковые фракции определяли не-фелометрическим методом по Оллу и Мак-корду, в модификации С. А. Карпюка (1962).
Определение общих иммуноглобулинов в сыворотке крови проводили с сульфатом натрия (1983). В цельной крови фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) определяли с использованием латекс-теста по С. Г. Потаповой с соавт. (1977). О функциональной активности нейтрофилов судили по реакции восстановления нитросинего тетразо-лия (И. Е. Виксман и А. Н. Маянский, 1979). НСТ-тест заключается в бессубстратном восстановлении нитросинего тетразолия и характеризует микробицидную активность нейтрофилов. Определение активности сывороточного лизоцима в крови проводили по методу О. В. Бухарина (1974) с суточной культурой Micrococcus lysodeicticus. Содержание Р-лизинов в сыворотке крови определяли фотонефелометрическим методом в модификации О. В. Бухарина и Б. А. Фролова (1977) с культурой В. Subtilis (сенной палочки).
Результаты
Влияние нематодозной инвазии на биохимические и иммунологические показатели крови изучали в течение месяца (в начале опыта, на 7, 14 и 28-е сутки). Результаты исследований представлены в таблицах 1 и 2.
Анализируя данные, приведенные в таблице 1, следует отметить, что в сыворотке крови естественно инвазированных лошадей концентрация общего белка составила 69,9±1,52 - 70,2 ±0,69 г/л, что выше показателей у незараженных животных в среднем на 9,6 % (Р < 0,05). Однако количество общего белка как у лошадей с инвазией, так и у здоровых животных находилось в пределах физиологических границ (65,0-78,0 г/л).
Наличие хронической инвазии в организме лошадей сопровождалось диспро-теинемией, выражавшейся увеличением
а-глобулиновой фракции белка в среднем на 21,7 % (Р < 0,01), при одновременном уменьшении у-глобулинов на 19,7 % (Р < 0,05).
По результатам, представленным в таблице 2, можно отметить, что фагоцитарная активность нейтрофилов в крови лошадей, естественно инвазированных кишечными нематодами на протяжении всего опыта, в среднем на 20,4 % (Р < 0,001) была ниже по сравнению с контролем. Количество общих иммуноглобулинов в сыворотке крови зараженных животных находилось в пределах 34,1±0,75 - 36,2±0,66 мг%, что ниже показателей контрольных животных на 14,9 % (Р < 0,05). Более низкое количество общих иммуноглобулинов (в том числе и у-глобулинов) объясняется их участием в формировании циркулирующих иммунных комплексов.
Показатель восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) принадлежит к чувствительным индикаторам нормы и патологии. В крови здоровых лошадей нейтрофилы, не испытывая активизирующих воздействий, находились в покоящемся (инертном) состоянии, что отражалось в быстром восстановлении нитросинего тетразолия (11,8±0,54 до 12,6±0,42 %). При внедрении в кровь раздражителей, которыми выступают секреты и экскреты гельминтов, происходит усиление кислородзависимой микробицидности ней-трофилов. Поэтому показатель НСТ-теста в 3,6 раза (Р < 0,001) выше у зараженных лошадей.
Кроме того, на протяжении всего эксперимента у лошадей с наличием нематодоз-ной инвазии активность лизоцима и уровень Р-лизинов достоверно превышал значения, полученные у контрольных животных.
Заключение
Таким образом, в исследованиях показано, что при хронической нематодозной инвазии у лошадей снижалась естественная резистентность организма: уменьшалась фагоцитарная активность нейтрофилов на 20,4 %, количество у-глобулинов - на 19,7 %, концентрация общих иммуноглобулинов - на 14,9 %. Компенсаторно увеличивался уровень лизоцима в 1,5 раза и Р-лизинов - в 1,3 раза. Кислородза-висимая микробицидность нейтрофилов воз-
Примечание: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001 (по отношению к незараженным животным).
Таблица 2.
Показатели естественной резистентности организма при кишечных нематодозах лошадей
Таблица 1.
Биохимические изменения в сыворотке крови при кишечных нематодозах лошадей
Показатель Естественно инвазированные лошади (п = 6) Незараженные лошади (контроль) (п = 6)
Срок наблюдений (сутки)
0 7 14 28 0 7 14 28
Общий белок, г/л, М±м 69,9± 1,52 * 70,2± 2,51* 70,1± 0,83 * 70,2± 0,69 * 62,9± 2,44 62,5± 2,33 63,3± 2,70 63,4± 2,26
Альбумины, %, М±м 45,5± 1,49 45,9± 1,83 46,1± 0,93 45,6± 1,21 46,2± 1,37 45,1± 1,28 43,8± 1,39 43,3± 1,17
а-глобулины, %, М±м 19,8± 0,38** 20,2± 0,43*** 19,6± 0,26*** 20,4± 0 27 *** 15,5± 1,29 14,8± 0,27 15,2± 0,27 14,6± 0,58
Р-глобулины, %, М±м 19,5± 1,97 19,1± 1,55 18,4± 0,81 17,9± 1,44 20,1± 2,54 21,3± 1,25 21,9± 1,54 23,9± 0,92
у-глобулины, %, М±м 15,2± 0,27 * 14,8± 0,25 *** 15,9± 0 29*** 16,1± 0,43 ** 18,2± 1,19 18,8± 0,41 19,1± 0,34 18,2± 0,46
Показатель Естественно инвазированные лоша-ди (п = 6) Незараженные лошади (контроль) (п = 6)
Срок наблюдений (сутки)
0 7 14 28 0 7 14 28
ФАН, % М±м 69,1± 171*** 68,7± 1 47*** 68,4± 1 59*** 67,0± 1 46*** 83,2± 1,8 82,8± 1,35 83,5± 1,06 82,5± 1,34
НСТ-тест, % М±м 45,5± 171*** 42,8± 1 94*** 44,3± 1,65*** 43,8± 2,06 *** 12,0± 0,55 12,6± 0,42 11,8± 0,54 12,2± 0,60
Общие иммуноглобулины, мг% М±м 35,5± 0,53 * 34,8± 0,61*** 34,1± 0,75*** 36,2± 0,66*** 40,8± 1,98 41,2± 0,36 41,8± 0,60 42,1± 0,81
Сывороточный лизоцим, мкг/ мл, М±м 2,52± 0,34* 2,48± 0,24 2,54± 0,19** 2,61± 0,12** 1,65± 0,16 1,73± 0,54 1,62± 0,20 1,70± 0,11
Сывороточные Р-лизины, % М±м 25,4± 2,15* 24,8± 1,18** 25,2± 1,69** 25,1± 1,05 19,5± 0,92 18,7± 1,32 18,9± 0,89 19,4± 0,66
Примечание: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001 (по отношению к незараженным животным).
росла до предельных значений (45,5 % против 12,0 %), приводя к истощению резервных возможностей клеток. Среди биохимических показателей отмечается повышенное содержание общего белка и диспротеинемия, выражающаяся увеличением а-глобулиновой фракции белка на 21,7 %. Все перечисленные показатели характеризуют метаболические процессы, происходящие в живом организме при паразитоносительстве. Комплексная оценка биохимических показателей в сочетании с факторами естественной резистент-
ности позволяет более глубоко взглянуть на патогенез при кишечных гельминтозах и объяснить целесообразность использования в качестве средств патогенетической терапии для коррекции метаболических процессов при дегельминтизации иммуностимуляторы, анти-оксиданты, пробиотики, гепатопротекторы.
Список литературы
1. Бундина, Л. А. Эффективность фебтала и альбе-на - гранулята при кишечных нематодозах лошадей / Л. А. Бундина // Ветеринария. - 2007. - № 4. -С. 30-32.
2. Бякова, О. В. Перекисное окисление липидов у лошадей при кишечных нематодозах / О. В. Бякова, Л. В. Пилип // Вестник ветеринарии. - № 63/4. -2012. - Ставрополь. - С. 28-31.
3. Даугалиева, Э. Х. Особенности реактивности при гельминтозах и ее роль в системе паразит - хозяин // Вестник сельскохозяйственных наук. - 1984. -№ 1. - С. 128 - 135.
4. Пилип, Л. В. Терапевтическая эффективность препарата универм и его влияние на иммунобиохими-ческие показатели крови лошадей с наличием миксин-вазии / Л. В. Пилип, О. В. Бякова // Современные научно-практические достижения в ветеринарии: Сборник статей Международной научно-практической конференции. Выпуск 2. - Киров: Вятская ГСХА, 2011. -С. 12-15.
